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五叶草莓乙醇提取物镇痛抗炎作用的实验研究



全 文 :实 验 研 究
五叶草莓乙醇提取物镇痛抗炎作用的实验研究
李巧兰  李 征  杨 轶  李 斌 何谨瑜  指导:张 红
(陕西中医学院 ,陕西 咸阳 712046)
摘 要:目的观察五叶草莓乙醇提取物对实验动物模型的抗炎镇痛作用 。方法 通过小鼠热板及扭
体实验观察五叶草莓的镇痛作用;通过小鼠耳肿胀 ,大鼠足肿胀及大鼠棉球性肉芽肿模型观察五叶草莓的
抗炎作用 。结果 五叶草莓乙醇提取物能显著提高小鼠热板实验中的痛阈 ,减少扭体次数;对小鼠耳肿胀 ,
大鼠蛋清性足肿胀及棉球性肉芽肿均有显著抑制作用 。结论 五叶草莓乙醇提取物具有显著的镇痛及抗
炎作用。
关键词:五叶草莓;抗炎;镇痛;实验研究
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1672-0574(2006)05-0063-03
Alcoh Extractive from Quinqueleaf Strawberry:
Empirical Study of its Pain-relieving and Anti-inflammatory Effects
Li Qiaolan ,Li Zheng , Yang Yi , Li Bin , He Jinyu , Director:Zhang Hong
Shaanxi University of Chinese Medicine , Xianyang , Shaanxi , 712046
Abstract Objective:To observe the pain-relieving and anti-inflammatory effects of alcoh extractive from quin-
queleaf strawberry on experimental animal model.Methods:Observing quinqueleaf strawberry s pain-relieving effect
through mice s hot plate and writhing experiment and observing its anti-inflammation effect through ear swelling of
mice , foot swelling and cotton ball granuloma of rats.Results:Alcoh extractive from quinqueleaf strawberry could sig-
nificantly improve the pain threshold and reduce the writhing frequency in the hot plate experiment of mice , and had a
significant depressant effect on mice s ear swelling , rats albumen foot swelling and cotton ball granuloma.Conclu-
sion:alcoh extractive from Quinqueleaf strawberry has a significant pain-relieving and anti-inflammatory effect.
Key Words:Quinqueleaf strawberry;anti-inflammatory;pain-relieving;empirical study
  五叶草莓(又名泡儿 、栽秧泡)属蔷薇科草莓属
多年生草本植物 ,是秦岭山区的一种野生植物 ,当
地群众采集白色成熟果实大量食用或酿酒 ,当地民
间草医用其全草煎服治疗胃脘不适极有效验 。我
们根据民间应用经验 ,将其全草经过浸泡煎煮后采
用常规乙醇提取方法得到其乙醇提取物 ,在前期毒
理实验的基础上对其进行镇痛 、抗炎作用的研究 ,
为进一步开发应用五叶草莓提供依据。
1 实验材料
1.1 动物 ICR小鼠 ,雌雄各半 ,体重 18 g ~ 22g;
SD大鼠 ,雌雄各半 ,体重 130g ~ 150g ,均由陕西省
中医研究院动物实验中心提供(动物合格证号陕动
字 08 ~ 24)
1.2 药物 五叶草莓全草(采自秦岭山区 ,以下简
称WYCM):经水煎 ,过滤浓缩至 5g 生药/ml ,用生
理盐水配制成高剂量(含生药 90mg/ml)、中剂量
基金项目:陕西省科技厅资助项目(2001SM90)
2006年 9月第 26卷第 5期
Sep.2006 Vol.26  No.5
现 代 中 医 药
Modern Traditional Chinese Medicine ·63 ·
DOI :10.13424/j.cnki.mtcm.2006.05.040
(含生药 45mg/ml)、低剂量(含生药 22.5mg/ml)备
用;哌替啶 吉林制药股份有限公司生产 ,批号
050312;阿司匹林 西南药业股份公司 , 批号
050401。
1.3 试剂 冰醋酸:河南开封化工厂生产 ,批号
20040905;二 甲 苯:西 安 化 工 厂 生 产 , 批 号
20050629。
1.4 仪器 YLS-6A 智能热板仪:山东省医学科
学院设备站;FA1004N型电子天平:上海精密科学
仪器有限公司天平仪器厂;机械秒表(钻石牌):上
海市钟表工业公司上海秒表厂;游标卡尺:上海研
润光机科技有限公司 。
2 实验方法
2.1 小鼠热板实验[ 1]  取雌性 ICR小鼠 ,调节恒
温水浴水温(55±0.5)℃,预热 10min后 ,将小鼠置
热板上至出现舔后足所需时间为该小鼠痛阈值 。
选用痛阈值 5 ~ 30s小鼠 50只 ,随机分为WYCM高
剂量组 、中剂量组 、低剂量组 、哌替啶组及空白组 ,
每组 10只 ,各小鼠测 2次痛阈值 ,取均值作为基础
痛阈值 。其中WYCM高 、中 、低剂量组分别依次 ig
3.6g/kg 、1.8g/kg 、0.9g/kg的WYCM 提取物 ,空白
组 ig等体积生理盐水 ,给药容量均为0.2ml/10g体
重 ,连续 7d ,末次给药后哌替啶组给予 ip 0.1%的
盐酸哌替啶 0.1ml/10 g ,分别测给药后 30 、60 、90 、
120min的痛阈。
2.2 小鼠扭体实验[ 2]  取 ICR小鼠 50只 ,雌雄各
半 ,随机分为 WYCM 高 、中 、低剂量组。哌替啶组
和空白组 ,每组 10只 。各组实验小鼠给药方式同
2.1。末次给药 30min后 ,腹腔注射 0.9%醋酸 0.1
ml/10mg 。哌替啶组在 i.p哌替啶 10min后 i.p同
量醋酸 ,观察各组动物 10min内扭体次数 。
2.3 小鼠耳肿胀实验[ 3]  取 ICR小鼠 50只 ,雌雄
各半 ,随机分为 WYCM 高 、中 、低剂量组。阿司匹
林组和空白组 ,每组 10只 。WYCM 各组及空白组
给药同 2.1 ,阿司匹林组于末次给药时 ip 0.1ml/10
g 阿司匹林 。WYCM 各组于末次灌胃 30min 后 ,阿
司匹林组于给药 10min后在每只小鼠左耳均匀涂
二甲苯 0.05ml致炎 ,右耳为空白。4 h后 ,小鼠脱
颈椎处死 ,沿耳廓基线剪下双耳 ,用直径 8mm打孔
器取双侧对称处的耳片称重 ,以其重量差为肿胀指
标。
2.4 大鼠蛋清致足肿胀实验[ 2]  取 SD大鼠 50
只 ,随机分为WYCM高 、中 、低剂量组 ,阿司匹林组
及空白组 ,每组 10只 ,WYCM高 、中 、低剂量组分别
依次 ig 4g/kg 、2 g/kg 、1 g/kg WYCM提取物 ,空白组
ig 等体积生理盐水 ,给药容量均为 2ml/100 g ,阿司
匹林组给 0.7ml/100g ,连续7d 。末次给药后 1h将
鲜蛋清注入大鼠右踝关节皮下(0.1ml/只),3 h 后
用卡尺测量踝关节周长之差为指标 ,用左右踝关节
肿胀之差计算肿胀程度 。
2.5 大鼠棉球性肉芽肿实验[ 4]  取 SD大鼠 40
只 ,在乙醚吸入浅麻醉无菌条件下 ,于两侧腹部皮
下各植入 30mg灭菌棉球 1个 ,外涂青霉素溶液防
止感染。手术后随机分为 WYCM 高 、中 、低剂量
组。阿司匹林组及空白组 ,每组10只 ,给药同 2.4。
末次给药后处死动物 ,打开原切口 ,剥离棉球肉芽
组织 ,用滤纸吸干 ,放在称质量纸上称质量 ,所得质
量减去纸的质量 ,净得肉芽质量。计算肉芽重量并
计算抑制率。
3 统计学处理
数据以均数±标准差表示 ,应用 SPSS-10.0
统计软件进行方差分析 。
4 结果
4.1 小鼠热板实验 结果提示:高 、中 、低五叶草
莓提取物对热板法致痛小鼠的痛阈值均有明显的
提高作用 ,随着给药后时间的延长痛阈值亦增加 ,
但作用逊于哌替啶组 ,见表 1。
表 1 五叶草莓乙醇提取物对热板法致痛小鼠痛阈的影响( x ± s , n =10)
组别 剂量(g/ kg)
给药前痛
阈(s)
给药后不同时间痛阈(s)
30min 60min 90min 120min
空白组 - 16.50±3.27 19.30±4.85 20.90±4.50 19.11±4.11 19.9±3.69
哌替啶组 0.0002 17.8±3.99 25.5±3.95★★☆☆ 29.8±3.85★★☆☆ 32.2±4.13★★☆☆ 33.7±4.42★★☆☆
WYCM 高 3.6 18.70±8.05 22.72±7.63☆ 23.90±6.53☆ 25.59±7.15★☆ 27.20±6.95★☆
WYCM 中 1.8 17.50±2.95 19.80±3.15 21.80±4.29 24.84±6.60★☆ 26.70±5.90★☆
WYCM 低 0.9 16.90±4.43 20.33±3.65 21.60±2.41 23.80±4.36★☆ 25.90±5.70★☆
  与同一时间点空白组比较 ,★ P <0.05;★★ P <0.01;与给药前痛阈比较 , ☆ P <0.05;☆☆ P <0.01。
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现 代 中 医 药
Modern Traditional Chinese Medicine
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Sep.2006 Vol.26  No.5
4.2 小鼠扭体实验 结果提示:高 中 低五叶
草莓提取物对醋酸引起的小鼠扭体反应均有明显
的抑制作用 ,见表 2 。
表 2 五叶草莓乙醇提取物
对小鼠扭体反应的影响( x ± s , n =10)
组别 剂量(g/ kg)
出现扭体次数
(次/ 10min)
抑制率
(%)
空白组 - 42.4±8.71 -
哌替啶组 0.0002 23.5±6.08★★ 44.6
WYCM高 3.6 30.1±4.93★★ 29.0
WYCM中 1.8 32.6±10.71★ 23.1
WYCM低 0.9 30.1±4.93 9.9
  与空白组比较 , ★ P <0.05;★★ P <0.01。
4.3 小鼠耳肿胀实验 结果提示:高 、中 、低剂量
五叶草莓提取物均能明显对抗二甲苯所致小耳肿
胀作用 ,见表 3。
表 3 五叶草莓乙醇提取物对小鼠
二甲苯性耳壳肿胀的影响( x± s , n =10)
组别 剂量(g/kg)
肿胀度
(mg)
炎症抑制率
(%)
空白组 - 18.8±5.98 -
阿司匹林组 0.1 9.7±3.40★★ 48.4
WYCM高 3.6 12.7±6.75★ 32.4
WYCM中 1.8 15.9±5.99 15.4
WYCM低 0.9 16.4±4.64 12.8
  与空白组比较 , ★ P <0.05;★★ P <0.01。
4.4 大鼠鸡蛋清致足肿胀实验 结果提示:高 、
中 、低剂量五叶草莓提取物对大鼠蛋清性足肿胀均
有明显的抑制作用 ,从致炎后 1h 开始对蛋清所致
足肿胀起抑制作用 ,并且在炎症达到高峰期后随着
时间的增加抑制作用增强 ,见表 4 。
表 4 五叶草莓乙醇提取物对大鼠蛋清性足肿胀的影响( x ± s , n =10)
组别 剂量(g/ kg)
不同时间足肿胀程度(mm)
1h 2h 4h 6h 8h
空白组 - 9.63±0.65 10.35±0.33 12.09±0.21 13.96±0.31 15.29±0.26
阿司匹林组 0.7 4.32±0.34★★ 4.21±0.35★★ 4.63±0.53★★ 4.46±0.42★★ 4.34±0.43★★
WYCM高 4 5.32±0.46★★ 6.90±0.53★★ 7.59±0.15★★ 5.64±0.14★★ 4.82±0.46★★
WYCM中 2 7.94±0.47★ 8.80±0.29★ 9.84±0.60★ 7.36±0.32★ 5.94±0.47★
WYCM低 1 8.47±0.56★ 9.60±0.41★ 10.80±0.36★ 9.39±0.26★ 6.47±0.56★
  与同一时间点空白组比较 , ★ P <0.05;★★ P <0.01。
4.5 大鼠棉球性肉芽肿实验  结果提示:高 中
 低剂量五叶草莓提取物对大鼠棉球性肉芽肿均
有显著的抑制作用 ,见表 5。
表 5 五叶草莓乙醇提取物
对大鼠棉球性肉芽肿的影响( x ± s , n =10)
组别 剂量(g/kg)
肉芽肿
(mg)
炎症抑制
率(%)
空白组 - 71.48±8.44 -
阿司匹林组 0.7 35.53±7.34 50.3
WYCM 高 4 45.75±6.75★★ 36.0
WYCM 中 2 58.71±14.82★ 17.9
WYCM 低 1 63.08±16.13 11.8
与空白组比较 , ★ P <0.05 ★★ P <0.01。
5 讨论
秦岭山区五叶草莓分布较广 ,民间使用疗效确
切 ,尤其在治疗胃脘痛 ,前列腺炎等方面均有显著
疗效。本实验证明五叶草莓提取物有明显的镇痛
作用 ,采用小鼠热板法和扭体法两种疼痛模型 ,实
验可见小鼠因热刺激致痛的痛阈值明显提高 ,扭体
反应次数明显减少 ,但稍逊于哌替啶 。在抗炎方
面 ,对二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀 ,大鼠蛋清性足
肿胀及大鼠棉球性肉芽肿均有显著的抑制作用 ,并
与药物剂量程正相关性。我们的研究结果显示其
乙醇提取物含有较为稳定的药物活性成分 ,对动物
疼痛和炎症模型表现出显著的抑制作用 。此初步
研究对五叶草莓临床合理应用具有一定的指导作
用 ,其镇痛抗炎机理及有效成分还有待于进一步研
究 。
参考文献
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京:人民卫生出版社 , 1991:965.
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中医药出版社 1997 , 303.
(收稿日期:2006-04-21)
2006年 9月第 26卷第 5期
Sep.2006 Vol.26  No.5
现 代 中 医 药
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