全 文 ：织细胞，这与经其转录激活的下游靶酶或蛋白如 CYP3A4、
CYP2B6、UGT1A1、MDR1 等的表达部位基本一致。近年来在众
多肿瘤组织中也发现了 PXR的高表达，研究表明高表达 PXR
的肿瘤谱已经从早期的性激素相关肿瘤得到了很大范围的扩
展。在结肠癌〔6〕中也发现了 PXR的表达并证实了与多药耐药
的相关性。最近，在食道鳞状上皮癌组织中，PXR 蛋白及 mR-
NA水平均明显高于正常食道上皮组织〔2〕。
PXR抑制肿瘤细胞凋亡也可能是其诱导耐药的机制之一。
在人结肠癌细胞中，PXR 活化导致了抗凋亡基因，如 BAG3，
BIRC 2，MCL-1 等表达上调，而包括 BAK1 和 TP53 在内的促凋
亡基因表达受到抑制〔7〕。可是 Verma 等〔8〕却发现了相反的结
果。他们在人乳腺癌细胞系 MCF-7 和 ZR-75-1 中发现，PXR的
活化也可以通过一氧化氮(NO)依赖的途径上调 p53 的表达，
进而导致促凋亡因子 p21、PUMA 、BAK 表达增加，促进了乳腺
癌细胞的凋亡。PXR 对细胞凋亡的作用可能和性激素的表达
水平及 PXR对 NO的诱导作用的强弱有关，具有一定的组织特
异性，从而为研究化疗药物的选择性和与激素类药物的联合用
药方面提供了参考。
本实验发现 PXR基因与凋亡蛋白 Caspase-3 在食管鳞癌中
的表达明显相关，进一步证实其在食管鳞癌的发生与演进中有
着重要的作用与地位，是食管鳞癌治疗中的一个靶基因，因此
对 PXR的研究及应用这些研究成果有望使其成为食管鳞癌诊
断和基因、免疫治疗的新靶点，为食管鳞癌的诊断、治疗开辟一
条新途径。本研究证明，药理学活化 PXR 足够抑制阿霉素诱
导的 EC9706 细胞的凋亡，基因表达分析说明 PXR的抗凋亡作
用与多种凋亡相关基因的调控有关。PXR 作为抗肿瘤细胞凋
亡作为在肿瘤的治疗新靶点方面已引起重视，本研究为 PXR
在食管癌中的治疗作为新的靶点提供了理论依据。
4 参考文献
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〔2011-12-17 收稿 2012-04-05 修回〕
(编辑 赵慧玲)
翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
刘文泊 许本善 王德厚 张 峰 (泰山医学院药学院，山东 泰安 271016)
〔摘 要〕 目的 研究翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌注(I /R)损伤的保护作用及其可能机制。方法 小鼠随机分为 4 组，即假手术组、模型
组及翻白草总黄酮高、低剂量组。采用双侧颈总动脉阻断法制备小鼠 I /R损伤模型，Y型迷宫检测小鼠学习记忆能力，酶联免疫标记法检测小鼠脑
组织中髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6 的含量。结果 翻白草总黄酮可改善小鼠学习及记忆能力，降低 I /R损伤
小鼠脑组织 MPO活性及 TNF-α、IL-6 的含量。结论 翻白草总黄酮对 I /R损伤小鼠有保护作用，其机制与其抗炎作用有关。
〔关键词〕 翻白草总黄酮;I /R损伤;MPO;TNF-α;IL-6
〔中图分类号〕 R285 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2012)22-4965-02;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 22. 052
基金项目:泰安市大学生创新项目(No. 2010D2040)
通讯作者:张 峰(1972-) ，男，硕士，讲师，主要从事中药药理学研究。
第一作者:刘文泊(1989-) ，男，2008 级临床药学专业本科生，主要从事
药学研究。
翻白草为蔷薇科植物，在我国分布极为广泛，应用历史悠
久，多种医药典籍中均有记载，其主要功效为清热解毒，凉血止
血〔1〕。现代医学研究表明，翻白草具有消炎镇痛、抗菌、抗氧
化、降血糖等作用〔1 ～ 3〕。翻白草富含黄酮类成分〔4，5〕，具有重要
开发价值。本研究旨在探讨翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌
注(I /R)损伤的保护作用，并探讨其可能的机制，为其临床应用
于缺血性脑血管疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 健康昆明种小鼠 60 只，雌雄兼用，体重(25 ± 2)g，
由泰山医学院动物中心提供，合格证号:鲁动质字 070103。翻
白草购于泰安市场，经我院中药学教研室鉴定;总黄酮采用超
声法提取，按文献方法〔5〕检测含量为 22. 4 mg /g 生药。考马斯
亮蓝染色试剂盒、髓过氧化物酶(MPO)试剂盒，购于南京建成
生物公司;白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒，
购于北京环亚泰克生物医学技术有限公司。
·5694·刘文泊等 翻白草总黄酮对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 第 22 期
1. 2 方法
1. 2. 1 实验分组及给药 实验前 1 d采用 Y形迷宫对小鼠进
行筛选，淘汰反应过于迟钝或特别敏感的小鼠。将筛选合格的
60 只小鼠随机分为 4 组，每组 15 只，即假手术组(进行手术，但
不进行脑 I /R)、I /R 模型组及翻白草总黄酮(FPB)高、低剂量
组，采用灌胃给予 5、2. 5 mg·kg －1·d －1FPB，1 次 /d，连续 3 d。
假手术组、模型组灌胃给予等体积的蒸馏水。
1. 2. 2 脑 I /R模型制备 末次给药后 1 h，用水合氯醛(4%，
0. 1 ml /10 g腹腔注射)麻醉小鼠，常规消毒颈部皮肤，将小鼠
仰卧固定，切开颈部皮肤，分离两侧颈总动脉，用缝合线打活
结，缝合颈部皮肤。脑 I /R 时，提起活结阻断双侧颈总动脉
5 min，立即松开再灌注 25 min。
1. 2. 3 学习记忆能力的检测 术后 24 h，筛选清醒活跃小鼠
继续给药 2 d，末次给药 1 h后进行脑缺血再灌注，随即采用 Y
型迷宫检测小鼠学习能力，次日检测记忆能力。电压范围 50 ～
90 V。检测时先放入小鼠使其适应 3 min，然后给小鼠以电刺
激，随机改变电击区和安全区，小鼠遭遇电击时直接逃至安全
区为正确反应，否则为错误反应。电击 15 次，记录正确次数。
24 h后再次测定小鼠连续遭遇 15 次电击的正确反应次数。
1. 2. 4 脑组织 MPO活力及 TNF-α、IL-6 含量测定 脱臼处死
小鼠，断头取脑，用冰生理盐水洗去血液，滤纸吸干，将脑组织
制成 10%匀浆，4℃离心(3 500 r /min，10 min) ，取上清，按照试
剂盒操作步骤进行检测。
1. 3 统计学方法 应用 SPSS13. 0 软件进行统计分析。实验
数据用 x ± s表示，各组均数比较采用单因素方差分析。
2 结 果
2. 1 FPB对 I /R损伤小鼠学习记忆能力的影响 模型组小鼠
正确次数明显低于假手术组小鼠，24 h 后检测正确率有所提
高，但仍然显著低于假手术组。与模型组相比，FPB 高、低剂量
组均可显著改善 I /R损伤小鼠学习和记忆能力(P ＜ 0. 01，P ＜
0. 05)。见表 1。
表 1 FPB对 I /R损伤小鼠学习记忆能力的影响(x ± s)
组别 n 学习正确次数 记忆正确次数
假手术组 10 0. 65 + 0. 16 0. 69 ± 0. 17
模型组 8 0. 17 ± 0. 071) 0. 37 ± 0. 151)
低剂量 FPB组 8 0. 44 ± 0. 121)2) 0. 51 ± 0. 081)2)
高剂量 FPB组 9 0. 52 ± 0. 113) 0. 64 ± 0. 153)
与假手术组比较:1)P ＜ 0. 01;与模型组比较:2)P ＜ 0. 05，3)P ＜
0. 01，下表同
2. 2 FPB对 I /R损伤小鼠脑组织 MPO 活力及 TNF-α、IL-6 含
量的影响 模型组小鼠脑组织中 TNF-α和 IL-6 含量及MPO的
活力均显著升高(P ＜ 0. 05)。与模型组小鼠比较，FPB高、低剂
量组小鼠脑组织 TNF-α 和 IL-6 含量及 MPO 的活力明显降低
(P ＜ 0. 05)。见表 2。
表 2 FPB对 I /R损伤小鼠脑组织中 TNF-α、
IL-6、MPO的影响(x ± s)
组别 n
TNF-α
(ng /L)
IL-6
(pg /ml)
MPO
(U /g)
假手术组 10 282. 32 ± 28. 34 120. 28 ± 22. 26 0. 64 ± 0. 08
模型组 8 321. 90 ± 25. 361)209. 97 ± 56. 481) 0. 85 ± 0. 151)
低剂量 FPB组 8 278. 00 ± 33. 032)176. 34 ± 29. 052) 0. 71 ± 0. 102)
高剂量 FPB组 9 272. 53 ± 40. 052)128. 87 ± 14. 603) 0. 68 ± 0. 092)
3 讨 论
学习记忆功能障碍是缺血性脑血管疾病患者普遍的临床
表现。本研究显示，脑 I /R损伤的小鼠在 Y型迷宫中回避电击
的正确次数显著减少，记忆能力也明显下降。预先给予 FPB的
小鼠则表现出了较好的规避危险的能力，提示 FPB 可减轻脑
I /R造成的损伤。脑 I /R损伤的发生是多种因素及多种机制参
与的复杂病理生理过程，其中炎症反应起着重要的作用。当脑
缺血 /再灌注时，可激活脑血管内皮细胞、血小板和免疫细胞释
放大量的促炎性细胞因子，包括 TNF-α、IL-6、IL-8、血小板激活
因子和补体活化产物等物质〔6〕。TNF-α、IL-6 作为炎症反应及
免疫应答的重要调节因子，参与 I /R损伤过程，加重脑损伤〔7〕。
MPO 是中性粒细胞的活化标志物，可诱导炎症相关基因的表
达，促进炎症效应细胞的增殖与活化〔8〕。本研究结果表明，小
鼠 I /R损伤后脑组织中 TNF-α、IL-6 含量显著升高，MPO 活力
亦明显提高，而预先给予 FPB 可降低脑组织中 TNF-α、IL-6 含
量及 MPO活力，提示 FPB可抑制脑 I /R后炎症反应。
黄酮类化合物具有广泛的药理活性，本研究证实翻白草总
黄酮可抑制炎症反应，对脑 I /R后学习记忆能力有一定保护作
用，为其在脑血管疾病防治方面的应用提供了实验依据。
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(编辑 曹梦园)
·6694· 中国老年学杂志 2012 年 11 月第 32 卷