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槭叶草对PEG-6000模拟干旱胁迫的生理响应



全 文 :·园林花卉·植物 北方园艺2013(22):74~78
第一作者简介:张爽(1988-),女,硕士,现主要从事园林植物栽培
与应用研究工作。E-mail:410464564@qq.com.
责任作者:董然(1966-),女,博士,教授,现主要从事长白山野生植
物的引种驯化等科研工作。E-mail:1836630983@qq.com.
基金项目:吉林省科技厅科技支撑计划资助项目(20100259)。
收稿日期:2013-06-19
槭叶草对PEG-6000模拟干旱胁迫的生理响应
张   爽1,赵   纯2,董   然1,赵   芮1,许 嘉 雯1
(1.吉林农业大学 园艺学院,吉林 长春130118;2.长春市绿化管理处,吉林 长春130062)
  摘 要:以长白山槭叶草(Mukdenia rossi(Oliv)Koidz)1a生种苗为试材,研究了不同浓度
(0%(CK)、10%、15%、20%、25%)和不同时间(24、48、72、96h)聚乙二醇6000(PEG-6000)模拟干
旱胁迫对槭叶草叶片生理生化指标的影响及其耐旱性,以期为槭叶草在园林绿化中的应用提供
理论依据。结果表明:槭叶草可通过渗透调节作用适应轻度干旱胁迫,表现出一定的耐旱性。随
胁迫强度的增加和胁迫时间的延长槭叶草叶片相对含水量(RWC)呈下降趋势,相对电导率
(REC)呈上升趋势,丙二醛(MDA)含量大体呈上升-下降-上升的趋势;脯氨酸(Pro)含量呈先升后
降的趋势;SOD活性呈上升-下降-上升-下降的趋势,均与对照差异显著(P<0.05)。相关性分析
表明,REC、MDA含量、Pro含量与RWC呈显著性相关,SOD活性与RWC无显著性相关。
RWC、REC、MDA含量、Pro含量可作为评价槭叶草耐旱性的依据。
关键词:槭叶草;PEG;干旱胁迫;生理响应
中图分类号:S 567.239 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2013)22-0074-05
  槭叶草(Mukdenia rossi(Oliv.)Koidz)属虎耳草科
(Saxifragaceae)槭叶草属(Mukdenia)多年生草本植物,
在我国东北、朝鲜有分布,在长白山区主产于长白、安
图、临江、集安等县市,生长在海拔300~900m的水边沟
谷石崖上或山坡石砬子上[1-3]。早春开花,花色洁白素
雅,叶形独特,秋叶红色,是集药用价值、食用价值和极
高观赏价值于一体的优良野生地被植物[4]。有部分学
者从槭叶草的原生境推测其具有抗旱性[4-5],但也有学
者持不同观点。宫敬利[6]在槭叶草引种驯化技术研究
中发现槭叶草在炎热干旱的天气叶片容易过早老化;马
全等[7]也认为槭叶草应栽植于假山溪水的绿化区和绿
化带。由此可见槭叶草对土壤水分和空气湿度的要求
各有不同,不能确定其耐旱性强弱。目前对槭叶草的研
究主要集中在有效成分、药理、资源调查等方面,而对引
种驯化、栽培繁殖技术和园林应用方面的报道较少,对
其生态适应性的研究更鲜见报道。
现通过聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫处理长
白山槭叶草的1a生种子苗,测定槭叶草在不同浓度
PEG-6000处理下生理生化指标的变化,旨在研究槭叶
草对干旱胁迫的生理响应,并初步判断其耐旱性,以期
为筛选观赏性好、抗旱性强的野生园林地被植物提供理
论依据,为其引种驯化和园林绿化应用提供科学指导。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为栽植于吉林农业大学园林试验基地的
长白山槭叶草的1a生种苗,2012年11月将槭叶草根
茎移栽到直径为8cm的营养钵中,盆内基质为园土∶
沙子∶草炭=2∶1∶1,置于温室内生长,期间根据温室
的条件进行正常肥水管理(0.3%尿素和磷酸二氢钾,
2次/月)。 
1.2 试验方法
试验于2013年4月在吉林农业大学园艺学院园林
基地进行。2013年3月选取长势良好,叶数、冠幅基本
一致的槭叶草,分成5组,每组24盆。用清水小心洗去
根部泥土,再用蒸馏水冲洗数次后放入装有新鲜1/2
Hoagland营养液的透明塑料瓶内恢复生长(每3d更换
1次新鲜的1/2Hoagland培养液)。15d后,用不同浓
度的PEG-6000(W/V)溶液(1/2Hoagland培养液配置)
对供试材料进行模拟干旱胁迫。处理浓度分别为0%
(CK)、10%(100g/L PEG-6000)、15%(150g/L PEG-
6000)、20%(200g/L PEG-6000)、25%(250g/L PEG-
6000),处理时间为24、48、72、96h。每个处理8盆,3次
重复。
1.3 项目测定
选取成熟完整的功能叶片,放入自封袋密封好,迅
速带回实验室。洗净后吸干叶片表面的水分、去除中
脉、剪碎混合,放入自封袋中密封,在4℃冰箱中保存
备用。
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北方园艺2013(22):74~78 植物·园林花卉·
叶片相对含水量(Relative water content,RWC)测
定采用饱和称重法[8];叶片细胞膜透性测定采用电导率
仪法[8];丙二醛含量(Malondiadehyde,MDA)测定采用硫
代巴比妥酸(TBA)法[8];叶片脯氨酸含量(Proline,Pro)
测定采用茚三酮法[8];超氧化物歧化酶活性(Superoxide
dismutase,SOD)测定采用核黄素-NBT法[8]。
1.4 数据分析
采用Excel 2003绘制折线图;用SPSS 17.0软件对
数据进行方差分析和相关性分析。
2 结果与分析
2.1 PEG-6000处理对槭叶草叶片相对含水量的影响
叶片相对含水量(RWC)能够反映植物体内的水分
亏缺情况[9]。由图1可知,随胁迫时间的延长,不同浓度
PEG-6000处理下RWC均呈下降趋势,在96h降至最
低,与对照差异显著(P<0.05)。10%、15%PEG-6000处
理RWC在48h内呈缓慢下降趋势,降幅为8.6%、
16.85%;随着胁迫程度加剧和处理时间的延长,RWC下
降幅度不断增大。在处理96h时,25%PEG-6000处理
RWC降至最低30.83%,低于对照63.76%。
图1 PEG-6000处理对槭叶草叶片相对含水量的影响
Fig.1 Efect of PEG-6000stress on relative
water content(RWC)of Mukdenia rossi leaf
图2 PEG-6000处理对槭叶草叶片相对电导率的影响
Fig.2 Efect of PEG-6000stress on relative electrical
conductivity(REC)of Mukdenia rossi leaf
2.2 PEG-6000处理对槭叶草叶片相对电导率的影响
当植物受到水分胁迫时,细胞膜透性增大,电解质
外渗,从而导致叶片相对电导率升高[10]。由图2可知,
随着PEG-6000处理浓度的增大和胁迫时间的延长,槭
叶草叶片相对电导率(REC)逐渐增大,25%PEG-6000处
理96h时达到最大值,与对照差异显著(P<0.05)。
10%、15%PEG-6000处理REC在0~48h内变化幅度
较小,高出对照9.43%、16.1%,48h后显著增大;而
20%、25%PEG-6000处理REC在0~72h内显著增大,
高出对照50.30%、60.14%,72h后25%PEG-6000处理
REC变化不明显。
2.3 PEG-6000处理对槭叶草叶片丙二醛含量的影响
干旱胁迫会使植物体内活性氧增加,导致膜脂过氧
化,产生丙二醛(MDA)[11]。由图3可知,槭叶草叶片
MDA含量随胁迫程度加剧总体呈先升后降再上升的趋
势,峰值均出现在处理96h时,与对照差异显著(P<
0.05)。在24h时,各处理MDA含量均有所增加,PEG-
6000处理浓度越大,MDA含量上升幅度越大;10%、
15% MDA含量在24~48h内有所下降,20%PEG-6000
处理在48~72h有所下降,随后均迅速上升。25%
PEG-6000处理则在24h急剧上升后一直呈缓慢上升
趋势。
图3 PEG-6000处理对槭叶草叶片丙二醛含量的影响
Fig.3 Efect of PEG-6000stress on MDA content of
Mukdenia rossi leaf
图4 PEG-6000处理对槭叶草叶片游离脯氨酸(Pro)含量的影响
Fig.4 Efect of PEG-6000stress on Pro content of
Mukdenia rossi leaf
2.4 PEG-6000处理对槭叶草叶片游离脯氨酸(Pro)含
量的影响
脯氨酸作为植物体内的主要渗透调节物质,在干旱
胁迫下大量合成和积累,以降低细胞渗透势,促进植物
吸水,起到渗透调节作用[12]。由图4可知,除10%PEG-
6000处理外,其余浓度PEG-6000处理叶片游离脯氨酸
(Pro)含量随着时间延长均呈先上升后下降的趋势,与
对照差异显著(P<0.05)。10%PEG-6000处理Pro含
量呈不断上升趋势,至96h时升至最高;15%、20%、
25%PEG-6000处理在72、72、48h时Pro含量最高。而
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·园林花卉·植物 北方园艺2013(22):74~78
15%PEG-6000处理Pro最大积累量明显高于其它处
理,是对照的8.15倍,与对照差异显著(P<0.05)。
2.5 PEG-6000处理对槭叶草叶片超氧化物歧化酶活性
的影响
SOD是植物组织防御系统中的重要保护酶,能通过
歧化反应清除因水分胁迫而产生的活性氧自由基,防止
细胞膜过氧化,使活性氧的产生和消除处于动态平衡状
态,从而保护细胞免受伤害[13]。由图5可以看出,除
10%PEG-6000处理外,15%、20%、25%PEG-6000处理
SOD活性随时间的延长均呈升高-降低-升高-降低的趋
势,峰值出现在72、72、24h时,与对照差异显著(P<
0.05);而10%PEG-6000处理则呈降低-升高-降低的趋
势,峰值出现在72h时,与对照差异显著(P<0.05)。
15%PEG-6000处理72h时SOD活性最高,是对照的
3.03倍;25%PEG-6000处理96hSOD活性最低,低于
对照10.3%。
图5 PEG-6000处理对槭叶草叶片超氧化物歧化酶活性的影响
Fig.5 Efect of PEG-6000stress on superoxide dismutase(SOD)
activity of Mukdenia rossi leaf
2.6 PEG-6000处理下槭叶草各生理指标相关性分析
由表1可知,REC与RWC、Pro含量、MDA含量之
间呈显著正相关,与SOD活性无显著相关性。RWC与
Pro含量、MDA含量之间呈显著负相关,与SOD活性无
显著相关性。Pro含量与 MDA含量、SOD活性之间呈
显著正相关关系,MDA含量与SOD活性之间无显著相
关性。
表1     PEG-6000处理下槭叶草
    各生理指标相关性分析
  Table 1   Correlation analysis of physiological index of
    Mukdenia rossi leaf under PEG-6000stress
生理指标
Physiological index
相对电导率
(REC)
相对含水量
(RWC)
游离脯氨酸
含量(Pro)
丙二醛含量
(MDA)
SOD
活性
相对电导率(REC) 1
相对含水量(RWC) 0.965** 1
游离脯氨酸含量(Pro) 0.793** -0.669** 1
丙二醛含量(MDA) 0.898** -0.940** 0.655** 1
SOD活性 0.427 -0.341  0.712** 0.438  1
3 讨论与结论
在PEG-6000模拟干旱胁迫下,槭叶草的叶片生理
生化指标发生了明显变化。叶片相对含水量(RWC)可
反映植物在遭受水分胁迫时植物体内的水分状况,是衡
量植物适应干旱胁迫的重要指标之一[9]。试验结果表
明,槭叶草在正常状况下相对含水量较高,随着胁迫加
剧而呈下降趋势。胁迫初期,10%、15%PEG-6000处理
RWC缓慢降低,而随PEG-6000处理浓度的升高和胁迫
时间的延长降幅不断增大,说明槭叶草在水分亏缺较小
时具有一定的保水能力,当胁迫强度增加时,叶片保水
能力逐渐丧失。这一变化规律与大多数研究结果
相同[14-15]。
干旱胁迫时,细胞内活性氧的平衡受到破坏而含量
增多,导致膜脂过氧化,产生大量的 MDA。所以,MDA
含量的多少是指示膜脂过氧化程度的重要指标[18]。该
研究中MDA含量随胁迫程度加剧总体呈先上升后下降
再上升的趋势。MDA含量先升高后降低是槭叶草自我
调节的结果;但随着胁迫时间的延长和PEG-6000浓度
的增大,MDA含量不断上升,且显著高于对照(P<
0.05),说明随着水分亏缺增大,膜脂过氧化程度不断增
大,产生了大量的 MDA。这与邱真静等[16]的研究结果
一致。
质膜是细胞与外界环境进行物质交换和传递信息
的界面结构,对水分变化最为敏感[17]。质膜结构受到破
坏和膜脂过氧化会导致细胞膜透性增大,细胞内电解质
外渗,从而使叶片相对电导率(REC)升高。所以,REC
的大小可以反映细胞膜受破坏的程度[17]。试验结果表
明,各处理REC总体呈上升趋势。处理48h内10%、
15%PEG-6000处理REC变化幅度较小,说明槭叶草在
干旱程度较低时细胞膜未受到损伤,而随着处理浓度的
增大和胁迫时间的延长,细胞膜受到破坏,REC上升幅
度增大,这与大多数研究结果一致[18-19]。而25%PEG-
6000处理72~96h之间电导率没有明显上升,说明细胞
膜已受到严重破坏。
脯氨酸(Pro)是植物体内重要的渗透调节物质[19]。
当植物受到干旱胁迫时,脯氨酸主动积累,以调节植物
体内的渗透势,促进细胞吸水,以利于植物在干旱胁迫
下维持植物体正常生长代谢所需要的水分,提高植物的
抗逆性[20]。该研究中,15%、20%、25%PEG-6000处理
Pro含量变化总体呈先升后降的趋势,分别在72、72、
48h时积累量最大。说明当PEG-6000处理浓度较低和
时间较短时,槭叶草通过Pro的积累进行渗透调节,以
适应干旱胁迫,而随着PEG-6000浓度加大和处理时间的
延长Pro最大积累量减少,槭叶草渗透调节能力不断降
低,这与岳桦等[23]对开蕨的研究结果一致[21]。一般认为,
游离脯氨酸含量越高,植物渗透调节能力越强,其抗旱性
也就越强[22-23]。由此可见,槭叶草具有一定的耐旱性。
正常情况下,植物体内的活性氧的产生和抗氧化系
统处于动态平衡状态。干旱胁迫打破了活性氧的动态
平衡,使活性氧增多。而SOD是清除活性氧系统的第
67
北方园艺2013(22):74~78 植物·园林花卉·
一道防线,它可以催化超氧阴离子自由基发生的歧化反
应,最终使其转变为水和分子氧,保护植物细胞免受活
性氧的损伤[24]。该研究中10%、15%、20%处理大体上
呈先升高后降低的趋势,在72h时升至最高,随后均有
不同程度降低,说明低浓度PEG-6000的短时间处理,能
增强槭叶草SOD活性,以清除由于胁迫产生的活性氧,
这是植物细胞为适应胁迫进行的自我调节。而25%
PEG-6000处理24h时,SOD活性已达到最大值,说明高
浓度PEG-6000胁迫下,植物的自我防御系统迅速受损,
导致SOD活性受到抑制而降低。这与仲伟敏等[25]的研
究结果一致。
大量研究证实,RWC能反映植物体内水分亏缺程
度,是衡量植物耐旱性的重要指标,与耐旱性呈正相关关
系[26-27]。因此,可通过分析各指标与RWC的相关性确定
所测指标是否可以作为评价槭叶草耐旱性的依据。相关
性分析表明,REC、MDA含量和Pro含量与RWC之间均
存在极显著相关性,均可作为评价槭野草耐旱性的依据。
综上所述,在不同浓度PEG-6000胁迫下,随着胁迫
时间的延长,槭叶草各生理指标(REC、RWC、MDA含
量、Pro含量、SOD活性)均受到了不同程度的影响。在
轻度胁迫和短时间处理时,槭叶草可以通过渗透调节作
用适应干旱胁迫,表现出一定的耐旱性;而当胁迫强度
较大和处理时间较长时,槭叶草渗透调节能力降低。
PEG-6000模拟干旱胁迫与土壤干旱胁迫对槭叶草生理
指标的影响是否完全一致及槭叶草在土壤中的水分适
应范围,则有待进一步研究。
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Physiological Responses of Mukdenia rossi Under PEG-6000 Drought Stress
ZHANG Shuang1,ZHAO Chun2,DONG Ran1,ZHAO Rui 1,XU Jia-wen1
(1.Colege of Horticulture,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118;2.Greening Management Ofice of Changchun City,
Changchun,Jilin 130062)
Abstract:Taking the annual seeding of Mukdenia rossi (Olive)Koidz as experimental material,the method of stimulated
drought stress by applying PEG-6000were adopted,the efect of diferent concentrations of PEG-6000(be 0%(CK),
10%,15%,20%,25%respectively)and diferent time(24,48,72,96h)on the physiological and biochemical indexes of
Mukdeniarossiand its drought tolerance were studied,thus provided a theoretical basis for the application of Mukdenia
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·园林花卉·植物 北方园艺2013(22):78~81
        
第一作者简介:王金龙(1978-),男,博士,副教授,现主要从事植物
生理生态学研究工作。E-mail:whitedanny@live.cn.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30900191)。
收稿日期:2013-09-03
生根剂对锦鸡儿属三种植物幼苗生长与
生理性状的影响
王 金 龙1,张 丽 红2,赵 念 席2,高 玉 葆2
(1.天津农学院 农学系,天津300384;2.南开大学 生命科学学院,天津300071)
  摘 要:以内蒙古地区主要的飞播植物小叶锦鸡儿、中间锦鸡儿和柠条锦鸡儿为试材,研究
比较了NK?Ⅱ?298、NK?Ⅱ?888和NK?Ⅱ?16 3种生根剂对其生长和生理性状的影响。结果表明:不同
的生根剂对3种锦鸡儿的株高和生物量影响不同,但对锦鸡儿最终生长状况没有影响;不同植
物、不同指标对生根剂的响应结果并不一致。3种生根剂均显著提高小叶锦鸡儿的净光合速率,
仅生根剂NK?Ⅱ?16提高了中间锦鸡儿净光合速率,生根剂NK?Ⅱ?888和NK?Ⅱ?16显著提高了柠条
锦鸡儿净光合速率;柠条锦鸡儿叶绿素b含量受到生根剂的促进作用影响显著。该试验结果表
明,将生根剂用于这3种植物种群构建的促进作用并不显著,且不同种锦鸡儿对不同生根剂具有
植物特异性反映。
关键词:锦鸡儿;生根剂;飞播
中图分类号:Q 948.1 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2013)22-0078-04
  为了防止草原的进一步退化和治理退化草原,中国
北方和西北地区一直积极探索退化、沙化草原的植被恢
复研究工作。利用飞机播种牧草,是人工改良草地的一
项重要技术措施。国外飞播牧草有长久的历史。澳大
利亚、新西兰等国在第二次世界大战之后不久就把飞播
牧草作为草地建设的基本手段。中国从1979年开始进
行大规模飞播牧草试验已经取得初步成效[1-4]。飞播种
草具有范围广、速度快、成本低、见效快、落种匀、经济效
果好等优点。在地广人稀、植被稀疏、水土流失严重、沙
化、风化严重、草场退化、有一定降水量的内蒙古地区,
    
是绿化荒漠、荒沙,改良退化草场,改善恶劣的生态环
境,促进内蒙畜牧业发展行之有效的途径。
豆科(Leguminosae)锦鸡儿属(Caragana)主要分布
在黄河流域以北干燥地区,西南和西北则以青藏高原为
中心,是我国华北、西北地区植被恢复、环境改善、防风
固沙、水土保持的优质牧草资源[5-6]。小叶锦鸡儿(C.
microphyla)、中间锦鸡儿(C.intermedia)和柠条锦鸡儿
(C.korshinski)具有很强的干旱适应能力(如光合和水
分生理特性)[7-11],且对灌丛下草本植物种群生态位、土
壤微生物群落功能多样性、酶活性等也有改善作
用[12-15],因此,是飞播种草和草原恢复中首选植物。但
由于飞播区域环境恶劣,如何提高锦鸡儿的成活率和生
长速率已成为研究者关注的问题。生根剂可以促进植
物内部的新陈代谢作用和呼吸作用,增强吸水能力,加
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rossiin landscaping.The results showed that the Mukdenia rossi could adapt to mild drought stress through osmo-
regulation thus showed drought resistance to some extent.Along with the increasing of the stress intensity and the
extension time,several changes occurred.The relative water content(RWC)of Mukdenia rossi was in downward trend
while the relative electrolytic conductivity(REC)was in upward trend.The content of malonaldehyde(MDA)was in a
trend of first rising,then faling and bakes to rising again.The proline(Pro)content was in trend of rising after the first
drop.The SOD activity had a trend of up-down-up-down.Al of them showed obvious diference in comparing(P<
0.05).The related analysis indicated that there was a significant correlation between REC,MDA content,Pro content and
RWC.On the contrary,that relation didn’t occur between SOD activity and RWC.Therefore,RWC,REC,MDA content
and Pro content could be used to evaluate the drought tolerance of Mukdenia rossi.
Key words:Mukdenia rossi(Olive)Koidz;PEG-6000;drought stress;physiological responses
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