全 文 ：黄花瓦松中总三萜成分的含量的测定
王翔飞 1 潘旭东 2 刘雯霞 1 谭 勇 1
(1.新疆特种植物药资源教育部重点实验室石河子大学药学院 , 新疆 ,石河子 , 832002
2.新疆石河子大学农学院 , 新疆 ,石河子 , 832003)
【摘要】 目的:本文以新疆产瓦松作为研究对象 ,采用比色法 ,测定瓦松有效成分总三萜的含量。方法:以齐墩果酸作为
对照品 ,以 5%香草醛 -冰醋酸 、高氯酸作为显色剂 ,在 540nm波长处处测定样品吸收度。结果:齐墩果酸在 4 ～ 16μg/ml线性
范围内 ,线性关系良好 ,其回归方程为:A=0.1082C+0.1105, r=0.9981,所测瓦松中总三萜成分为 1.51%, RSD=1.31%。
【关键词】 瓦松;总三萜;比色法
【中图分类号】 R284.2 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-8517(2009)10-0011-01
黄花瓦松(Orostachysspinosa(L.)C.A.Mey.)为景天
科瓦松属(Orostachys)二年生肉质草本植物 , 又名昨叶荷草 、
向天草 , 为我国传统用药 [ 1] 。其性味酸 、苦 、凉(《唐本草 》
等),归肝 、肺 、脾经(《本草再新》),具有清热解毒 、凉血止血 、
利湿消肿 、抗菌消炎等功效 , 中国药典(2005年版)对其进行
了收录。瓦松属植物全世界约有 13种 , 主要分布于温带地
区 , 我国约有 10种 ,在新疆也有着广泛的分布(新疆药用植物
志第三册)。经研究表明 , 萜类化合物是其主要有效化学成
分之一。为了更好地利用和开发其药用成分 , 本实验以齐墩
果酸为对照 , 采用 5%香草醛 -冰醋酸 、高氯酸显色的方法 ,
首次对瓦松中总三萜类成分的含量进行测定 , 为其进一步开
发利用提供了可靠的鉴定依据。
1 试药及仪器
试药:所用试剂均为国产分析纯 ,黄花瓦松采自新疆农九
师 165团。齐墩果酸对照品购于武汉卓康科技发展有限公
司。仪器:水浴锅(SB-1000上海爱明仪器有限公司)、分光
光度计(722N型上海精密科学仪器有限公司)
2 方法 [ 2 ～ 5]及结果
2.1 对照液的制备 精确称取齐墩果酸对照品 20mg, 置于
100ml容量瓶中。加甲醇溶液稀释至刻度 ,摇匀 , 备用。
2.2 测定波长的选择 将齐墩果酸对照品加显色剂后 , 于
分光光度计上扫描 , 得吸收光谱图 , 结果如图 1, 齐墩果酸在
540nm处有一吸收峰 ,故确定 540nm为测定波长。
2.3 显色剂用量及条件选择
2.3.1 5%香草醛 -冰醋酸溶液用量的选择 取齐墩果酸
对照品溶液 1.0ml5份 , 水浴挥干 , 分别加入 5%香草醛 -冰
醋酸溶液 0.2、 0.3、0.4、0.5、 0.6ml, 各加入高氯酸 1.4ml, 置
70水浴加热 15min, 冰浴冷却后 , 转移至 10ml容量瓶中加乙
酸乙酯稀释至刻度。摇匀 , 在 540nm波长处测定吸收值 , 结
果见表 1。结果表明 5%香草醛 -冰醋酸用量为 0.4ml时最
佳。
2.3.2 高氯酸的用量的选择 取齐墩果酸对照品溶液 1.
0ml5份 , 水浴挥干 , 分别加入 5%香草醛 -冰醋酸溶液 0.
5ml,高氯酸 1.0、 1.2、 1.4、 1.6、 1.8ml, 置 70℃水浴加热 15
min,冰浴冷却后 , 转移至 10ml容量瓶中加乙酸乙酯稀释至刻
度。摇匀 , 在 540nm波长处测定吸收值 , 结果见表 2。结果表
明 , 高氯酸用量为 1.6ml时最佳。
表 1 不同香草醛 -冰醋酸用量结果
5%香草醛 -冰醋酸用量(ml) 吸收值(A)
0.2 0.265
0.3 0.324
0.4 0.392
0.5 0.335
0.6 0.306
表 2 不同用量高氯酸测定结果
5%香草醛 -冰醋酸用量(ml) 吸收值(A)
1.0 0.286
1.2 0.343
1.4 0.382
1.6 0.389
1.8 0.383
2.4 对照曲线的制备 精确吸取对照液 0.2、0.3、0.4、0.5、
0.6、0.7、0.8ml, 分别置具塞试管中 , 挥去溶剂 , 准确加入 5%
香草醛 -冰醋酸 0.4ml、高氯酸 1.6ml, 混匀 , 置 7O℃恒温水
浴中加热 15min,冷却至室温 , 并转移至 10ml容量瓶中加乙
酸乙酯稀释至刻度 , 摇匀 ,在 540nm波长处测定吸收度 ,以不
加对照品溶液而直接加 5%香草醛 -冰醋酸 0.4ml, 高氯酸 1.
6ml, 用乙酸乙酯稀释至刻度的混合溶液为空白对照 , 并以 A
对浓度 C回归得方程:A=0.1082C+0.1105, r=0.9981, 线
性范围在 4 ～ 16μg/ml。
2.5 供试品溶液的置备 精确称取瓦松 25mg。置 25ml容
量瓶中。加乙醚 15ml。超声提取 3O分钟 , 再添加乙醚至刻
度。精密吸取 15.0ml, 置于 25ml容量瓶内 ,挥干溶剂 , 加甲醇
稀释至刻度 , 摇匀。
2.6 含量测定方法 精确称取供试液溶液 3ml, 加入 10ml
容量瓶内 , 挥干溶剂 , 加乙酸乙酯至刻度 , 再从中精密吸取
4ml溶液加入 10ml容量瓶内 ,挥干溶剂后 , 加入 5%香草醛 -
冰醋酸 0.4ml、高氯酸 1.6 ml, 混匀 , 并由乙酸乙酯稀释至刻
度 ,按样品测定项下操作。代入标准曲线方程 ,计算含量。 结
果表明总三萜类成分含量为 1.51%(n=5), RSD=1.31%。
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药 物 研 究　　　　　　　　　　　　　　中国民族民间医药
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双相滴定法测定硝酸咪康唑溶液的含量
陈树新 蔡先东 陆 颖
(佛山市第一人民医院药剂科 , 广东 ,佛山 , 528000)
【摘要】 目的:建立硝酸咪康唑溶液的简便含量测定方法。方法:采用阴离子表面活性剂双相滴定法 ,以磺基丁二酸钠二
辛酯为滴定液 ,用二甲基黄 -溶剂蓝 19混合指示液 ,在酸性条件下进行滴定 ,测定硝酸咪康唑含量。结果:阴离子表面活性剂
双相滴定法测硝酸咪康唑溶液中硝酸咪康唑的含量 ,平均回收率为 100.4%, RSD为 1.03%(n=9)。结论:阴离子表面活性剂
双相滴定法测硝酸咪康唑溶液中硝酸咪康唑含量 ,方法可行 、简便 、快捷。
【关键词】 双相滴定法;硝酸咪康唑溶液;含量
【中图分类号】 R969.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-8517(2009)10-0012-02
硝酸咪康唑为咪唑类抗真菌药 , 为白色或类白色的结晶
或结晶性粉末 , 无臭或几乎无臭。在甲醇中略溶 , 在三氯甲烷
或乙醇中微溶 , 在水或乙醚中不溶 [ 1] , 常制作成乳膏剂 、搽
剂 、栓剂和胶囊剂等。硝酸咪康唑作为溶液剂在临床使用目
前国内较少报道。为了配合临床需要使用硝酸咪康唑溶液 ,
通过处方 、配制工艺的摸索及体外药敏试验结果 , 研制出 0.
01%硝酸咪康唑溶液 [ 2] , 为进一步控制该制剂的质量 , 笔者
采用阴离子表面活性剂双相滴定法对硝酸咪康唑溶液进行含
量测定 , 现报道如下。
1 仪器及试药
1.1 仪器设备 玻璃仪器 、电子天平(日本 AND)、卧式圆
型灭菌器(上海)等。
1.2 试药 硝酸咪康唑(上海集成药厂 , 批号 20050601)、吐
温 -80(广州器化医疗设备有限公司 ,批号:050515)、氯化钠
(台山市新宁制药有限公司 , 批号:20051202)、磺基丁二酸钠
二辛酯(上海试剂二厂)、溶剂蓝 19(国药集团化学试剂有限
公司 , 批号:wc20050125)、二甲基黄(天津市化学试剂研究
所 ,批号:20051111)、氯仿(分析纯 , 广州市海珠区化学试剂
厂 ,批号:20060102)等。
2 处方与制备
2.1 处方 硝酸咪康唑 0.1g, 氯化钠 9.0g, 吐温 -80 3.
0ml, 纯化水加至 1000ml。
2.2 配制方法 取硝酸咪康唑加吐温 -80搅拌混和后 , 搅
拌下加入适量 80 ℃左右纯化水 , 再加入氯化钠使溶解 , 放冷
后定容至 1000ml,含量测定合格后滤过分装 , 100 ℃45min灭
菌 ,即得 。作供试品备用。
3 测定方法 [ 3]和结果
3.1 滴定液 、指示剂的配制
3.1.1 磺基丁二酸钠二辛酯试液的配制 取磺基丁二酸钠
二辛酯 0.9g加水 50ml微温使之溶解 , 冷却至室温后加水稀
释至 200ml, 即得磺基丁二酸钠二辛酯试液。备用。
3.1.2 二甲基黄 -溶剂蓝 19混合指示液的配制 取二甲
基黄和溶剂蓝 19各 15mg,加氯仿 100ml, 振摇溶解 , 即得二甲
基黄 -溶剂蓝 19混合指示液。备用。
2.7 稳定性试验 同一份样品按上述方法处理 , 在 1日之
内 , 隔 1h测定 , 共测 6次 , 得平均含量为 1.50, RSD为 1.
58%, 结果说明显色反应在 6h基本稳定。
2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的瓦松粉末 0.
2g, 6份 ,精密加入齐墩果酸对照品 1mg,照供试品溶液制备方
法制成 10ml样品液 ,各吸取 0.1ml, 依法显色后测定吸收度 ,
见表 3, 计算回收率 , 得平均回收率为 98.718%, RSD=0.
8644%。
表 3 回收率测定结果
取样量(g)样品含量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)
0.2012 0.3018 1 1.3000 99.40
0.1986 0.2979 1 1.2899 97.31
0.2036 0.3054 1 1.2962 96.99
0.1996 0.2994 1 1.2938 98.13
0.2135 0.3203 1 1.3139 98.00
0.2017 0.3152 1 1.3100 98.35
3 讨论
三萜类化合物为药用植物中主要的有效化学成份之一 ,
对药用植物黄花瓦松中总三萜成分的测定未见文献报道 , 本
文所得结果表明黄花瓦松中三萜类成分含量较高 , 作为我国
的传统用药 , 可对其进行更深入的研究与开发。比色法是测
定三萜类化合物常用方法 ,本文探讨了显色条件以及反应后
放置时间对含量测定的影响 , 结果表明 ,香草醛 -冰醋酸溶液
以及高氯酸用量等因素的影响较为显著 ,反应后的放置时间
在 6h内基本稳定 , 此方法简单可行 , 其结果较稳定 , 重现性
好 ,为测量瓦松中活性成分总三萜类成分提供了一种有效可
靠的分析方法。
参考文献
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(收稿日期:2009.03.14)
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