全 文 ：蒌子宜在果实变为黄色完全成熟时采摘。提前采
摘，瓜蒌子不仅难以从果实中取出，且 3，29-DＲ 的
含量较低，影响瓜蒌子的品质。
3. 2 不同加工方式对瓜蒌子中 3，29-DＲ 含量的影
响 不同加工方式对瓜蒌子中 3，29-DＲ 的含量有
一定的影响，干燥品色泽也有差异。随加工温度的
升高，3，29-DＲ 的含量呈先增后减的趋势，60 ℃下
恒温烘干，3，29-DＲ 的含量最高为 131. 6255 μg /
mL，其次是先 50 ℃下烘干，变温烘干及炒制、蒸制
后，3，29-DＲ的含量均降低，这可能与温度过高破坏
相关化学键或转化为其他新的化合物有关。市售全
瓜蒌饮片的加工工艺流程为:先烘干再上笼蒸制，压
饼，切片后晾干，文中瓜蒌子传统加工方式的炮制工
艺参考市售全瓜蒌的加工工艺，其操作较为麻烦，
3，29-DＲ的含量也没有明显的提高，而变温烘干不
易操作，其最高含量也不及 60 ℃下恒温烘干，因此
瓜蒌子的加工方式选择 60 ℃下恒温烘干为宜。
3，29-DＲ的熔点为 163 ℃，温度对 3，29-DＲ 含
量的影响较为明显，其单体在室温下稳定性较差，长
期放置须 4 ℃ 保存，本研究结果与文献报道一致〔3〕，
研究表明 40 ℃和 80 ℃干燥条件下，瓜蒌子中 3，29-
DＲ含量均不及 60 ℃，推测其原因为 40 ℃下烘干耗
时较多，活性成分受热时间较长，而 80 ℃下烘干虽干
燥时间缩短，但较高的温度促进了 3，29-DＲ 的降解，
因此 60 ℃烘干为瓜蒌子较适宜的干燥条件。
3. 3 不同的加工方式对瓜蒌子中其他化学成分的
影响 中药化学成分十分复杂，发挥药效作用的基
础往往不是单一的化学成分，而是一类物质或几类
物质共同作用的结果，因此研究瓜蒌子中单一的指
标不足以阐述其炮制机理。后续研究发现随着加工
温度的升高，药材色泽由浅到深，5-羟甲基糠醛(5-
Hydroxymethyl furfural，5-HMF)的含量也迅速升高。
经高温炒制后瓜蒌子中 5-HMF较 60 ℃下烘干的瓜
蒌子样品增加了 29. 12 倍，这可能是由于炒制时温
度较高，瓜蒌子中糖类成分与蛋白质或氨基酸在试
验条件下，发生 Maillard 反应而产生的〔4〕。由此可
见，不同的加工方式对中药物质基础研究有一定的
影响，有关选用其他化学成分作为瓜蒌子质量评价
的新标准有待进一步的探讨。
参 考 文 献
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收稿日期:2013-09-12
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAI27B06);教育部大学生创新项目(302-GCX12022)
作者简介:鲁蓝青(1991-)，女，在读本科生，专业方向:化学生物学;Tel:15527922878，E-mail:1104680024@ qq. com。
* 通讯作者:万定荣，Tel:18986065360，E-mail:wandr666@ 163. com。
·鉴别·
佛甲草及其近缘种垂盆草的 HPLC特征指纹图谱研究
鲁蓝青1，梅 青1，万定荣1，2* ，杨新洲1，乔 舒1，赵喻丹1
(1. 中南民族大学药学院，湖北 武汉 430074;2. 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验
室，湖北 武汉 430074)
摘要 目的:建立不同采收期佛甲草的 HPLC特征图谱，并与外形极似的近缘植物药垂盆草进行比较，为其鉴
别及质量控制提供可靠的分析方法。方法:用 HPLC 法研究不同采收期佛甲草的特征图谱及垂盆草的特征图谱，
比较异同。结果:从佛甲草 HPLC特征图谱中标定了金丝桃苷、异槲皮苷、黄芪苷 3 个共有峰;相同产地不同生境的
佛甲草的 HPLC图谱基本一致;同一产地不同采收期佛甲草的 HPLC图谱差异显著，多数共有峰峰面积有不同程度
变化，且峰的数目(即成分种类)也有所差异。两种植物药 HPLC谱图虽有 4 个共有峰，但有显著区别;研究认为二
者均以 4 月底至 5 月盛花期时采收为宜。结论:建立的 HPLC特征指纹图谱为佛甲草鉴定及质量分析提供了重要
参考依据。
关键词 佛甲草;垂盆草;HPLC指纹图谱
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)04-0583-05
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HPLC Characteristic Fingerprints of Sedi Linearis Herba and Sedi Herba
LU Lan-qing1，MEI Qing1，WAN Ding-rong1，2，YANG Xin-zhou1，QIAO Shu1，ZHAO Yu-dan1
(1. Institute of Medical Science，South-central University for Nationalities，Wuhan 430074，China;2. Hubei Provincial Key Laboratory
for Protection and Application of Special Plants in Wuling Area of China，Wuhan 430074，China)
Abstract Objective:To study HPLC characteristic fingerprint of Sedum lineare from different harvest periods，and to compare with
its related species Sedum sarmentosum. Methods:The HPLC fingerprints of Sedum lineare from different collecting periods were estab-
lished and compared with Sedum sarmentosum by the same detection method. Ｒesults:Hyperin，isoquercitrin and astragaloside were i-
dentified from the HPLC fingerprint of Sedum lineare. The fingerprint of Sedum lineare growing in the same area but different environ-
ment were basically identical;while there were remarkable differences of Sedum lineare growing in the same place but from different har-
vest periods，with the area of most common peaks changing from little to great，and slightly different peak number. The HPLC fingerprint
of the two Sedum species had four common peaks，but could be distinguished from each other. The optimal harvest period of these two
species should be full-bloom stage. Conclusion:The established method can provide reference for identification and quality analysis of
Sedum lineare.
Key words Sedum lineare Thunb. ;Sedum sarmentosum Bge. ;HPLC fingerprint
佛甲草为景天科植物佛甲草 Sedum lineare
Thunb. 的全草，曾收载于 1977 年版中国药典，具有
清热解毒、消肿止血的功能，用于咽喉肿痛、目赤、痢
疾、漆疮、带状疱疹、痈肿、丹毒、烫火伤及外伤出血
等症的治疗。我国多数地区还广泛用于肝炎、各种
出血、腹泻、牙痛、癌症等症〔1〕。佛甲草主要含黄酮
类、三萜类及甾醇类化合物〔2-4〕，其水提液能保肝降
酶、抑制肝纤维化，并具有良好的抗炎、抗疲劳、抗心
脑缺氧及抗脂质过氧化的作用〔5-9〕，其总黄酮提取物
有显著的抗肿瘤活性〔10〕。为有效对佛甲草进行鉴
定与质量评价，笔者对该药材不同采收期及不同环
境的样品进行 HPLC 特征指纹图谱研究，并与外形
极为相似的近缘种植物药垂盆草 Sedum sarmentosum
Bge. 进行谱图比较，考察两者指纹特征的异同及谱
图的专属性，以期为佛甲草的鉴定与质量分析提供
可靠的参考依据。
1 仪器与材料
戴安 U3000 高效液相色谱仪，二元梯度泵，UV
检测器，高效液相数据处理系统(美国戴安公司);
CP214 万分之一分析天平(奥豪斯仪器有限公司);
SB25-12DTD超声清洗器(宁波新芝生物科技股份
有限公司)。
乙腈为色谱纯(美国 Tedia 公司)，甲醇、乙醇、
乙酸为分析纯，水为重蒸水。
异槲皮苷(批号:111809-201102)、金丝桃苷(批
号:111521-201205)对照品购于中国食品药品检定
研究院;黄芪苷为自制(HPLC 归一法测定质量分数
＞ 95%)。药材样品来源见表 1，均由笔者万定荣教
授鉴定为景天科植物佛甲草 Sedum lineare Thunb.
或垂盆草 Sedum sarmentosum Bge. 的全草，去杂质，
60 ℃烘干，备用。
表 1 佛甲草与垂盆草药材样品来源
样品编号 药材名称 产地 采集时间
1 ～ 10 佛甲草 湖北黄梅(向阳环境) 2012-04-30
11 ～ 15 佛甲草 湖北黄梅(阴湿环境) 2012-08-12
16 ～ 20 佛甲草 湖北黄梅(向阳环境) 2012-08-12
21 垂盆草 湖北武汉中南民族
大学校园花圃
2012-10-20
22 垂盆草 湖北武汉蛇山 2012-05-01
23 垂盆草 湖北武汉蛇山 2012-07-12
24 垂盆草 湖北武汉蛇山 2012-10-19
25 垂盆草 湖北宜昌长阳 2012-07-15
26 垂盆草 湖北宜昌秭归 2009-04-30
27 垂盆草 湖北宜昌秭归 2009-09-29
28 垂盆草 湖北宜昌车溪 2012-10-13
2 方法
2. 1 对照品溶液的制备 取异槲皮苷、金丝桃苷、
黄芪苷对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每 1
mL含异槲皮苷、金丝桃苷、黄芪苷各 0. 1 mg 的溶
液，即得。
2. 2 供试品溶液的制备 取药材样品粉末约 0. 5
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加 80%甲醇 10 mL，
称定重量，超声(40 kHz，500 W)提取 40 min，放冷，
再称定重量，用 80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤
过，滤液移至 10 mL 量瓶中，用 80%甲醇定容，摇
匀，经 0. 45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2. 3 色谱条件 色谱柱:COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ色
谱柱(250 mm ×4. 6 mm，5 μm);流动相:乙腈(A)-
0. 1%乙酸溶液(B)，梯度洗脱(0 ～ 15 min，7% ～
13%A;15 ～ 50 min，13% ～ 19% A;50 ～ 90 min，19%
～40%A);流速:1. 0 mL /min;柱温:30 ℃;检测波
长:360 nm;进样量:20 μL;供试品溶液色谱峰在 70
min内全部出完，故洗脱时间定为 90 min。理论板
·485· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 4 期 2014 年 4 月
数按异槲皮苷峰计不得低于 3 000。
2. 4 HPLC 分析方法的建立 将不同采收期各 10
批佛甲草样品按上述方法分析检测，得色谱图，分别
比较两采收期各批样品的相对保留时间以确立共有
峰，建立不同采收期佛甲草样品的 HPLC 特征图谱
共有模式并进行相似度评价。再以相同方法对垂盆
草样品进行检测分析，考察比较两者 HPLC 谱图中
色谱峰的异同，确定所建立的方法用于佛甲草鉴定
及质量分析的专属性及可靠性。
2. 5 方法学考察
2. 5. 1 精密度试验:取佛甲草样品(1 号)粉末，按
“2. 2”项下方法制备供试品溶液，按“2. 3”项下色谱
条件连续进样 5 次，检测，计算得主要色谱峰相对保
留时间的 ＲSD 均小于 1. 60%，相对峰面积的 ＲSD
均小于 2. 81%，表明仪器精密度良好。
2. 5. 2 重复性试验:取佛甲草样品(1 号)粉末 5
份，按“2. 2”项下方法制备供试品溶液，按“2. 3”项
下色谱条件检测，计算得主要共有峰的相对保留时
间和相对峰面积的 ＲSD 分别小于 0. 3%和 4. 88%，
表明方法重复性较好。
2. 5. 3 稳定性试验:取佛甲草样品(1 号)粉末，按
“2. 2”项下方法制备供试品溶液，按“2. 3”项下色谱
条件于 0、2、4、8、12 h 进样检测，计算得主要色谱峰
相对保留时间的 ＲSD均小于 1. 59%，相对峰面积的
ＲSD均小于 2. 73%，表明供试品溶液在 12 h内稳定
性良好。
3 结果
3. 1 佛甲草共有峰的确立 取不同采收期(包括
不同环境)湖北黄梅的各 10 批佛甲草样品，按
“2. 2”项下方法制备供试品溶液，进样，检测，得各
样品的 HPLC谱图。经比较分别确立了两个采收期
样品共 12 个共有峰(图 1 和图 2)，以峰面积较大且
较稳定的4号峰(异槲皮苷)为参比峰(S)，计算得
图 1 佛甲草(4 月)HPLC特征图谱(示共有峰)
图 2 佛甲草(8 月)HPLC特征图谱(示共有峰)
各共有峰的相对保留时间及相对峰面积。
3. 2 佛甲草 HPLC 谱图中部分色谱峰的确认 取
金丝桃苷、异槲皮苷及黄芪苷对照品溶液，进样，检
测，将其色谱峰的保留时间与佛甲草样品各色谱峰
进行比较(图 3)，确定 3、4、8 号峰分别为金丝桃苷、
异槲皮苷、黄芪苷。
图 3 佛甲草 HPLC谱图部分共有峰的确认
A. 佛甲草(4 月，向阳环境) B. 佛甲草(8 月，向阳环境)
C. 金丝桃苷对照品 D. 黄芪苷对照品 E. 异槲皮苷对照
品 3. 金丝桃苷 4. 异槲皮苷 8. 黄芪苷
3. 3 佛甲草样品 HPLC 特征图谱共有模式的建立
取来自湖北黄梅不同采收期各 10 批佛甲草样品，
按“2. 3”项下色谱条件检测，将测试数据导入国家
药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”
(2004 A版)中，分别对两采收期各批样品特征图谱
进行谱峰匹配，通过中位数矢量分别建立了佛甲草
不同采收期样品的特征图谱共有模式(图 4 和图
5)，分别将两采收期各样品谱图与其共有模式进行
整体相似度的评价。结果相似度均大于 0. 970，说
明不同采收期(包括不同生境)的佛甲草样品在相
同采收期内质量较一致。
图 4 10 批佛甲草(4 月)药材的 HPLC
谱图与特征图谱共有模式
1 ～ 10. 4 月采自湖北黄梅不同地点的 10 批佛甲草样品
Ｒ. 4 月佛甲草 HPLC特征图谱共有模式
3. 4 不同采收期及不同生境佛甲草样品 HPLC 谱
图的比较 比较两采收期各批佛甲草样品的 HPLC
谱图发现，化学成分的含量随采收期的不同而有极
显著变化。尽管 4 月样品共有成分的总量远高于 8
月样品(约为 8 月份的 1. 5 倍)，但各成分的含量变
化规律不尽一致甚至相反。与 4 月样品相比，8 月
样品中部分成分(8号黄芪苷峰及7、11号峰)的含
·585·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 4 期 2014 年 4 月
图 5 10 批佛甲草(8 月)药材的 HPLC
谱图与特征图谱共有模式
11 ～ 15. 8 月采自湖北黄梅不同阴湿环境的 5 批佛甲草样品
16 ～ 20. 8 月采自湖北黄梅不同向阳环境的 5 批佛甲草样品
Ｒ1. 8 月佛甲草 HPLC特征图谱共有模式
量大大降低，其中 7 号峰所代表的成分的平均含量
约为 4 月份样品的 1 /10，11 号峰所代表的成分的平
均含量仅约为 4 月样品的 1 /9，12 号峰所代表的成
分的含量也明显降低。但 8 月样品中有 6 个共有成
分(其中 5 个为低含量或极低含量的共有成分)的
含量与 4 月相当或略有增加，1、6 号峰所代表的成
分的含量则明显高于 4 月份样品。再如 4 月样品
11、12 号共有峰峰面积之比约为 4∶ 1，而 8 月中旬样
品均变为约 1∶ 1。
通过谱图比较，不同采收期佛甲草样品的成分
种类有所差异，但这些差异性成分均为低含量成分;
不同采收期样品中大多数主成分(即高含量成分)
的含量有显著差异，即 4 月佛甲草样品多数主成分
的含量显著高于同一产地 8 月中旬所采各批样品，
但有少量主成分(2 个)的含量在 8 月反而增加;4
月佛甲草样品各成分的总量显著高于同一产地 8 月
所采各批样品。结合前期课题组对佛甲草不同采收
期样品总黄酮含量分析的结果，即 4 月底 5 月初样
品中总黄酮含量最高，进一步表明佛甲草于 4 月底
5 月初盛花期时采收较适宜。
同一采收期(8 月)不同环境(阴湿、向阳)得到
的各佛甲草样品相对于 4 月样品，其 HPLC 谱图具
有较大相似性。二者极性较强(在 45 min 前出的
峰)的共有峰(3 号金丝桃苷峰除外的 1、2、6 号峰及
4 号异槲皮苷峰)以及 10、12 号峰的峰面积在绝大
多数样品中均大致相仿。余下的各共有峰中，阴湿
环境样品 7 号峰的峰面积显著低于干燥向阳环境样
品，8 号黄芪苷峰及 9、11 号峰的峰面积显著高于干
燥向阳环境样品。表明同一采收期不同环境的佛甲
草，其成分种类一致，多数成分的含量也非常相近，
但少数成分的含量还是有一定差异。说明阴湿环境
中的佛甲草质量略好于向阳环境者。
3. 5 佛甲草与垂盆草 HPLC 谱图的共性与差异
按与其近缘种植物药佛甲草相同的 HPLC 分析法对
湖北省内收集的 8 批垂盆草样品进行检测分析，发
现不同产地不同采收期垂盆草样品的 HPLC 谱图虽
有较大差异，但可发现它们有 5 个主要共有成分
(图 6)。其中，垂盆草的 4 个共有峰(a、b、c、e 峰)
与佛甲草的部分共有峰(1 号峰、3 号金丝桃苷峰、4
号异槲皮苷峰及 10 号峰)相对应，但它们在含量上
又存在差异性，如金丝桃苷(b 峰)在佛甲草样品中
的含量非常低，但在不同产地的垂盆草样品中含量
相对较高;且垂盆草的 d峰在佛甲草谱图中不存在。
表明利用建立的佛甲草的 HPLC特征图谱可有效区
别近缘种垂盆草。
图 6 8 批垂盆草样品 HPLC对照图谱
4 讨论与小结
本研究建立了佛甲草 HPLC 特征图谱分析方
法，确立了佛甲草的 HPLC共有峰，考察了不同采收
期佛甲草样品主要共有峰峰面积的变化规律，同时
确认的金丝桃苷、异槲皮苷及黄芪苷 3 个共有峰均
为与佛甲草疗效相关的黄酮苷类活性成分。表明建
立的 HPLC特征图谱不仅对佛甲草的鉴定有重要价
值，对其质量评价也有一定意义。还以相同的色谱
条件对其近缘种植物药垂盆草进行 HPLC 检测分析
与比较，为外形极为相似的垂盆草的鉴别提供了重
要参考。
特征图谱研究结果表明，相同产地不同生态环
境的佛甲草的质量基本一致;但同一产地不同采收
期佛甲草的化学成分含量差异显著，多数共有主成
分的含量变化大，甚至低含量成分的种类也有一定
差异。由此提出佛甲草与垂盆草均于 4 月底 5 月初
盛花期采收质量较佳;也具体说明全草类药材的采
收期与其质量有显著相关性，确定最佳采收期至关
重要。
参 考 文 献
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收稿日期:2013-10-23
基金项目:国家中医药公共卫生专项(财社〔2011〕76 号);中医药行业科研专项(201207002)
作者简介:陈随清(1965-)，男，博士，教授，研究方向:中药品种整理及质量标准研究;Tel:0371-65676686，E-mail:suiqingchen@ sohu. com。
野生与栽培密银花品质对比分析
陈随清，孙孝亚，刘晓俊，戴 啸
(河南中医学院，河南 郑州 450046)
摘要 目的:通过对野生和栽培密银花品质进行对比分析，为密银花的质量评价提供科学依据。方法:以性状
鉴别法和显微鉴别法分别比较 2 类密银花的性状特征和显微特征;采用中国药典方法测定有效成分绿原酸、木犀
草苷含量;DNA分子标记鉴定不同品种的金银花。结果:野生与栽培密银花的性状特征、显微特征、绿原酸和木犀
草苷的含量存在差异;对密银花 PCＲ反应体系和扩增程序进行了优化，并从 11 对引物中筛选出 1 对具有鉴别意义
的引物。结论:实验结果可为密银花药材质量的综合评价提供科学依据。
关键词 野生密银花;栽培密银花;性状鉴别;显微鉴别;DNA分子鉴定
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)04-0587-03
Comparison and Analysis of Wild and Cultivated Lonicerae Japonicae Flos from Xinmi
CHEN Sui-qing，SUN Xiao-ya，LIU Xiao-jun，DAI Xiao
(Henan College of TCM，Zhengzhou 450046，China)
Abstract Objective:To compare and analyze the wild and cultivated Lonicerae Japonicae Flos from Xinmi. Methods:Macroscopic
identification and microscopic identification were adopted to compare and analyze characteristics of the wild and cultivated Lonicerae Ja-
ponicae Flos from Xinmi. The content of chlorogenic acid and luteoloside were determined by the methods in the Chinese Pharmacopoe-
ia. DNA molecular marker technology was used to identify Lonicerae Japonicae Flos of different varieties. Ｒesults:The differences in
macroscopic and microscopic characteristics as well as the content of chlorogenic acid and luteoloside between them had been
found. PCＲ amplification reaction system and procedure of Lonicerae Japonicae Flos from Xinmi were optimized. An effective primer for
identification was chosen from 11 primers. Conclusion:The results provide the scientific basis for quality assessment of Lonicerae Japoni-
cae Flos from Xinmi.
Key words Wild Lonicerae Japonicae Flos from Xinmi;Cultivated Lonicerae Japonicae Flos from Xinmi;Macroscopic identifica-
tion;Microscopic identification;DNA molecular identification
金银花为忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica
Thunb．的干燥花蕾或带初开的花，具有清热解毒、凉
散风热的功能〔1〕。现代药理表明金银花具有抗菌、
抗病毒、解热、增强免疫力、止血、利尿和降低胆固醇
等作用〔2〕。金银花主产于河南、山东，以河南省新
密市(原密县)产者为道地药材，商品特称“密银
花”。但由于经济建设的原因，密银花规模化种植
发展较慢，在新密市五指山一带一直处于野生或山
区农户房前屋后的半野生状态，产量较小。近几年
调查发现，这种野生或半野生状态的金银花与人工
规模化种植的金银花从植物形态、药材性状、显微特
征、化学成分的含量等方面都有明显差异。为了更
好的开发利用和保护资源，本文对野生和栽培的密
银花进行了品质分析，现报道如下。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 奥林巴斯 CX31 型生物显微镜;岛津
LC-20AT 高效液相色谱仪;KQ-500DV 型超声波清
洗器(昆山市超声仪器有限公司);Hero-Mole PCＲ
·785·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 37 卷第 4 期 2014 年 4 月