免费文献传递   相关文献

郁李微型繁殖技术研究



全 文 : 2013年2月 Journal of Green Science and Technology 第2期
收稿日期:2013-01-18
作者简介:宋洪文 (1969—),女,黑龙江望奎人,硕士,副教授,主要从事植物学、植物组织培养、园林苗圃等方面的教学、生产、科研工作。
郁李微型繁殖技术研究
宋洪文,周 鑫
(黑龙江林业职业技术学院,黑龙江 牡丹江157011)
摘要:指出了郁李种子繁殖花色变化大,影响园林应用效果,微型繁殖技术的研究不但可以使花色稳定,而
且能够快速繁殖优良品种,对郁李的推广应用意义巨大,同时为郁李的工厂化育苗提供理论依据。对郁李
微型繁殖技术进行了研究,结果表明:郁李微型繁殖诱导培养基为:MS+KT1.5+IBA0.1;增殖培养基为:
MS+KT3.0+IBA0.5;生根培养基为1/2MS+KT0.1+IBA0.5。
关键词:郁李;微型繁殖;诱导;增殖;生根
中图分类号:S622.3      文献标识码:A  文章编号:1674-9944(2013)02-0066-02
1 引言
郁李(Prunus japonica Thunb)属蔷薇科、樱属。落
叶灌木,高约1.5m,小枝纤细,叶卵圆形,长3~7cm,宽
1.5~2.5cm,先端渐尖,基部圆形,边缘有浅重锯齿,花
先于叶或与叶同时开放,花梗长5~10mm,花直径约
2cm,倒卵形,花瓣粉红色或近白色,核果近球形,直径
约1cm,暗红色,光滑而有光泽,花期3~5月,是园林中
重要的观花、观果树种,常与棣棠、迎春等其他花木配
植,也可作花篱栽植。郁李常规用种子繁殖,花色变化
大,花色的不确定性加大了植物配置难度,限制了郁李
的使用,而微型繁殖技术不但可以快速繁殖,同时使花
色稳定,利于园林利用。
2 材料与方法
2.1 材料
选取健壮的枝条,用饱满而未萌发的侧芽作为外植
体,切成小段,每段长2~3cm。每段带有1个侧芽,用
自来水冲洗15min,在无菌条件下用75%的酒精消毒
30s,再用0.1%升的汞消毒7~8min,最后用无菌水冲
洗6~8遍,在超净工作台上把它们接种于不同的培养
基上。
2.2 方法
2.2.1 侧芽诱导培养
以 MS为基本培养基,不同种类、浓度的生长调节
剂组合形成1~48号侧芽诱导培养基(表1),将外植体
接种于不同的培养基上,培养2周后,观测生长情况。
表1 不同生长调节剂组合培养基编号
单位/(mg/L) BA1.5 BA2.0 BA2.5 BA3.0 KT1.5 KT2.0 KT2.5 KT3.0
NAA0.1  1  7  13  19  25  31  37  43
NAA0.5  2  8  14  20  26  32  38  44
NAA1.0  3  9  15  21  27  33  39  45
IBA0.1  4  10  16  22  28  34  40  46
IBA0.5  5  11  17  23  29  35  41  47
IBA1.0  6  12  18  24  30  36  42  48
2.2.2 增殖培养
根据2.2.1实验结果,将诱导培养中高达到1cm
的侧芽,接种于以 MS为基本培养基,KT浓度分别为
2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L,
IBA浓度分别为0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5
mg/L的丛生芽诱导培养基上,培养2周后,观测生长
情况。
2.2.3 生根培养
将诱导培养中高达到1cm 的侧芽,接种于以1/2
MS为基本培养基,KT浓度分别为0.1mg/L、0.2mg/
L、0.4mg/L,IBA浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L、1.
5mg/L的生根培养基上,培养2周后,观测生长情况。
3 结果与分析
3.1 侧芽诱导培养
外植体在不同的侧芽诱导培养基生长15d,每种培
养基随机抽取10个样本,统计分析诱导率结果,从表2
可以看出NAA对侧芽诱导结果有一定影响,但差异不
显著;IBA对侧芽诱导结果有显著影响,以0.1mg/L
最好,0.5mg/L次之,1.0mg/L最差;BA对侧芽诱导结
66
 宋洪文,等:郁李微型繁殖技术研究 植物研究
果有显著影响;KT对侧芽诱导结果有极显著影响;
NAA×BA的交互作用对侧芽诱导不显著;NAA×KT
和IBA×BA的交换作用对侧芽诱导均显著;IBA×KT
交换作用对侧芽诱导极显著。IBA与 KT组合好于其
他组合,从图1可以看出IBA与KT组合的28号培养
基侧芽诱导率最高,达到87.9%,即 MS+KT1.5+
IBA0.1侧芽诱导效果最好。
表2 不同培养基侧芽诱导率方差分析结果
变异来源 自由度df  Pvalues
NAA处理 2  0.094
IBA处理 2  0.011*
BA处理 3  0.021*
KT处理 3  0.000**
NAA×BA  6  0.084
NAA×KT  6  0.023*
IBA×BA  6  0.031*
IBA×KT  6  0.000**
  注:*代表差异显著,**代表差异极显著。
图1 不同培养基平均侧芽诱导率统计
3.2 丛生芽诱导培养
随机抽取培养基样品各40个,统计分析丛生芽有
效(不含玻璃化或形成愈伤组织的芽)增值率(表3),
KT浓度变化对丛生芽有效增值率影响显著(P<
0.05),KT促进芽分化效果显著(P<0.05),过高浓度
KT产生玻璃化或形成愈伤组织,使丛生芽有效增值率
降低;IBA促进芽生长作用显著(P<0.05),在同一KT
浓度下,随着IBA浓度的升高芽的高生长加大,增值率
降低,而KT在3.0mg/L,IBA 0.10mg/L有效增值率
最高,因而最佳丛生芽诱导培养基为 MS+KT3.0mg/L
+IBA0.1mg/L,有效增值率5.9。
表3 不同培养基侧芽有效增值率方差分析
浓度/(mg/L) KT2.0 KT2.5 KT3.0 KT3.5 KT4.0
IBA 0.1  1.9±0.49Da  3.6±0.14Ca  5.9±0.52Aa  5.2±0.27Ba  1.4±0.13Ea
IBA 0.5  1.6±0.52Ca  3.0±0.21Bb  5.3±0.23Ab  4.9±0.37Aa  1.2±0.06Da
IBA 1.0  1.0±0.54Cb  1.2±0.54Cc  3.3±0.55Ac  2.6±0.42Bb  1.0±0.07Da
IBA 1.5  1.0±0.34Bb  1.0±0.49Bc  1.4±0.67Ad  1.3±0.37Ac  1.0±0.11Ba
        注:同行不同大写字母代表差异显著,同列不同小写字母代表差异显著(P<0.05)。
3.3 生根培养
随机抽取不同培养基各40个样品,统计有效根发生
率(表4),IBA促进生根效果显著(P<0.05),浓度低于
1.0mg/L时随着浓度增加促进生根效果明显,浓度大于
1.0mg/L时,形成愈伤组织、出现玻璃化现象增加,因而
随着浓度增加有效根数量减少;KT抑制根的发生,随着
浓度的增加有效生根率较低。最佳根诱导培养基为1/
2MS+IBA0.5,生根率达85%。
表4 不同培养基有效生根率方差分析
浓度/(mg/L) KT0 KT0.1 KT0.2 KT0.4 KT0.6
IBA 0.5  85.14±2.401Aa  76.43±1.352Ba  70.54±4.687Ca  51.20±1.243Da  45.12±1.652Ea
IBA 1.0  54.21±2.290Ab  34.23±1.402Bb  31.16±1.258Bb  25.12±1.293Cb  21.82±0.934Cb
IBA 1.5  8.18±0.123Ac  8.06±0.205Ac  7.09±1.356Ac  6.46±1.112Ac  6.06±0.943Ac
        注:同行不同大写字母代表差异显著,同列不同小写字母代表差异显著(P <0.05)。
4 结语
郁李微型繁殖诱导侧芽分化最佳培养基:MS+
KT1.5+IBA0.1mg/L,诱导率达到87.9%;丛生芽诱
导最佳培养基:MS+KT3.0mg/L+IBA0.1mg/L,增
值率为5.9;生根最佳培养基:1/2MS+IBA0.5mg/L,
生根率85%。
参考文献:
[1]周以良,董世林,聂绍荃.黑龙江树木志[M].哈尔滨:黑龙江科技
出版社,1986.
[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版
社,1991.
[3]谷瑞升,蒋湘宁.植物离体培养器官发生调控机制的研究进展
[J].植物学通报,1999(3):238~294.
76