全 文 ：红檵木花红色素提取物抗菌活性研究初报
卢成瑛 ,唐克华 ,唐　慧 ,黄早成 ,钟　维
(湖南省林产化工工程重点实验室 ,吉首大学张家界校区 ,湖南张家界 427000)
摘　要:用 20%乙醇加微波处理提取红檵木花红色素 ,正丁醇 、石油醚 、乙醚 、乙酸乙酯对粗提液进行纯化 ,牛
津杯法检测花红色素粗提物及色素的各级提取物的抑菌活性 ,以诺氟沙星的抑菌活性为对照 ,计算抑菌系数 。
结果表明红檵木花红色素粗提物及各级提取物对金黄色葡萄球菌痢疾杆菌的生长有明显的抑制作用。
关键词:红檵木;花红色素;抑菌活性;
Priliminary study report of anti-virus activity of the pigment
extracts of Loropetalum chinense var.rubrum Flower
LuChengying ,Tang Kehua ,Tang hui ,Huang Zaocheng ,Zhong Wei
(TheKey Laboratory For Forest Products Chemical Industry Engineering of Hunan ,
Ji ShouUniversity , Zhangjiajie , Hunan , 427000)
Abstract:The red pigment in Lorpetalum chinense var.rubrums f low ers w as ext racted wi th micro-
wave treatment and 20% ethano l , step-purified w ith alcoho l buty1 , petroleum ethe r , ether and
e thy1 acetate.The ant ibacterial activit ies o f the ex t ract and its g radocal ex t ract ions against the
three kinds o f bacteria w ere dete rmined by Ox fo rd Cup method , then the m icrobiostat ic cof ficients
were calculated contracated wi th norf lox acin.The result is that the ex tracts inhibi t the g row th of
shigella dy senteroae and staphy lococlus aureus efficaciously .
Key words:L.chinense var.rubrum;flower pigment s;antibacterial activity
　　红檵木(Loropetalum chinense var.rubrum )属金缕
梅科檵木属白花檵木变种 、常绿小乔木 ,原产湖南浏阳[ 1] 。
野生红檵木 1978年发现后被广泛栽培。红檵木多分枝 ,
小枝被星毛;花 4 ～ 8 朵簇生 ,成头状或短穗状花序 ,有短
花梗 ,肉红色 ,花序长约 1cm ,被毛;苞片线形 ,0.3cm ;萼片
卵形 ,长约 0.2cm ,花后脱落;花瓣 4 ～ 5瓣 ,带状线形 ,长 1
～ 2cm ,先端圆或钝 ,呈淡紫红色或紫红色 。红檵木 1 年
内能多次开花[ 2] ,花叶俱美 ,是优良的园林盆景树种[ 3] ,湖
南浏阳县依托红檵木原产地种质资源优势形成了大规模
的红檵木花卉苗木盆景产业 ,产业现状与发展前景良好 ,
产品广销国内外。
红檵木适于温暖湿润气候及疏松酸性土壤 ,苗木萌发
能力强 ,较耐阴 、耐旱 、耐寒[ 3] ,这决定了红檵木资源的生
态丰富性。当前对红檵木的研究多在分类 、进化 、品系筛
选 、遗传育种 、遗传工程 ,以及生理 、组织培养和园林观赏
植物学方面文献报道 。红檵木枝条中含鞣质 ,种子含多种
脂肪酸 ,花中含异槲皮甙(Isoquerctit rin),叶中含鞣质 、还
原糖 、甙类 、黄酮类 、酚类物质及有机酸 ,具有止血 、消炎 、
镇痛等作用 ,湘西民间也有用红檵木作药用的偏方 ,红檵
木花红色素色泽优良 ,其花色素苷的含量比檵木高 4 ～
7倍 [ 4 ～ 6] ,有研究证实其多种色素具抗氧化 , 抗菌活
性 [ 7 , 8] ,为此我们对红檵木花红色素的抑菌活性进行了
初步研究 ,旨在充分的开发利用国内丰富的红檵木资
源 。
号样进行气质联机定性分析 ,主要成分有十二烷酸乙基
酯 、十四烷酸 、十五烷酸 、十六烷酸 、十七烷酸 、十八烷酸及
相应的乙基酯。
4　结果与分析
从表 1可知 ,峰号 1-31号中 ,第 2号峰对应的物质是
乙醇 ,置信度较高 ,可肯定是样品中的溶剂 ,除第 25号 、30
号峰对应物质置信度分别为 56和 50外 ,其他的置信度都
很小 ,认为这些物质可能是溶剂中的杂质 ,不应是大戟狼
毒的化学成分 。通过杀虫试验及气质联机分析结果表明 ,
大戟狼毒杀虫活性成分为高分子有机酸及相应的乙基酯
类 。
参考文献
1　杨伟文 ,邢有权 , 宋茂森等.7-甲氧基狼毒素的分离与结
构鉴定.高等学校化学报 , 1984 , 5(5):671～ 673.
2　刘桂芳 , 付玉芹 , 侯风飞等.瑞香狼毒化学成分的研究
(I).中草药 , 1996 , 27(2):67～ 70.
3　刘玉玺,王明正 ,孙美玲等.狼毒大戟碱性提取液治疗癫痫
72例临床分析.中国中西医结合杂志 , 1994 , 14(5):282～ 283.
4　陆九芳 ,李总成 , 包铁竹编著.分离过程化学.北京:清华
大学出版社 , 1993.12:106 ～ 140.
5　赵奎群.狼毒类生药原植物调查及分类鉴定研究.中国中
药杂志 , 1995 , 20(1).
9
第3期(总第 76期) 中 国 林 副 特 产 No.3(GSNO.76)
2005年 6月 Forest By-Product and Speciality in China Jun.2005
DOI :10.13268/j.cnki.fbsic.2005.03.005
1　材料与仪器
1.1　材料
红檵木花:2004年 4月采于校园花坛 ,低温保藏备用;
试剂:乙醇 ,乙醚 ,石油醚 ,乙酸乙酯 ,氢氧化钠 ,盐酸 ,
正丁醇 ,氯化钠(AR),蛋白胨 ,牛肉浸膏 ,琼脂(BR),诺氟
沙星胶囊(市售),蒸馏水(自备);
菌种:金黄色葡萄球菌(Saphylocolus aureus),大肠
杆 菌 (Escheichia coli ), 痢 疾 杆 菌 (Shigella
dysenteroae )购自湖南省疾病预防控制中心 ,湖南省林产
化工工程重点实验室冻藏;
培养基:牛肉膏蛋白胨培养基 。
1.2　仪器
旋转蒸发仪(RE540 yamato)、格兰仕微波炉 、pH 计
(HM-205T OA)、冷冻干燥机(FD-1)、培养箱(PW/10-
002)、超净工作台(CCV-1311)、高压蒸汽灭菌器(XM-
52)、1/万天平(AEG-220)。
2　方法
2.1　红檵木花红色素粗提液的制备
冻藏红檵木花 50g ,加 750ml 20%乙醇溶液 、室温浸
提 1h 、微波中档火力处理 4min ,取滤液静置 24h ,过滤 、滤
液 60℃、0.095MPa浓缩至 50ml ,使其生药浓度为 1g/ml。
2.2　红檵木花红色素各级提取物的制备
提取物Ⅰ:红檵木花红色素粗提液 40ml ,加正丁醇∶石
油醚(V∶V/1∶4)混合溶剂 40ml ,混匀 、静置 30min ,取下
层色素液 ,重复 3次得红檵木花色素提取物Ⅰ,无水定容至
40ml(使生药浓度为 1g/ml ,下同)。
提取物Ⅱ:红檵木花红色素提取物Ⅰ30ml ,加无水乙
醚 30ml ,充分摇匀 ,静置 30min ,取下层液 ,重复 3次 、得红
檵木花红色素提取物 Ⅱ ,无菌水定容至 30ml ,备用 。
提取物Ⅲ:提取物 Ⅱ20ml ,加乙酸乙酯 20ml ,充分振
摇后静置 30min ,取下层液 、重复 3 次得红檵木花红色素
提取物Ⅲ ,无菌水定容到 20ml ,备用。
各级提取物用无菌水配成含生药浓度 1g/ml、0.8g/
ml、0.4g/ml、0.2g/ml 、0.1g/ml 、0.05g/ml的试液 ,备用 。
2.3　红檵木花红色素抑菌活性检测[ 9 ～ 12]
菌悬液的制备:供试菌接入试管斜面 , 37℃培养 24h ,
活化菌种斜面内加适量生理盐水 ,刮取菌落 ,混匀 ,稀释成
107 cfu/ml菌悬液 ,备用 。
抑菌实验:取牛肉膏蛋白胨培养基制成无菌琼指平
板 ,每皿加 0.1ml菌悬液 ,涂布涂匀 ,每皿等距离放置牛津
杯 ,牛津杯内各加入提取液 0.2ml , 37℃培养 24h 后观测
记录结果 ,游标卡尺量抑菌圈的大小 ,取 3个平行实验中
抑菌圈平均值。另设0.1mg/ml诺氟沙星液为对照。
3　结果与分析
3.1　红檵木花红色素粗提液抑菌活性检测
红檵木花红色素的粗提液对金黄色葡萄球菌和痢疾杆
菌均有较好的抑制作用 ,对大肠杆菌的抑制效果不明显 ,但
牛津杯周围菌落似有减少 ,提示红檵木花色素对大肠杆菌
可能有微弱的抑制作用(参见表 1)。
表 1　红檵木花色素粗提液的抑菌活性
样液生药
浓度
(g/ml)
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 痢疾杆菌
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
1.0 16.48 64.6 ± 0 18.12 65.5
0.8 16.50 64.7 ± 0 18.25 66.0
0.4 15.00 58.8 ± 0 15.63 56.5
0.2 13.02 51.0 ± 0 12.38 44.1
0.1 12.50 49.0 ± 0 12.15 43.9
0.05 12.23 47.9 ± 0 11.03 39.9
诺氟沙星 25.52 100 27.94 100 27.67 100
注:抑菌系数=提取物抑菌圈直径/诺氟沙星抑菌圈直径×100%;“ ±”表示抑菌圈不明显 ,但牛津杯周围菌落较少 ,下同。
3.2　红檵木花红色素提取物Ⅰ抑菌活性检测
经正丁醇和石油醚处理后的提取物 Ⅰ主要去除了弱
极性和非极性物质 ,它对大肠杆菌仍没有抑制作用 ,而对
金黄色葡萄球和痢疾杆菌仍有抑制作用 ,但比粗提液的抑
菌活性低 。提取物Ⅰ对金葡的抑制效果较痢疾杆菌好(参
见表 2)。
表 2　红檵木花色素提取物Ⅰ的抑菌活性
样液生药
浓度
(g/ml)
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 痢疾杆菌
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
1.0 14.60 57.2 ± 0 14.27 51.6
0.8 14.79 57.9 ± 0 14.22 51.4
0.4 14.47 56.7 ± 0 13.97 50.5
0.2 11.50 45.0 ± 0 13.00 47.0
0.1 ± 0 ± 0 10.87 39.3
0.05 ± 0 ± 0 ± 0
诺氟沙星 25.52 100 27.94 100 27.67 100
10
2005年 中　国　林　副　特　产 第 3期
3.3　红檵木花红色素提取物Ⅱ抑菌活性检测
经正丁醇 、石油醚和无水乙醚萃取后的提取液 ,对
3种菌都有抑制作用 ,对痢疾杆菌的抑制活性最高(表
3)。
表 3　红檵木花色素提取物 Ⅱ抑菌活性测定
样液生药
浓度
(g/ml)
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 痢疾杆菌
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
1.0 11.32 44.4 ± 51.9 17.43 63.0
0.8 11.64 45.6 ± 46.4 15.18 54.9
0.4 11.01 43.1 ± 0 14.96 53.3
0.2 10.85 42.5 ± 0 ± 0
0.1 ± 0 ± 0 ± 0
0.05 ± 0 ± 0 ± 0
诺氟沙星 25.52 100 27.94 100 27.67 100
3.4　红檵木花色素提取物 Ⅲ抑菌活性检测
表 4结果表明 ,经过正丁醇 、石油醚 、无水乙醚和乙酸
乙酯萃取后的提取液 ,对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌生长
有较高的抑制活性 ,对大肠杆菌无抑制作用(参见 4)。
表 4　红檵木花色素提取物 Ⅲ抑菌活性测定
样液生药
浓度
(g/ml)
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 痢疾杆菌
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
抑菌圈直径
(mm)
抑菌系数
(%)
1.0 11.28 44.2 ± 0 12.05 43.5
0.8 10.89 42.8 ± 0 11.59 41.9
0.4 ± 0 ± 0 ± ±
0.2 - 0 ± 0 ± 0
0.1 - 0 - 0 ± 0
0.05 - 0 - 0 ± 0
诺氟沙星 25.52 100 27.94 100 27.67 100
注:“ -”表示无抑菌圈
4　结语与讨论
红檵木花色素各级提取物具有较强的抗菌活性 ,除可用
于开发抗菌消炎药物外 ,还可进一步探索用做食品抗菌防腐
剂和增色剂及其它产品的添加剂 ,具有广阔的开发利用前景。
研究表明 ,红檵木花色素提取液及各级提取物对金黄
色葡萄球菌 、痢疾杆菌有较强抑制作用 ,其最大抑菌系数
(提取物抑菌圈直径/诺氟沙星的抑菌圈直径)分别为
64.7%、66.0%,但对大肠杆菌无抑制作用。
提取物Ⅰ主要去除了粗提液中的非极性及弱极性的
脂类物质 ,提取物 Ⅱ在提取物Ⅰ的基础上主要去除了黄酮
甙元类 ,提取物Ⅲ则主要去除了黄酮甙类 ,从各提取物中
分离除去的物质类群和各提取物抑菌活性逐步有所下降
的现象分析 ,红檵木花中脂类 、黄酮甙元类及黄酮甙类可
能具有抗菌活性 ,亦可能具增强红色素抑菌活性的作用 ,
为此我们拟对上述物质的单体分离 、单体抗菌活性或抗菌
增强作用作深入研究。
致谢:本研究得到了我室全体老师的全力支持与帮助,特此致谢。
参 考 文 献
1　表政德 ,付爱华.浏阳红檵木产业现状和发展趋势探讨.
湖南农业科学 , 2003 ,(1):80～ 81.
2　黄瑞康 , 杨金桂 ,贺中华等.红檵木资源调查研究.湖南农
业科学 , 1998(4):44 ～ 45.
3　贺中华.红檵木的园林应用及栽培管理技术.湖南农业科
学 , 1998(4):44～ 45.
4　李晨东 , 唐前瑞 , 陈德富等.不同来源红檵木材料的
RAPD 分析及分类学探讨.园艺学报 , 2002 , 29(3):358 ～
362.
5　唐前瑞 , 周朴华.红檵木不同变异类型形态特征与色素含
量的比较.湖南农业大学学报(自然科学版), 2001 , 27(5):
362～ 363.
6　唐前瑞 ,陈友云 , 周朴华.红檵木色素苷稳定性及叶片细
胞液 pH 值变化的研究.湖南农业大学学报 , 2003 , (12):24
～ 25.
7　童群义 ,高孔荣 , 周正宏.红曲色素抑菌作用的研究.食品
工业科技 , 1997 , (5):5～ 6.
8　王允祥.葡萄色素抑菌作用的研究.食品科学 , 1998 , 19
(9):23 ～ 24.
9　汤杰 ,施春阳 , 徐晗等 ,板蓝根抑菌抗炎活性部位的评价.
中国医院药学杂志 , 2003 , 23(6):327～ 328.
10　祖若夫 ,胡宝龙 , 周德庆.微生物学实验教程.上海:复旦
大学出版社 , 1993.191～ 206.
11　沈萍 ,主编 ,微生物学.北京:高等教育出版社 , 2000.
12　沈萍 , 范秀容 , 李广武.微生物学实验.第三版 , 北京:高
等教育出版社 , 1999.
11
2005年 卢成瑛等:红檵木花红色素提取物抗菌活性研究初报 第 3期