全 文 ：基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目( ［2008］5002)
作者简介:王燕，女，硕士，实验师 研究方向:药品质量标准研究 * 通讯作者:鲍家科，男，主任药师 研究方向:药物分析研究
Tel:(0851)6807968 E-mail:bjk2005@ 163. com
羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠 HPLC指纹图谱共有模式的建立与比较研究
王燕1，鲍家科2* ，金杨3，罗曼2，熊慧林2(1. 大理学院药学与化学学院，云南 大理 671000;2. 贵州省药品检验所，贵阳 550004;3.
大理白族自治州中医医院，云南 大理 671000)
摘要:目的 建立羽叶鬼灯檠药材和西南鬼灯檠药材的 HPLC 指纹图谱，为两种药材的质量控制提供新手段。方法 采用
HPLC，分别建立主产于云南、贵州两地的羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠的指纹图谱共有模式，并对两图谱进行比较研究。结果
与所建立的两个参照图谱相比，羽叶鬼灯檠样品和西南鬼灯檠样品(各 10 批)的相似度均大于 0. 95。与羽叶鬼灯檠指纹图谱
共有模式相比，各批西南鬼灯檠样品的相似度均小于 0. 85。在羽叶鬼灯檠的图谱中观察到 3 个专有特征峰。结论 建立的
两种 HPLC指纹图谱共有模式可用于两种鬼灯檠的种属鉴别、内在质量的综合评价。
关键词:羽叶鬼灯檠;西南鬼灯檠;指纹图谱
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2012)02 － 0098 － 04
Comparative Study on Mutual Pattern of HPLC Fingerprints of Rodgersia Pinnata Hemsl and Rodgersia
Sambucifolia Hemsl
WANG Yan1，BAO Jia-ke2* ，JIN Yang3，LUO Man2，XIONG Hui-lin2(1. College of Pharmacy and Chemistry，Dali Uni-
versity，Dali 671000，China;2. Guizhou Province Institute for Drug Control，Guiyang 550004，China;3. Chinese Medicine Hospital of
Dali Prefecture，Dali 671000，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To establish the HPLC fingerprints of Rodgersia pinnata Hemsl and Rodgersia sambucifolia Hemsl for
providing a new means of their quality control. METHODS HPLC method was used to establish mutual pattern of HPLC fingerprints
of Rodgersia pinnata Hemsl and Rodgersia sambucifolia Hemsl from Yunnan and Guizhou respectively，and the two patterns were com-
pared. RESULTS The similarity of 10 batches of Rodgersia pinnata Hemsl and Rodgersia sambucifolia Hemsl were greater than 0. 95
compared with each mutual pattern of HPLC fingerprint respectively. However，the similarity of the mutual pattern of HPLC fingerprint
between Rodgersia pinnata Hemsl and Rodgersia sambucifolia Hemsl was less than 0. 85. Three specific peaks were observed in HPLC
fingerprint of Rodgersia pinnata Hemsl. CONCLUSION The mutual pattern of HPLC fingerprints established herein can be used for
species identification and comprehensive evaluation of the instinct quality.
KEY WORDS:Rodgersia sambucifolia Hemsl;Rodgersia pinnata Hemsl;fingerprint
羽叶鬼灯檠(Rodgersia pinnata Hemsl. )和西南
鬼灯檠(Rodgersia sambucifolia Hemsl. )均属虎耳草
科植物，主产于云南、贵州。民间以两者的根茎入
药，药材名通称岩陀，俗名毛青冈。本品具有清热解
毒、消炎、祛风除湿、收敛的功效，用于感冒头痛、风
湿骨痛、外伤出血、老年性支气管炎等常见疾病有较
好的疗效［1］。由于西南鬼灯檠和羽叶鬼灯檠的根
茎在外形上和显微鉴别中相似性极高，两者易于混
淆，对有关研究中涉及的品种基源鉴定等带来了较
大困难。为了探索以现代实验方法区分两种药材的
可行性，客观评价药材质量，本实验搜集产自云南、
贵州的不同年份的羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠药材，
分别建立两者的 HPLC 指纹图谱共有模式，并在此
基础上进行了分析比较，找出了其差异性，可用于有
关质量控制，现报道如下。
1 材 料
1. 1 仪器与试药
日本岛津 LC － 20AD 型 HPLC 系统(CTO －
20AC柱温箱、CBM － 20A 系统控制器、SPD － M20A
二极管阵列检测器、LC solution 工作站) ;KQ －
500DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限
公司) ;XS205 型梅特勒电子天平(上海亚荣生化仪
器厂) ;中药材粉碎机(浙江温岭市林大机械有限公
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司)。岩白菜素对照品(中国药品生物制品检定所，
批号 1532-200202) ，没食子酸对照品(中国药品生
物制品检定所，批号 110831-200302) ;乙腈为色谱
纯，其他试剂为分析纯，水为重蒸水。
1. 2 药材
实验用西南鬼灯檠和羽叶鬼灯檠药材均由贵阳
中医学院陈德媛研究员鉴定 Rodgersia pinnata
Hemsl为正品。
2 方法与结果
2. 1 羽叶鬼灯檠指纹图谱的建立
2. 1. 1 色谱条件 色谱柱:Alltima C18(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ;检测波长:310 nm;柱温:30 ℃;流
动相:溶液;流速:0. 8 mL·min －1;进样量:10 μL;梯
度洗脱:0. 01 min，乙腈-0. 1%磷酸 = 1∶ 99，5 min，乙
腈-0. 1%磷酸 = 5∶ 95，25 min，乙腈-0. 1%磷酸 = 14∶
86，60 min，乙腈-0. 1%磷酸 = 20∶ 80。
2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸、岩
白菜素对照品适量，加体积分数 60%甲醇分别制成
每 1 mL约含 0. 25 mg，每 1 mL约含 0. 5 mg的溶液，
摇匀，即得。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 取羽叶鬼灯檠药材粉
末(过四号筛)约 1 g，精密称定，置锥形瓶中，加体
积分数 60% 甲醇 50 mL，水浴回流 2 次，每次 60
min，滤过，合并滤液，蒸干，残渣加体积分数 60%甲
醇溶解，转移至 10 mL 量瓶中，并加体积分数 60%
甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。经 0. 45 μm
微孔滤膜滤过，即得。
2. 1. 4 方法学考察 ①精密度实验:取样品编号为
5的羽叶鬼灯檠药材 1 份，按“2. 1. 3”项下制备供试
品溶液，连续进样 5 次，考察各共有峰的相对保留时
间及相对峰面积比值的一致性，结果显示，各共有峰
的相对保留时间 RSD 值为 0. 024% ～ 0. 115%，相对
峰面积比值的 RSD 值为 1. 462% ～ 3. 915%，均小于
5%，同时考察各色谱峰的相似度，用相似度软件计
算，相似度均大于 0. 999。表明该方法的精密度良好。
②稳定性实验:取样品编号为 5 的羽叶鬼灯檠药
材 1 份，按“2. 1. 3”项下制备供试品溶液，分别在
0、5、10、15、24 h 进样，考察各共有峰的相对保留
时间及相对峰面积比值的一致性，结果显示，各
共 有 峰 的 相 对 保 留 时 间 RSD 值 为
0. 011% ～ 0. 104%，相对峰面积比值的 RSD 值
为1. 184% ～ 3. 431%，均小于 5%，同时考察各
色谱峰的相似度，用相似度软件计算，相似度均
大于 0. 999。表明供试品在 24 h 内稳定。③重
现性实验:取样品编号为 5 的羽叶鬼灯檠药材 5 份，
按“2. 1. 3”项下制备供试品溶液，进行测定，考察各
共有峰的相对保留时间及相对峰面积比值的一致
性，结果显示，各共有峰的相对保留时间 RSD 值为
0. 015% ～ 0. 116%，相对峰面积比值的 RSD 值为
2. 277% ～4. 319%，均小于 5%，同时考察各色谱峰
的相似度，用相似度软件计算，相似度均大于
0. 999。表明该方法的重现性良好。
2. 1. 5 样品测定 取 10 批搜集到的羽叶鬼灯檠样
品，按“2. 1. 3”项下制备供试品溶液，按“2. 1. 1”项下
色谱条件进样测定，详细比较所有样品的色谱图，确
定了 13个主要的特征峰，构成羽叶鬼灯檠的指纹图
谱，10批羽叶鬼灯檠样品的 HPLC色谱图见图 1。
2. 1. 6 羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式的建立 运
用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004A 版》
软件，以样品编号为 1 的羽叶鬼灯檠药材色谱图作
为参照图谱，利用中位数法进行多点校正自动匹配
后生成羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式见图 2(A) ，
并对上述 10 批样品进行相似度评价，相似度计算结
果见表 1。
2. 2 西南鬼灯檠指纹图谱的建立
取 10 批搜集到的西南鬼灯檠样品，按羽叶鬼灯
檠的前处理方法制备供试品溶液，色谱条件同
“2. 1. 1”，在指纹图谱方法学考察(稳定性、重现性、
精密度)都符合要求的基础上建立西南鬼灯檠指纹
图谱。10 批西南鬼灯檠的相似度均大于 0. 95。指
纹图谱共有模式见图 2(B) ，10 批西南鬼灯檠样品
的 HPLC色谱图见图 3，相似度计算结果见表 2。
2. 3 羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠 HPLC 指纹图谱
比较
以上述建立的羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式为
图 1 10 批羽叶鬼灯檠药材样品的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC Fingerprints of 10 batches of Rodgersia pinnata
Hemsl samples
·99·
中国药学杂志 2012 年 1 月第 47 卷第 2 期 Chin Pharm J，2012 January，Vol. 47 No. 2
图 2 羽叶鬼灯檠(A)和西南鬼灯檠(B)HPLC 指纹图谱共
有模式
Fig. 2 Mutual pattern of HPLC fingerprints of Rodgersia pin-
nata Hemsl and Rodgersia sambucifolia Hemsl
表 1 10 批羽叶鬼灯檠样品相似度计算结果
Tab. 1 Similarity of 10 batches of Rodgersia pinnata Hemsl
samples
No.
Producing
areas
Collecting
time
Reference
fingerprint
Compared
fingerprint
1 Yunnan Dali 2010. 06 1. 000 0. 987
2 Yunnan Jianchuan 2010. 06 0. 991 0. 999
3 Shanxi 2010. 06 0. 978 0. 998
4 Yunnan Lijiang 2010. 06 0. 995 0. 980
5 Yunnan Heqing 2010. 06 0. 996 0. 989
6 Guizhou Guiyang 2010. 09 0. 991 0. 999
7 Guizhou Shuicheng 2010. 09 0. 986 0. 999
8 Guizhou Shuicheng 2010. 09 0. 962 0. 993
9 Guizhou Weining 2010. 09 0. 981 0. 999
10 Guizhou Shuicheng 2010. 09 0. 967 0. 994
图 3 10 批西南鬼灯檠药材样品的 HPLC色谱图
Fig. 3 HPLC Fingerprints of 10 batches of Rodgersia sambuci-
folia Hemsl samples
参照图谱，分别对 10 批西南鬼灯檠指纹图谱进行相
似度计算。结果表明，各批西南鬼灯檠的相似度均
在 0. 85 以下(相似度计算结果见表 3) ;通过对比两
者共有指纹峰的保留时间和紫外光谱图，可见羽叶
鬼灯檠指纹图谱共有模式中 1、2、5、6、7、9、10、11、
12、13 号峰在西南鬼灯檠指纹图谱共有模式中均可
找到，但羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式中的 3、4、8
号峰在西南鬼灯檠指纹图谱共有模式中未见。
3 讨 论
3. 1 由 HPLC图谱可见，两种药材的醇提物中成分
较为复杂，通过对照品和样品 HPLC-DAD 指纹图谱
中色谱峰的紫外光谱图及保留时间对比可知，西南
鬼灯檠和羽叶鬼灯檠 1 号峰为没食子酸，西南鬼灯
檠 4 号峰和羽叶鬼灯檠 6 号峰为岩白菜素，岩白菜
素［1］和没食子酸的活性［2］与羽叶鬼灯檠和西南鬼
灯檠的功效相近。
3. 2 两份指纹图谱中有较多的共有特征峰，说明两
种鬼灯檠中均含有没食子酸和岩白菜素等多数相同
的化学成分，但与羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式比
较，10 批西南鬼灯檠的 HPLC 图谱的相似度均在
0. 85 以下，说明两种药材化学成分在量化比例方面
有所不同。羽叶鬼灯檠指纹图谱共有模式中 3、4、8
号峰在西南鬼灯檠指纹图谱共有模式中不存在或不
明显，说明羽叶鬼灯檠和西南鬼灯檠药材内含化学
表 2 10 批西南鬼灯檠样品相似度计算结果
Tab. 2 Similarity of 10 batches of Rodgersia sambucifolia
Hemsl samples
No.
Producing
areas
Collecting
time
Reference
fingerprint
Compared
fingerprint
11 Guizhou Shuicheng 2007. 09 1. 000 0. 998
12 Guizhou Xingyi 2007. 07 0. 972 0. 983
13 Guizhou Weining 2008. 07 0. 985 0. 992
14 Guizhou Shuicheng 2008. 07 0. 989 0. 995
15 Guizhou Shuicheng 2010. 06 0. 989 0. 983
16 Guizhou Shuicheng 2007. 09 0. 970 0. 958
17 Guizhou Weining 2007. 09 0. 991 0. 996
18 Yunnan Dali 2010. 06 0. 982 0. 974
19 Yunnan Jianchuan 2010. 06 0. 995 0. 995
20 Yunnan Heqing 2010. 06 0. 995 0. 993
表 3 10 批西南鬼灯檠样品相似度计算结果(与羽叶鬼灯檠
指纹图谱共有模式比较)
Tab. 3 Similarity of the mutual pattern fingerprint between 10
batches of Rodgersia sambucifolia Hemsl and Rodgersia pinnata
Hemsl samples
No. Producing areas Collecting time Similarity
11 Guizhou Shuicheng 2007. 09 0. 805
12 Guizhou Xingyi 2007. 07 0. 820
13 Guizhou Weining 2008. 07 0. 797
14 Guizhou Shuicheng 2008. 07 0. 814
15 Guizhou Shuicheng 2010. 06 0. 842
16 Guizhou Shuicheng 2007. 09 0. 813
17 Guizhou Weining 2007. 09 0. 778
18 Yunnan Dali 2010. 06 0. 854
19 Yunnan Jianchuan 2010. 06 0. 827
20 Yunnan Heqing 2010. 06 0. 834
·001· Chin Pharm J，2012 January，Vol. 47 No. 2 中国药学杂志 2012 年 1 月第 47 卷第 2 期
成分存在着一定的差异性。上述情况是否影响到两
种药材的药效作用还值得进一步探讨。
3. 3 指纹图谱是目前国内外广泛接受的中药质量
控制和评价的方法。本实验首次建立了羽叶鬼灯檠
和西南鬼灯檠的 HPLC 指纹图谱共有模式，所用药
材采自云南和贵州两个主产区，其指纹图谱共有模
式相似度均分别在 0. 95 以上，因此所建立的 HPLC
指纹图谱共有模式可分别作为两种药材质量综合评
价的参考方法。通过两者指纹图谱的比较可见，3、
4、8 号峰应为羽叶鬼灯檠指纹图谱的专有特征峰。
由此可为两种鬼灯檠种属的比较鉴定提供新的方
法，也为深入研究两者化学成分组成奠定了一定的
基础。
利用本实验方法，可区分和鉴别羽叶鬼灯檠和
西南鬼灯檠，为两者的质量控制及综合评价提供了
新的方法［3］。
REFERENCES
［1］ ZHANG X Y，LI D W，WANG Y C，et al． Distribution and medi-
cal value of Rodgeris aesculifolia and its exploitation ［J］． Sub
Plant Sci (亚热带植物学) ，2005，34(2) :60-62．
［2］ CHEN J，LI Y X，CHEN G D，et al． Study on extraction and an-
tioxidation of flavonoids and polysaccharides from two species of
Bergenia rhizomes［J］． Sci Technol Food Ind (食品工业科技) ，
2009，(3) :98-101．
［3］ ZHAO K J，ZHENG Y Z，DONG T X，et al． Analysis of HPLC fin-
gerprints of fructus aurantii from different habitats and contents of
naringin，neohesperidin and synephrine［J］． Chin Pharm J (中国
药学杂志) ，2011，46(12) :955-959．
(收稿日期:2011-07-25)
基金项目:国家科技重大专项资助项目(2009ZX09103-377)
作者简介:戚中杰，男，硕士研究生 研究方向:中药新药研发与质量控制 * 通讯作者:田景奎，男，博士，教授，博士生导师 研究方
向:天然药物化学以及中药生物技术 Tel:(0571)88208454 E-mail:tjk@ zju. edu. cn
猫爪草中吡咯丁酸的含量测定研究
戚中杰，应弘梅，李娟娟，张琳，田景奎* (教育部生物医学工程重点实验室，浙江大学生物医学工程与仪器科学学院，杭州 310027)
摘要:目的 探寻猫爪草中指标性成分，并建立 HPLC测定猫爪草中指标性成分含量的方法，对猫爪草进行质量控制研究。方
法 采用不同柱色谱技术进行分离，通过光谱、波谱分析鉴定指标性成分吡咯丁酸的化学结构。采用高效液相色谱法进行吡
咯丁酸的含量测定，以 Agilent TC-C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)色谱柱为固定相;流动相为 0. 4%醋酸水-甲醇;检测波长:
292 nm;体积流量:1. 0 mL·min －1。结果 猫爪草中指标性成分经分离、鉴定为吡咯丁酸，吡咯丁酸在 0. 372 ～ 1. 302 μg线性
关系良好，r2 = 0. 999 8。平均回收率为 100. 89% (RSD = 0. 83%)。结论 本方法简单、快速、可靠，为猫爪草的质量控制提供
了科学依据。
关键词:猫爪草;吡咯丁酸;抗结核;质量控制
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2012)02 － 0101 － 03
Study on Quality Control of Ranunculi Ternati Radix
QI Zhong-jie，YING Hong-mei，LI Juan-juan，ZHANG Lin，TIAN Jing-kui* (Key Laboratory of Biomedical Engineering of
Education，College of Biomedical Engineering and Instrument Science，Zhejiang University，Hangzhou 310027，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To identify a characteristic chemical marker of Ranunculi Ternati Radix and establish a HPLC method
for determination of its content. METHODS Various chromatographic methods were applied to isolate the marker 4-［formyl-5-
(hydroxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl］butanoic acid，and its structure was elucidated by spectroscopic methods. The HPLC was performed
on Agilent TC-C18 column(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)using CH3OH-H2O (containing 0. 4% acetic acid)as the mobile phase. The
flow rate was 1. 0 mL·min －1 and the detection wavelength was set at 292 nm. RESULTS 4-［formyl-5-(hydroxymethyl)-1H-pyrrol-
1-yl］butanoic acid was isolated and identified as the chemical marker． The HPLC method showed good linearity within the range of
0. 372 － 1. 302 μg (r2 = 0. 999 8). The average recovery of 4-［formyl-5-(hydroxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl］butanoic acid was 100. 89%
(n =6，RSD =0. 83%). CONCLUSION This method is simple，rapid and reliable for the quality control of Ranunculi Ternati Radix.
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中国药学杂志 2012 年 1 月第 47 卷第 2 期 Chin Pharm J，2012 January，Vol. 47 No. 2