全 文 :2017 年 3 月 1 日 第 3 期
No. 3 1 March 2017
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 32 卷 总第 226 期
Vol. 32 Serial No. 226
* 基金项目:中国人民解放军全军后勤科研计划项目(CJN12J005)
垂盆草水煎液对 4 种肝损伤模型小鼠的保肝作用*
鲁合军
周口市中医院,河南 周口 466000
摘要:目的:研究垂盆草水煎液对 4种肝损伤模型小鼠的保肝作用。方法:采用乙醇、对乙酰氨基酚、四氯化碳、D-氨基半
乳糖复制小鼠肝损伤模型,随机分为正常组、模型组、联苯双酯滴丸组、垂盆草高剂量组(6. 67 g·kg -1)、垂盆草低剂量组
(3. 33 g·kg -1)。正常组和模型组灌胃给予等体积的生理盐水,连续给药数天后,观察不同剂量垂盆草对小鼠血清中丙
氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino transferase,AST)及肝脏中超氧
化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malonaldehyde,MDA)等生化指标的影响。结果:①对乙醇所致肝损伤
小鼠模型的影响:垂盆草水煎液高剂量组 SOD、MDA与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液各剂
量组 ALT、AST与联苯双酯滴丸组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液低剂量组 SOD、MDA与联苯双酯
滴丸组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05)。②对 D-氨基半乳糖所致肝损伤小鼠模型的影响:垂盆草水煎液各剂量组
ALT、AST、SOD及 MDA与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液各剂量组 ALT,垂盆草水煎液低剂
量组 MDA、AST,垂盆草水煎液高剂量组 SOD与联苯双酯滴丸组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05)。③对四氯化碳
所致肝损伤小鼠模型的影响:垂盆草水煎液各剂量组 ALT、AST与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草
水煎液高剂量组 SOD、MDA与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液各剂量组 ALT、AST与联苯双
酯滴丸组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液高剂量组 SOD、低剂量组 MDA 与联苯双酯滴丸组比较,
差异均有统计学意义(P < 0. 05)。④对对乙酰氨基酚所致肝损伤小鼠模型的影响:垂盆草水煎液各剂量组 ALT、AST、
SOD及 MDA与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05);垂盆草水煎液低剂量组 ALT、AST、SOD 及 MDA 与联苯双
酯滴丸组比较,差异均有统计学意义(P < 0. 05)。结论:垂盆草对对乙酰氨基酚模型作用趋势强于其他模型组,在对抗活
性氧过度产生中的作用强度呈现剂量依赖性,高剂量的垂盆草在清除自由基方面有较好的效果。
文献引用:鲁合军.垂盆草水煎液对 4种肝损伤模型小鼠的保肝作用[J].中医学报,2017,32(3):409 - 414.
关键词:垂盆草;肝损伤;乙醇;对乙酰氨基酚;四氯化碳;D-氨基半乳糖;丙氨酸氨基转移酶;天门冬氨酸氨基转移酶;超
氧化物歧化酶;丙二醛;小鼠
DOI:10. 16368 / j. issn. 1674 - 8999. 2017. 03. 106
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1674 - 8999(2017)03 - 0409 - 06
Protective Effect of Sarmentosum Decoction on Four Types of Liver Injury Model Mice
LU Hejun
TCM Hospital of Zhoukou City,Zhoukou Henan China 466000
Abstract:Objective:To study the protective effect of Sarmentosum Decoction on four types of liver injury of model mice. Methods:
To extablish the animal models of liver injury mice models,which were induced by alcohol,acetaminophen,arbon tetrachloride and
D-galactosamine respectively. The mice were randomly divided into 5 groups:the normal control group,model group,high dose
group (6. 67 g·kg -1)and low dose group (3. 33 g·kg -1). The mice in the normal and model group received an equal volmue
of saline. All mice received oral administration of the corresponding medicines for seven days. After treatment,the serum ALT,
AST,MDA and liver SOD of each group were detected. Results:Results:①The effect on ethanol induced liver injury model mice:
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SOD and MDA in the high dose group were significantly higher than those in the model group (P < 0. 05). The contents of SOD,
MDA and Bifendate in the low dose group were significantly lower than those in the untreated group (P < 0. 05). Compared with
the control group,the SOD,the differences in MDA and BDP of the low-dose group were statistically significant(P < 0. 05).②The
effect on of D-galactosamine induced liver injury model mice:The contents of ALT,AST,SOD and MDA in different dosage groups
of Sarmentosum Decoction were significantly different from those in model group(P < 0. 05). The contents of MDA,AST and sele-
nium decoction in high dose group of ALT and SZD were significantly lower than those in BDD group(P < 0. 05).③The effect on
Carbon tetrachloride induced liver injury model mice:The contents of ALT and AST in different dose groups were significantly low-
er than those in the untreated group (P < 0. 05)Compared with the model group,the contents of SOD and MDA in the high-dose
decoction group were significantly different(P < 0. 05);The contents of SOD in the high dose group and the MDA in the low dose
group were significantly different from those in the Bifendate Pills group(P < 0. 05).④The effect on Acetaminophen induced liver
injury model mice:The contents of ALT,AST,SOD and MDA in different dose groups were significantly lower than those in the un-
treated group(P < 0. 05). The AST,SOD and MDA in the low dose group were significantly different from those in the Bifendate
Pills group(P < 0. 05). Conclusion:The effect of Sarmentosum on Acetaminophen model mice is stronger than that of other model
groups. The intensity of the effect on the over-production of reactive oxygen species is in a dose-dependent manner. The high dose
of Sarmentosum has better scavenging free radicals effect.
Reference citation:LU Hejun. Protective Effect of Sarmentosum Decoction on Four Types of Liver Injury Model Mice[J]. Acta
Chinese Medicine,2017,32(3) :409 - 414.
Key words:Sarmentosum;liver injury;ethanol;acetaminophen;carbon tetrachloride;D-galactosamine;alanine aminotransferase;
aspartate aminotransferase;liver superoxide dismutase;Malondialdehyde;mice
垂盆草为景天科植物垂盆草(Sedum sarmento-
sum Bunge)的新鲜或干燥全草,味甘、淡,性凉,归
肝、胆、小肠经,主要功效为利胆退黄、清热解毒;
作为临床上常用中药材主要用于治疗湿热黄疸,
小便不利等[1]。根据其“五味、归经”可知,垂盆草
主要活性成分在肝、胆、小肠富集;从化学成分角
度来看,垂盆草主要成分为黄酮类、氨基酸类、糖
类、蛋白质、三萜类等,此类化学组分在临床应用
中有较好的生物学活性,如垂盆草的水溶性总苷
有较好的免疫调节作用,增强肌力作用及降酶保
肝作用[2];垂盆草总黄酮类有明显的抗肿瘤作
用[3];生物碱类成分也有保肝作用。基于此,笔者
以此为研究方向,考察了垂盆草水煎液的保肝作
用,为进一步探究其保肝机制,本研究采用 4 种不
同的造模方法,对其保肝作用趋势进行分析,探究
其临床应用机理,为垂盆草药材资源的临床应用
提供参考依据。
1 材料与方法
1. 1 实验动物 昆明种小鼠,雌雄各半,体质量
(18 ± 2)g,由河南省动物实验中心提供,合格证号:
SCXK(豫)2011-0011。
1. 2 实验试剂 天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate
amino transferase,AST)试剂盒(批号:20110818),丙
氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)试
剂盒(批号:20080808),丙二醛(malonaldehyde,
MDA)试剂盒(批号:20110508),超氧化物歧化酶
(superoxide dismutase,SOD)试 剂 盒 (批 号:
20110505),以上均购自南京建成生物工程研究所;
D-氨基半乳糖盐酸盐(江苏启冬化学有限公司,批
号:20111108);联苯双酯滴丸(浙江万邦药业股份
有限公司,批号:110910);对乙酰氨基酚(广州白云
山制药,批号:H44021521);四氯化碳(国药集团化
学试剂有限公司,批号:20131102);乙醇(国药集团
化学试剂有限公司,批号:20131005)。
1. 3 实验药材 垂盆草饮片购自张仲景大药房,经
河南大学药学院药用植物教研室李昌勤教授鉴定为
景天科植物垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge)的干
燥全草。
1. 4 实验仪器 RE-2000 旋转蒸发器(上海亚荣生
化仪器厂);BT224S 电子天平(北京赛多利斯科学
仪器有限公司);HH. W420 型电热恒温水浴箱(天
津市森斯特仪器有限公司);KQ5200B 超声波清洗
器(昆山市超声仪器有限公司);HJ-6A 型多头磁力
搅拌器(国华常州电器有限公司)。
1. 5 供试样品的制备 垂盆草 1 000 g,10 倍量水
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浸泡 30 min后,煎煮 2 次,每次 1. 5 h,合并滤液,减
压浓缩后真空干燥制成干浸膏,称定浸膏质量计算
出膏率,临用前用体积分数 5%吐温 - 80 配成适宜
浓度的溶液。
1. 6 剂量计算与分组 根据药材的临床用量,由剂
量换算公式折算成小鼠剂量,垂盆草临床常用量为
(15 ~ 30)g·d -1,取 20 g 作为常用剂量计算,即高
剂量为 6. 67 g(生药)· kg -1,低剂量为 3. 33
g(生药)·kg -1。各模型组实验各分正常组(体积
分数 5%吐温 - 80,20 mL·kg -1),模型组,联苯双
酯滴丸组,垂盆草高剂量组、低剂量组,各组小鼠均
雌雄各半。
1. 7 模型制备
1. 7. 1 乙醇致小鼠肝损伤模型的复制[4] 取 50
只小鼠,随机分成 5 组,分别为正常组,模型组,联
苯双酯滴丸组,垂盆草高剂量组、低剂量组。正常
组及模型组给予同量的生理盐水,联苯双酯滴丸
组给予联苯双酯滴丸(200 mg·kg - 1),连续给药
20 d,末次给药后,除正常组给予等量生理盐水外,
其余组灌胃给予体积分数 50% 乙醇 0. 012
mL·g - 1,禁食 12 h 后,眼静脉丛取血,按照试剂
盒说明书分别测定各组小鼠 ALT、AST 水平,取血
后小鼠立即解剖,取相同部位的一小块肝组织,精
密称定质量后用生理盐水制备成质量分数 10%的
肝匀浆,按照试剂盒说明测定每克肝组织中 MDA、
SOD水平。
1. 7. 2 D-氨基半乳糖致小鼠肝损伤模型的复制
取小鼠 50 只,随机分成 5 组,灌胃给药,模型组和正
常组给予等体积的生理盐水,连续给药 7 d,末次给
药 1 h后,各组除正常组外均腹腔注射 D-氨基半乳
糖(600 mg·kg - 1),注射前禁食不禁水 24 h,阳性
对照药物选择联苯双酯滴丸(200 mg·kg - 1),造
模后 16 h,眼静脉丛取血,按照试剂盒说明书分
别测定各组小鼠 ALT、AST 水平,取血后小鼠立
即解剖,取相同部位的一小块肝组织,精密称定
质量后用生理盐水制备成质量分数 10%的肝匀
浆,按照试剂盒说明测定每克肝组织中 MDA、
SOD 水平。
1. 7. 3 CCl4 致小鼠肝损伤模型的复制 取 50 只
小鼠,随机分成 5 组,分别为正常组,模型组,联苯双
酯滴丸组,垂盆草高剂量组、低剂量组。正常组及模
型组给予同量的生理盐水,连续灌胃 10 d,与末次给
药后 1 h,除正常组腹腔注射质量分数 0. 9%生理盐
水外,其余各组均腹腔注射体积分数 0. 1% CCl4 花
生油溶液 20 mL·kg -1,造模后 16 h,各组小鼠采取
眼眶静脉丛取血,分离血清,按照试剂盒说明测定血
清中 ALT、AST的水平。取血后小鼠立即解剖,取相
同部位的一小块肝组织,精密称定质量后用生理盐
水制备成质量分数 10%的肝匀浆,按照试剂盒说明
测定每克肝组织中 MDA、SOD水平。
1. 7. 4 对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤模型的复制
实验程序基本同 1. 7. 2 项下步骤,只是以腹腔注射
对乙酰氨基酚 110 mg·kg -1代替 D-氨基半乳糖。
1. 8 统计学方法 采用 SPSS 20. 0 统计学软件,首
先对试验数据进行正态分布检验,并对其方差齐性
进行分析,符合正态分布及方差齐的数据进行 LSD
组间比较,符合正态分布方差不齐的数据进行
Games-Howell组间比较;不服从正态分布的数据进
行秩转换,再进行 KS 检验,仍不服从正态分布的数
据进行非参数检验组间比较。P < 0. 05 为差异有统
计学意义。
2 结果
2. 1 垂盆草水煎液对乙醇致肝损伤小鼠 ALT、
AST水平及肝组织 MDA、SOD 水平的影响 模型
组各相应指标与正常组比较,差异均有统计学意义
(P < 0. 05),表明采用乙醇复制的肝损伤模型成功。
血清指标显示,联苯双酯滴丸组与模型组比较,差异
有统计学意义(P < 0. 05),说明阳性药物能明显降
低乙醇致肝损伤导致的血清 ALT、AST指标的异常;
垂盆草高剂量组、低剂量组与模型组比较,差异无统
计学意义,说明垂盆草水煎液在改善血清 ALT、AST
水平方面效果低于阳性对照药物。在对肝组织中
MDA、SOD检测中发现,联苯双酯滴丸组能明显降
低模型组 MDA水平,升高 SOD水平;垂盆草高剂量
组在清除自由基,改善肝脏代谢紊乱有积极作用,能
显著改善 MDA、SOD水平,与模型组比较,差异有统
计学意义(P < 0. 05),与联苯双酯滴丸组比较,差异
无统计学意义,说明其在保护肝组织中与阳性药物
效力相当。见表 1。
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2. 2 垂盆草水煎液对 D-氨基半乳糖致肝损伤小鼠
ALT、AST 水平及肝组织 MDA、SOD 水平的影响
模型组各指标数据与正常组比较,均有显著性差
异(P < 0. 05),说明采用 D-氨基半乳糖复制小鼠肝
损伤模型成功。从生化指标数据中可知,垂盆草高
剂量组、低剂量组能显著降低 D-氨基半乳糖致肝损
伤小鼠血清的 ALT、AST水平,并能显著改善肝组织
中 MDA、SOD 水平,且差异有统计学意义(P <
0. 05),提示垂盆草水煎液能显著改善 D-氨基半乳
糖造成的肝损伤,其作用机制可能是垂盆草高剂量
组能有效改善肝代谢导致的糖原、RNA、蛋白质合成
障碍,从而抑制肝组织损伤。见表 2。
表 1 垂盆草水煎液对乙醇致肝损伤小鼠 ALT、AST水平及肝组织 MDA、SOD水平的影响 (珋x ± s)
组别 n 剂量
血清
ALT(U·L -1) AST(U·L -1)
组织
MDA(μmol·g - 1) SOD(U·mg -1)
正常组 10 - 35. 96 ± 2. 77 75. 01 ± 7. 78 9. 42 ± 1. 15 38. 76 ± 4. 34
模型组 10 0. 012 mL·g - 1 184. 12 ± 8. 16 205. 53 ± 6. 49 32. 85 ± 3. 13 17. 44 ± 3. 98
联苯双酯滴丸组 10 200 mg·kg -1 141. 67 ± 7. 17* 159. 82 ± 5. 41* 20. 27 ± 3. 41* 22. 89 ± 2. 34*
垂盆草高剂量组 10 6. 67 g·kg -1 173. 41 ± 16. 86# 199. 44 ± 12. 75# 24. 82 ± 3. 41* 30. 41 ± 7. 79*
垂盆草低剂量组 10 3. 33 g·kg -1 187. 13 ± 7. 48# 206. 99 ± 8. 46# 33. 24 ± 5. 01# 19. 60 ± 6. 47#
注:与模型组比较,* P < 0. 05;与联苯双酯滴丸组比较,#P < 0. 05
表 2 垂盆草水煎液对 D-氨基半乳糖致肝损伤小鼠 ALT、AST水平及肝组织 MDA、SOD水平的影响 (珋x ± s)
组别 n 剂量
血清
ALT(U·L -1) AST(U·L -1)
组织
MDA(μmol·g - 1) SOD(U·mg -1)
正常组 10 - 37. 42 ± 4. 34 75. 68 ± 9. 62 10. 34 ± 0. 99 43. 90 ± 7. 90
模型组 10 600 mg·kg -1 83. 94 ± 3. 00 142. 53 ± 7. 81 39. 95 ± 2. 89 14. 74 ± 3. 96
联苯双酯滴丸组 10 200 mg·kg -1 45. 57 ± 5. 87* 94. 74 ± 8. 61* 15. 84 ± 2. 29* 36. 97 ± 5. 25*
垂盆草高剂量组 10 6. 67 g·kg -1 61. 35 ± 9. 99* # 101. 04 ± 10. 10* 20. 22 ± 4. 66* 27. 42 ± 4. 18* #
垂盆草低剂量组 10 3. 33 g·kg -1 71. 15 ± 13. 98* # 125. 95 ± 8. 50* # 27. 62 ± 2. 65* # 29. 86 ± 4. 43*
注:与模型组比较,* P < 0. 05;与联苯双酯滴丸组比较,#P < 0. 05
2. 3 垂盆草水煎液对 CCl4 致肝损伤小鼠 ALT、
AST水平及肝组织 MDA、SOD 水平的影响 CCl4
复制小鼠肝损伤模型为考察保肝作用最常用的实验
模型。从实验数据可以看出:模型组各生化指标与
正常组比较,差异均有统计学意义,提示肝损伤模型
复制成功。血清指标检查中发现,垂盆草高剂量组、
低剂量组能显著降低模型组 ALT、AST水平,差异有
统计学意义(P < 0. 05),提示垂盆草能抑制 CCl4 导
致的肝微粒体脂质过氧化,抑制细胞膜钙离子的内
流,保护肝细胞组织及功能的完整性;在肝组织数据
中发现垂盆草低剂量组在升高 SOD 指标中与模型
组相当,提示低剂量的垂盆草在升高 CCl4 致肝损伤
小鼠 SOD水平效果不好,而高剂量的垂盆草能显著
改善肝组织中 SOD水平,显示了垂盆草保肝的剂量
依赖性,从作用机制的角度来看,垂盆草可能是活化
肝脏细胞膜及微粒体膜上的钙泵活性,抑制钙离子
的内流,提高肝细胞活性,从而发挥保护肝功能的作
用。见表 3。
表 3 垂盆草水煎液对 CCl4 致肝损伤小鼠 ALT、AST水平及肝组织 MDA、SOD水平的影响 (珋x ± s)
组别 n 剂量
血清
ALT(U·L -1) AST(U·L -1)
组织
MDA(μmol·g - 1) SOD(U·mg -1)
正常组 10 - 35. 63 ± 3. 20 86. 06 ± 9. 81 10. 55 ± 1. 28 40. 01 ± 1. 11
模型组 10 20 mL·kg -1 214. 67 ± 4. 54 240. 40 ± 7. 43 40. 15 ± 5. 42 18. 50 ± 2. 53
联苯双酯滴丸组 10 200 mg·kg -1 139. 67 ± 6. 84* 165. 22 ± 7. 06* 17. 49 ± 2. 04* 20. 36 ± 3. 24
垂盆草高剂量组 10 6. 67 g·kg -1 147. 59 ± 2. 15* # 182. 53 ± 5. 25* # 25. 54 ± 4. 25* 25. 65 ± 2. 47* #
垂盆草低剂量组 10 3. 33 g·kg -1 170. 07 ± 4. 37* # 194. 23 ± 6. 89* # 33. 20 ± 1. 48# 19. 27 ± 3. 57
注:与模型组比较,* P < 0. 05;与联苯双酯滴丸组比较,#P < 0. 05
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2. 4 垂盆草水煎液对对乙酰氨基酚致肝损伤小鼠
ALT、AST 水平及肝组织 MDA、SOD 水平的影响
模型组各生化指标与正常组比较,差异均有统计
学意义,提示肝损伤模型复制成功。在血清生化指
标中,垂盆草高剂量组与联苯双酯滴丸组作用强度
相当,均能显著降低模型组 ALT、AST 水平,差异有
统计学意义(P < 0. 05),垂盆草低剂量组能显著降
低模型组相关指标,差异有统计学意义(P < 0. 05);
在肝组织生化指标检查中,垂盆草的高剂量、低剂量
均能显著改善 MDA、SOD 水平,提示垂盆草在保护
对乙酰氨基酚导致的肝损伤模型中有积极作用,究
其作用机制,可能是清除由肝细胞色素 P450 酶代谢
产生的半醌自由基,抑制肝细胞内谷胱甘肽的消耗,
从而发挥保肝作用。见表 4。
表 4 垂盆草水煎液对对乙酰氨基酚致肝损伤小鼠 ALT、AST水平及肝组织 MDA、SOD水平的影响 (珋x ± s)
组别 n 剂量
血清
ALT(U·L -1) AST(U·L -1)
组织
MDA(μmol·g - 1) SOD(U·mg -1)
正常组 10 - 37. 54 ± 5. 59 80. 22 ± 9. 62 10. 37 ± 1. 39 33. 73 ± 3. 83
模型组 10 110 mg·kg -1 188. 77 ± 6. 44 205. 84 ± 6. 27 35. 70 ± 4. 11 14. 57 ± 3. 14
联苯双酯滴丸组 10 200 mg·kg -1 98. 05 ± 3. 69* 115. 04 ± 2. 91* 15. 03 ± 3. 86* 29. 94 ± 3. 22*
垂盆草高剂量组 10 6. 67 g·kg -1 107. 75 ± 7. 11* 124. 10 ± 9. 28* 16. 85 ± 1. 26* 29. 49 ± 3. 55*
垂盆草低剂量组 10 3. 33 g·kg -1 118. 41 ± 8. 40* # 126. 60 ± 1. 77* # 22. 83 ± 2. 25* # 21. 71 ± 1. 40* #
注:与模型组比较,* P < 0. 05;与联苯双酯滴丸组比较,#P < 0. 05
3 讨论
AST、ALT是反应肝实质损害的常用酶学检查
指标,ALT主要分布于胞浆,AST主要分布于胞浆和
线粒体,也是一种线粒体酶[5-6]。当肝细胞破坏、细胞
通透性增高及线粒体损伤时,AST、ALT 活性增高,并
且其活性高低变化与肝细胞受损程度一致。SOD 是
生物体内清除自由基的首要物质,它能修复自由基损
伤的组织细胞,平衡自由基造成的伤害;MDA为脂质
过氧化的最终产物,MDA 的含量可反映脂质过氧化
的程度,间接反映细胞的损伤程度[7]。
CCl4 是急性肝损伤模型较为常用的造模试剂,
其作用机制为造成肝微粒体脂质过氧化,产生三氯
甲烷自由基和氯自由基,导致肝微粒体脂质过氧化,
同时抑制细胞膜及微粒体膜上的钙泵活性,使肝细
胞膜结构和功能完整性破坏,钙离子内流增多,细胞
中毒死亡,导致肝细胞和肝功能受损[8]。
乙醇在肝脏中代谢的产物可引起肝细胞毒性及
肝脏代谢紊乱,此为酒精性肝损伤及脂肪肝的主要
原因[9]。其代谢机制为首先作用于肝脏线粒体的
乙醇脱氢酶代谢为乙醛,再经乙醛脱氢酶代谢为乙
酸,在乙醇的代谢过程中,增加呼吸链中传递的电子
流,导致活性氧的过度产生,同时,乙醇在体内的蓄
积激活了细胞色素 P450 酶,尤其是 CYP2E1,使反
应性氧中间产物和脂质过氧化终产物形成增多,从
而介导自由基脂质过氧化引起肝损伤,脂质过氧化
反应会使肝细胞损伤进一步加重,严重时可导致肝
组织的炎症、坏死、纤维化等症状[10-11]。
D-氨基半乳糖所致的急性肝损伤模型与人类病
毒性肝炎的病理学变化相似,是筛选保肝药物和研
究药物作用机制的经典动物模型。通常认为其损伤
肝细胞是由于其与磷酸尿嘧啶核苷竞争性结合,导
致糖原、RNA、蛋白质合成障碍,从而引起肝细胞炎
症和坏死;同时过量的自由基产生和脂质过氧化反
应也是导致肝损伤的重要原因[12]。
对乙酰氨基酚是非甾体类解热镇痛药的代表药
物,临床上主要用于退热及关节痛、神经痛等轻、中
度疼痛。近年来,对乙酰氨基酚过量或长期使用导
致的急性肝损伤事件发生率逐年增长,由其引起的
急性肝衰竭发生率已达 42%,并由此引发了严重的
公共健康安全问题。基于此,有实验引入了对乙酰
氨基酚肝损伤模型,研究其毒性机制[13]。乙酰氨基
酚进入人体后,经肝细胞色素 P450 酶代谢后产生大
量的半醌自由基,过多的自由基使肝内谷胱甘肽被
消耗,不能参与灭活半醌自由基,从而引起肝细胞膜
脂质过氧化,导致肝细胞损伤坏死[14-15]。
垂盆草水煎液对各种肝损伤实验模型均有较好
的保肝作用,此作用与垂盆草归肝、胆经相吻合[16]。
本研究发现,垂盆草对对乙酰氨基酚模型作用强于
其他模型组,而对乙酰氨基酚模型类似于人类的病
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2017 年 3 月 1 日 第 3 期
No. 3 1 March 2017
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 32 卷 总第 226 期
Vol. 32 Serial No. 226
毒性肝炎,由此可以推断,垂盆草主要通过抑制肝内
谷胱甘肽的消耗而发挥保肝作用,即垂盆草水煎液
对病毒性肝炎有较好的临床作用。从乙醇模型来
看,垂盆草在对抗活性氧的过度产生中的作用强度
呈现剂量依赖性,即高剂量的垂盆草能较好地发挥
清除乙醇代谢产生的自由基,低剂量效果并不明显,
提示大剂量垂盆草可以用于解酒。在 CCl4 和 D-氨
基半乳糖模型组中,高剂量的垂盆草体现出较好的
保肝作用,并且与联苯双酯滴丸组作用强度相当,差
异无统计学意义(P > 0. 05)。由于 D-氨基半乳糖模
型与人类病毒性肝炎的相似性,可以推断垂盆草水
煎液可通过抑制某些炎症介质的渗出、减少肝细胞
损伤,从而达到降酶保肝的作用,其中高剂量组具有
较好的自由基清除能力,降低肝组织自由基损伤,低
剂量的垂盆草作用强度稍低。
垂盆草水煎液有较好的抗肝损伤作用,其产地
广泛,性状有别,质量差异较大,其化学成分涉及到
黄酮类、三萜类、生物碱类、甾醇类等多种组分,临床
使用多靶点的作用趋势明显,因此垂盆草作为临床
常用中药,在开发保肝、护肝药效物质基础中有很大
潜力。有研究表明,垂盆草水煎液中主要活性组分
为水溶性总苷及总黄酮类成分,其中小麦黄素-7-0-
β-D-葡萄糖苷经药理学研究表明有明显的保肝作
用;而总黄酮类成分稳定性稍差,如垂盆草苷可抑制
炎症介质的释放,修复受损的肝细胞,明显改善肝功
能(对丙氨酸转氨酶作用明显),长时间的高温加热
可降低其含量[17]。临床使用垂盆草采用煎煮后服
用,在加热过程中其稳定性稍差的化学成分会受到
不同程度的影响,导致在临床使用中疗效较差。为
确保垂盆草临床疗效发挥,建议从整体组分的角度
建立质控标准,这样更有利于垂盆草的临床应用。
目前,垂盆草抗肝炎活性的研究较多,但其深入系统
的研究不多,对其保肝的明确作用机制还有待进一
步研究。因此,进一步完善垂盆草的质量标准、研制
疗效确切的靶向制剂以及更多的药理学研究、开发
是垂盆草药用价值开发的主导方向。
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收稿日期:2016 - 10 - 12
作者简介:鲁合军(1964 -),男,河南周口人,大学本科,副
主任药师,主要从事中药临床药理研究。
编辑:秦小川
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