免费文献传递   相关文献

欧李褐腐病病原菌生物学特性及其寄主范围



全 文 :果 树 学 报 2014,31(1): 101~104
Journal of Fruit Science
欧李褐腐病病原菌生物学特性及其寄主范围
郝晓娟 1,高 莹 1,李新凤 1,王建明 1*,李生才 1,王美琴 1,李俊林 2
(1山西农业大学农学院,山西太谷 030801; 2山西省植保植检总站,山西太原 030001)
摘 要: 【目的】明确欧李褐腐病菌的生物学特性和寄主范围。 【方法】通过测定欧李褐腐病菌菌丝和孢子在不同条件
下的生长和萌发情况,对病菌的生物学特性进行了研究;采用刺伤接种法对病菌寄主范围进行了研究。 【结果】欧李
褐腐病菌菌丝 7~27 ℃内均可生长,最适生长温度为 22 ℃;最适 pH 范围 7.0~9.0;在 12 h 光暗交替条件下生长最快;
最适碳源为葡萄糖、蔗糖和半乳糖,最适氮源为蛋白胨。 孢子萌发最适温度为 17~27 ℃;最适 pH 为 6.0~8.0;光照对
孢子萌发没有显著影响。 该病原菌能侵染梨、苹果、油桃、樱桃、杏、柑橘、葡萄,不能侵染金桔和圣女果。 病菌对樱桃
和油桃的致病力最强,对柑橘的致病力最弱。 【结论】生物学特性和寄主范围研究结果为综合防治该病害提供了科学
依据。
关键词: 欧李; 褐腐病; 美澳型核果链核盘菌; 生物学特性; 寄主范围
中图分类号:S662.3 文献标识码:A 文章编号:1009-9980(2014)01-0101-04
Biological characteristics and host range of the pathogen causing Brown
Rot of Chinese Dwarf Cherry
HAO Xiao-juan1, GAO Ying1, LI Xin-feng1, WANG Jian-ming1*, LI Sheng-cai1,WANG Mei-qin1,LI
Jun-lin2
(1College of Agriculture, Shanxi Agricultural University, Taigu Shanxi 030801 China; 2General Station of Plant Protection and Quarantine,
Taiyuan Shanxi 030001 China)
Abstract: 【Objective】Biological characteristics and host range of pathogen causing Chinese dwarf cherry
brown rot (Monilinia fructicola) were determined in the study. 【Method】Biological characteristics were
tested by measuring mycelial growth and spore germination under different conditions. Host range were
determined by stab inoculation method. 【Result】The temperature for mycelial growth ranged from 7 to
27 ℃, the optimum temperature was 22 ℃ and the optimum pH was 7.0 to 9.0. The speed of growth was
faster under alternation of light and darkness every 12 hours. M. fructicola could make use of many carbo-
hydrates and nitrogen sources, the optimum carbon sources were galactose, glucose and sucrose, and the
optimum nitrogen source was peptone. The optimum temperature for conidial germination was 17 to 27 ℃
and optimum pH was 6.0 to 8.0. Illumination had no significant effect on conidial germination. The
pathogen could infect pear, apple, nectarine, cherry, apricot, citrus and grape except kumquat and
cherry tomato. The pathogen had the strongest virulence to cherry and nectarine and the weakest virulence
to citrus. 【Conclusion】The results could enhance the understanding of the disease and offer basis for the
integrated control strategy.
Key words: Chinese dwarf cherry (Gerasus humilis); Brown rot; Monilinia fructicola; Biological charac-
teristic; Host range
欧李(Cerasus humilis)是我国特有的果药兼用
果树资源,果实含有丰富的蛋白质、矿质元素、维生
素和氨基酸,不仅可以鲜食,还可用于医疗保健和食
品饮料等行业[1]。欧李果实中钙元素含量高于一般水
收稿日期: 2013-09-02 接受日期: 2013-11-22
基金项目:国家自然科学基金青年基金(31000873);中国博士后基金(个人编号:92459);山西农业大学中青年学术骨干基金(XG201210);
山西省科技攻关项目(20120311016-2)
作者简介: 郝晓娟,女,副教授,主要从事植物病理学方面的研究。 Tel: 0354-6288344,Email: xiaojuanhao@126.com
觹 通信作者 Author for correspondence. Tel: 0354-6289739,Email:jm.w@sohu.com
DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.2014.01.006
果 树 学 报 31 卷
图 1 不同温度对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢子萌发的影响
Fig. 1 Effect of different temperatures on mycelial growth
and conidial germination of Monilinia fructicola
图 2 不同 pH 对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢子萌发的影响
Fig. 2 Effect of different pH values on mycelial growth and
conidial germination of Monilinia fructicola





      









     








果,因此又被称为钙果。其根系发达,耐干旱,适应性
强,被国家林业局列为生态林优良树种[2]。 欧李的营
养、 药用价值及优化环境的特性引起了越来越多的
关注,随着欧李的大面积人工种植,病害问题日益突
出[3-4]。
欧李褐腐病在山西省欧李种植区发生普遍,通
常在 8月中下旬开始进入侵染盛期, 并一直延续到
9月底 10月初,造成大量烂果和落果,损失巨大。 徐
成楠等 [3]报道欧李褐腐病是由美澳型核果链核盘菌
Monilinia fructicola 引起的, 但未对该病原菌的生物
学特性进行研究。 M. fructicola 在中国被列为检疫对
象[5],对其寄主范围的研究,是指导植物检疫和病害
防治的重要基础。 我们对欧李褐腐病菌的生物学特
性和寄主范围进行了研究, 对了解病原菌的危害范
围,制定防治和检疫措施具有重要意义。
1 材料和方法
1.1 供试菌株来源
欧李褐腐病菌 Monilinia fructicola 由山西农业
大学植物病理学实验室分离保存。
1.2 温度、pH、光照对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢
子萌发的影响
培养温度设为 7、12、17、22、27、32、37℃; 光照
条件设为连续光照、12 h 光暗交替、连续黑暗;调节
PDA 培养基或孢子悬浮液的 pH 至 2.0、3.0、4.0、
5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0。
菌丝生长:在 PDA平板上接种 6 mm菌饼,置于
不同培养温度下恒温培养;不同 pH 条件置于 22 ℃
黑暗培养;不同光照条件置于 22℃培养。 7 d后采用
十字交叉法测量菌落直径。 孢子萌发: 参照文献[6]
进行,培养条件与菌丝生长相同。 4 h后镜检孢子萌
发情况并计算孢子萌发率。每处理均重复 3次,运用
DPS软件进行统计分析。
1.3 不同氮源、碳源对欧李褐腐病菌菌丝生长的影

以查氏固体培养基为基础培养基, 分别加入相
同质量碳元素的蔗糖、葡萄糖、D-果糖、麦芽糖、可
溶性淀粉、D-半乳糖、乳糖替换碳源,22℃培养。 同
样以查氏固体培养基为基础培养基, 分别加入相同
质量氮元素的硝酸钠、硫酸铵、尿素、甘氨酸、L-天
冬氨酸、牛肉浸膏、蛋白胨、L-胱氨酸替换氮源,22
℃培养。 以上处理接种 6 mm 菌饼 7 d 后,采用十字
交叉法测量菌落直径, 每处理重复 3 次, 运用 DPS
软件进行统计分析。
1.4 病原菌寄主范围的测定
供试寄主植物包括梨、苹果、柑橘、金桔、葡萄、
圣女果、油桃、樱桃、杏。 用 75%酒精对供试果实进
行表面消毒,无菌水冲洗后晾干备用。 将 20μL欧李
褐腐病菌孢子悬浮液(108cfu·mL-1)接种于刺伤果实
表面,以无菌水作为对照,每处理重复 3 次。 晾干后
将果实置于塑料盒中,保鲜膜封装,于 25 ℃下贮藏。
观察记录发病情况并对发病果实进行病原菌的再分
离。
2 结果与分析
2.1 温度、pH、 光照对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢
子萌发的影响
图 1表明, 病菌在 7~27℃内均可生长,22℃为
最适生长温度,温度高于 32℃病菌停止生长。 在 7~
37℃内孢子均可萌发, 最适温度为 17~27℃,4 h 萌
发率可达到 67%左右。
病菌菌丝在 pH2~10 内均可生长, 在 7~9 内生
长最好,表明微碱性培养基质较适宜该菌菌丝生长。
适宜孢子萌发的 pH 为 6~8,最适 pH 为 6。 pH 低于
3或高于 9时,孢子萌发明显受抑(图 2)。
光照对菌丝生长具有显著影响 ,12 h 光暗交




Co
lo
ny
di
am
et
er
/c
m





Co
ni
di
al
ge
rm
in
at
io
n
ra
te
/%
温度 Temperature/℃
菌落直径 Colony diameter
孢子萌发率 Conidial germination rate




Co
lo
ny
di
am
et
er
/c
m





Co
ni
di
al
ge
rm
in
at
io
n
ra
te
/%
菌落直径 Colony diameter
孢子萌发率 Conidial germination rate
pH
7 12 17 22 27 32 37
8.0
6.0
4.0
2.0
0.0
100
50
0
2 3 4 5 6 7 8 9 10
10.0
8.0
6.0
4.0
2.0
0.0
100
80
60
40
20
0
102
1 期






     








郝晓娟等: 欧李褐腐病病原菌生物学特性及其寄主范围
图 3 不同光照条件对欧李褐腐病菌菌丝生长和孢子萌发的
影响
Fig. 3 Effect of different illumination conditions on mycelial
growth and conidial germination of Monilinia fructicola
表 1 不同碳、氮源对欧李褐腐病菌生长的影响
Table 1 Effects of carbon and nitrogen nutrition on mycelial growth of Monilinia fructicola
碳源
Carbon source
菌落直径
Colony diameter/cm
氮源
Nitrogen source
菌落直径
Colony diameter/cm
D-半乳糖 D-Galactose
葡萄糖 Glucose
蔗糖 Sucrose
乳糖 Lactose
可溶性淀粉 Starch
D-果糖 D-Fructose
麦芽糖 Maltose
CK
6.487 5±0.140 5 Aa
6.112 5±0.178 4 Aa
5.875 0±0.077 7 Aa
4.725 0±0.382 2 Bb
4.712 5±0.096 6 Bb
4.550 0±0.130 7 Bb
3.062 5±0.323 6 Cc
2.825 0±0.059 5 Cc
蛋白胨 Peptone
牛肉浸膏 Beef extract
硫酸铵 Ammonium sulfate
L-天冬氨酸 L-Aspartic acid
硝酸钠 Sodium nitrate
尿素 Urea
L-胱氨酸 L-Cystine
甘氨酸 Glycine
CK
8.675 0±0.047 9 Aa
8.062 5±0.055 4 Bb
5.975 0±0.116 4 Cc
3.843 8±0.025 8 Dd
3.350 0±0.064 5 Ee
2.693 7±0.035 9 Ff
2.037 5±0.065 7 Gg
1.562 5±0.055 4 Hh
3.737 5±0.042 7 Dd


















Co
lo
ny
di
am
et
er
/c
m





Co
ni
di
al
ge
rm
in
at
io
n
ra
te
/%
菌落直径 Colony diameter
孢子萌发率 Conidial germination rate
光暗交替
Alteration
全黑暗
Darkness
全光照
Light
替条件明显利于菌丝生长 ,7 d 时菌落直径达到
8.2 cm。 不同光照条件对孢子萌发没有显著影响
(图 3)。
2.2 不同碳、氮源对欧李褐腐病菌生长的影响
由表 1 可知,欧李褐腐病菌在 D-半乳糖、葡萄
糖、蔗糖为碳源条件下生长最好,其次为乳糖、可溶
性淀粉和 D-果糖,麦芽糖不利于该菌生长。 病菌在
不同氮源培养基上生长差异显著,以蛋白胨作氮源,
7 d时菌落直径达到 8.7 cm,显著优于其他氮源。 以
L-天冬氨酸、硝酸钠、尿素、L-胱氨酸、甘氨酸作氮
源均不利于该菌生长。
2.3 欧李褐腐病菌寄主范围的测定结果
病原菌可以侵染梨、苹果、柑橘、葡萄、油桃、樱
桃、杏,不能侵染金桔、圣女果(图版-A~I),对照组
均未发病。接种后,梨、苹果、桃、樱桃、杏 2~3 d即开
始发病,产生典型的褐腐病症状。 在葡萄上接种 7 d
后开始发病,果实软腐,表面布满灰色绒状霉层。 病
菌可侵入柑橘,但扩展非常缓慢,12 d时接种处产生
明显凹陷状病斑,病斑处果肉腐烂。病菌对樱桃和油
桃的致病力最强,对柑橘的致病力最弱。接种金桔 2
d 时,接种部位长出菌丝,但周围无病斑;7 d 时接种
部位菌丝与 2 d 时相比,基本没有扩展,接种部位凹
陷、硬化,果实其他部分没有症状出现;对凹陷组织
进行再分离,没有分离到欧李褐腐病菌,剖检发现
接种部位果肉完好,因此认为欧李褐腐病菌不能侵
染金桔。 接种圣女果 2 d 后, 在接种部位有菌丝长
出,5 d后果实上出现点簇状霉层, 但果实本身没有
坏死腐烂,欧李褐腐病菌可以在圣女果上生长,但不
能引起病害。
3 讨 论
美澳型核果链核盘菌 Monilinia fructicola, 主要
分布于美洲、大洋洲及亚洲一些国家,欧盟和中国
都将其列为检疫对象 [5,7]。 近年来,我国多次从进口
葡萄[8]、樱桃[8-9]、油桃[8]、西梅[8]上截获到 M. fructicola。
作为一种恶性检疫真菌, 除了在出入境检疫中具有
重要地位外,M. fructicola 在我国境内也呈局部发生
态势。 2005年,Zhu等[10]首次报道了在中国北京引起
桃褐腐病的病原为 M. fructicola。 2011年徐成楠等[3]
报道了 M. fructicola在辽宁省欧李果实上的发生。 欧
李作为我国特有的水果,是 M. fructicola的新寄主[3],
我们有必要对欧李上分离到的 M. fructicola 进行生
物学特性研究。
结果表明,欧李褐腐病菌 M. fructicola 菌丝生长
的最适温度为 22 ℃,孢子萌发的最适温度为 17~27
℃,这与该病在山西省 8 月中下旬开始发病,9 月凉
爽多雨有利于病害流行的发病规律相符。 温度高于
32 ℃欧李褐腐病菌停止生长,而赵晓燕等 [11]报道的
桃褐腐病菌 M. fructicola 在 35℃时仍可生长, 可见
不同地区不同寄主上的 M. fructicola 在生物学特性
存在一定差异。 微碱性基质适宜菌丝生长,pH 6~8
适宜孢子萌发。光暗交替利于菌丝生长,这一点与赵
晓燕等[11]、Lane[12]的报道一致。 不同光照条件对孢子
萌发没有显著影响。菌丝生长最适碳源为半乳糖、葡
萄糖、蔗糖,最适氮源为蛋白胨。 欧李褐腐病菌经伤
10.0
8.0
6.0
4.0
2.0
0.0
100
80
60
40
20
0
光处理 Light treatment
103
口可以在梨、苹果、柑橘、葡萄、油桃、樱桃、杏等植物
果实上导致发病, 在生产上和果实贮运期间应注意
采取措施,防止病菌的交叉感染。 (本文图版见插 2)
参考文献 References:
[1] LIU Shu-qin,CHANG Hong,ZHOU Jia-hua,LAN Yan-ping,YAO
Yan-wu,FENG Cui-ping. The research status on development and
application of Prunus humilis bunge in China[J]. Food Research and
Development,2009,30(12): 167-170.
刘淑琴,常虹,周家华,兰彦平,姚砚武,冯翠萍. 我国欧李的开发
应用研究现状[J]. 食品研究与开发,2009,30(12): 167-170.
[2] YIN Ze -peng,LIU Xue -mei,SHANG Zhi -wei,REN Jing,SONG
Xing -shun. Response of photosynthesis and chlorophy II fluores-
cence parameters to different drought stress in Cerasus humilis
Bunge[J]. Plant Physiology Journal,2011,47 (5): 452-458.
尹赜鹏,刘雪梅,商志伟,任静,宋兴舜. 不同干旱胁迫下欧李光
合及叶绿素荧光参数的响应 [J]. 植物生理学报,2011,47 (5):
452-458.
[3] XU Cheng -nan,ZHOU Zong -shan,WU Yu -xing,CHI Fu -mei,
ZHANG Hong-jun. Identification of the pathogen causing brown rot
of Chinese dwarf cherry(Cerasus humilis)[J]. Acta Phytopathologica
Sinica,2011,41(6): 626-630.
徐成楠,周宗山,吴玉星,迟福梅,张红军. 欧李褐腐病病原菌鉴
定[J]. 植物病理学报,2011,41(6): 626-630.
[4] GAO Ying,WEI Shao -gang,TAN Jing -hui,HAO Xiao -juan,LI
Xin-feng,WANG Jian-ming. Identification and biological charac-
teristics of the pathogen causing sour rot of Gerasus humilis [J].
Journal of Shanxi Agricultural University: Natural Science Edition,
2012, 32(4): 328-332.
高莹,魏少刚,谈静惠,郝晓娟,李新凤,王建明. 欧李酸腐病病原
菌鉴定及其生物学特性研究[J]. 山西农业大学学报 : 自然科学
版,2012,32(4): 328-332.
[5] Animal and Plant Quarantine Bureau of PRC. List of quara -ntine
pests of entry plants for China[EB/OL]. [2007-07-06]http://dzwjyjgs.
aqsiq.gov.cn/zwjyjy/swaq/wlyhsw/200706/t20070607_31809.htm
中华人民共和国动植物检疫局. 中华人民共和国进境植物检疫
性有害生物名录.[EB/OL]. [2007-07-06]http://dzwjyjgs.aqsiq.gov.
cn/zwjyjy/swaq/wlyhsw/200706/t20070607_31809.htm
[6] ZHANG Xiao-yuan,HE Hong,HU Han-qiao,OU Xiong-chang,LIU
Feng,LI Xin -shen. Identification and biological characteristics of
Rhizophora stylosa leaf spot caused by Pestalotiopsis versicolor [J].
Acta Phytopathologica Sinica,2009,39(6): 584-592.
张小媛,何红,胡汉桥,欧雄常,柳凤,李信申. 红海榄赤斑病病原
菌鉴定及其生物学特性研究 [J]. 植物病理学报 ,2009,39(6):
584-592.
[7] EPPO. EPPO A2 List of pests recommended for regulation as quaran-
tine pests [EB/OL]. [2013-09-02] http://www.eppo.int/QUARAN-
TINE/listA2.htm
[8] ZHANG Chuan-fei,JIANG Zi-de,ZHONG Guo-qiang,CHEN Shen,
ZHAO Li-rong, LI Ling. Preliminary study on postharvest foreign
fruits[J]. Journal of Zhongkai University of Agriculture and Technol-
ogy,2005,18(4): 53-57.
张传飞,姜子德,钟国强,陈晟,赵立荣,李玲. 外源水果储运期病
害研究初报[J]. 仲恺农业技术学院学报,2005,18(4): 53-57.
[9] WANG Wei-fang, ZHANG Zhu, YU Xin. The first interception of
Monilinia fructicola from USA cherry[J]. Plant Quarantine,2012,26
(5): 88-91.
王卫芳,章柱,余辛. 从进境美国樱桃中首次截获美澳型核果褐
腐病菌[J]. 植物检疫,2012,26(5): 88-91.
[10] ZHU X Q,CHEN X Y,LUO Y,GUO L Y. First report of Monilinia
fructicola on peach and nectarines in China[J]. Plant Pathology,2005,
54(4): 575.
[11] ZHAO Xiao-yan, WANG Ying-jie, YANG Hai-qing, LIU Su-hua,
LIU Zheng-ping. Effect of cultural conditions on mycelial growth and
conidial germination of Monilinia fructicola[J]. Journal of Beijing U-
niversity of Agriculture,2007, 22(4): 34-37.
赵晓燕,王颖洁,杨海清,刘素花,刘正坪. 环境条件对桃褐腐病
菌生长和分生孢子萌发的影响[J].北京农学院学报,2007,22(4):
34-37.
[12] LANE C R. A synoptic key for differentiation of Monilinia fructicola,
M. fructigena and M. laxa, based on examination of cultural charac-
ters[J]. Bulletin OEPP,2002,32(3): 489- 493.
果 树 学 报 31 卷104