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恩施州火棘营养成分鉴定及其对小鼠抗疲劳作用的研究



全 文 :作者简介 覃红斌( 1966 - ) ,男,湖北恩施人,副教授,主要从事中药抗衰老研究。
恩施州火棘营养成分鉴定及其对小鼠
抗疲劳作用的研究
覃红斌
湖北民族学院医学院( 湖北 恩施 445000)
【摘要】目的 研究火棘( Pyracantha fortuneana) 的主要营养成分及其抗疲劳效果。方法 把饲喂不同比例的火棘
饲料后的昆明小鼠,在抗疲劳实验中,以血清乳酸脱氢酶( LDH) 、血乳酸( BLA) 、肌糖原( MG) 、肝糖原( LG) 等 4 个
生理参数为指标观察火棘的抗疲劳效应。结果 恩施州火棘均含有丰富的糖类、蛋白质、脂类,特别是 8 种必需氨
基酸和多种不饱和脂肪酸,多种维生素等;饲喂 4 周火棘剂的小鼠,其 LDH、LG 含量均显著高于对照组;其抗疲劳
时间亦显著增长,且抗疲劳实验 30 min和 60 min后的血乳酸( BLA) 水平均低于对照组。结论 恩施州火棘营养成
分高,有较好的抗疲劳作用。
【关键词】恩施州;火棘;小鼠;抗疲劳
【中图分类号】R332; D95 - 33 【文献标识码】A 【文章编号】1008 - 8164( 2011) 01 - 0019 - 03
Determination of Nutrients of Pyracantha fortuneana in Enshi
and the Anti - fatigue Effect in Mice
QIN Hong - bin
( Medical College,Hubei University for Nationalities,Enshi 445000,China)
【Abstract】Objective to analyze major nutrients of Pyracantha fortuneana in Enshi and compare
the anti - fatigue effect and mechanism of Pyracantha fortuneana in different proportions.Meth-
ods we fed Kunming mice with Pyracantha fortuneana in different proportions and then ob-
served the anti - fatigue effect of Pyracantha fortuneana by the 4 physiological parameters,the
serum lactic dehydrogenase ( LDH) activity,blood lactate ( BLA) ,muscle glycogen ( MG) and
liver glycogen ( LG ) as standards in the anti - fatigue experiment.Results Pyracantha fortu-
neana in Enshi was rich in nutrients such as sugar,protein and lipid,in particular,8 essential a-
mino acids for human body and a variety of unsaturated fatty acids,vitamins,etc.The LDH and
LG contents of mice by fed with Pyracantha fortuneana for 4 weeks were significantly higher
than the control group and the anti - fatigue time also significantly increased.The BLA content
was lower than the control group on average within 30 mins and 60 mins after the fatigue ex-
periment.Conclusion Pyracantha fortuneana in Enshi was rich in nutrients and had a good effect
on resisting fatigue.
【Key words】Enshi; Pyracantha fortuneana; mice; anti - fatigue
火棘( Pyracantha fortuneana) 又叫赤阳子、火把
果、红火棘、小红果等,为蔷薇科苹果亚科火棘属的
野生灌木果树植物,湖北恩施地区叫红果泡、救命
粮、红壳刺等。火棘始载于《滇南本草》,其果实性
味干酸,药用具有健脾消积,生津止渴,清热解毒,活
血止血的功效[1]。《本草纲目》中详载: “通十二经
脉,除五脏恶气,久服可轻身耐老”。目前已有研究
表明,火棘具有抗疲劳、抗应激、抗缺氧、抗氧化和增
强免疫功能等作用[2]。本研究旨在鉴定恩施州新
塘火棘和双河火棘的营养成分,为开发火棘的药用
第 28 卷第 1 期( 第 19 页)
2011 年
湖北民族学院学报·医学版
Journal of Hubei University for Nationalities·Medical Edition
Vol. 28 No. 1 P. 19
2011
价值和食用价值提供理论依据; 并观察以不同比例
的火棘饲料喂养的小鼠抗疲劳的效果,以进一步探
讨火棘抗疲劳作用机制。
1 材料与方法
1. 1 实验材料
1. 1. 1 实验动物:由武汉大学医学院实验动物中心
提供。昆明小鼠封闭群品系,35 ~ 40 g,雌雄各半。
1. 1. 2 火棘的来源:火棘果实分别采摘于恩施市新
塘和双河乡,由湖北中医学院药用植物鉴定研究所
鉴定为火棘,挑选上好的果实并晒干磨粉。
1. 1. 3 药品与试剂: 血乳酸 ( BLA) 、乳酸脱氢酶
( LDH) 、肝糖原 ( LG) 、肌糖原 ( MG) 等测定试剂盒
由南京建成生物工程研究所提供,测定步骤按试剂
盒说明书进行。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 营养成分的鉴定: 参考侯建军的方法进
行[3]。微量元素的测定用日本岛津 AA - 650 型原
子吸收分光光度计测定火棘提取液 Cu、Fe、Zn、Mn、
Co、Ni、Cd、Po,用日本岛津 DF - 540 型荧光分光光
度计测定火棘提取液 Se 的含量。VB1、VB2、VB6、
VPP、VE、Vc、脂肪酸、果胶蛋白质、氨基酸的测定等
按照参考文献方法[4]测定。
1. 2. 2 实验分组: 取小鼠 147 只,随机分成 7 组:
( 1) 对照组:饲喂普通饲料,( 2) 维生素组:饲喂复合
维生素饲料; ( 3 ) 2%的火棘饲料; ( 4 ) 4%的火棘饲
料; ( 5) 6%的火棘饲料; ( 6 ) 8% 的火棘饲料; ( 7 )
10%的火棘饲料。每组均为 21 只。
1. 2. 3 血乳酸( BLA) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、肝糖原
( LG) 、肌糖原( MG) 测试: 从每组取小鼠 6 只,抗疲
劳实验前,眼眶放血制血清送检,测试 BLA、LG、
MG、LDH活力。
1. 2. 4 小鼠的抗疲劳实验: 把小鼠饲喂 4 周后,每
小组取 13 只按小鼠体重 10%负重砝码,在 40 cm
深、直径为 20 cm、水温 25 ~ 27℃的标本瓶中游泳,
进行抗疲劳试验。将小鼠头部沉入水下 5 s 后迅速
捞起,记录其游泳时间,恢复 30min后各取 4 只眼眶
放血制备血清,测试 BLA,余下各组 4 只恢复 60 min
后再眼眶放血制血清送检测试 BLA。
1. 3 统计学方法 实验数据使用 ANOVA 以及
Tukeys test分析。P < 0. 05 表示有统计学意义。
2 结果
2. 1 火棘营养成分鉴定
2. 1. 1 火棘中微量元素及其含量:新塘火棘和双河
火棘的微量元素差别不明显,虽然 Cu、Fe、Zn 等微
量元素的含量略显差别,但无统计学意义,可能与产
地地质和矿物的分布有关。见表 1。
表 1 火棘中的微量元素及其含量( mg /kg)
产地 Cu Fe Zn Mn Co Ni Cd Po Se
新塘火棘 10. 16 80. 58 23. 99 28. 42 0. 15 0. 38 0. 10 0. 51 0. 18
双河火棘 18. 13 90. 16 18. 57 30. 54 0. 18 0. 41 0. 07 0. 43 0. 14
2. 1. 2 火棘中维生素的种类及其含量:新塘火棘和
双河火棘所含维生素种类多,如 VC、VB1、VB2、VE
等含量相对较高。见表 2。
表 2 火棘中维生素的种类及其含量( mg /kg)
产地 VC VE VB1 VB2 VB6 VPP 胡萝卜素
新塘火棘 632. 4 788. 9 256. 3 234. 8 88. 9 211. 2 135. 4
双河火棘 581. 1 684. 3 302. 4 243. 9 84. 3 173. 2 127. 8
2. 1. 3 火棘鲜果中部分酶的种类和活性:新塘火棘
和双河火棘均有较高的 SOD活性,同时火棘果实中
含有过氧化氢酶、过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、果
胶酶等。见表 3。
表 3 火棘果实中部分酶的活性
产地 新塘火棘 双河火棘
过氧化物酶( 氧化愈创木酚)
/μmol1 g - 11 min -1 0. 09 0. 06
过氧化氢酶( 氧化 H2O2 )
/μmol1 g - 11 min -1
128. 43 122. 23
多酚氧化酶( 氧化 Vc)
/μmol1 g - 11 min -1 38. 65 40. 18
抗坏血酸氧化酶( 氧化 Vc)
/μmol1 g - 11 min -1 0. 27 0. 32
果胶酶( 生成游离半乳糖醛酚)
/mmol1 g - 11 h -1 0. 44 0. 58
超氧化物歧化酶
( SOD) /U·g -1 288. 32 254. 71
2. 2 火棘对小鼠代谢的影响
2. 2. 1 LDH 活力、MG、LG 与 BLA 值: 维生素组各
项指标显著大于对照组( P < 0. 05) 。2% ~ 6%火棘
组 MG和 LG 含量均显著大于对照组( P < 0. 05 ) ,
BLA含量无统计学意义( P > 0. 05 ) ; 4% ~ 6%火棘
组 LDH活力显著大于对照组( P < 0. 05 ) ; 8%火棘
与对照组比较 MG 含量有显著性差异 ( P < 0. 05 ) ;
10%火棘与对照组比较无明显统计学差异 ( P >
0. 05) 。见表 4。
2. 2. 2 力竭游泳后血乳酸值:维生素组的抗疲劳时
间比对照组延长 3. 25 min,且差异显著( P < 0. 01 ) ;
2% ~6%火棘饲喂的小鼠抗疲劳时间比对照组延长
1. 18 ~ 3. 69 min,差异显著( P < 0. 01) ; 8% ~ 10%火
棘饲喂的小鼠抗疲劳时间与对照组相比,其差异无
统计学意义( P > 0. 05) ,见图 1。
02 湖北民族学院学报·医学版 第 1 期
表 4 各组小鼠 LDH活力、MG、LG、BLA值比较( x ± s)
组别 MG( mg /L) LG( mg /L) BLA( mg /L) LDH( mg /L)
对照组 1870 ± 24. 24 1. 89 ± 0. 63 28. 26 ± 5. 11 146 ± 11. 82
维生素组 3233 ± 21. 70* 3. 28 ± 0. 58* 24. 27 ± 7. 42* 197 ± 16. 10*
火棘( 2% ) 组 2019 ± 22. 28# 2. 59 ± 0. 54# 26. 71 ± 6. 51 161 ± 15. 8
火棘( 4% ) 组 2830 ± 27. 47# 3. 01 ± 0. 77# 26. 58 ± 7. 47 189 ± 19. 91#
火棘( 6% ) 组 2330 ± 22. 71# 2. 353 ± 0. 44# 25. 32 ± 6. 36 178 ± 19. 90#
火棘( 8% ) 组 2330 ± 22. 71# 1. 97 ± 0. 97 27. 68 ± 5. 09 151 ± 14. 41
火棘( 10% ) 组 1710 ± 22. 78 1. 70 ± 0. 46 27. 82 ± 4. 49 127 ± 8. 08
注:与对照组比较,* P < 0. 05;对照组比较,#P < 0. 05
图 1
2. 3 血乳酸变异级差 4% ~ 6%火棘在游泳 30
min以后 BLA含量明显低于其它组,60 min 以后维
生素组及 2% ~ 6% 火棘组均能降低 BLA 含量,
8% ~10%火棘不能降低血液中的 BLA。见图 2。
图 2 游泳 30、60 minBLA水平
3 讨论
疲劳产生的机制极其复杂,大致可分为中枢性
疲劳( 定位于中枢神经系统) 和周围性疲劳( 定位于
脊髓运动神经、神经肌肉接点和骨骼肌) 。这两大
机制中又贯穿着各种假说,如能量耗竭学说、代谢产
物堆积学说及氧自由基脂质过氧化学说等,其中氧
自由基脂质过氧化被认为是疲劳产生的重要机制。
而在过量运动期间添加具有抗氧化作用的营养素
( VE、VA、VC及 Se等) ,能对机体产生保护作用,使
机体免受自由基的损伤,增强运动能力。如小鼠补
充还原型谷胱甘肽后,游泳能力提高 20% ~
40%[7]。
建立游泳模型,测疲劳时间,力竭游泳后 30
min、60 min的 BLA值,结果显示维生素组的抗疲劳
时间比对照组延长 3. 36 min,且有显著性差异,说明
维生素具有抗疲劳作用;饲喂 2% ~ 6%火棘粉的大
鼠抗疲劳时间比对照组延长 1. 17 ~ 3. 59 min,且差
异有很高显著性( P < 0. 01 ) ,说明 2% ~ 6%火棘粉
具有一定的抗疲劳作用; 8% ~10%火棘粉组抗疲劳
时间与对照组相比,差异无统计学意义( P > 0. 05) ,
说明 8% ~10%火棘粉无明显抗疲劳作用; 力竭游
泳后 30 min 4% ~ 6%火棘粉组 BLA 含量与对照组
相比有显著差异( P < 0. 05 ) ,说明 4% ~ 6%火棘粉
组能有效降低运动产生的乳酸含量,且在运动初期
就表现明显。60 min 后维生素组和 4% ~ 6%火棘
粉组与对照组相比,均有显著性差异( P < 0. 01) ,说
明维生素和 4% ~ 6%火棘粉对运动所产生的乳酸
均有清除作用。由于各组抗疲劳运动前的血乳酸含
量不同,故仅仅使用抗疲劳后 30 min 和 60 min 的血
乳酸含量差异性还不足以说明动物在疲劳运动后乳
酸清除速度大小,因此依据表 3 与表 2 推算出了各
组血乳酸变异级差,结果显示 4% ~ 6%火棘粉在游
泳 30 min以后 BLA含量明显低于其它组,说明 4%
~6%火棘粉能有效清除运动产生的乳酸,并且在乳
酸产生早期就开始起作用。60 min以后维生素组及
2% ~6%火棘粉组均能不同程度地降低 BLA 含量,
8% ~10%火棘粉不能降低血液中的 BLA,说明维生
素和 2% ~6%火棘粉对运动所产生的乳酸均有清
除作用,其中 4% ~6%火棘粉清除能力最强,8% ~
10%火棘粉效果不明显。
目前对火棘的研究工作主要集中在对火棘营养
成分和化学成分的研究方面,对火棘有关成分的药
理、毒理和人体对其吸收和利用程度及临床研究不
够,有必要研究火棘有关成分对脂代谢、糖代谢、肥
胖症、癌症、衰老和疲劳、以及消化功能的影响及其
作用机理,在此基础上开发相应的营养强化剂或有
关疾病的预防或治疗剂,使火棘真正实现它的价值。
( 下转第 24 页)
12第 1 期 湖北民族学院学报·医学版
食管鳞癌 1 例,浅着色区不典型增生的诊断率为
63. 6%,说明浅着色区对食管癌前病变有一定诊断
意义。在本组染色中我们发现,染色前 1 例内镜下
表现为隆起病变,表面糜烂,覆污秽苔,拟诊为食管
癌,染色后为深棕色,病理诊断食管上皮细胞增生性
病变; 1 例染色前诊断为食管息肉,染色后为不着
色,病理证实为食管鳞癌;在染色前诊断为反流性食
管炎的 24 例病变中,染色后发现其中 1 例,病灶呈
条索状糜烂、浅着色区,病理诊断为早期食管鳞癌,
认为浅着色不能排除食管癌,这与王兴刚等[3]的结
果相一致。卢戈氏碘液食管染色在一定程度上可以
减少误诊和漏诊,提高取材的准确率及内镜诊断符
合率。
靛胭脂是一种非吸收性染料,可沉积于凹陷区,
在内镜下形成浅蓝色对照,能够清晰地显示病灶轮
廓,有利于发现微小凹陷病变以及扁平隆起病变。
美兰则是一种吸收性染料,不被正常胃黏膜吸收,可
被肠化生的上皮细胞吸收,同时,美兰极易与恶性坏
死物结合,着色的深浅与恶性坏死物的多少正相
关[4],分化程度越低,着色就越深,从而形成不同程
度的染色。靛胭脂染色可以发现内镜下难以发现的
微小病灶,美兰则对病灶的病理学背景有一定的反
映,二者结合,指导内镜下活检,有助于提高早期胃
癌及癌前病变的检出率。本组胃黏膜染色出现了明
显染色分界区、无明显染色分界区以及不染色区,其
中,明显染色分界区早期胃癌和上皮内瘤变的检出
率分别为 44. 26%、15. 15%,而无明显染色分界区
早期胃癌和上皮内瘤变的检出率分别为 54. 1%、
3. 03%,明显染色分界区早期胃癌以及癌前病变的
检出率均明显高于无明显染色分界区( P≤0. 01 ) 。
胃黏膜美兰 -靛胭脂双重染色后,边界清晰的染色
区对于早期胃癌和癌前病变有一定的指示意义。
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