全 文 ：[ 收稿日期] 　2006-11-30
[ 基金项目] 　国家重点科技项目改革计划(99-929-01-034)
[ 通讯作者] 　＊张思巨 , Tel:(010)64014411-2984
高效液相色谱法测定垂盆草药材中小麦黄素苷的含量
张思巨1＊ ,王跃生1 ,刘　丽1 ,魏太明2 ,闫玉凝2
(1.中国中医科学院中药研究所 , 北京 100700;2.北京中医药大学药学院 , 北京 100102)
　　[ 摘要] 　目的:建立反相高效液相色谱法测定垂盆草药材中小麦黄素苷的含量。方法:采用 YMC-J Sphere ODS-H80(4 μm ,
150 mm×4.6 mm)等色谱柱;以异丙醇-水-冰醋酸(15∶8∶2)为流动相;检测波长 350 nm。 结果:小麦黄素苷在 0.099 ～ 0.99μg 范
围内峰面积与进样量呈良好的线性关系 ,相关系数 r=0.999 8;平均回收率为 97.04%。结论:该法简便可行 ,结果准确可靠 ,适
用于药材质量控制的定量方法。
[ 关键词] 　垂盆草;小麦黄素苷;高效液相色谱法
[ 中图分类号] 　R284.1　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2007)04-0004-02
RP-HPLC Determination of Tricin-7-O-D-glucoside in Herba Sedi
ZHANGSi-ju1＊ ,WANG Yue-sheng1 , LIU Li1 ,WEI Tai-ming2 ,YAN Yu-ning2
(1.Institute of Chinese Material Medica , China Academy of Chinese Medical Science , Beijing 100700 , China;
2.Beijing University of Traditional Chinese Medicing , Beijing 100102 , China)
[ Abstract] 　Objective:To establish a RP-HPLC method for determination of tricin-7-O-β-D-glucoside in Herba
sedi.Methods:YMC-J Sphere ODS-H80(150 mm×4.6 mm ,4μm)and YMC-pack ODS-A column(250 mm×4.6mm ,
5 μm)were adopted.The mobile phase consisted of (CH3)2CHOH-H2O-HAC(15∶8∶2), the detection wavelength was
350 nm.Results:tricin-7-O-β-D-glucoside and other components in herba sedi can be separated , the calibration curve
was linear in the range of 0.099 ～ 0.99 μg with correlation coefficient 0.999 9.The average recovery was 97.04%with
RSD 0.81%(n=5).Conclusion:The method is simple , rapid , reliable.It can be used as quantitative determination for
quality control of Herba sedi.
[ Key words] 　Herba sadi;tricin-7-o-β-D-glucoside;RP-HPLC
　　垂盆草为景天科植物垂盆草 Sedum sarmentosum
Bunge 的新鲜或干燥全草[ 1] 。具有清利湿热 ,解毒之
功能;临床用于湿热黄疸 、小便不利 、痈肿疮疡 、急 、
慢性肝炎等。
文献报道[ 2] 垂盆草苷为垂盆草的主要活性成
分 ,具有明显保肝作用 。为了制定垂盆草药材的质
量标准 ,本课题曾针对垂盆草苷进行了提取分离 ,结
果发现由于商品药材均经过烫制后干燥的过程 ,致
使在商品药材中得不到性质不稳定的氰苷化合物;
提示目前临床应用的垂盆草及其制剂 ,采用垂盆草
苷作为质控标准的对照品值得商榷。
作者[ 3] 从垂盆草中共分离得到了 16个化合物 ,
鉴定了其中 12个 ,包括:黄酮类 7个 ,三萜类 1个 ,
甾醇类 2个 ,无机盐 2个 ,其中小麦黄素苷含量相对
较高;药理实验[ 4] 证明小麦黄素苷(tricin-7-O-β-D-
glucoside)为垂盆草的活性成分 ,能显著抑制小鼠脾
脏 T 、B淋巴细胞转化增殖 ,提示具有免疫抑制作用;
并具有明显的保肝作用 ,与垂盆草的主治功能相吻
合 。该成分主要存在于禾本科 、莎草科植物中 ,双子
叶植物较少见 ,在常用中药材中仅个别药材中含有 ,
对于垂盆草具有一定的专属性 ,选用小麦黄素苷为
对照品建立垂盆草药材的质量控制方法是合理的。
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第 13卷第 4 期
2007年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.13 , No.4
Apr., 2007
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2007.04.002
1　仪器与试药
HEWLETT PACKARD 1100 型全自动 HPLC 仪;
KQ-250E型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司);色谱纯异丙醇(MERCK)和 N ,N-二甲基甲
酰胺;高纯水为中药所自制;其它试剂均为分析纯。
小麦黄素苷对照品自制 ,纯度大于 98%;药材经北
京中医药大学阎玉凝教授鉴定为景天科植物垂盆草
Sedum sarmentosum Bunge.的新鲜或干燥全草。
2　方法
2.1　色谱条件 　色谱柱:YMC J Sphere ODS-H80
(150 mm ×4.6 mm , 4 μm)和 YMC-pack ODS-A(250
mm×4.6 mm ,5 μm);流动相:异丙醇-水-冰醋酸(15∶
80∶2);检测波长:350 nm;柱温:30 ～ 35 ℃,流量:0.5
～ 0.8 mL/min ,理论板数按小麦黄素苷峰计算应不
低于1 500。
2.2　试验溶液制备
2.2.1　对照品溶液的制备　精密称取小麦黄素苷
对照品适量 ,加甲醇-N ,N-二甲基甲酰胺(9∶1)混合
液制成每 1 mL 含 0.1 mg 的溶液 ,即得。
2.2.2　供试品溶液的制备　取本品粉末(过 6 号
筛)约 2 g ,同时另取本品粉末测定水分[ 1] ,精密称
定 ,置 100 mL具塞锥形瓶中 ,加石油醚(60 ～ 90 ℃)
50 mL ,超声处理 30 min ,离心 ,弃去上清液 ,沉淀经
石油醚洗涤后 ,挥尽溶剂 。药渣中精密加甲醇 50
mL ,密塞 ,摇匀 ,称定重量 ,浸泡 10 min ,超声处理 40
min(功率 250 W ,频率 40 KHZ),取出 ,放冷 ,再称定
重量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,离心 ,精密吸取
上清液25 mL ,减压回收至近 4mL ,加适量N ,N-二甲
基甲酰胺定容至 5 mL ,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,
即得 。
2.3　方法学考察
2.3.1　线性关系考察　精密吸取对照品溶液 1 ,2 ,
4 ,6 , 8 , 10 μL ,按正文中拟定的色谱条件测定峰面
积 ,以对照品进样量为横坐标(X),峰面积值为纵坐
标(Y),绘制标准曲线并计算回归方程 ,方程式为:Y
=2 278.787X +17.089 ,(r=0.999 8),小麦黄素苷
在0.099 ～ 0.99μg 范围内呈良好的线性关系。
2.3.2　精密度试验　精密吸取 3号药材的供试品
溶液 ,重复进样 5次 ,小麦黄素苷峰面积的相对标准
偏差为0.857%。
2.3.3　重现性试验　取 5 号药材粉末(过 100 目
筛),精密称定 ,按正文方法制备成 5份供试品溶液;
在拟定的色谱条件下 , 测定峰面积;结果显示 RSD
为 2.65%。
2.3.4　稳定性试验　选用 4号药材的供试品溶液 ,
按拟订的时间间隔进样 ,考察 16 h ,结果显示 RSD为
2.20%。
2.3.5　加样回收率试验　精密称取 5份已测知含
量的样品 ,精密加入相应量的小麦黄素苷对照品溶
液 ,按上述制备供试品液方法操作 ,并测定含量 ,平
均回收率为 97.04%,RSD为 0.8%。
3　样品测定
按 2.2.2项下操作 ,制备了 16种不同产地的商
品药材溶液 ,分别精密吸取对照品溶液 3 ～ 8 μL 与
供试品溶液 10 ～ 20 μL ,按上述色谱条件测定 ,计算
含量。结果见下表。
4　讨论
垂盆草为全草入药 ,含叶绿素较多 ,色泽干扰较
大 ,供试品溶液制备中采用石油醚除去叶绿素的方
法 ,小麦黄素苷在石油醚中不溶解 ,达到了除杂质又
不丢失测定成分的目的 。比较了回流提取和超声处
理两种方法;比较了乙醇 、甲醇 、乙酸乙酯数种溶剂
的提取率 ,确定采用正文方法。
表 1　16种药材小麦黄素苷含量测定结果
编号 药材产地或购置地
小麦黄素
苷含量
(干品)%
编号 药材产地或购置地
小麦黄素
苷含量
(干品)%
1 四川峨嵋山 0.030 3 9 河北7月购置(烫) 0.008 4
2 四川峨嵋山(烫) 0.011 8 10 河北7月购置(60℃加热) 0.003 4
3 天津蓟县 0.030 5 11 河北8月购置(鲜) 0.010 1
4 北京香山 0.051 3 12 河北8月购置(烫) 0.001 8
5 河北安国 0.012 3 13 北京 0.023 8
6 北京昌平 0.011 4 14 天津 0.005 2
7 北京东四同仁堂 0.008 4 15 河北安国 0.038 1
8 北京王府井永安堂 0.013 7 16 河北 0.028 3
　　注:未注明者为自然干燥 ,购置药材均为烫(95℃)后晒干
[参考文献]
[ 1] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部 , 北
京:化学工业出版社 , 2005.148 , 附录 IXH.
[ 2] 　方圣鼎 , 严修 , 李静芳 , 等.垂盆草化学成分的研究.
Ⅳ.垂盆草甙及异垂盆草甙的结构[ J] .化学学报 , 1982 ,
40(3):273.
[ 3] 　魏太明 , 闫玉凝 , 关昕璐 , 等.垂盆草的化学成分研究
(Ⅰ)[ J] .北京中医药大学学报 , 2003 , 26(4):59.
[ 4] 　熊玉兰 , 王彦礼 ,孙建辉 , 等.垂盆草小麦黄素苷体外对
正常小鼠淋巴细胞增殖的影响[ J] .中国实验方剂学杂
志 , 2006 , 12(10):29-31.
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第 13卷第 4 期
2007年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.13 , No.4
Apr., 2007