全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(6)∶642 ～ 643
基金项目:四川省教育厅重点项目(12ZA257)
作者简介:黄荣(1964—) ，女，四川成都，硕士，副教授，从事食品与化妆品的研发工作。Email:rong936407@ 163． com
分光光度法测定火棘提取物中的总黄酮
黄 荣，傅小红，常 波
(成都师范学院化学与应用化学系，四川 成都 610041)
摘要:目的 研究火棘提取物中总黄酮含量测定的最佳方法。方法 采用亚硝酸钠 －硝酸铝法及 AlCl3 分光光度法测定火
棘提取物中总黄酮的含量。结果 两种方法测定的结果差异较大。亚硝酸钠 －硝酸铝分光光度法干扰严重，测定的结果偏
高。结论 采用 AlCl3 分光光度法的方法简单、重复性好、结果合理，适合火棘提取物中总黄酮含量的测定。
关键词:火棘;亚硝酸钠 －硝酸铝法;三氯化铝法;总黄酮
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2013)06 － 0642 － 02
火棘 Pyracantha fortuneana 为蔷薇科火棘属植
物，生长在四川、云南、贵州、甘肃、陕西等省海拨 0．
4 ～ 1． 0 km 的广大山区地带，储量丰富［1］。火棘果
实总提物具有清除氧自由基、降血脂、增强免疫力、
增强体力和促进消化功能等作用，与其含有金丝桃
苷、山奈酚、槲皮素、花青素、芦丁等黄酮类化合物有
关［2］。四川省凉山州的野生火棘资源极其丰富［3］。
黄酮的含量测定方法有分光光度法、HPLC 法等。
分光光度法以亚硝酸钠 －硝酸铝法常用，文献［4］发
现具有邻二酚羟基的非黄酮物质在此波长处也有强
吸收，而火棘提取物中所含有机酸成分均具有邻二
酚羟基，因此，使用该方法的专属性不强，测定结果
不准确。A1C13 法也被应用于总黄酮的含量测
定［5］。现分别采用亚硝酸钠 － 硝酸铝法与 A1C13
法测定火棘提取物中总黄酮的含量，并对结果进行
比较。结果表明:采用 A1C13 法干扰小、重复性好，
更适用于火棘提取物中总黄酮含量的测定。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
TU －1901 双光束紫外 －可见分光光度计(北京
普析)。芦丁对照品(成都康邦生物科技有限公司，
含量≥98%) ;火棘叶、火棘果及火棘茎于 8 ～ 9 月采
自四川凉山州，分别于 60 ℃烘干，粉碎过 60 目筛;
其余试剂为分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 标准曲线的制备 精密称取 20 mg 105 ℃
下干燥至恒重的芦丁对照品，用 70%乙醇溶解，定
容至 100 mL，作为对照品贮备液。亚硝酸钠 －硝酸
铝法:分别吸取 0、2、3、4、5、6、7 mL对照品贮备液置
25 mL量瓶中，分别加入 1 mL 5%NaNO2 试液摇匀，
静置 6 min，加 1 mL 10% A1(NO3)3 试液，摇匀，静
置 6 min，再加 10 mL 1% NaOH，用 70%乙醇定容，
静置 15 min，于 510 nm处测定吸光度。以吸光度值
为纵坐标、浓度为横坐标进行线性回归，得回归方程
为:A = 0． 0128C(r = 0． 9998) ，16 ～ 60 mg·L －1芦丁
对照品与吸光度的线性关系良好。A1C13 法:分别
精密吸取 0、0． 5、1． 0、1． 5、2． 0、2． 5 mL 对照品贮备
液置 25 mL量瓶中，加人 8 mL 1． 5%A1C13 和 4 mL
pH5． 5 乙酸 －乙酸钠缓冲溶液，用 70%乙醇定容，
静置 30 min，于 420 nm处测定吸光度。以吸光度为
纵坐标、浓度为横坐标进行线性回归，得回归方程
为:A = 0． 0312C(r = 0． 9996) ，4 ～ 20 mg·L －1芦丁对
照品与吸光度的线性关系良好
1． 2． 2 样品的测定 分别取 2 g 火棘叶、火棘果及
火棘茎样品，精密称定，置索氏提取器中，加 30 mL
70%乙醇溶液，于 80 ℃提取 6 h，抽滤，用 70%乙醇
定容至 100 mL。分别按“1． 2． 1”项下亚硝酸钠 －硝
酸铝法和 A1C13 的实验步骤测定火棘样品中的总
黄酮含量。
1． 2． 3 两种测定方法的比较 由表 1 可知:亚硝酸
钠 －硝酸铝法的测定结果偏高，测定火棘总黄酮时，
明显生成红色絮状沉淀，干扰测定;用 A1C13 法测
定则较稳定，重复性好。
表 1 火棘样品中总黄酮含量的测定结果(%)
方法 火棘叶 火棘果 火棘茎
亚硝酸钠 －硝酸铝法 10． 85 18． 37 8． 44
AlCl3 法 2． 73 1． 90 0． 78
1． 2． 4 pH 的影响 分别配制 pH3． 5、4． 0、4． 5、
5. 0、5． 5、6． 0、6． 5 的醋酸 － 醋酸钠缓冲溶液，按
“1. 2. 1”项下 A1C13 法测定样品中的吸光度，并进行
光谱扫描。结果显示:随着酸度降低，最大吸收峰位
置变化不大，但吸光度变化较大，当 pH ＞ 5 时达到最
高且稳定。故选用 pH5． 5的醋酸 －醋酸钠缓冲溶液。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2013.06.023
华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(6)∶643 ～ 644
1． 2． 5 稳定性与重复性试验 取火棘叶样品，精密
称定，按“1． 2． 2”项下方法制备样品溶液并采用
A1C13 法测定吸光度，每隔 30 min 测 1 次，连续测
定 6 次。计算 3 h 内含量的 ＲSD = 1． 03%，表明样
品溶液在 3 h内基本稳定。准确吸取同一批火棘叶
样品 6 份，按“1． 2． 2”项下方法制备样品溶液并采
用 A1C13 法测定吸光度。计算含量的 ＲSD =
1. 35%，表明方法重复性良好。
1． 2． 6 精密度与回收率试验 准确吸取 1 mL芦丁
对照品溶液，共 6 份，按“1． 2． 1”项下 A1C13 法测定
吸光度。计算含量的 ＲSD = 1． 31%，表明方法的精
密度良好。取已知含量的火棘叶样品，分别加入一
定量芦丁对照品，按“1． 2． 2”项下方法制备样品溶
液，并按“1． 2． 1”项下 A1C13 法测定吸光度，计算回
收率(表 2)。
表 2 样品的加样回收率实验结果(mg，n =6)
样品含量 加入量 测得量 回收率 /% 珔X /% ＲSD /%
0． 400 0． 2 0． 592 98． 5 98． 6 1． 26
0． 403 0． 2 0． 599 98． 0
0． 393 0． 2 0． 595 101
0． 398 0． 2 0． 594 98． 0
0． 407 0． 2 0． 606 97． 5
0． 403 0． 2 0． 600 98． 5
2 讨论
文中采用两种常用的分光光度法测定了火棘提
取物中黄酮类化合物的含量，采用亚硝酸钠 －硝酸
铝法测定时干扰严重，测定时发现生成红色絮状沉
淀，影响测定结果，两法的测定结果比较火棘果的含
量差异很大。火棘果中含有原花青素又称为缩合单
宁，属于鞣质的一种，具有邻苯二羟基结构，显色反
应后在 510 nm 有强吸收，对总黄酮的测定造成干
扰，因此，该法测定结果偏高。采用 A1C13 法在酸
性环境下，原花青素只与酮羰基和其邻位羟基发生
络合，酚酸类、原花色素对其干扰小，因此，对黄酮类
化合物的专属性较强，适用于火棘中黄酮的测定。
参考文献:
［1］ 邓如福，王三根．火棘色素现化特性初探［J］．中国野生植物，
1990，2:43 － 46．
［2］ 陈青，李祝，孙媚．蔷薇科火棘属和蔷薇属植物研究进展［J］．
食品工程，2011，3:11 － 13．
［3］ 唐宇，刘建林． 凉山州火棘资源的开发利用与可持续发展
［J］．四川农业科技，2002:9．
［4］ 何珺，颜仁梁，刘志刚． NaNO2 － A1(NO)3 － NaOH 比色法测
定总黄酮应用中的常见问题［J］． 今日药学，2009，19(12) :
18．
［5］ 甘秀梅，陈华国，周欣，等． 火棘果中总黄酮的含量测定［J］．
光谱实验室，2012，29(2) :1223 － 1226．
收稿日期:2013 － 01 － 15
作者简介:王雪彦(1984— ) ，女，药师，从事药品检验工作。Email:wxy1226@ 126． com
* 通信作者，Email:songyi_2008@ 163． com
参苓胃炎合剂中丹参的薄层鉴别
王雪彦，陈泽莲，宋 毅*
(四川大学华西医院药剂科，四川 成都 610041)
摘要:目的 采用薄层色谱法鉴别参苓胃炎合剂中的丹参。方法 使用硅胶 G薄层板，以甲苯 －乙酸乙酯 －甲酸(5∶6∶1)
为展开剂，以 2%三氯化铁乙醇溶液为显色剂，进行薄层色谱分析。结果 供试品色谱图中，各组分的分离良好，斑点对称、清
晰。结论 所用方法专属性强、耐用性好，完善了参苓胃炎合剂的质量标准。
关键词:参苓胃炎合剂;薄层色谱法;丹参;丹酚酸 B
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2013)06 － 0643 － 02
参苓胃炎合剂是华西医院长期使用的临床验
方，由丹参、南沙参、茯苓等 17 味中药组成，用于治
疗慢性胃炎所致的胃脘胀痛，脘腹不适，呃逆，食欲
不振。原质量标准中以脂溶性成分丹参酮ⅡA作为
丹参鉴别的指标成分，而参苓胃炎合剂制法规定丹
参为水煎煮入药，故以丹参酮ⅡA 为指标鉴别丹参
会致测定结果不稳定。丹参中水溶性有效成分主要
是酚酸类成分［1］，故以丹酚酸 B 作为丹参鉴别的指
标成分［2］，与该制剂的制备工艺更吻合。现参考文
献［3］，对参苓胃炎合剂中丹参的薄层鉴别方法进行
了研究，完善了该制剂的质量标准。