免费文献传递   相关文献

翻白草总黄酮和芦丁组合物的降血糖作用研究



全 文 :· ·中国慢性病预防与控制 2015年 9月第 23卷第 9期 Chin J Prev Contr Chron Dis,September 2015,Vol. 23,No. 9
2.4 2011-2013年宁夏地区不同性别朝觐人群 HBsAg
阳性率的比较 2011年,男性 HBsAg阳性率为 6.68%
(91/1 361),女性阳性率为 5.09%(66/1 297);2012年,
男性阳性率为 5.08%(71/1 397),女性阳性率为 4.03%
(56/1 389);2013年男性阳性率为 4.79%(58/1 212),女
性阳性率为 4.17%(50/1200),3年间不同性别人群阳
性率差异均无统计学意义(χ2值分别为 3.05、1.77和
0.54,P>0.05)。
3 讨 论
本研究结果显示,2011-2013年宁夏地区朝觐人群
HBsAg 阳性率(4.98%)高于 2010 年宁夏居民 [1]和
2011-2013年新疆口岸朝觐人员检测结果[2],与本研究
调查对象年龄较大、聚居性强等因素有关。本研究结果
表明,朝觐人群中 HBsAg阳性者平均年龄较高,提示
相关医疗机构和检验检疫机构应对朝觐人群加强乙肝
危害的宣传并加强防控措施,提高老年人对乙肝危害
的重视程度和防范意识,提高疫苗接种覆盖率,防止疫
情从国门传入传出。检验检疫机构应对宗教局工作人
员加强乙型肝炎传播及防控措施的宣传,防止在朝觐
地发生疫情的传播流行。
参考文献
[1] 李海军,关键,杨媛媛,等.宁夏 2010年人群中乙肝表面抗原携带
现状分析[J].宁夏医学杂志,2014,36(1):78-80.
[2] 古丽努尔·买买提,王凌冰,雷霞,等.2011-2013年新疆口岸朝觐人
员传染病监测结果分析[J].中国国境卫生检疫杂志,2014,37(3):
240-266.
收稿日期:2015-01-16 修回日期:2015-03-16 本文编辑:高申
翻白草总黄酮和芦丁组合物的降血糖作用研究
孙琛 1,翟西峰 2,王力 3,潘亚磊 1,张严磊 1,刘妍如 1,宋忠兴 4,唐志书 1
1.陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心,陕西省 咸阳 712083;
2.西安医学院;3.陕西省泾阳县医院普外科;4.陕西省中药基础与新药研究重点实验室
摘要:目的 研究翻白草总黄酮、芦丁及其两者组合物对高血糖小鼠的降血糖作用,为糖尿病的治疗提供实验依据。
方法 选择昆明种小鼠,采用四氧嘧啶(50 mg/kg)腹腔注射造模,将造模成功的小鼠(血糖≥11.1 mmol/L以上)随机分为
11组:空白对照组、模型组、二甲双胍组(125 mg/kg)、消渴灵片组(2.88 g/kg)、组合物大剂量组(200 mg/kg)、组合物中剂量
组(150 mg/kg)、组合物小剂量组(100 mg/kg)、芦丁大剂量组(120 mg/kg)、芦丁中剂量组(100 mg/kg)、芦丁小剂量组(80
mg/kg)和翻白草总黄酮组(100 mg/kg)。连续给药 14 d后,观察芦丁和组合物对高血糖小鼠的血糖、胰岛素敏感指数、丙二
醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合成酶(NOS)的影响。结果 与模型组相
比,给药后,翻白草总黄酮、芦丁及其组合物小鼠血糖均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01);同时芦丁和组合物还能
够降低小鼠血清中 MDA含量,升高小鼠血清中 GSH-Px、SOD活力;组合物大、中剂量组,翻白草总黄酮组小鼠血清中 NOS
含量升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 翻白草总黄酮、芦丁及其组合物有较好的降血糖作用,改善胰岛
素抵抗力,增强小鼠的抗氧化能力,修复受损的胰岛细胞。
关键词:翻白草总黄酮;芦丁;血糖
中图分类号:R587.1 文献标志码:B 文章编号:1004-6194(2015)09-0695-03
DOI:10.16386/j.cjpccd.issn.1004-6194.2015.09.016
作者简介:孙琛,硕士,助教,研究方向:中药的提取分离及药理作用研
究,E-mail:sunchen2010xian@sina.com
通讯作者:唐志书,E-mail: tzs6565@163.com
·实验研究·
近年来,翻白草的许多药用价值被人们所发现,在
民间多用它来治疗糖尿病,并发现具有良好的效果,其
乙酸乙酯萃取物被发现有比较强的降血糖作用,并可
以调节血脂、抑制细菌、清除自由基,且没有毒性,主要
药理活性成分是其中的黄酮类物质[1-3]。芦丁能够保持
毛细血管的弹性,降低毛细血管的脆性及通透性,还能
够促进细胞增生和防止血液细胞聚合[4]。有报道,芦丁
还可以降低血糖,但是,针对其降血糖作用机制没有进
一步的研究。翻白草总黄酮和芦丁的组合物降血糖效
果值得研究,本文旨在探讨翻白草总黄酮、芦丁及两者
的组合物对高血糖小鼠的降血糖活性,为开发安全、有
效的降血糖药物提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料 药材购自陕西省药材市场,由西北大学王
亚洲教授鉴定为翻白草,取干燥全草,先粉碎,再过筛,
695
· · 中国慢性病预防与控制 2015年 9月第 23卷第 9期 Chin J Prev Contr Chron Dis,September 2015,Vol. 23,No. 9
表 1 各组小鼠给药前后血糖水平变化情况(mmol/L,x±s)
组别 动物数 给药前血糖 给药后血糖
对照组 12 6.76±0.57 6.45±0.49
组合物大剂量 12 11.74±0.62b 6.11±0.52a
组合物中剂量 12 11.62±0.48b 6.26±0.44a
组合物小剂量 12 11.69±0.45b 6.56±0.64a
芦丁大剂量 12 11.64±0.65b 6.81±0.49a
芦丁中剂量 12 11.72±0.57b 6.97±0.45acd
芦丁小剂量 12 11.73±0.53b 7.24±0.43acd
二甲双胍 12 11.67±0.70b 6.43±0.53a
消渴灵片 12 11.72±0.51b 6.61±0.66a
翻白草总黄酮 12 11.69±0.38b 6.86±0.47ac
模型组 12 11.72±0.63b 14.08±1.89b
F值 68.479 81.539
P值 <0.01 <0.01
注:与模型组相比,aP<0.01;与对照组相比,bP<0.01;与组合
物大剂量相比,cP<0.05;与组合物中剂量相比,dP<0.05。
在 70℃用 70%的乙醇回流提取 2次,每次 2 h。提取液
减压回收溶剂至无醇味,用石油醚萃取除去叶绿素,再
用乙酸乙酯萃取,取乙酸乙酯层减压回收至干,即得翻
白草总黄酮粗品(得膏率为 1.1%)。组方:将翻白草总
黄酮(65%)粗品粉碎,再取芦丁(35%)将其粉碎,将两
者粉末混匀、溶解。以下就用组合物来表示翻白草总黄
酮和芦丁的组方。芦丁(陕西省生物医药重点实验室),
消渴灵片(吉林省康福药业有限公司),盐酸二甲双胍
缓释片(石家庄市华新药业有限责任公司),四氧嘧啶
(美国 Sigma公司),生理盐水(河南华利药业有限责任
公司),氢氧化钠(武汉欣申试化工科技有限公司),甲
醛(成都科龙化工试剂厂),磷酸氢二钠(南京化学试剂
有限公司),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测试盒(南
京建成生物工程研究所),超氧化物歧化酶(SOD)测试
盒(北京华英生物技术研究所),丙二醛(MDA)试剂盒
(南京建成生物工程研究所)。
1.2 动物 健康昆明种雄性小鼠 132只(购自西安交
通大学医学院实验动物中心,合格证号:SCXK2012-
0007),体重 18~25 g。饲养条件:SPF级实验室,相对湿
度 30%~40%,温度 20~30 ℃,SPF级饲料(西安交通大
学医学院实验动物中心提供)、纯净水,各组实验动物
饲养条件一致。
1.3 仪器 EYALAN-N型旋转蒸发仪(日本RIKAKIKAI
公司),血糖测试仪(北京怡成生物电子技术有限公司),
U-2001型紫外可见分光光度计(日本HITAICHI公司)。
1.4 方法
1.4.1 高血糖模型的建立 小鼠在 SPF级实验条件下
适应 1周后,随机分为 11组,即空白对照组、模型组、
二甲双胍组、消渴灵片组、组合物大剂量组、组合物中
剂量组、组合物小剂量组、芦丁大剂量组、芦丁中剂量
组、芦丁小剂量组和翻白草总黄酮组。除空白对照组
外,其余各组每天灌服高浓度的葡萄糖 30 g/kg,同时
饮用葡萄糖水,连续灌服 20 d,对照组给予等量的生理
盐水,给小鼠腹腔注射四氧嘧啶,50 mg/kg,分别于实验
第 1、3、5、14和 20天眼眶取血,测空腹血糖,血糖浓度
达 11.1 mmol/L以上者选用。
1.4.2 血糖的测定 各给药组连续灌胃给药 14 d,1
次/d,组合物小、中、大剂量分别为 100、150、200 mg/kg,
芦丁小、中、大剂量分别为 80、100、120 mg/kg,二甲双
胍 125 mg/kg,消渴灵片 2.88 g/kg,翻白草总黄酮 100
mg/kg,空白对照组及模型组给予等量的生理盐水,每
组 12只小鼠。于第 14天下午对小鼠禁食不禁水,第
15天早上空腹给药,并于给药后 1.5 h测定空腹血糖。
1.4.3 胰岛素敏感指数(INS)的计算 于实验第 15
天,各组小鼠禁食不禁水 12 h后,对各组小鼠进行灌
胃给药,准确记录时间,并于 60 min 后眼眶取血 1.0~
1.5 ml,静置,用离心机 3 000 r/min离心 10 min(离心半
径为 3 cm),迅速分离血清。取血清 50 μl,采用 125I胰
岛素放射免疫分析试剂盒测定各组小鼠空腹血清胰岛
素水平,并计算 INS。INS=ln[1/(胰岛素×空腹血糖)]。
1.4.4 生化指标的测定 取 1.4.3节中小鼠的血清,采
用 722型分光光度剂测定一氧化氮合成酶(NOS)、谷
胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)
活力和丙二醛(MDA)含量。
1.5 统计学分析 用 SPSS 17.0统计软件包进行数据
的统计处理。计量资料以 x±s表示,多组间比较用单因
素方差分析,两两比较用 LSD检验。检验水准 α=0.05。
2 结 果
2.1 对高血糖小鼠血糖的影响 与对照组比,造模后
给药前各组血糖水平均明显升高,差异有统计学意义
(P<0.01),与模型组相比,组合物各剂量组及芦丁各剂
量组给药后空腹血糖均明显降低,阳性药二甲双胍和
消渴灵片组小鼠血糖水平亦明显下降,差异均有统计
学意义(P<0.01)。给药后,各给药组血糖水平与对照组
比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。且组合物组与芦
丁、翻白草总黄酮组相比,降糖效果更佳,见表 1。
2.2 各组小鼠 INS的变化 与模型组相比,各给药组
小鼠空腹血清胰岛素水平均明显下降,INS均明显升
高,差异均有统计学意义(P<0.01),见表 2。与对照组比
较,各给药组血清胰岛素水平及 INS差异均无统计学
意义(P>0.05)。
2.3 对高血糖小鼠生化指标的影响 与模型组相比,
给药组 MDA含量均明显降低,差异均有统计学意义
(P<0.01)。给药 14 d后,阳性药组小鼠血清中的 NOS
含量和 GSH-Px、SOD活力明显升高,差异均有统计学
意义(P<0.05)。与模型组相比,组合物组和芦丁的大、
696
· ·中国慢性病预防与控制 2015年 9月第 23卷第 9期 Chin J Prev Contr Chron Dis,September 2015,Vol. 23,No. 9
表 2 各组小鼠空腹血清胰岛素水平及 INS(x±s)
组别 动物数 血清胰岛素水平(mu/L) INS
对照组 12 13.36±1.57a -4.36±0.12a
组合物大剂量 12 12.69±1.41a -4.24±0.14a
组合物中剂量 12 12.85±2.52a -4.27±0.14a
组合物小剂量 12 12.91±1.25a -4.33±0.15a
芦丁大剂量 12 13.32±1.88a -4.48±0.15a
芦丁中剂量 12 13.20±1.08a -4.55±0.18a
芦丁小剂量 12 12.97±1.79a -4.61±0.13a
二甲双胍 12 12.53±2.18a -4.28±0.13a
消渴灵片 12 13.87±1.73a -4.50±0.14a
翻白草总黄酮 12 12.93±2.23a -4.41±0.19a
模型组 12 20.62±1.18 -5.66±0.12
F值 14.849 72.879
P值 <0.01 <0.01
注:与模型组相比,aP<0.01;INS:胰岛素敏感指数。
表 3 各组小鼠生化指标含量的比较(x±s)
组别 动物数
NOS
(U/ml)
GSH-Px
(U/ml)
SOD
(U/ml)
MDA
(nmol/ml)
对照组 12 61.14±2.70 96.96±10.87b 72.70±4.18b 5.19±1.04
组合物大剂量 12 56.46±2.76b 95.62±10.46b 70.29±3.03b 5.28±1.22b
组合物中剂量 12 55.60±3.99a 93.65± 8.47b 68.41±5.20b 5.37±0.82b
组合物小剂量 12 53.21±3.84 92.15±11.12b 66.65±6.42b 5.50±1.02b
芦丁大剂量 12 53.01±3.71 82.03±13.11acde 60.19±4.21bcde 6.78±1.13bcde
芦丁中剂量 12 52.93±4.55 80.08±11.50acde 58.26±6.63bcde 6.95±1.00bcde
芦丁小剂量 12 52.37±2.16 79.17±10.08cde 59.17±6.18bcde 6.73±0.97bcde
二甲双胍 12 55.59±6.42 82.68±10.09a 53.21±6.74a 5.32±1.09b
消渴灵片 12 57.93±2.28b 99.09±14.65b 60.71±6.85b 5.15±1.25b
翻白草总黄酮 12 59.03±4.71be 79.61± 9.86cde 51.94±3.30cde 6.70±0.61bcde
模型组 12 51.81±1.54 71.56±13.93 46.76±6.39 10.28±0.88
F值 4.888 5.746 21.103 16.468
P值 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01
注:与模型组相比,aP<0.05,bP<0.01;与组合物大剂量相比,
cP<0.05;与组合物中剂量相比,dP<0.05;与组合物小剂量相比,
eP<0.05;NOS:一氧化氮合成酶;GSH-Px:谷胱甘肽过氧化物酶;
SOD:超氧化物歧化酶;MDA:丙二醛。
中剂量组小鼠血清中 GSH-Px、SOD活力均明显升高,
差异均有统计学意义(P<0.05),而翻白草总黄酮组
未对GSH-Px、SOD含量有明显影响。与模型组比较,组
合物大、中剂量组,消渴灵片组及翻白草总黄酮组 NOS
活力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01),而各芦
丁剂量组 NOS活力与模型组的差异无统计学意义(P>
0.05)。与芦丁各剂量组和翻白草总黄酮组比较,组合物
各剂量组小鼠血清中 SOD、GSH-Px活力均明显升高,
MDA 含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),
见表 3。
3 讨 论
本研究结果显示,翻白草总黄酮、芦丁及翻白草总
黄酮与芦丁组合物均能明显降低糖尿病小鼠的空腹血
糖,提高胰岛素敏感性,且组合物组作用明显强于单独
芦丁、翻白草总黄酮组。随后,我们从氧化应激方面对
翻白草总黄酮与芦丁的降血糖机制进行了探讨。
研究显示,一氧化氮(NO)可通过改善胰岛素敏感
性,促进血糖在体内的代谢治疗糖尿病并改善其并发
症[5-6]。此外,NO还可修复糖代谢紊乱导致的血管及神
经细胞损伤[7-8]。本实验结果显示,组合物和芦丁均可升
高小鼠血清中 NOS含量。
体内 MDA含量可反映机体内脂质过氧化的程度,
间接反映胰岛细胞损伤的程度,而 GSH-Px和 SOD活
力则可以反映小鼠的抗氧化活性。本实验结果表明,组
合物和芦丁能明显提高 SOD、GSH-Px活力,降低 MDA
含量。本研究结果提示,提高抗氧化酶活力,增强机体
的抗氧化能力,清除活性氧自由基,从而解除自由基对
胰岛 β-细胞的损伤,促进胰岛 β-细胞的修复和再生,
可能是芦丁和翻白草总黄酮降血糖作用的机制之一。
综上所述,本研究中我们对芦丁及芦丁和翻白草
总黄酮组合物的降血糖作用进行了初步探讨,为研制
安全有效的新型治疗糖尿病药物奠定实验基础。另外,
芦丁及组合物的剂量关系有待进一步研究。
参考文献
[1] 黄芸,秦民坚,余国奠.异黄酮类化合物在植物界的分布及药理作
用[J].中国野生植物资源,2001,20(1):5-7.
[2] Sanchez I, Gomez-Garibay F, Taboadal J. Antiral effect of flavonoids
oil the denguevirus[J]. Phytotheapy Res,2000,4(3):89.
[3] 王琦,周玲仙,罗晓东,等.翻白草不同方法提取物对小鼠降血糖作
用[J].中国公共卫生,2007,23(2):225.
[4] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品
标准化学药品及制剂[S]. 1989.
[5] 徐梓辉,周世文,陈卫.薏苡仁多糖对糖尿病血管并发症大鼠 NO
及主动脉 iNOS基因表达的影响[J].第三军医大学学报,2007,29
(17):1673-1676.
[6] 张俭,伍贤进,谭运兰,等.翻白草营养成分及部分药用成分的测定
与分析[J].食品科技,2006(9): 237-239.
[7] 徐勤.鞣质的研究进展[J].华夏医学,2004,17(1):113-115.
[8] Masalkar PD, Abhang SA. Oxidative stress and antioxidant status in
patients with alcoholic liver disease[J].Clin Chim Acta,2005,55
(1/2):61-65.
收稿日期:2014-07-04 修回日期:2015-07-25 本文编辑:何雅晖
697