全 文 ：莱 阳 农 学 院 学 报 7(3) :1 2 0一 3 1 2, 199 0
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西府海棠的茎尖培养 ’
战淑敏 曲善珊
(基 础 部 )
任卫华 宫志玲
(莱芜市农业局 ) (莱阳市古柳镇果树站 )
摘要 对西府海棠 茎尖进行离体培养 , 在 1 / ZM s 附加 B A O . 5一 1 . om g / l (或再 加人
IA A O
.
Zm g / l) 的培养基上培养 l 个月左右 , 可分化出丛生芽 。 丛生芽的嫩梢继代培养于附加
B A O
.
5 m g / +l IA A O
.
Zm g / 1 的培养基 中 , 其月增殖系数可达 4 . 6一 5 . 0 , 且有利于成苗 。
1 / 3 M S十 N A A O
.
lm g l/ 诱导嫩茎生根的效果较好 。
关键词 西府海棠 ; 茎尖培养 ; 继代增殖
西府海棠 (M . m ic or m a lu : M ak in o) 是苹果属五大栽培种之一 , 又是优良的苹果砧
。 按常规方法进行繁殖 , 需大量种 子 , 且程序繁杂 , 繁殖系数小 。 而采用茎尖繁殖技
, 利用较小的空间 , 可获得大量的自根苗 ,
种和砧木的组织培养国内外已有较多研究 1一 ` l
有利于促进苹果生产的发展 。 目前 , 苹果品
, 但西府海棠栽培种组织培养国内外尚未见
术木
系统报道 。 笔者于 19 8 8一 19 9 0 年利用 2 年的时间对西府海棠茎尖培养进行了研究 , 并取
得了生产大量再生植株的阶段性成果 。
材料与方法
供试材料为 2 年生西府海棠的嫩枝 , 取材时间为 5 月和 9 月份 。 将材料剪成带有 1一
2 个腋芽的小段 , 先用洗衣粉 、 自来水冲洗干净 , 再用 0 . 1%升汞消毒 IOm in , 然后用水
冲洗 15 m in , 最后在超净工作台上用饱和次氯酸钠溶液浸泡 IOm in , 用无菌水冲洗干净 ,
在解剖镜下剥取 0 . 5 一 1 . Om m 茎尖 , 接种培养 。
诱导外植体分化和继代增殖培养基为 :
1
.
1 / 2 M S + B A 1
.
0 ( 单位 : m g / L ,下同 ); 2 . 1 / 2 M S + BA 0 . 5 ; 3 . 1 / 2 M S +
B A 0
.
5 + IA A 0
.
2 : 4
.
2 / 3 M S + B A 1
.
0 ;
·
5
.
2 / 3 M S + BA 0
.
5: 6
.
2 / 3 M S + B A 0
.
5
+ IA A 0
.
2 ; 7
.
M S + BA 1
.
0 ; 8
.
M S + B A O
.
5 ; 9
.
M S + B A O
.
5 + IA A O
.
2 ;
附加蔗糖 3% 、 琼脂 0 . 5% 、 L H 30 、 肌醇 50 。 先将外植体接种于 1、 2 、 3 号培养
基 , 每瓶接种 2一 3 个茎尖 , 待长出丛芽后 , 再将新梢继代于 1一 9 号培养基进行继代培
养 , 每月继代 l 次 , 调查增殖系数 。
生根培养基为 : 10 . 1 / 3 M S+ N A A 0 . 1 ; 1 1 . 1 / 3M S + I B A O . 5+ I A A O. 3; 12 . 1 / 3
* 本文收到 日期 : 19 0一 03 一 07
3期 战淑敏等 :西府海棠的茎尖培养
M S+I BA 0
.
3 +IA A 0
.
5 :1 3
.
1 / 3 M S+IA A 1
.
0 +I BA O
.
l +NA A O
.
0 5
附加蔗糖 1 .50 ;、 琼脂 0 .5 %、 L Hl o o、 肌醇 0 5。 培养基 p H调至 5 .5一 6 .0, 培养室温
度为 2 5一 30 ℃ , 光照强度为 180 L x , 每 日光照 14 小时 , 用音片定时开关钟控制 。
试管苗移栽设洗净的石英砂 , 高温灭菌的侄石 和河沙及未经任何处理的梨 园土等处
理 , 每处理 20 一 30 棵 , 移栽 25 天调查其成活率 。
2 试验结果
.2 1 丛芽的诱导
接种到 l 、 2 、 3号培养基上的外植体 , 经过 l 个月的培养都开始进行分化 。 19 8 8 年 9
月 2 3 日接种的材料到 10 月 28 日调查 , 培养在 3 种培养基上的外植体分化芽数均达 2 个
以上 , 在 l 号培养基上培养的外植体分化芽数比在其它 2 种培养基上的多 , 其中最好的
一个外植体 已分化 出 4 个丛生芽 。 西府海棠茎尖培养过程 中 , 丛生芽的诱导阶段 , 其外
植体的生长和分化速率比同期培养的苹果品种明显地高 3[] 。 如秋伏 1号 、 乔纳锦等品种接
种 1个月 , 大部分只能长出 3 片叶 , 最好的也只能分化出 l 个侧芽 。 因此 , 西府海棠茎尖
培养初期具有生长快 、 繁殖率高的特点 。
.2 2 不同培养基对芽分化的影响
将在分化培养基上获得的新梢切下 , 接种到 1一 9 号培养基上进行继代增殖培养 , 培
养 10 天后 , 大部分新梢开始分化 , 培养 1 个月结果见表 1 , 继代培养的基本培养基以
2 / 3M S 较好 , 激素水平 以 B A O . 5+I A A .O 2 较为适宜 。 试验中发现此激素处理还有利于丛
生芽的成苗和壮苗 。
另外 , 从表 1 还可看出 , 在 同一培养基 中培养 的外植体 , 其个体间的增殖系数相差
显著 。 如 4 号培养基中 , 其最高增殖系数为 9 , 最低为 1。
表 1 不同培养基对芽分化的影响
增殖系数培养基号 接种棵数 分化芽数 平均 最高 最低
1 10 4 0 4
`
0 6 1
7
护nQJ马, 、6饰t,、月“ J马4r、l 0
l 0
3 7
4 8
J斗,、dl O 4
l 0
10
l 0
4 6
3 3
9 1 0 5 1 5
.
1 8 3
.2 3 不同培养时间与芽增殖的关系
在新梢继代培养过程中 , 在一定的时间范围内随培养时间的延长 , 外植体增殖系数相
应地提高 。 一般培养 1个月 , 单芽增殖 系数可达 4 一 5 , 而在继代 8 次的 9 号培养基上培
莱 阳 农 学 院 学 报 7卷
养时间延长到 5 4天 , 有的单芽增殖系数可达 巧 .0 以上 。 但培养时间也不宜过长 , 如果超
过 2 个月 , 由于培养基中的营养枯竭 , 已分化出的芽有的也会 自行衰退 , 余者木质化程度
较高 , 再继代培养分化较困难 , 也不易诱导生根 。 一般以每月继代 1 次为好 , 最多不超过
50 天 。
.2 4 不同光强和培养基对根系分化的影响
将 1 . 5一 3 . co m 的嫩茎接种到生根培养基 上 , 一般经 12 天即可生根 ,最快的培养 10 天
就可生根 。 经过 2 0 多天的培养 , 基本全部生根 , 且根 系发达 , 平均根条数达 .5 0 ~ 1 . 5
条 , 这是其它苹果品种培养中不能比拟的 。 西府海棠嫩茎诱导生根比较容易 , 且生根质量
较好 , 基部无愈伤组织 , 直接从茎基分化出根 。 N A A 、 I A A 、 BI A 对西府海棠的生根都
有明显的促进作用 , 但对根系分化的数量和生长速率的影响有一定差异 。 不同的光照强度
对单株分化根的数量及生长速度有较大影响 。 表 2 是在两种不同的光照条件下在生根培养
基中培养 2 2 天的调查结果 。
表 2 两种光强下不同培养基对根系分化的影响
对熊强度 培养基 接种棵数 生根梨数 平均根条数 / 棵 平均根长 c( m 〕
3名8567沼170丘1生巧反44万3021认1伙丘从又气O八4gQn,, .且.角`l几.月1`e1ù、O八`马490O. .t1l,.e,11孟l 0
1l
l 2
l 3
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在较强光照条件下 , 培养的材料平均单株根条数为 6 . 5 左右 , 根长度为 6 . 6m m ; 而在
较弱光照条件下培养的材料 ,平均单株根条为 9 条以上 , 根长度近 15 m m 。 可见 , 西府海
棠的生根并不需要强光照 。 培养基以 10 号比较理想 , 无论从根 系分化的数量还是生长速
度都优于其它几种培养基 。 从生产的观点讲 , 1 0 号培养基所用激素的成本比其它几种培
养基低 2 5 0一 3 0 0 倍 。
.2 5 不同移栽基质对小苗移栽成活率的影响
当生根小苗根长达 1 ~ cZ m , 具有 5一 8 个展开 叶片时 , 将培养瓶置于实验室 近窗
处 , 在自然散射光下 (光强 70 一 10 0 0 L x , 温度 20 一 25 ℃ ) 炼苗 7 天 , 然后打开瓶盖炼
苗 3 天 , 再将小苗取 出 , 用 自来水冲洗千净基部的培养基 , 分别移栽到石英砂 、 侄 石 、
河沙和梨园土中 , 并用塑料薄膜保持一定湿度 , 头 5 天每天揭开通风 2 次 , 以后通风次数
逐渐增加 , 到第 10 天完全揭开 , 注意及时喷水 。 移栽 25 天调查成活率 , 其石英砂 、 侄
石 、 河沙和梨园土分别为 92 % 、 95 % 、 80 % 、 40 % 。 调查中发现 , 移栽到梨 园土中死亡的
小苗 , 多数因茎基部变褐腐烂所致 。 将上述移栽成活的小苗直接定植到大田 , 定植后及时
进行田间管理 , 一般情况 下成活率可达 80 % 左右 , 如在阴雨天定植 , 其成活率可达 90 %
以上 。 移栽到大田的苗子生长势较强 , 一般当年株高可达 50 一 7 0c m 。
3期 战淑敏等: 西府海棠的茎尖培养
3讨 论
) l苹果砧木和品种茎尖培养过程中 , 茎尖接种到诱导分化培养基 中在光下培养至外
植体转绿 , 随之转人暗 中培养 , 在暗中培养 2~ 3 代后及时转人光照培养 , 效果较
好 lI,6 ,7] 。 本试验表明 , 西府海棠茎尖培养 , 前期不经过暗处理 , 其外植体在 3 种诱导分化
培养基上都能正常分化 。 一直在光下培养的苗子比较壮 , 而在暗中培养的苗子 , 一般叶片
瘦小 、 茎细长 , 转到光下培养 , 短时间内也很难形成壮苗 。
2) 低盐量低糖培养基有较好的生根效果 lI,3 司 , 本试验结果与此一致 。 用 1 / 3M s 、
蔗糖用 量 1 . 5% 作为诱导生根的基本培养基 , 再加少量生 长素 ; 其嫩茎 的生根率可达
10 %
, 且根系发达 , 直接从茎基分化出根 。
3) 在试管苗移栽试验中 , 移栽到石英砂 、 侄石和河沙中的小苗比移栽到梨园土中的
成活率成倍提高 。 死亡的苗子多因病菌的侵染致死 。 因此在组织培养过程中 , 必须注意培
育壮苗 , 对移栽基质进行严格消毒。
参 考 文 献
陈正华等 。 木本植物组织培养及其应用 。 高等农业教育出版社 , 19 8;6 25 4 ~ 2 62
战淑敏等 。 苹果良种的离体培养及试管繁殖 。 莱阳农学院学报 , 19 8;8 5 (4) : 54 一 58
裘之达等 。 园艺植物组织培养 。 上海科学技术 出版社 , 19 8 ;6 2 05 一 2 09
王际轩 . 苹果品种自根苗组织培养研究初报 。 辽宁果树 , 19 81 ; :3 1一 5
王际轩等 。 苹果砧木组织培养繁殖的研究 . 中国农业科学 , 19 81 ; ( 6) : 3 一 37
覃兰英 。 苹果矮化砧木的组织培养 。 植物生理学通讯 , 19 81 ; :5 36
刘世峰等 。 苹果矮化砧木和实生苗的茎尖培养 . 植物学报 , 19 78 ; (4) : 3 38
王厚臣等 。 苹果砧木 M 26 的离体培养 。 山东农业科学 , 19 8 ;9 ( 5) : 26