全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(6)∶670 ～ 672
细胞狭窄，围绕保卫细胞周围呈环状，形似环式气
孔，大的副卫细胞部分覆盖小的副卫细胞。这类气
孔比较少见，可能是直轴式和环式的过渡类型，可能
为观音草属植物的特有，有待深入研究。文中使用
的鉴别方法简便，各种性状和显微特征明显，适用于
野靛青的鉴别，可为野靛青的开发利用、质量控制提
供方法和依据。
参考文献:
［1］ 国家中医药管理局．中华本草［M］．第 20 卷．上海:上海科学
技术出版社，1999:466 － 467．
［2］ 杨毅，王真，李旭梅．野靛青对小鼠免疫功能的影响［J］．医药
导报，2008，27(1) :26 － 27．
［3］ 杨毅，王真，顾艳玲，等．野靛青化学成分研究［J］． 中华中医
药学刊，2013，31(4) :665 － 666．
收稿日期:2013 － 09 － 09
基金项目:2015 年版《中国药典》科研项目(编号:M21)
作者简介:欧洋(1990—) ，女，陕西汉中，正攻读药学专业的硕士学位。Email:ouyang － daodao@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:suwang571@ 126． com
西藏木瓜的鉴别及其齐墩果酸、熊果酸的测定
欧 洋，马 静，张朝阳，张 力，李 卒，王 曙*
(四川大学华西药学院，四川 成都 610041)
摘要:目的 完善西藏木瓜的质量标准。方法 采用性状鉴别、显微鉴别及 TLC进行鉴别，并采用 HPLC法测定齐墩果酸和
熊果酸的含量。结果 TLC鉴别西藏木瓜的专属性强;西藏木瓜中齐墩果酸、熊果酸的平均含量分别为 0． 18%、0． 49%。结
论 所用方法简便、准确、重复性好，可作为西藏木瓜的质量控制方法。
关键词:西藏木瓜;质量标准;齐墩果酸;熊果酸;薄层色谱法;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ917，Ｒ28 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)06 － 0670 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 06． 022
Identification of Chaenomeles thibetica and determination of oleanicacid and ursolic acid
OU Yang，MA Jing，ZHANG Chao － yang，ZHANG Li，LI Zu，WANG Shu*
(West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，610041 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To consummate the quality standard of Chaenomeles thibetica Yu． METHODS Morphological identifica-
tion，microscopic identification and TLC were used to identify，and the oleanic acid and ursolic acid were determined by HPLC．
ＲESULTS The TLC method was specific． The total content of oleanic acid and ursolic acid in Chaenomeles thibetica were 0． 18% and
0. 49%，respectively． CONCLUSION The methods are simple，accurate，reproducible and can be used as the quality control of
Chaenomeles thibetica．
Key words:Chaenomeles thibetica;Quality standard;Oleanic acid;Ursolic acid;TLC;HPLC
CLC number:Ｒ917，Ｒ28 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)06 － 0670 － 03
西藏木瓜 Chaenomeles thibetica Yu 为蔷薇科木
瓜属植物，藏医将其果实用做木瓜(藏药名赛亚)入
药。西藏木瓜主要分布在西藏、四川等省区，具有舒
经活络、和胃化湿、健胃之功效，用于治疗腰腿酸软、
麻木、吐泻腹痛、腓肠肌痉挛、四肢抽搐等［1］。木瓜
的现行药材标准收载于《中国藏药》第一卷中［2］，无
完整的质量标准，对药材质量的可控性偏弱，需进一
步修订。现采用性状、显微、理化鉴别和含量测定等
方法研究了西藏木瓜药材，完善了西藏木瓜的质量
标准。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
TSView显微照相机、ECLIPSE － E100 光学显微
镜(日本 Nikon) ;LC －10AT高效液相色谱仪(日本岛
津)。齐墩果酸、熊果酸对照品(中国药品生物制品检
定所，批 号 分 别 为:110709 － 200505、110742 －
200517) ;甲醇、乙腈为色谱纯;水为双蒸水;其余试剂
为分析纯;5个批次西藏木瓜药材(5 号为对口药材)
的采集地及采集时间见表 1，经鉴定为蔷薇科植物西
藏木瓜 Chaenomeles thibetica Yu的干燥成熟果实。
表 1 西藏木瓜检查项的测定结果
Table 1 Ｒesults of examination for Chaenomeles thibetica
No． 采集 /购买地 时间 水分 /%
总灰
分 /%
浸出
物 /%
1 西藏雄巴拉曲神水藏药厂 2012 － 06 11． 45 3． 75 11． 80
2 西藏金珠雅砻药业 2012 － 06 9． 99 4． 35 7． 69
3 西藏自治区藏药厂 2012 － 06 12． 00 4． 14 15． 46
4 西藏自治区药材市场 2012 － 07 11． 51 3． 83 13． 43
5 西藏林芝鲁朗镇 2012 － 09 11． 05 3． 28 17． 36
1． 2 西藏木瓜的鉴别
1． 2． 1 原植物的鉴别 原植物为灌木或小乔木，高
达 1． 5 ～ 3． 0 m，通常多刺，刺锥形。长 1． 0 ～ 1． 5
cm;小枝屈曲，圆柱形，有光泽，红褐色或紫褐色;多
年生枝条黑褐色，散生长圆形皮孔;冬芽三角状卵
形，红褐色，先端急尖，有少数鳞片，在先端或鳞片边
缘微有褐色柔毛。叶片革质，卵状披针形或长圆披
针形，长 6． 0 ～ 8. 5 cm，宽 1． 8 ～ 3． 5 cm，先端急尖，
基部楔形，全缘，上面深绿色，中脉与侧脉均微下陷，
下面密被褐色绒毛，中脉及侧脉均显著突起;叶柄粗
短，长 1 ～ 1． 6 cm，幼时被褐色绒毛，逐渐脱落;托叶
大型，草质，近镰刀形或近肾形，长约 1 cm，宽约 1． 2
cm，边缘有不整齐锐锯齿，稀钝锯齿，上面无毛，下
面被褐色绒毛。花 3 ～ 4 多簇生;花柱 5，基部合生，
并密被灰白色柔毛。果实长圆形或梨形，长 6 ～ 11
cm，直径 5 ～ 9 cm，黄绿色，味香;萼片宿存，反折，三
角卵状，先端急尖，长约 2 mm;种子多数，扁平，三角
卵状，长约 1 cm，宽约 0． 6 cm，深褐色。
1． 2． 2 性状的鉴别 果实为长圆形或梨形的梨果，
多纵切成2 ～4瓣。长6 ～11 cm，直径约3 ～5 cm。外
表面黄绿色或红棕色，饱满或皱缩。剖开面可见大部
分子房，果实较薄。外形饱满者肉疏松呈海绵状，外
形皱缩者果实较密。种子多数密集，每室约 30 粒，红
棕色，呈扁平三角形。嗅特殊，味极酸(图 1)。
图 1 西藏木瓜的药材图
Figure 1 Plant medicinal diagram of Chaenomeles thibetica
1． 2． 3 粉末的鉴别［3 － 4］ 石细胞较多，成群或单个
散在，多淡黄色或浅棕色，呈类方形、长椭圆形、类三
角形，长 20 ～ 100 μm，宽 15 ～ 60 μm，壁厚 5 ～ 15
μm，孔沟和胞腔明显，有的腔内含有棕红色物质。
薄壁细胞多皱缩，呈类长方形或类方形，长 70 ～ 110
μm，宽 50 ～ 80 μm，呈淡黄色、浅棕色或近无色，偶
含草酸钙方晶。木栓细胞常破碎，壁较厚，呈类长方
形或多边形，长 25 ～ 25 μm，宽 10 ～ 20 μm，含黄棕
色或深棕色物质。纤维较长，多成束存在，呈淡黄色
或棕黄色，木质化，径 10 ～ 30 μm，壁厚薄不一，厚
5 ～ 7 μm。导管多破碎，主为螺纹和网纹，直径 5 ～
50 μm，壁厚 2 ～ 3 μm，无色或呈黄棕色。草酸钙方
晶细小，直径 15 ～ 50 μm(图 2)。
石细胞 薄壁细胞和草酸钙方晶 木栓细胞
木纤维 螺纹导管 草酸钙方晶
图 2 西藏木瓜粉末的显微图
Figure 2 Powder characteristics diagrams of Chaenomeles thibetica
1． 2． 4 薄层鉴别 取西藏木瓜细粉 1． 0 g，置具塞
锥形瓶中，加三氯甲烷 10 mL，于 40 ℃超声 30 min，
过滤，蒸干滤液，残渣中加入甲醇 －三氯甲烷(1∶
3)2 mL 使溶解，作为供试品溶液;另取木瓜对照药
材 1． 0 g，同法制成对照药材溶液。取熊果酸对照
品，加甲醇制成 0． 5 mg·mL －1对照品溶液。照薄层
色谱法(《中国药典》2010 年版附录ⅥB) ，吸取上述
3 种溶液 1 ～ 2 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，
以环己烷 －丙酮 －乙酸乙酯 －甲酸(9∶2∶1∶0．
2)为展开剂，展开、取出、晾干，喷以 10%硫酸乙醇
溶液，于 105 ℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和
紫外灯光(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对
照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧
光斑点;在与对照品色谱相应的位置上，显相同紫红
色(日光)和橙黄色荧光斑点(365 nm)。
1． 2． 5 水分、总灰分及浸出物的检查 照水分测定
法、灰分测定法和醇溶液浸出物测定法(《中国药
典》2010 年版附录ⅨH 第一法、ⅨK、ⅩA 项下热浸
法)，分别测定。计算 5 批样品中水分、总灰分和浸
出物的平均含量分别为 11． 20%、3． 87%、13． 15%
(表 1)。
1． 3 西藏木瓜中齐墩果酸、熊果酸的含量测定
1． 3． 1 色谱条件与系统适用性 采用 Kromasi C18
176第 6 期 欧 洋，等。西藏木瓜的鉴别及其齐墩果酸、熊果酸的测定
色谱柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 －
甲醇 － 0． 5%醋酸铵(67∶12∶21) ，流速为 1． 0 mL·
min －1，检测波长为 210 nm，柱温为 30 ℃，进样量 10
μL。在上述色谱条件下，取混合对照品、供试品溶
液分别进样。理论板数按齐墩果酸计应≥5 × 103
(图 3)。
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
A B
ur
so
lic
ac
id
ol
ea
ni
c
ac
id
ur
so
lic
ac
id
ol
ea
ni
c
ac
id
t/min
图 3 对照品(A)及供试品(B)溶液的色谱图
Figure 3 Chromatograms of control solution(A) and sample
solution(B)
1． 3． 2 溶液的制备 取齐墩果酸、熊果酸对照品适
量，精密称定，置同一 100 mL量瓶中，加甲醇溶解并
定容，得含齐墩果酸 0． 1104 mg·mL －1、熊果酸
0. 2316 mg·mL －1的对照品贮备液。精密量取上述
贮备液 5 mL至 10 mL 量瓶中，加甲醇定容，得含齐
墩果酸 55． 2 μg·mL －1、熊果酸 115． 8 μg·mL －1的混
合对照品溶液。取西藏木瓜细粉 0． 5 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，密塞，称定
重量，超声(250 W、40 kHz)20 min，放冷，再称定重
量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液做
为供试品溶液。
1． 3． 3 线性关系的考察 精密吸取对照品贮备液
10、20 μL和对照品溶液 5、10 μL，分别进样分析，记
录峰面积。以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标进
行线性回归，得齐墩果酸、熊果酸的回归方程分别
为:Y1 = 2． 6276 × 10
4X + 8． 885 × 103(r2 = 0． 9999)、
Y2 = 2． 3157 × 10
4X + 3． 6154 × 103(r2 = 0． 9996) ，齐
墩果酸 0． 276 ～ 2． 208 μg、熊果酸 0． 579 ～ 4． 632 μg
与峰面积呈良好的线性关系。
1． 3． 4 重复性试验 取 4 号样品，精密称取 6 份，
按“1． 3． 2”项下方法制备供试品溶液，进样测定，记
录峰面积。计算得样品中齐墩果酸、熊果酸的平均
总含量为 0． 70%，ＲSD = 0． 69%，表明方法重复性
良好。
1． 3． 5 精密度与稳定性试验 取“1． 3． 2”项下对
照品溶液，重复进样 6 次。计算得齐墩果酸、熊果酸
峰面积的 ＲSD 分别为 0． 99%、0. 67%，表明精密度
良好。取对照品溶液，并分别于 0、2、4、6、8、12 h 时
进样测定。计算得齐墩果酸、熊果酸峰面积的 ＲSD
分别为 1． 06%、0． 77%，表明对照品溶液在 12 h 内
稳定。
1． 3． 6 回收率试验 取 4 号样品(齐墩果酸和熊果
酸分别为 0． 17%、0． 53%)0． 25 g，精密称定 6 份，置
具塞锥形瓶中，精密加入含齐墩果酸 17． 2 μg·
mL －1、熊果酸 52． 9 μg·mL －1的混合对照品溶液 25
mL，按“1． 3． 2”项下方法制备供试品溶液并进样测
定。计算得齐墩果酸、熊果酸的平均回收率分别为
98． 55%、99． 04%，ＲSD分别为 1． 12%、1． 47%。
1． 3． 7 样品的测定 分别精密吸取对照品与供试
品溶液各 10 μL，进样测定，记录峰面积。5 批西藏
木瓜样品中齐墩果酸、熊果酸的平均含量及平均总
量分别为 0． 18%、0． 49%、0． 67%(表 2)。
表 2 西藏木瓜药材的含量测定结果(%)
Table 2 Ｒesults of the determination for Chaenomeles thibetica
(%)
No． Oleanic acid Ursolic acid Total
1 0． 20 0． 60 0． 80
2 0． 30 0． 55 0． 85
3 0． 12 0． 37 0． 48
4 0． 17 0． 53 0． 70
5 0． 13 0． 39 0． 63
珔X 0． 18 0． 49 0． 67
2 讨论
以平均值上浮 20%为标准，拟定西藏木瓜药材
中水分≤15． 0%，总灰分≤5． 0%;以平均值下浮
20%为标准，拟定西藏木瓜药材中醇溶性浸出物含
量≥10． 0%。以平均值下浮 20%为标准，拟定西藏
木瓜药材中齐墩果酸、熊果酸总含量≥0． 5%。
参考文献:
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收稿日期:2013 － 12 － 24
276 华 西 药 学 杂 志 第 29 卷