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毛樱桃茎尖培养的初步研究



全 文 :第4 1卷第 2期
1 8 96年 6月
西北农业大学学报
A
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.
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v .S ep t
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A gr i
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Vol
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4 12
,
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.
Ju n e
, 1 9 8 6
毛樱桃茎尖培养的初步研究 `
董义虎 杨增海 胡霓云 路广明
( 西湘 农业大学园艺系 )
摘 要
本文研究了 `影响毛樱桃 ( P r u 作“ s 云o机e n t o s a T孔环 n b . ) 茎 尖培养的有关 因 素 。 毛樱
桃 茎尖在M S , G , L 三种培养基上均可增殖生长 , 但 以 在 L培养基中生长较好 。 在 附加
的六 类激素中 , 以 I B A , B A最 为有效 , 适宜的浓度为 I B A 1 . 。 , B A 1 . 0或Z T 1 . 。 。诱导
生根以李L培 、吞基附加 N A A 。 . 1较好 , 削伤和暗培养可 大大提高生根率 。 移栽入土前 ,一 ” 2 一 ` ’ 一
在 0 . 1%克菌丹溶液中浸根 5 分钟可提高成活率。
关越饲 毛樱桃 ; 茎尖培养 ; 增殖生长 ; 生根率 ;成活率
应用茎尖培养进行大量繁殖的研究 , 在果树 上 巳有不 少报道 1t ’ . 1 。 在樱 桃 中巳
有关于甜樱桃 、 酸樱桃茎尖培养的研究资料 , 而对于抗寒 、 耐旱 、 适应性强 , 可 作 为
桃 、 李等矮化砧木的毛樱桃 , 仅见到由茎段诱导成愈伤组织的资料 〔 s] , 尚未见 到 茎尖
培养成苗的报道 。 木试验的 目的是研究影响毛樱桃茎尖增殖生长 , 新梢生根与小植株入
土存活的有关因素 , 以便进一步为毛樱桃 `工厂化 ’ 快速育苗提供依据 。
材料和方法
从二至五年生毛樱桃树上采取 5 厘米左右长的嫩梢 , 经流水 冲 洗 0 . 5一 1小时 , 用
O

1%升汞表面消毒 10 分钟 , 用无菌水冲洗 2 一 3 次后 , 在超净工作台上切取 .0 5厘米的
茎尖和带腋芽茎段 , 接种到 3 %蔗糖的增殖培养基中 , 待生长 4 一 5 周后 , 把大于 1 厘
米的新 。 切 一 : , . 诱导生 根 , 其余作继代培养用 。 诱导生根采用三种方法 : ( 1 ,音L基 本` 养
基 + N A A`蔡乙 酸 , ; ` 2 ,音L培养基 + “ A A + 新 。 基部削伤 ; ` 3 ,音L 十 N A A + 黑 暗处
. 本文曾得到北京植物研究所王伏雄 、 王玉英 , 西北植物研究所播景丽 、 东北农学院吴绛云以及
本校王鸣 、 李嘉瑞等同志审阅 , 并提出宝贵意见 . 在此一并致谢 。
本文于 2 9 8 5年 1 2月 3 0日收到 。
1 1 0西北农业大学学报 1币卷
理 。 生根培养基加 /、 2 %蔗糖 , 各培养基均加 0 . 6%琼脂 。 培养基 p H调至 5 . 6一 5 . 8 , 15
磅灭菌 2 0分钟 。 培养温度 2 5。 士 2 “ C , 光强 ] 5 0 0一 2 0 Oe l u x , 每天 16小时光照 。
把新梢接入生根培养基中培养 6 周后 , 调查生根率 , 并对已生根植株 , 在室温下去
掉试管塞锻炼 2 一 3 天 , 取出试管苗 , 洗去根 上附着的培养基 , _移至盛有沙土的塑料钵
中 , 在 15 一 18 ℃下保湿培养 1 周 , 便逐渐提高温度到 2 5℃ 。 在温室中生长 1个月后 , 移
至散射的 自然光下锻炼 1一 2 周 , 再移到大 田 。 遮荫 5 一 7 天后 , 进行正常田间管理 。
试 验 结 果
一 、 不同培养基对茎尖增殖生长的作用
用 L 〔7」 、 G 〔引 、 M S三种培养基 , 附加 Z T (玉米素 ) 和 I B A (叫噪乙酸 毫克 /升 )
各 1 . 。 。 第二次又比较了 L 和 G 两种培养基 , 附加 B A ( 6一节基氨基嘿吟 ) 1 . 0 , I B A o . 5( 表
1 )
。 结果表明 , 毛樱桃在这三种培养基上均可生长 , 对于增殖数 目 , 它们之间无显著
差异 , 而对于大于 1 厘米的新梢率 , L培养基则明显优于 G 和 M S培养基 。 在 G 培养 基
中 , 有些新梢叶片颜色淡黄 , 在 M S培养基中 , 虽叶色正常 , 但长势较差 。 可见 L 培 养
基较适合毛樱桃茎尖生长 。
表 1 不同培养基对毛樱挑茎尖增殖生长的影晌
激素
~
~一~项 目
Z T 1
.
0 + I B A 1
.
0 B A 2
.
0 + I B A o
.
5
培养多\ 接种数 平均每芽增殖数 > l
e l n
新梢率 (% ) 接种数 平均每芽增殖数
3 0

6 a
1 4
.
6 b
卜\ 一里止一…- 兰生一一卜一兰三呈一-…一三竺匕…一竺一…一全里生- .一兰上一}一竺一卜一竺匕}一兰竺一一…,一兰一卜兰塑一二一月
M S 1
4 0
1
’ · l a
}
·
1 6
·
7 b
} 】
注 : 表中字母 系邓肯氏多重比较的差异性 , 0 . 05 水平 。
二 、 不同激素种类对茎尖增殖生长的影响
以 L培养基为基本培养基 , 选用 IB A , G A (赤霉素 ) 、 N A A , B A , Z T , K (激动
素 ) 六种激素进行试验 。
1
. 生长素和赤霉素的效果
用 I B A , N A A , G A 各 0 . 5 (毫克 /升 ) , 并以不加者 ( A o) 为对照 , 各处 理 均加
Z T I
.
o
。 结果如图 1 所示 , 芽增殖倍数 、 有效新梢率 , 均 以 I B A 最好 , G A 次之 , N A A
因愈伤组织多 , 外植体中间部分膨大 , 故较差 。
2
。 几种细胞分裂素的作用
选用 B A , Z T , K 三种细胞分裂素各 1 . 0 , 以不加者 ( 0C ) 为对 照 , 各 处 理 均 加
第 2期 毛樱桃茎尖培养的初步研究 1 1 1
有效浙浦李附
之 Tt o I以认 ,
图 1 不同激素对毛 . 挑茎尖增殖生长的影晌
BI A盆。 . 5。 其中以 B A 1 . 0对芽增殖最为有效 , 它是对照的 2 . 7倍 , Z丁和 K 次之 。 有效新
梢率以 Z T较高 , 但仍稍低于对照 (见图 1 ) 。
以上试验结果表明 , 适合毛樱桃茎尖增殖生长的生长素以 I B A 为好 , 细胞 分 裂素
以 B A为好 , Z T对增殖生长也有一 定的促进作用 。
三 、 不同滋素浓度对落尖增殖生长的影响
.1 不同浓度的 Z T和 IB A 配合试验
在 Z T (毫克 /升 ) 0 . 5 、 2 . 0 、 2 . 0和 I B A 0 . 1 , 0 . 5 , 2 . 0各三个浓度组合试验中 , 以
0
.
5一 2 . 0毫克 /升 Z T和 1 . 。毫克 /升 I B A为好 , 其中最好的组 合 为 Z T I . o , I B A I . 0 。 对
照 (即不加任何激素 ) 只是芽萌发而巳 ,
有谈新梢率劣
脚|刀芳德往修数
\ 招物解
2 0 5 0
田 3 不·同B A浓度对茎尖增殖和生
长的效果
即增殖比率还是 1 : 1 , 且无有一个大于 1厘米
的有效新梢 。 而 Z T I . o , I B A I . o的 处理 ,
芽增殖数是对照的 1 . 5倍 , _且又有 3 3 . 3%的
有效新梢 (见图 2 ) 。
2
. 不 同B A浓度对茎尖增 殖和 生长的效

以 L培养基为基本培养基 、 附加不同浓
度的 B A ( 0 . 0 , 0 . 5 , 1 . 0 , 2 . 0 , 3 . 0 ) 均加
入 I B A I . O。 凡加入 B A者 , 每芽平均增殖倍
数均在 2 . 5以上 。 其中以 B A I . O最 高 , 平均
梅芽可增殖 3 . 3倍 , 而增殖最 多 的一个芽可
达 1 0倍 。 在 B A .Z O和 3 . 口中 一 , 有些 形成了小
芽丛 , 但未明显分离 。 有效新梢率以 B A O . 5
最高 ( 2 6 . 3% ) , 其次为 B A i . o ( 16 . 7 % ) ,
在 B A Z . o以 上 , 几乎无明显长高的新梢 (见
图 3 ) 。
四 、 诱导生很 一 ,
112西北农业大学学报 4 1卷
图 2Z T和 I B A不同浓度对增殖和生长的影晌
1
.不同浓度的 N A A对生根的效果 `… 、 `泛以音 L培养基附加不同浓度的 N A“ (毫克 /升 ) (0.。 、 。 .1、 。 0)结
果表明 , 不加 N A A , 则无根的形成 , 附加 N A A o . 1一 1 . 0都可诱导 生根 , 但 随N A A浓
度的提高 , 生根率有降低趋势 , 其中以 N A A O . 1和 0 . 25 生根率高 , 即 分 别 为 65 . 4%和
63
.
6%
, 且根生长正常 。 N A A O . 5的处理 , 愈伤组织多 , 到 N A A .I 0时 , · 根短而粗 。 , 第
二次又比较了N A A o . 1和N A A O . 25 这二个浓度 , 这次在新梢基部一面削伤 吕一 5 毫米 ,
结果同前 , 还以 N A A O . 1的处理生根率最高 , 即为 70 % (见表 2 ) 。 、
表 2
处理
N几A浓度对生根的影响
N A A浓度 接种数 } 生根率 (% ) ! 平均根条数
I O

0 2 8 0 0
O

1 2 6 6 5

4
`
3

1
0

2 5 2 2 6 3

6
.
5

3
0

5 2 5 5 2

0 3

8
1

O 2 0 5 0

0 5

9
l 0

1 3 0 7 0
.
0 2

0
肖lJ伤 0 。 2 5 3 1 6 4 。 5 2 。 1
2
。 不同光暗处理及削伤对生根的影响
. 、 .
I
t 、 , _
~ 一 ,、 一 ~ . , , 」 _ 、 , ` 二 _以欢 . ` 刀丛小猫乔鑫 , 附那八八八 U 。 1乙
, 进行 不同的光暗处理 。 全黑暗处理是在新
第 2期 毛樱桃茎尖培养的初步研究 1 3
照提高 · 2。% , 而对根条数的多少无影响 。 在 .全黑暗下培养 并在新梢一侧削伤 处理 , 生
根率达到了 10 0% (见表 3 ) 。 另外 , 黑暗处理根出现 自较早 , 在接后 10 天就可 见 到根
长出 , 比对照可提早两天 。 在接后十二天调查 , 黑暗处理生根率为 9 3 . 5% , 而一般光暗
处理生根率仅落7 . 1% 。 由此可见 , 黑暗处理 , 有利于根的发生 。 在削伤处理中 , 采用 一
面削伤 (马耳形 , 斜面长 3 一 5 毫米 ) 和两面削伤 (楔形 ) , 并以不削伤为对照 , 削伤
明显提高了生根率 , 一面削伤和两面削伤均比对照分别提高 18 , 3% 和 3 1 . 6% ( 见表 3 ) 。
表 3 不同光暗和削伤处理对生根的影响
光周期
光 : 暗
1 6 : 8
(小时 )
, 肖。伤
{
接新 。 数
}
: :根率 (% )
}
习乙均根条数一 } , 0 0。 {{一一工丽一一一 .{、一兰竺一 ~{ 3· ` a b全黑暗注 : 表中数字为接入新梢后 1 个月的调查资料 。五 、 试警苗移栽入土
把在试管中培养了一个月以上生了根的小植株取 出 , 移栽到盛有沙土的塑料钵中 ,
五周后统计成活率 , 试验结果见表 4 。 由表 4 可知 , 用 0 . 1%克菌丹和代森锌浸 5 分 钟 的处
理 , 其生根率分别 比对照高 24 . 9%一 3 . 7% , 其中以 0 . 1%克菌丹浸 5 分钟效果 最 好 ,
成活率达 85 % 。 另外 , 移栽时根系较发达者 (根长大于 1 厘米 , 根条数多于三条 ) 比根
较小者成活率可提高 1 8 . 2% 。
表 4 不同处理对入土成活的影响
移栽数 成活率 ( % )
卜一 ~堕竺生一二一二…- 一一一竺- 一一一一卜` 竖些三` 一…一` 些巴一` `卜一三王一- -卜二掣二-卜-宜塑1 一-一卜-一竺- - ` -卜一竺二一一一
}一 -主竺— 卜一二兰一一卜一`竺二一一 - ~ -} 刁、 根 } “ ! 5。 · 0
根药浸
未浸根
注 : 米 0 。 2水 平 。
带 带 0 . 1水平 。
带 带 带 为与时照相 比的差异性 0 . 0 5水平 ( t沮弓验 ) 。
1 1 1酋北农业大学学报 1辱卷
把塑料钵中移栽成活后的小植株 , 经在室外锻炼适应后 , 带土移至大 田 , 其成活率
为 10 0% 。
讨 论
1
. 毛樱桃茎尖在 M S 、 L 、 弓三种培养基上红 两次试验表明 , L 培养基的有效新梢数
比 M S 、 C 培养基 都高一倍以 卜, 证明 L 培养基对毛樱桃的试管繁殖是适用的 。 L 培养基
的最大特点是 降低 -J N H 4 N O : 含量 。 0 0 ) , 是 M S培养基 的 1/ 1 , 用 C a( N O : ) 2 ( 1 2 0 0) 代
替 了C a C I : · ZH : O , 另外 , 大大降低了 M n S O ` · 」 H : O ( 1 . 0 )和 K l ( 0 . 0 5 )的含量 。
2
, 一般认为 〔 5 ’ 8」细胞分裂素和生长素对于茎尖增殖与生长是必须 的 , 正确 精 选这
两类激素 , 夕卜调整其浓度对 : ;玉到最大数量的繁殖体则又是必要的 , 不 同的树种要 求 各
异 。 我们在六种激素试验中发现 , B A 和 I B A 对毛樱桃茎尖增殖与生长最为有效 , 其最
适浓度为 I B A I . 0和 B A I . O , 最高的增殖比率可达 10 : 1。
:
. 在李L培养基附加 N A A o . 1的基础上 , 对毛樱桃新梢基部削伤 , 可提高生根率 ,这一
2

- - 一 -
与 S in r `。 〕对甜樱桃 .与试验结果相同 。 可见 , 削伤是提高樱桃类试管生根的一个 有 效手
段 。 另外 , 在黑暗中培养十二天 , 比在一般光暗 ( 16 / 8) 条件下生根率高 , 且 生 根 较
早 , 但有些生根的小植株叶片发黄 , 如果减少黑暗处理时间 , 可能有利于小植株正常生
长 , 这还有待进一步试验 。
, . 对于提高试管苗移栽 入土臼成活率 , 目前还存在着很大间题 , 且这方面 报 道 尚
峥 ; 。 有人研究了桃胚培养苗的 入 上成活问题 , 认为用 0 . 1%代森锌浸根可 提 高 成活
{“ j , 昼夜温差与幼苗成活率之间高度相关 〔 2 〕 。 我们发现用药剂处理同样对茎 尖培养
率少
苗有效 。 另外 , 、 凡小植株根系大 ( 尚末变褐 ) 叶片多 _且完 整 者 , 并 给 以 高 湿 低 温
( R H 9 5一 1 0 % , 15 一 18 ℃ ) 则有利于成活 。
参 考 文 献
〔 1 〕 杨乃博 : 试管植物名录 , 《 植物生理学通讯 》 , 1 9 8 2年 , 第 4 期 , 第 61 页 。
〔 2 〕 徐祝英 、 庄恩及 : 果树试管苗移栽技术研究 , 《 上海农业科技 》 , 1 9 8 2年 , 第 3
期 , 第 2 6一 2 7页 。
〔 3 〕 杨增海 、 胡霓云 、 路广明: 早熟桃胚培养的研究 , 《 西北农学院学报 》 , 19 8 3年 ,
第 1 期 , 第 1 5一 2 4页 。
〔 4 〕 杨增海 、 胡冤云 、 路广明: 桃的茎尖培养 , 《西北农学院学报 》 , 19 8 4年 , 第 1 期 ,
一第 13 ~ 19 页 。
〔 5 〕 A n d e r s o n , W . C . : M a s s p r o p a g a t i o n b y T i s s u e C u l t u r 。 : p r i n e i p l e s
a n d p r a e t i e e
,
P r o e e e d i n g s o f t h e C o n f e r e n e e o n N u r s e r y P r o d u e t i o n
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f F
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s s u e C u l t u r e

A p p l i e a t i o n s a n d F e a s i b i l i t y
,
1 9 8 0: 1 ~ 1 0

第 2期 毛樱桃茎尖培养的初步研究
〔 6〕 C os si o, F . : I n v i t r o p r o p a g a t i o n o f V i a d i m i r S o u r e h e r r y , H o r t . A b
5 2 ( 5 ) 1 9 8 2
: 2 5 8 (仅见摘要 ) 。
〔 7 〕 H `伍m e 二 s e五l a g , F : M主。 : o p r睁* : , 吮、。 。 。 r ` p。 a 。 h , p r o c e e d ; 。 9 5 一 。 f · t h e ·
C O n f f e r e n c e o n N u r “ e叮y p r o d u c 乡丘” n o f F r u i t p l a n t , t h` o u “ h T i s s u e
C o l t : : r e

A p p l i e a t i o n s a n d F e a s i b i l i t y
,
B e l t s v i l l e M a r y l a n d
, 1 9 5 0 : 5 2
.
〔 s 〕 S k i r v i n , , R . M . : T h e t i s o u 夏 e u l t u r e o f f r u i t e r o p s C l o n i n g a g r -
i e o l t u r a l p l a n t , v s a i n v i t犷 o t e e h n i q u e s , C h e m i e a l R u b b e r C o m p
.
P r
. ,
F l o l i d a
, 1 9 8 1
.
〔 9 〕 S n i r , 1 . : I n v i t r o
5 i e n e e
, 1 7 ( 2 ) 1 9 8 2
p r o p a g a t i o n o f s w e e t e h e r r y e u l t i v a r s
,
H o r t
-
19 2

附照片
116 西北农业大学学报 1 4卷
A P r e li m i n a r y Re s e a r e h O n Sh o o t T i pC u lt u r e o f M a n e h u
C h e r r y( P r u n u s t o m e n t o s a T h u n b
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M a n e h u e h e r r y( P r u n u s t o 川 e n 艺o s a 丁九“ 扎b . ) i n v i t r o . M a n e h u e h e r r ys h o o t
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