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蒙古扁桃药材石油醚提取物对高脂血症大鼠血脂水平的影响



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神经药理学报
Acta Neuropharmacologica
第 5 卷第 3 期
2015 年 06 月
Vol. 5 No. 3
Jun. 2015
蒙古扁桃药材石油醚提取物对高脂血
症大鼠血脂水平的影响
郑倩男 何 鑫 石松利 周红兵 吴培赛
包头医学院,包头,014060,中国
【摘要】 目的:研究蒙古扁桃药材石油醚提取物对高脂血症大鼠血脂水平的影响。方法:采用高脂饲料饲养 5
周建立高脂模型,将 60 只实验大鼠分成空白对照组、高脂模型组、血脂康组(61.7 mg·kg-1)、以及蒙古扁桃石油醚
低、中、高剂量组(1 500、2 000、2 500 mg·kg-1),给药 7 周后,眼底静脉丛取血,检测总胆固醇(total cholesterol,
TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-C,LDL-C)、高密度脂蛋白胆
固醇(high density lipoprotein-C,HDL-C),并计算血脂综合指数和动脉粥样硬化指数。结果:与高脂模型组
比较,蒙古扁桃石油醚低剂量组大鼠血清中 TC 和 LDL-C 含量显著降低;血脂综合指数 TC/HDL-C、LDL-C/
HDL-C 和动脉粥样硬化指数(atherosclerotic index,AI)的比值显著降低。结论:蒙古扁桃石油醚提取物有效调
节血脂水平,同时降低发生心血管疾病的危险性。
【关键词】 蒙古扁桃;石油醚提取物;高脂血症
【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】 A 文章编号:2095-1396(2015)03-0012-005
Effect of the Petroleum Ether Extract From Amygdalus
Mongolica on Blood Lipid Level in Hyperlipidemia Rats
ZHENG Qian-nan,HE Xin,SHI Song-li,ZHOU Hong-bing,WU Pei-sai
Baotou Medical College,Baotou,014060,China
【ABSTRACT】 Objective:To study the effect of the petroleum ether extract from Amygdalus
mongolica on blood lipid level in hyperlipidemia rats. Methods:Model was established by
feeding high-fat diet for five weeks. Experimental animals were divided into six groups:control
group,model group,XUE Zhi-kang group(61.7 mg·kg-1)and 1 000,2 000,2 500 mg·kg-1 of
the petroleum ether extract from Amygdalus mongolica. Hyperlipidemic indicators were tested
after 7 weeks oral administration of petroleum ether extract. Lipid comprehensive index and
atherosclerosis index were calculated. Results:Compared with the hyperlipidemic model group,
low-dose group of petroleum ether extract group from Amygdalus mongolica could significantly
decreased the level of serum TC、LDL-C in the hyperlipidemia rat and TC/HDL-C、LDL-C/
HDL-C、atherosclerotic index (P<0.01,P<0.05). Conclusion:Petroleum ether extract from
Amygdalus mongolica could improve blood lipid level,reduced the risk of arteriosclerosis.
【KEY WORDS】 Amygdalus mongolica;petroleum ether extract;hyperlipidemia
基金项目:国家自然科学基金 (No.81102760),内蒙古自治区高等学校青年科技英才支持计划(No.NJYT-15-B01)
作者简介:郑倩男,女,硕士研究生;研究方向:中蒙药药理及化学成分研究;Tel:+86-0472-7167855,E-mail:18647202521@163.com
通讯作者: 石松利,女,教授,硕士生导师;研究方向:中蒙药药理及化学成分研究;Tel:+86-0472-7167855,E-mail:shisongli122@126.com
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第 5 卷第 3 期
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随着我国人群老龄化以及膳食结构的改变,高脂
血症日趋高发[1],高脂血症作为诱导动脉粥样硬化、心
脑血管疾病发病的主要危险因素,越来越受到人们的
关注[2]。通过调节饮食结构、增强体力活动、改善生活
方式等方法可以降低血脂水平,但药物治疗仍是最重
要的手段[3]。目前使用的药物如羟甲基戊二单酰辅 A
还原酶抑制剂、烟碱类等均存在一定的毒副作用,如肝
脏功能损害、胃肠功能紊乱等[4-5],而中医药在治疗高
脂血症方面具有独特的优势:毒副作用小、药源丰富
等。因此,研究和应用天然药物成为治疗高脂血症的新
兴趋势。
蒙古扁桃(拉丁名:Amygdalus mongolica),蒙名乌
兰 - 布衣勒斯,属蔷薇科扁桃属植物,为蒙古高原特有
的阿拉善荒漠种[6-7]。其种仁作“郁李仁”入药,能润肠
通便,止咳化痰。本课题组前期研究已证实蒙古扁桃水
浸液能调节高脂血症大鼠血脂水平,同时抵抗由高脂
血症引起的脂质过氧化作用 [8-9]。本文在此基础上,建
立高脂血症大鼠模型,初步探讨不同剂量蒙古扁桃石
油醚提取物对其血脂水平的影响,旨在为降血脂药物
的研发提供科学依据和理论基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物
Wistar 大鼠,♂,SPF 级,60 只,体质量(70~100)g,
许可证编号:SCXK(蒙)2002-0001,购自内蒙古大学实
验动物中心。所有动物在实验室适应性饲养 4 d 后进行
实验研究,分笼饲养,自由饮食和饮水,饲养条件:室温
23°C~27°C,相对湿度 53%~57%,空气新鲜,通风良好。
1.1.2 药品和试剂
蒙古扁桃种仁(药材采自内蒙古阿拉善雅布赖戈
壁,经内蒙古科技大学包头医学院石松利教授鉴定为
蔷薇科植物蒙古扁桃 Amygdalus mongolica 的干燥
成熟种子),研碎,索氏提取法,料液比:1∶10,分别采
用 95% 乙醇、50% 乙醇,80~90 ℃水浴回流 3 次,每
次 2 h;得粗提液。回收溶剂,至药液呈膏状。将浸膏
与等质量的硅藻土搅拌均匀,用石油醚溶剂萃取,减
压浓缩萃取物、挥干称重,得蒙古扁桃石油醚提取物。
以 0.5% 的羧甲基纤维素钠作为溶剂,配制成溶液,冷
藏备用。
胆固醇,批号:20140507、牛胆盐,批号:20140426、
脱氧胆酸钠,批号:20140326,均购自北京双旋微生物
培养基制品厂;基础饲料为内蒙古大学实验动物中心
提供。
总 胆 固 醇(total cholesterol,TC)试 剂 盒,批 号:
OSR6216、甘 油 三 酯(triglyceride,TG)试 剂 盒,批
号:OSR61118E、低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇(low density
lipoprotein-C,LDL-C)试剂盒,批号:OSR6283、高密度
脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-C,HDL-C)试
剂盒,批号:OSR6287,均购于美国贝克曼公司。
0.5% 羧甲基纤维素钠:称取羧甲基纤维素钠 0.5 g,
加蒸馏水溶解并稀释到 100 mL。10% 水合氯醛配制:
称取水合氯醛 10 g,加生理盐水溶解并稀释到 100 mL。
1.1.3 实验仪器
全自动脱帽离心机,GENIUS 5K-D,长沙鑫奥仪
器;Olympus AU640 全自动生化分析仪,日本奥林巴斯
公司;DZW-8-8 型水浴锅,北京市永光明医疗仪器厂;
RE-52A 型旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;GZX-
DHG 电热恒温鼓风干燥箱,山东潍坊医疗器械厂。
1.2 实验方法
1.2.1 高脂模型建立
采用高脂饲料喂养法制备高脂模型。
高脂模型饲料配方:胆固醇 2%,猪油 10%,牛胆盐
0.5%,脱氧胆酸钠 0.1%,普通饲料 87.4%。
1.2.2 动物分组及给药
Wistar 雄性大鼠 60 只,在实验环境下普通饲料
适应性饲养 4 d 后,采用体重均衡随机法分成 6 组,空
白对照组、高脂模型组、阳性药对照组(血脂康,61.7
mg·kg-1)、蒙古扁桃石油醚提取物低、中、高剂量实验组
(1 500、 2 000、2 500 mg·kg-1),每组 10 只。从第 6 周
开始(0.6 mL·100 g-1) 灌胃,正常对照组、模型组给予
生理盐水,各给药组给予对应药物。给药期间,除空白
对照组给予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料,实验
期间自由摄食饮水。每 3 d 称量体重 1 次,根据体重变
化调整给药量,连续灌胃 7 周。
给药 7 周,大鼠禁食不禁水 12 h 后,眼眶后静脉采
血 2~3 mL,静置,常规制备血清,采用全自动生化分析
仪检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯
(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density
lipoprotein-C,LDL-C)、高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇(high
density lipoprotein-C,HDL-C)含量。
1.3 统计学方法
实验数据以均数 ± 标准差(x±s)表示,该实验中
全部数据主要使用 Excel 2007 和 SPSS 17.0 软件对所得
数据进行处理,采用单因素方差分析(one-way ANOVA)
进行差异显著性比较,P<0.05 表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大鼠高脂血症模型的建立
与饲喂普通饲料的空白对照组比较,饲喂高脂饲
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料的各组的 TC 、LDL-C 明显升高,差异有统计学意义
(P<0.05),说明该配方的高脂饲料能促使大鼠血清 TC、
LDL-C 升高(Tab.1)。结果显示,大鼠高脂血症模型建
立成功。
2.2 蒙古扁桃石油醚提取物对大鼠体重的影响
干预实验初始和实验结束后,各组间体重比较,差
异均无统计学意义(Tab.2)。
2.3 蒙古扁桃石油醚提取物对高脂血症大鼠血脂水平
的影响
由 Tab.3 可知,与空白对照组比较,高脂模型组的
TC 、LDL-C 明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),
说明饲喂高脂饲料 12 周,大鼠血清 TC 、LDL-C 升
高稳定。与高脂模型组比较,血脂康组和低剂量组的
TC 、LDL-C 明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,
P<0.01);其他组的 TG、HDL-C 均升高,无统计学意义。
结果表明:低剂量的蒙古扁桃石油醚提取物能显著降
低高脂血症大鼠血清中 TC 、LDL-C 的含量。
2.4 蒙古扁桃石油醚提取物对高脂血症大鼠血脂综合
指数和动脉粥样硬化指数的影响
由 Tab.4 可知,与空白对照组比较,高脂模型组的
血脂综合指数 TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C 和动脉粥样
硬化指数(atherosclerotic index,AI)明显升高,差异有
统计学意义(P<0.01)。与高脂模型组比较,血脂康组与
低剂量组的血脂综合指数 TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C
Tab.1 The blood lipid level of rats fed 5 weeks(x±s,n=10)
Group Category TC(mmol·L-1) TG(mmol·L-1)
HDL-C
(mmol·L-1)
LDL-C
(mmol·L-1)
Control Common diet 1.52±0.17 0.85±0.17 0.89±0.11 0.77±0.09
Model
Fat diet
3.08±0.22# 0.54±0.02 0.88±0.12 1.81±0.15#
Positive drug control 2.56±0.52# 0.57±0.14 0.86±0.18 1.50±0.34#
the petroleum ether extract
from Amygdalus mongolica
3.24±0.33# 0.63±0.10 0.90±0.04 1.87±0.23#
2.67±0.29# 0.55±0.08 0.88±0.03 1.75±0.09#
3.20±0.39# 0.41±0.05 0.89±0.14 1.90±0.25#
Note:#P<0.05 vs control group.
Tab.2 The effect of the petroleum ether extract from Amygdalus mongolica in rats on body weight(x±s,n=10)
Group Experimental samples,Feeding dose(mg·kg-1·d-1) Early intervention trail(g) intervention trail end(g)
Control Normal saline,9.0 278±31 354±35
Model Normal saline,9.0 279±20 332±40
Positive drug control XUE Zhi-kang,61.7 271±19 336±41
High-dose the petroleum ether extract from Amygdalus
mongolica,2.5
290±22 353±34
Middle-dose the petroleum ether extract from Amygdalus
mongolica,2.0
295±20 350±18
Low-dose the petroleum ether extract from Amygdalus
mongolica,1.5
266±18 320±26
Tab.3 The effect of the petroleum ether extract from Amygdalus mongolica in hyperlipidemia rats on blood
lipid level(x±s,n=10)
Group TC(mmol·L-1) TG(mmol·L-1)
HDL-C
(mmol·L-1)
LDL-C
(mmol·L-1)
Control 1.73±0.24 0.83±0.05 0.90±0.12 0.62±0.13
Model 3.95±0.80## 0.44±0.09 1.15±0.27 2.82±0.63##
Positive drug control 3.19±0.76* 0.54±0.11 1.14±0.34 2.04±0.57**
High-dose 4.44±0.48 0.48±0.08 1.51±0.37 3.04±0.40
Middle-dose 4.52±1.33 0.51±0.03 1.33±0.56 3.16±1.04
Low-dose 3.15±0.47* 0.49±0.10 1.13±0.24 2.02±0.35**
Note:##P<0.01 vs control group;*P<0.05,**P<0.01 vs model group.
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和动脉粥样硬化指数 AI 显著降低,差异有统计学意义
(P<0.05);其他组的血脂综合指数和动脉粥样指数均降
低,但差异不显著。结果表明:蒙古扁桃石油醚提取物低
剂量能够显著降低血脂综合指数和动脉粥样硬化指数。
3 讨论
高脂血症又称脂质代谢紊乱或异常,是指由于脂
质代谢或运转异常而导致血浆中总胆固醇、低密度脂
蛋白胆固醇及甘油三脂中一种或多种脂质水平超过正
常范围高限的病症[10]。饮食结构的不合理、体质量的上
升及年龄的增长都与高脂血症的形成有一定的关系[11]。
长期摄入高脂食物,脂肪吸收增加,TG 和胆固醇合成
超过其转运,在肝细胞内蓄积,形成高脂血症[10]。我们
以单纯高脂饮食诱导大鼠高脂血症模型,目的是模拟
更接近人类正常的发病过程,探讨高脂血症发生的真
实状况,配方中加入的胆固醇和胆盐均存在于动物体
内[12],结果显示以该高脂饲料配方造模 5 周后模型大
鼠血清 TC 和 LDL-C 等值高于空白对照。TC 在体内
有着广泛的生理作用,但当其过量时便会导致高胆固
醇血症,对机体产生不利的影响。本实验中蒙古扁桃石
油醚提取物低剂量显著降低高脂血症大鼠血清 TC 水
平,说明蒙古扁桃石油醚提取物能控制胆固醇含量,有
效调节了血脂紊乱。LDL-C 反映低密度脂蛋白的多少,
是所有血浆脂蛋白中首要的致动脉粥样硬化性脂蛋
白,因其水平的增加会导致心脑血管疾病而被称为“坏
胆固醇”[13]。造模成功后发现大鼠血清 LDL-C 显著
升高,这和 TC 水平的升高相一致,在给药 7 周后,蒙古
扁桃石油醚提取物低剂量组血清 LDL-C 显著降低。本
实验结果证明:蒙古扁桃石油醚提取物显著降低高脂
血症大鼠血清 TC 和 LDL-C 水平,提示蒙古扁桃石油
醚提取物对高脂饲料引起的脂代谢紊乱具有一定调节
作用。
血脂综合指数 TC/HDL-C、 LDL-C / HDL-C 和动
脉硬化指数(AI)的高低分别反映了心脑血管疾病发病
风险的高低[14]、心脏疾病危险因子的高低[15] 、HDL-C
与其它血清载脂蛋白的比例关系[16],其比值越高表明
发病的风险越高。实验结果显示蒙古扁桃石油醚提取
物低剂量给药后血清 TC/HDL-C、 LDL-C / HDL-C 、AI
较模型组显著性降低。说明蒙古扁桃石油醚提取物有
保护心脑血管、降低心脏疾病危险因子以及预防动脉
粥样硬化形成的作用。
本课题组一直致力蒙古扁桃药材化学成分及药理
作用方面的研究,根据蒙古扁桃种仁人每天的最大用
药量 9.0 g 计算,考虑到中药药效可能为不同成分联合
作用,将给药剂量加大 2 倍,在此基础上下各增设一组。
对蒙古扁桃药石油醚提取物的最高的用药剂量进行初
步的探讨和筛选。本次实验结果显示:蒙古扁桃石油醚
提取物的中、高剂量无降血脂作用。初步推测:可能与
蒙古扁桃中含有丰富的脂肪酸有关[17]。
综上所述,蒙古扁桃石油醚提取物能有效调节高
脂血症大鼠血脂水平,同时能降低心血管疾病危险性。
本实验结果开启了蒙古扁桃药材降血脂作用的新篇
章,也为后续深入研究其最佳剂量、量效关系、作用机
制以及蒙古扁桃油开发提供了宝贵的实验基础和科学
依据。
参 考 文 献
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Tab.4 The effect of the petroleum ether extract from Amygdalus mongolica in hyperlipidemia rats on TC/
HDL-C、LDL-C/HDL-C and AI(x±s,n=10)
Group TC/HDL-C LDL-C/HDL-C AI(TC-HDL-C/ HDL-C)
Control 1.94±0.18 0.70±0.14 0.94±0.18
Model 3.64±0.58## 2.52±0.50## 2.64±0.58##
Positive drug control 2.77±0.57* 1.88±0.58* 1.77±0.57*
High-dose 3.06±0.66 2.10±0.51 2.06±0.66
Middle-dose 3.57±0.77 2.49±0.62 2.57±0.77
Low-dose 2.77±0.45* 1.85±0.43* 1.70±0.45*
Note:##P<0.01 vs control group;*P<0.05 vs model group.
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