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细柄蕈树嫩枝扦插生根过程中内源激素动态特性研究



全 文 :第 4 1 卷第 4 期 江 苏 林 业 科 技 Vol . 4 1 No . 4
2 0 1 4 年 8 月 Journal of Jiangsu Forestry Science & Technology Aug . 2 0 1 4
文章编号:1001 - 7380(2014)04 - 0011 - 04
细柄蕈树嫩枝扦插生根过程中
内源激素动态特性研究
范俊俊,张往祥* ,蔡喜彦,赵明明,魏宏亮
(南京林业大学林学院,江苏 南京 210037)
收稿日期:2014-05-20;修回日期:2014-05-23
基金项目:江苏省农业科技自主创新项目:枫香亚科耐寒常绿阔叶行道树新品种选育 CX(11)1040
作者简介:范俊俊(1990 - ),女,硕士生,研究方向:观赏植物栽培。
* 通信作者:张往祥(1965 - ),男,副教授,主要从事观赏园艺研究,E - mail:malus2011@ 163. com。
摘要:以 3 年生细柄蕈树实生苗嫩枝为试验材料,运用酶联免疫吸附测定法(ELISA),研究其在扦插生根过程中内
源激素含量的变化,旨在揭示细柄蕈树扦插生根的机理。结果表明,与 CK相比,以质量浓度 300 mg /L的NAA处理
插穗,能有效缩短其生根周期;扦插生根过程中,NAA处理与 CK的几种内源激素(IAA、ZT和 ABA)含量随时间变
化的趋势相同,均呈正“V”形变化;NAA处理可调节内源激素,促进不定根的形成和发育;不定根形成期间,NAA处
理与 CK的 IAA /ZT、IAA /GA3和 IAA /ABA谷值的出现时间(20 d和 30 d)与愈伤组织形成期重合,内源激素的这种
节奏性变化反映了生根与生理之间的协同性。
关键词:细柄蕈树;扦插;内源激素
中图分类号:Q949. 751. 4 文献标识码:A doi:10. 3969 / j. issn. 1001 - 7380. 2014. 04. 003
The endogenous hormones’variation during the adventitious
root formation of Altingia gracilipes cuttings
FAN Jun-jun,ZHANG Wang-xiang* ,CAI Xi-yan,ZHAO Ming-ming,WEI Hong-liang
(College of Forestry,Nanjing Forestry University,Nanjing 210037,China)
Abstract:To reveal the rooting mechanism of Altingia gracilipes,endogenous hormone dynamics in the 3 - year - old soft-
wood cuttings during the adventitious root formation was studied by ELISA. The result showed that rooting cycle of the cut-
tings treated with 300 mg /LNAA was clearly shortened compared with that of CK. The change trend of the endogenous hor-
mones (IAA,ZT and ABA)by NAA treatment was parallel to that of CK,which was featured with“V - shape”. Mean-
while,indications of synergetic effects were observed between endogenous and exogenous hormones. During the adventitious
root formation,the valley in the curves of IAA /ZT,IAA /GA3and IAA /ABA with the NAA treatment and CK appeared on
the 20th and 30th respectively,presenting synergetic effect along with root formation.
Key words:Altingia gracilipes;Cutting;Endogenous hormone
细柄蕈树(Altingia gracilipes)是金缕梅科蕈树
属优良的速生阔叶常绿乔木,喜温暖湿润,其根系发
达,对土壤要求并不十分严格,主要分布于浙江南
部、福建及广东地区,树脂可供药用和香料之用,木
材可供建筑和制家具[1]。其树冠庞大,树形优美,
树干通直,具有较高观赏价值,是优良生态造林和绿
化树种。现存的细柄蕈树大多处于野生状态,其优
良特性还未被挖掘利用[2 - 3],应积极人工繁殖造林,
加快其推广促进产业发展。细柄蕈树可播种繁殖,
但是其蒴果出籽率低,仅有 1. 285%[2],且后代易产
生性状变异,不易保持亲本优良性状。目前很多苗
木在生产中都采用扦插繁殖技术,一套完善的扦插
技术不仅能缩短培育周期,还能保证品种特性,快速
成型、开花。细柄蕈树扦插繁殖技术还处于摸索阶
段[4 - 5],并且局限在繁殖技术上,并没有对扦插生根
机理做进一步的研究。因此,本文主要从细柄蕈树
扦插生根过程中内源激素含量及比值的动态变化来
研究不定根的发生,为揭示细柄蕈树的生根机理、高
效繁殖和开发利用提供理论和技术依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
试验插穗取材于江苏省扬州市江都区苗圃基地
种植的 3 年生细柄蕈树实生苗。选择无病虫害的半
木质化枝条(嫩枝),采后立即放入水桶并带回实验
室,将其剪成 8 ~ 10 cm的段作插穗,每段保留 2 ~ 3
片叶子,每片叶子保留基部的 1 /3 叶面积。
1. 2 方法
1. 2. 1 试验设计 试验设处理 2 组,即清水对照
(CK)和用 300 mg /L NAA浸插条基部 2 h。每个处
理重复 3 次,每个重复 30 株。扦插 15 d 后,进行插
穗生根动态观测。以后每隔 3 d 在每个处理中随机
挑选 3 株观测记录插穗愈伤组织形成期、不定根开
始发生期和不定根大量生成期。扦插后每隔 10 d
取样,用保鲜盒立即带回实验室,迅速将插穗基部 2
cm处的韧皮部切下来并剪碎、混匀,放入 - 74 ℃的
超低温冰箱中保存待用。
1. 2. 2 扦插及插后管理 试验于 2012 年 8 月 11 日
在南京林业大学银杏园内全光照自动间歇式喷雾扦插
苗床上进行。插床基质为珍珠岩和蛭石(2∶ 1 体积比)
的混合物,基质层厚度 15 cm。扦插前加多菌灵进行消
毒。扦插采用直插,株行距为4 cm ×4 cm,深度为3 ~4
cm。扦插 1个月后,每隔 15 d 喷施浓度为 0. 3%的多
菌灵溶液进行消毒,减少病虫害。
1. 2. 3 测定方法 生长素(IAA)、玉米素(ZT)、赤
霉素(GA3)、脱落酸(ABA)等 4 种内源激素的含量
采用酶联免疫法(ELISA)[6]测定,试剂盒由中国农
业大学提供。每样准确称取细柄蕈树插穗韧皮部样
品 0. 2 g,重复 3 次。
2 结果与分析
2. 1 扦插生根情况
结果见表 1。
表 1 细柄蕈树嫩枝插穗生根时间
处理
扦插后愈伤
组织出现期 /d
扦插后不定根
开始发生期 /d
扦插后不定根
大量生成期 /d
CK 0 ~ 33 34 ~ 45 46 ~ 60
300 mg /LNAA 0 ~ 21 22 ~ 30 31 ~ 45
从表 1 可以看出,与 CK 相比,以质量浓度 300
mg /L的NAA 处理插穗,能有效缩短其生根周期。
CK产生愈伤组织需 30 d 左右,不定根开始发生需
40 d左右,不定根大量生成需 50 d 左右;而 NAA处
理形成愈伤组织只需 20 d左右,不定根开始发生只
需 25 d左右,不定根大量生成只需 35 d左右。
2. 2 扦插生根过程中的内源激素含量变化
结果如图 1 所示。扦插生根过程中,NAA 处理
与 CK 的 IAA 含量均呈正“V”字形变化,扦插初期
插穗体内 IAA 含量不断下降,直至不定根突出后
IAA含量开始上升。NAA 处理的 IAA 含量均低于
CK,在扦插 20 d时达到谷值,比 CK提前 10 d。
图 1 细柄蕈树柄扦插生根过程中 IAA,ZT,GA3 和 ABA含量变化
21 江 苏 林 业 科 技 第 41 卷
GA3含量变化与 IAA 含量变化截然不同,NAA
处理与 CK均呈倒“V”字形变化,扦插初期插穗体
内 GA3含量不断上升,直至不定根开始大量发生时
含量开始下降。NAA处理第 30 d 达到峰值,比 CK
提前 10 d。在第 30 d之前,NAA处理 GA3含量均高
于 CK,第 30 d之后低于 CK。
在不定根大量形成前,ZT含量经扦插初期骤增
后呈正“V”字形变化,不定根开始发生时 ZT含量最
低。NAA处理在第 20 d时达到谷值,比 CK提前 10
d。扦插生根过程中,NAA处理 ZT含量均高于 CK。
ABA含量经扦插初期骤增之后均呈正“V”字
形变化,NAA 处理在第 40 d 时达到谷值,均比 CK
提前 10 d。扦插生根过程中,NAA 处理 ZT 含量基
本低于 CK。
2. 3 扦插生根过程中的内源激素比值变化
细柄蕈树扦插生根过程中 IAA /ZT、IAA /GA3和
IAA /ABA的变化见图 2。
图 2 细柄蕈树扦插生根过程中 IAA /ZT,IAA /GA3 和
IAA /ABA值变化
就 IAA /ZT 而言,NAA 处理与 CK 变化趋势相
同,均呈正“V”字形变化,但 NAA 处理比 CK 反应
快,在第 20 d就已经达到谷值,比 CK早 10 d。扦插
生根过程中,两处理 IAA /ZT 值始终大于 1,NAA 处
理 IAA /ZT低于 CK。
IAA /GA3变化与 IAA /ZT 变化趋势相同,呈正
“V”字形变化。NAA 处理比 CK 反应快,在第 20 d
就已经达到谷值,比 CK早 10 d。扦插生根过程中,
IAA /GA3值均大于 1,在 30 d前 NAA处理 IAA /GA3
低于 CK。在不定根大量形成前,NAA处理与 CK的
IAA /ABA 变化趋势相同,均呈正“V”字形变化。
NAA处理在第 20 d达到谷值,比 CK早 10 d。
3 结论与讨论
(1)外源激素与插穗不定根形成之间存在密切
的关系[7 - 11]。应用外源激素预处理插穗,可使难生
根树种生根[12 - 15]。在扦插育苗中,刺激生根效果显
著的生长素有 NAA、IAA、IBA、2,4-D 等[16 - 19]。本
研究中,细柄蕈树插穗经 300 mg /LNAA 处理后,愈
伤组织形成、不定根开始形成以及不定根大量形成
时期均比 CK提前 10 d,有效缩短了生根时间。在
苗圃管理过程中,扦插初期要加强扦插环境内的病
菌防治和水分管理。在扦插 40 d内(生根高峰期),
要及时补充营养元素,促进苗木生根、生长,缩短苗
木出圃时间。
(2)普遍认为 IAA是促进不定根形成的主要激
素[20],ABA则通过抑制 IAA 的运输和离体器官的
生长,从而抑制不定根的形成[16]。GA3对不定根发
生的影响观点不一,但多数试验表明高浓度 GA3抑
制不定根形成[7]。ZT 对插穗生根的影响与生根时
期及其浓度有关[21]。本研究中,在愈伤组织和根原
基形成的过程中,IAA 不断被氧化,含量逐渐减少,
在不定根突出前,IAA 和 ZT 含量均处于谷值,说明
低浓度 IAA及 ZT对不定根的启动和萌发有重要影
响,而在不定根发生期 2 激素含量不断上升以促进
根的分化和生长,这与前人[22 - 25]研究结果一致。
GA3含量变化与 IAA 呈一定的消长关系,在愈伤组
织形成时期,GA3含量不断上升,说明愈伤组织形成
过程中需要合成大量的 GA3
[26 - 27],在不定根发生期
GA3含量不断下降以促进根细胞分裂和分化
[28]。
ABA含量在扦插初期骤增可能为降低逆境对插穗
的伤害,不定根形成期含量下降利于生根,这与前人
的结论一致[29]。
(3)促进扦插生根的基本原理是调节插穗体内
生根抑制物质含量和生根促进物质含量之间的动态
平衡,扦插过程中插穗内源激素比值的变化也陆续
31第 4 期 范俊俊等:细柄蕈树嫩枝扦插生根过程中内源激素动态特性研究
被证明与生根关系密切[30 - 33]。本试验发现,NAA
处理插穗与 CK 在扦插生根过程中,体内激素比值
IAA /ZT,IAA /GA3和 IAA /ABA 均呈正“V”字形变
化,其谷值的出现时间前者为第 20 d,后者为第 30
d,与愈伤组织形成期重合,内源激素的这种节奏性
变化反映了生根与生理之间的协同性。外施 NAA
激素可协同内源激素促进不定根的形成和发育,并
与清水处理形成差异。
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