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十种杀菌剂对欧李褐腐病菌的室内毒力测定



全 文 :北方园艺2014(05):103~105 ·植物保护·
    
第一作者简介:周芳(1988-),女,河南开封人,硕士研究生,现主要
从事植物真菌病害及生物防治等研究工作。E-mail:zhoufangluck
@163.com.
责任作者:郝晓娟(1977-),女,山西晋中人,博士,副教授,现主要
从事植物病害生物防治等研究工作。
基金项目:国家自然科学基金青年基金资助项目(31000873);山西
省科技攻关资助项目(20120311016-2);山西农业大学中青年学术
骨干基金资助项目(XG201210)。
收稿日期:2013-11-15
十种杀菌剂对欧李褐腐病菌的室内毒力测定
周   芳,郝 晓 娟,程   超,王 美 琴,李 新 凤,王 建 明
(山西农业大学 农学院,山西 太谷030801)
  摘 要:以10种杀菌剂为试材,以欧李褐腐病菌为研究对象,采用菌丝生长速率法和孢子萌发
抑制法测定了10种杀菌剂对欧李褐腐病菌(Monilinia fructicola)的室内毒力,以筛选出防治欧李褐
腐病的有效药剂。结果表明:430g/L戊唑醇悬浮剂、24%腈苯唑悬浮剂、10%苯醚甲环唑水分散粒
剂、80%多菌灵可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、500g/L异菌脲悬浮剂、50%腐霉利可湿性
粉剂对欧李褐腐病菌菌丝生长的半致死浓度(EC50)均低于0.700mg/L,其中430g/L戊唑醇悬浮剂
对菌丝的抑制效果最好,EC50为0.027mg/L;80%代森锰锌可湿性粉剂对菌丝的抑制效果最差,EC50
为57.645mg/L。供试的10种药剂对孢子萌发的EC50均低于2.500mg/L,抑制作用最强的是500g/L
异菌脲悬浮剂,EC50为0.024mg/L;效果最差的是80%代森锰锌可湿性粉剂,EC50为2.496mg/L。24%
腈苯唑悬浮剂、430g/L戊唑醇悬浮剂、500g/L异菌脲悬浮剂可以用于欧李褐腐病的防治。
关键词:欧李褐腐病;美澳型核果链核盘菌;杀菌剂;毒力
中图分类号:S 436.62 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2014)05-0103-03
  欧李(Cerasus humilis)广泛分布于我国华北、西北、
东北及华东等地区,其果实钙含量居所有经济型水果之
首,因此又名“钙果”[1]。除含钙丰富外,欧李果实中还含
有多种维生素、氨基酸及铁锌硒等矿物元素,具有降压、
降胆固醇、抗炎症和抗癌作用[2],是我国特有的新一代
保健型果品[3-4]。近年来,欧李种植发展势头迅猛,但随
着种植面积的增加,病害问题日益突出。欧李褐腐病
2011年首次报道于辽宁省[5],在山西省欧李种植区同样
    
发生普遍,生长后期如遇多雨潮湿天气,引起果实腐烂,
发病率高达80%以上,使果实丧失经济价值。杜俊杰
等[6]认为褐腐病是欧李生产中危害最为严重的病害。
褐腐病菌主要以菌丝体在僵果上越冬,翌年僵果表面产
生大量分生孢子,通过风雨传播引起初次侵染。国内尚
未发现该病菌的有性阶段,因此分生孢子在初侵染中起
主要作用。适宜条件下,病部可产生大量分生孢子,进
行再次侵染。目前欧李褐腐病防治及药剂筛选尚鲜见
报道,筛选出能有效抑制欧李褐腐病菌菌丝生长和分生
孢子萌发的化学药剂,对该病害的有效防控至关重要。
现采用菌丝生长速率法和孢子萌发抑制法测定了10种
杀菌剂对欧李褐腐病菌(美澳型核果链核盘菌)Monilinia
fructicola的室内毒力,以期筛选出防治欧李褐腐病的
有效药剂,为该病害的化学防治提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试欧李褐腐病菌(Monilinia fructicola),由山西
    
healthy adventitious shoot clusters with an average number of(5.0±0.3)shoots/explant.Indirect regeneration way:cali
were induced from leaf fragments inoculated on the medium of MS+NAA 0.2mg/L+TDZ 0.5mg/L for 3weeks in
darkness,and then were cultured on medium of MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L for 4weeks under the light.
(88.9±5.9)%of cali could produce adventitious shoot with an average number of(5.5±0.4)shoots/calus.After
growing on the medium of MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 0.3mg/L for 3to 4weeks,the shoots proliferated and became
stronger.Thus,almost 100%of the shoots could root wel on the medium of MS+IBA 0.5mg/L+0.1%active carbon.
The two protocols could be used for genetic transformation research of S.involucrate.
Key words:Saussurea involucrate;proliferated sterile seedlings;plant regeneration;hormone;induce
301
·植物保护· 北方园艺2014(05):103~105
农业大学植物病理实验室分离保存。供试药剂及其浓
度见表1。
表1 室内毒力测定供试药剂及其浓度
  Table 1 The fungicides and their concetrations for
laboratory toxicity evaluation
供试药剂
Fungicides
生产厂家
Manufactuters
浓度梯度
Concentrations/mg·L-1
80%多菌灵Carbendazim WP 上海悦联化工有限公司 0.004、0.02、0.1、0.5、2.5
50%啶酰菌胺Boscalid WG 德国巴斯夫中国有限公司 0.004、0.02、0.1、0.5、2.5
70%甲基硫菌灵
Thiophanate-methyl WP
山东海讯生物化学有限公司 0.004、0.02、0.1、0.5、2.5
430g/L戊唑醇
Tebuconazole SC
拜耳作物科学中国有限公司 0.004、0.02、0.1、0.5、2.5
500g/L异菌脲Iprodione SC 拜耳作物科学中国有限公司 0.004、0.02、0.1、0.5、2.5
10%苯醚甲环唑
Difenoconazole WG
瑞士先正达作物保护有限公司 0.04、0.2、1、5、25
75%百菌清Chlorothalonil WP 青岛润生农化有限公司 0.04、0.2、1、5、25
50%腐霉利Procymidone WP 陕西上格之路生科有限公司 0.04、0.2、1、5、25
24%腈苯唑Fenbuconazole SC 美国陶氏益农公司 0.01、0.1、1、10、100
80%代森锰锌Mancozeb WP 美国陶氏益农公司 0.01、0.1、1、10、100
  注:WP为可湿性粉剂,SC为悬浮剂,WG为水分散粒剂。
Note:WP:Wettable powder;SC:Suspending agent;WG:Water dispersible granule.
1.2 试验方法
1.2.1 10种杀菌剂对病菌菌丝生长的毒力测定 采用
生长速率法。每种药剂均设置5个浓度梯度(表1),用
无菌水将供试药剂分别配成一定浓度的母液,使用时将
母液稀释,并将药液与PDA培养基按1∶9的体积比混
合均匀,配成相应浓度的含药培养基,以加等量无菌水
的培养基为对照。用直径6mm的打孔器在培养5d的
供试菌落边缘打取菌饼,将菌饼接种于含药培养基中
央,22℃光暗交替培养,每个浓度3次重复。4d后观察
供试病菌在各杀菌剂不同浓度下的生长情况,用十字交
叉法测量菌落直径,计算抑制率、毒力回归方程、EC50及
相关系数。抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直
径)/(对照菌落直径-菌饼直径)×100%。
1.2.2 10种杀菌剂对病菌孢子萌发的毒力测定 用无
菌水制成孢子悬浮液,其终浓度为在10×10倍显微镜下
每视野能观察到20~30个孢子,备用。各药剂浓度梯度
设置见表1。将孢子悬浮液与供试药剂按1∶4体积比
混合均匀,配成相应浓度的含药孢子悬浮液,滴于凹玻
片上于22℃保湿悬滴培养,3h后镜检培养结果,记录孢
子总数和孢子萌发数,每处理随机检查200个孢子,每处
理3次重复。计算孢子萌发抑制率、毒力回归方程、EC50
及相关系数。孢子萌发率(%)=萌发孢子数/检查孢子
数×100%;孢子萌发抑制率(%)=(对照萌发率-处理
萌发率)/(对照萌发率)×100%。
2 结果与分析
2.1 10种杀菌剂对病菌菌丝生长的毒力
从表2可以看出,10种药剂对欧李褐腐病菌菌丝生
长均表现出一定的抑制作用。430g/L戊唑醇悬浮剂对
病菌菌丝生长抑制作用最强,EC50为0.027mg/L。24%
腈苯唑悬浮剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、80%多菌灵
可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、500g/L异菌
脲悬浮剂、50%腐霉利可湿性粉剂等对菌丝的抑制效果
比较理想,EC50均低于0.700mg/L。50%啶酰菌胺水分
散粒剂、75%百菌清可湿性粉剂的抑菌效果相对较差,
EC50分别为1.456、1.462mg/L。80%代森锰锌可湿性
粉剂的抑菌效果最差,EC50为57.645mg/L。EC50值是
衡量杀菌剂毒力大小的重要指标,EC50值越小表明药剂
毒力越强[7]。10种不同药剂的EC50值由小到大依次为
430g/L戊唑醇悬浮剂<24%腈苯唑悬浮剂<10%苯醚
甲环唑水分散粒剂<80%多菌灵可湿性粉剂<70%甲
基硫菌灵可湿性粉剂<500g/L异菌脲悬浮剂<50%腐
霉利可湿性粉剂<50%啶酰菌胺水分散粒剂<75%百
菌清可湿性粉剂<80%代森锰锌可湿性粉剂。
表2  10种杀菌剂对欧李褐腐病菌
菌丝生长的毒力(EC50)
  Table 2   Virulence(EC50)of 10kinds of fungicides to
    mycelia growth of Monilinia fructicola
药剂
Fungicides
毒力回归方程
Virulence regression
equation
相关系数
Correlation
coeficient
EC50
/mg·L-1
80%多菌灵Carbendazim WP  y=1.5810x+6.3916  0.9787  0.132
50%啶酰菌胺Boscalid WG  y=0.6535x+4.8935  0.9375  1.456
70%甲基硫菌灵Thiophanate-methyl WP y=1.3250x+6.0723  0.9824  0.155
430g/L戊唑醇Tebuconazole SC  y=0.8521x+6.3399  0.9828  0.027
500g/L异菌脲Iprodione SC  y=0.6349x+5.2618  0.9978  0.387
10%苯醚甲环唑Difenoconazole WG y=0.7533x+5.8994  0.9956  0.064
75%百菌清Chlorothalonil WP  y=0.8466x+4.8604  0.9927  1.462
50%腐霉利Procymidone WP  y=1.2070x+5.2015  0.979  0.681
24%腈苯唑Fenbuconazole SC  y=0.5755x+5.8457  0.9921  0.034
80%代森锰锌 Mancozeb WP  y=0.5087x+4.1042  0.9828  57.645
2.2 10种杀菌剂对病菌孢子萌发的毒力
从表3可以看出,抑制孢子萌发效果最好的杀菌剂
是500g/L异菌脲悬浮剂,EC50为0.024mg/L;效果相对
  表3  10种杀菌剂对欧李褐腐病
菌孢子萌发的毒力(EC50)
  Table 3   Virulence(EC50)of 10kinds of fungicides to
    spore germination of Monilinia fructicola
药剂
Fungicides
毒力回归方程
Virulence regression
equation
相关系数
Correlation
coeficient
EC50
/mg·L-1
80%多菌灵Carbendazim WP  y=0.9948x+6.0743  0.9942  0.083
50%啶酰菌胺Boscalid WG  y=0.7626x+5.6548  0.9341  0.139
70%甲基硫菌灵Thiophanate-methyl WP y=0.5883x+5.3286  0.9915  0.276
430g/L戊唑醇Tebuconazole SC  y=0.9828x+5.4645  0.9960  0.337
500g/L异菌脲Iprodione SC  y=0.4342x+5.7033  0.9631  0.024
10%苯醚甲环唑Difenoconazole WG y=0.8485x+5.4174  0.9937  0.322
75%百菌清Chlorothalonil WP  y=1.2273x+5.7645  0.9611  0.238
50%腐霉利Procymidone WP  y=0.2859x+4.9933  0.9829  1.056
24%腈苯唑Fenbuconazole SC  y=0.4738x+5.6244  0.9856  0.048
80%代森锰锌 Mancozeb WP  y=0.8352x+4.6682  0.9702  2.496
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北方园艺2014(05):103~105 ·植物保护·
最差的是80%代森锰锌可湿性粉剂,EC50为2.496mg/L。
其它供试药剂EC50在0.048~1.056mg/L之间,对孢子
萌发均具有良好的抑制效果。10种不同药剂对孢子萌
发的EC50值由小到大依次为500g/L异菌脲悬浮剂<
24%腈苯唑悬浮剂<80%多菌灵可湿性粉剂<50%啶酰
菌胺水分散粒剂<75%百菌清可湿性粉剂<70%甲基
硫菌灵可湿性粉剂<10%苯醚甲环唑水分散粒剂<
430g/L戊唑醇悬浮剂<50%腐霉利可湿性粉剂<80%
代森锰锌可湿性粉剂。
3 结论与讨论
欧李在我国规模化种植的时间较短,病害化学防治水
平低,田间用药尚缺乏有效指导。该试验结果表明,供试药
剂对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢子萌发均具有一定程度的
抑制作用。对菌丝生长抑制作用最强的杀菌剂为430g/L
戊唑醇悬浮剂,EC50为0.027mg/L,其次为24%腈苯唑悬浮
剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、80%多菌灵可湿性粉剂、
70%甲基硫菌灵可湿性粉剂等,80%代森锰锌可湿性粉剂
的抑菌效果最差,EC50为57.645mg/L。供试的10种药剂
对孢子萌发的EC50均低于2.500mg/L,500g/L异菌脲悬
浮剂对孢子萌发的毒力最强,EC50为0.024mg/L,其次为
24%腈苯唑悬浮剂,EC50为0.048mg/L。
有报道认为,不同毒力测定方法获得的结果可能具
有差异[8-9],因此在杀菌剂毒力测定中,应尽可能测定与
病害有关的病菌各生长阶段对药剂的敏感性,以使获得
的结果更为全面准确[9]。因此,24%腈苯唑悬浮剂对病
菌菌丝生长和孢子萌发均具有良好的抑制作用,综合
性能要优于430g/L戊唑醇悬浮剂和500g/L异菌脲
悬浮剂。该试验结果从理论上表明24%腈苯唑悬浮
剂、430g/L戊唑醇悬浮剂、500g/L异菌脲悬浮剂是欧
李褐腐病防治中的优良杀菌剂,此外10%苯醚甲环唑水
分散粒剂、80%多菌灵可湿性粉剂、70%甲基硫菌灵可湿
性粉剂等药剂均可用于欧李褐腐病的化学防治。在实
践中,应注意药剂的轮换使用,延缓抗药性的产生。同
时在实际生产中还要配合及时清除落果、病果、僵果,及
时防治虫害,加强栽培管理等措施,综合防治欧李褐腐
病。另外由于该试验药剂筛选是在室内完成,在推广应
用到田间病害防治之前还需做进一步的田间药效试验,
确定杀菌剂在田间使用的最适时间、次数和浓度。
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Toxicity Test of Ten Fungicides to Monilinia fructicola Causing
Chinese Dwarf Cherry Brown Rot
ZHOU Fang,HAO Xiao-juan,CHENG Chao,WANG Mei-qin,LI Xin-feng,WANG Jian-ming
(Colege of Agriculture,Shanxi Agricultural University,Taigu,Shanxi 030801)
Abstract:Taking ten fungicides as materials,Chinese dwarf cherry brown rot as research object,the toxicities of 10
fungicides to Monilinia fructicola were tested by using mycelia growth rate method and spore germination method.The
efective fungicides for control of brown rot of Chinese dwarf cherry were screened in the laboratory.The results indicated
that the efective concetration(EC50)values of 430g/L tebuconazole SC,24%fenbuconazole SC,10%difenoconazole
WG,80%Carbendazim WP,70%thiophanate-methyl WP,500g/L iprodione SC,50%procymidone WP were less than
0.700mg/L.430g/L tebuconazole SC showed the strongest toxicity to mycelia growth with the minimum EC50of
0.027mg/L among 10fungicides,while 80% mancozeb WP showed the lowest toxicity with the EC50of 57.645mg/L.
The EC50values of 10fungicides on spore germination were less than 2.500mg/L.500g/L iprodione SC showed the highest
toxicity and its EC50value was 0.024mg/L.80% mancozeb WP showed the lowest toxicity and its EC50value was
2.496mg/L.24%fenbuconazole SC,430g/L tebuconazole SC and 500g/L iprodione SC could be used for control of brown
rot of Chinese dwarf cherry.
Key words:Chinese dwarf cherry brown rot;Monilinia fructicola;fungicide;toxicity
501