全 文 ：北方园艺２０１３（０３）：１１５～１１８ ·生物技术·
参考文献
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Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｏｐｔｉｍｕｍ ｆｏｒ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｌｅａｖｅｓ ｉｎ Ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｂａ
ＳＵＮ Ｙｅ－ｆａｎｇ１，ＺＨＥＮＧ Ｑｉ １，ＳＵＮ Ｊｕｎ－ｗｅｉ ２，ＣＨＥＮ Ｚｈｅｎ３，ＺＨＯＵ Ｄａｎ２
（１．Ｓｈａｏｘｉｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｏｘｉｎｇ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ ３１２００３；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｉｎａ Ｊｉｌｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ，
Ｚｈｅｊｉａｎｇ ３１００１８；３．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔａｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｚｈｏｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ ３１８０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ Ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｂａ ｗｅｒｅ ｓｅｔ ｕｐ ｖｉａ ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ｆｒｏｍ ｃａｌｕｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｌｅａｆ ｄｉｓｃ ｏｆ
ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｂａ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍａｔｕｒｅ ｌｅａｖｅｓ ｗｉｔｈ ｄａｒｋ
ｇｒｅｅｎ ｃｏｌｏｒ，ａｎｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｗａｙ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗａｓ ｆａｃｅ－ｕｐ；ｔｈｅ ｍｏｓｔ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｕｓ
ａｎｄ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｗａｓ １／２ＭＳ＋ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ １．０ｍｇ／Ｌ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ８５％ａｎｄ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ６．０；ｔｈｅ ｍｏｓｔ ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｗａｓ １／４ＭＳ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ，ｗｉｔｈ
ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ２％ｓｕｃｒｏｓｅ，ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｅｘｃｅｅｄｅｄ ９５％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｂａ；ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ；ｌｅａｆ ｄｉｓｃ ｏｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｐｌａｎｔｓ；ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；
ｒｏｏｔｉｎｇ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
第一作者简介：郑可（１９８７－），女，硕士，现主要从事森林培育等方
面的研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｅｎｇｋｅ１９８７０４３０＠１６３．ｃｏｍ．
责任作者：董胜君（１９７４－），男，博士，副教授，现主要从事森林培育
及种子与苗木培育等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｓｊ９２８＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：国家林业公益性行业科研专项资助项目（２０１００４０３４）；
中央财政林业科技推广示范资金资助项目（［２０１０］０２）。
收稿日期：２０１２－１０－２２
山 杏 组 培 繁 殖 技 术 研 究
郑 可１，董 胜 君１，田 明 芳２，刘 明 国１，吴 月 亮１，安 成 亮１
（１．沈阳农业大学 林学院，辽宁 沈阳１１０８６６；２．阜新蒙古族自治县林业科技示范中心，辽宁 阜新１２３０００）
摘 要：以山杏为试材，研究了外植体的消毒、基本培养基筛选、外植体的种类及不同浓度配
比的激素对外植体各阶段生长的影响。结果表明：采用１．０ｇ／Ｌ的ＨｇＣｌ２消毒３ｍｉｎ灭菌效果最
好；以改良ＭＳ［Ｃ（ＮＨ４＋）∶Ｃ（ＮＯ３－）＝０．１６］为基本培养基，组培苗分化和生长效果较好；最适外
植体为茎尖；初代培养最适的激素配比为１．０ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ和０．０５ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ；继代培养最
适的激素配比为０．５ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ和０．１ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ。
关键词：山杏；组培；繁殖技术
中图分类号：Ｓ ６６２．２０４＋．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１３）０３－０１１５－０４
山杏（Ｐｒｕｎｕｓ ｓｉｂｉｒｉｃａ）属蔷薇科李属杏亚属落叶灌
木或乔木。山杏是亚洲特有的生态经济型树种，其生态
特性为喜光，耐寒性强，耐干旱瘠薄［１］，是丘陵山区阳坡、
半阳坡造林绿化的先锋树种；而且具有优良的水土保持
和防风固沙功能，成为我国三北地区水土保持、防风固
沙和小流域综合治理等生态建设工程的主要造林树种；
山杏同时具有很高的经济价值，主要体现在杏仁、花、树
皮、叶、核壳和杏肉等方面；山杏的树形优美，春季先叶
开花，花色迷人，也是较好的园林绿化树种。因此，研究
山杏的组培技术，为山杏的繁殖提供快速有效的方法，
能使山杏在经济，生态，优良品系的保持上发挥重要
５１１
·生物技术· 北方园艺２０１３（０３）：１１５～１１８
作用。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
分别选取沈阳农业大学校园内２５ａ生的山杏当年
生枝条的茎尖、茎段和叶片及阜新市阜蒙县大巴沟山上
的１０ａ生山杏的当年生枝的茎尖为外植体材料。
１．２ 试验方法
１．２．１ 初代培养 外植体灭菌时间的筛选：将采取的外
植体用自来水冲洗干净，再用灭菌滤纸吸干水分，将其
放入７５％的酒精中浸泡３０ｓ，无菌水冲洗３～５次，
用１．０ｇ／Ｌ ＨｇＣｌ２进行灭菌处理。并不停的搅拌，使消
毒更加彻底，最后用无菌水冲洗５～７次。将处理过的
材料浸泡在无菌水中待用。分别设１、３、５ｍｉｎ ３个时间
升汞消毒处理。以茎段为外植体，每个处理１０瓶，每瓶
接２个外植体，３次重复，１０ｄ后统计存活率和污染率。
基本培养基的筛选：分别以ＭＳ、改良 ＭＳ［Ｃ（ＮＨ４＋）∶Ｃ
（ＮＯ３－）＝０．１６］、ＷＰＭ为基本培养基，其中均附加１．０
ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ、０．０５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，蔗糖３０ｇ／Ｌ，琼脂６ｇ／Ｌ。
以茎尖为外植体，每处理培养１０瓶，每瓶接种１个外植
体，每个处理重复３次。观察外植体的成活率、萌发率、
分化率和生长情况。激素筛选：以选定培养基为基本培
养基，以茎尖为外植体，以６－ＢＡ ０．０、０．５、１．０、２．０ｍｇ／Ｌ
和ＮＡＡ ０．００、０．０５、０．１０、０．１５ｍｇ／Ｌ为试验水平，采取
完全随机区组试验设计，设计１６个处理，每个处理培养
１０瓶，每瓶接种１个外植体，每个处理重复３次。其中
均附加蔗糖３０ｇ／Ｌ，琼脂６ｇ／Ｌ。观察在不同浓度和不
同激素的作用下，丛生芽诱导率和生长情况。外植体筛
选：以选定的培养基为基本培养基，添加选定的激素浓度，
其中均附加蔗糖３０ｇ／Ｌ、琼脂６ｇ／Ｌ。分别用山杏的茎
尖、茎段、叶片为外植体，接种到培养基上。每处理培养
１０瓶，每瓶接种１个外植体，每处理重复３次。观察不
同外植体的芽启动时间、分化率和生长情况。
１．２．２ 继代培养 初代培养后，选取生长健壮，无染菌
的幼苗，进行继代培养的激素浓度的初步筛选，以６－ＢＡ
０．５、１．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ ０．０５、０．１０ｍｇ／Ｌ交叉配比为４
个试验水平，以初代培养中选定的培养基为基本培养
基，其中均附加蔗糖３０ｇ／Ｌ，琼脂６ｇ／Ｌ。每处理培养１０
瓶，每瓶接种１个外植体，每个处理重复３次。观察丛生
芽诱导率和生长情况。
１．２．３ 培养条件 培养室温度为２４～２５℃，光照强度
为２ ０００～３ ０００ｌｘ，光照时间为１６ｈ／ｄ，空气相对湿度为
４０％～７０％，以上培养基的ｐＨ均为５．６～５．８。
１．３ 数据分析
数据分析均采用Ｅｘｃｅｌ和Ｓｐｓｓ软件进行处理和分
析。生长情况的评价标准分为３个等级：第１个等级为
组培苗细弱，生长缓慢，叶色发黄（＋）；第２个等级为组
培苗长势一般，叶色浅绿（＋＋）；第３个等级为组培苗健
壮，生长较快，叶色浓绿（＋＋＋）。
２ 结果与分析
２．１ 不同激素浓度对初代培养中组培苗的影响
２．１．１ 灭菌时间对外植体灭菌效果的影响 对山杏茎
段采用３种升汞灭菌时间处理。由表１可知，当用１．０
ｇ／Ｌ ＨｇＣｌ２消毒１ｍｉｎ时，１０ｄ后茎段的死亡率最低，但
污染率最高；消毒５ｍｉｎ时，１０ｄ茎段的死亡率最高，污
染率却最低；而消毒３ｍｉｎ时，茎段的污染率和死亡率都
控制在较低的水平，成活率可达８１．７％，而且外植体在
培养基上生长良好。因此用１．０ｇ／Ｌ ＨｇＣｌ２消毒３ｍｉｎ
为最佳的消毒时间。
表１ 消毒时间对外植体灭菌效果的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ ｅｆｅｃｔ
消毒时间
Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ
ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｎｕｍｂｅｒ
／个
死亡率
Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｒａｔｅ
／％
污染率
Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
／％
成活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ
／％
１
３
５
６０
６０
６０
３．３±０．２６ｃ
８．３±０．４６ｂ
２６．７±１．３１ａ
４３．３±１．２５ａ
１０．０±０．７０ｂ
３．３±０．３６ｃ
５３．４±１．２５ｃ
８１．７±１．１１ａ
７０．０±１．１４ｂ
注：表中数据为３次重复的均值±标准差；ＬＳＤ多重比较，表中同列中不同字母
表示α＝０．０５显著水平，下同。
Ｎｏｔｅ：Ｄａｔａ ｉｎ ｔｈｅ ｔａｂｌｅ ｉｓ ｔｈｅ ｍｅａｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎｓ±ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ；ＬＳＤ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎ ｔｈｅ ｔａｂｌｅ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔα＝０．０５
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ，ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
表２ 培养基对外植体分化和生长情况的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｍｅｄｉｕｍ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
成活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｒａｔｅ／％
萌发率
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
分化率
Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ｒａｔｅ
／％
平均丛生芽数
Ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｈｏｏｔｓ／个
生长情况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
ＷＰＭ
ＭＳ
改良 ＭＳ
５０．０±２．９８ｃ
６３．３±２．９５ｂ
７０．０±１．５１ａ
１０．０±１．９３ｃ
１６．７±２．４１ｂ
６０．０±２．１０ａ
０．０±０．００ｃ
６．７±１．３１ｂ
５０．０±３．８０ａ
０．０±０．００ｃ
１．３±０．３６ｂ
２．５±０．６６ａ
＋
＋＋
＋＋＋
２．１．２ 基本培养基对外植体生长的影响 表２结果表
明，在ＷＰＭ培养基上外植体没有分化的现象，而且生长
状态较差；而在ＭＳ和改良ＭＳ培养基上，外植体都有分
化的现象，但是ＭＳ培养基上分化的丛生芽较少而且生
长状态一般，而改良ＭＳ培养基上外植体生长健壮，丛生
芽较多而且有高生长趋势。所以山杏的适宜基本培养
基为改良ＭＳ培养基。
２．１．３ 激素浓度对外植体生长的影响 ６－ＢＡ和ＮＡＡ
的２因素４水平的完全随机区组试验结果见表３。当
ＮＡＡ的浓度为０ｍｇ／Ｌ时，随着６－ＢＡ的浓度增加丛生
芽的诱导率不断增加。其中６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．０５ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１０ｍｇ／Ｌ的培
养基中外植体生长的都很好，叶色深绿而且健壮，但是
６１１
北方园艺２０１３（０３）：１１５～１１８ ·生物技术·
６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０５ｍｇ／Ｌ的培养基中外植体
的丛生芽诱导率更高些，而且６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
０．１０ｍｇ／Ｌ的组培苗有些出现了玻璃化现象，因此６－ＢＡ
１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０５ｍｇ／Ｌ的激素配比更适宜山杏的
丛生芽的诱导和组培苗的生长。在最适激素浓度培养
基上，５ｄ茎尖开始在原有的基础上生长变大（图１－１）；１５
ｄ基部开始长愈伤组织，有些叶腋处长出芽并生长变大
（图１－２）；２２ｄ后基部的愈伤组织分化出丛生芽，有些叶
腋也长出了丛生芽（图１－３）；３０ｄ开始有些丛生芽开始
往高生长并且继续分化（图１－４）。对试验结果进行双因
素方差分析。由表４可知，４，６－ＢＡ和ＮＡＡ对山杏的丛
生芽诱导率极显著，６－ＢＡ×ＮＡＡ的交互作用对山杏的
丛生芽诱导率也极显著，显著水平达到了０．０００。
表３ 不同激素浓度对外植体诱导率和生长情况的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
６－ＢＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔｓ
ｎｕｍｂｅｒ／个
产生丛生芽外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｍｕｌｔｉｐｌｅ
ｓｈｏｏｔｓ／个
丛生芽诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｈｏｏｔｓ／％
平均丛生芽数
Ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｈｏｏｔｓ／个
生长情况
Ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
１
２
３
４
５
６
７
８
９
１０
１１
１２
１３
１４
１５
１６
０．０
０．５
１．０
２．０
０．０
０．０
０．０
０．５
０．５
０．５
１．０
１．０
１．０
２．０
２．０
２．０
０．００
０．００
０．００
０．００
０．０５
０．１０
０．１５
０．０５
０．１０
０．１５
０．０５
０．１０
０．１５
０．０５
０．１０
０．１５
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
３０
０
３
５
６
０
０
０
３
４
０
１５
１０
６
９
１２
８
０．０±０．００ｊ
１０．０±０．７２ｉ
１６．７±１．６５ｇ
２０．０±１．３２ｆ
０．０±０．００ｊ
０．０±０．００ｊ
０．０±０．００ｊ
１０．０±０．９６ｉ
１３．３±１．１４ｈ
０．０±０．００ｊ
５０．０±１．００ａ
３３．３±０．３０ｃ
２０．０±０．９８ｆ
３０．０±０．３０
４０．０±０．３６ｂ
２６．７±０．５３ｅ
０．０±０．００ｃ
１．０±０．３０ｂ
１．０±０．２６ｂ
１．０±０．６２ｂ
０．０±０．００ｃ
０．０±０．００ｃ
０．０±０．００ｃ
１．０±０．６２ｂ
１．０±０．２６ｂ
０．０±０．００ｃ
２．５±０．６６ａ
１．７±０．６２ａ
１．８±０．４４ａ
１．９±０．４０ａ
２．１±０．３６ａ
１．８±０．４６ａ
＋
＋
＋＋
＋＋
＋
＋
＋
＋＋
＋＋
＋
＋＋＋
＋＋
＋＋
＋＋
＋＋＋
＋＋
图１ 改良ＭＳ中山杏组培苗不同天数生长情况
Ｆｉｇ．１ Ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｏｆ Ｐｒｕｎｕｓ ｓｉｂｉｒｉｃａｉｎ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄａｙｓ
表４ 方差分析结果
Ｔａｂｌｅ ４ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ
变异来源
Ｓｏｕｒｃｅ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ
自由度
Ｄｅｇｒｅｅｓ ｏｆ ｆｒｅｅｄｏｍ
Ｆ值
Ｆｖａｌｕｅ
显著水平
Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｅｖｅｌ
６－ＢＡ
ＮＡＡ
６－ＢＡ×ＮＡＡ
３
３
９
４ ４５９．２１５
７１０．１６０
３０６．２１９
０．０００
０．０００
０．０００
２．１．４ 外植体筛选结果 分别选用山杏的茎尖、茎段、
叶片为外植体进行组培试验，由表５可知，茎尖分化产
生丛生芽的时间是第２２天，最快；叶片是３２ｄ；茎段需要
４５ｄ，最慢。而且茎尖的分化率最高达到５０％，茎段分化
率最低只有３．３％。而且以茎尖为外植体的组培苗生长
健壮，分化的丛生芽较多，丛生芽容易向高生长。因此
茎尖为山杏的最适外植体材料。这３类外植体产生丛
生芽的状况分别不同。茎尖是先生长变大，并且基部开
始长愈伤组织，然后由基部愈伤组织和叶腋处分化出丛
生芽；茎段是叶腋处芽先突破芽鳞，开始生长变大，然后
分化出丛生芽，或者长大后的腋芽转接到其它培养基然
后分化出丛生芽；叶片首先生成愈伤组织，然后在愈伤
组织上分化出丛生芽，但是产生的丛生芽叶色淡绿发
黄，生长较慢。
７１１
·生物技术· 北方园艺２０１３（０３）：１１５～１１８
表５ 外植体筛选结果
Ｔａｂｌｅ ５ Ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ ｅｘｐｌａｎｔｓ
外植体种类
Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｔｙｐｅ
芽启动时间
Ｂｕｄ ｓｔａｒｔ ｕｐ ｔｉｍｅ／ｄ
分化率
Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ｒａｔｅ／％
生长情况
Ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
茎尖
茎段
叶片
２２
４５
３２
５０．０±３．８０ａ
３．３０±０．５７ｃ
１０．０±１．４７ｂ
＋＋＋
＋
＋＋
２．２ 不同的激素浓度对继代培养中组培苗的影响
从初代培养基上选取生长健壮、无染菌的组培苗，
其上的丛生芽分成单芽，将所得的单芽接种到４种不同
浓度配比的继代培养基上，３０ｄ后所得结果见表６。表６
结果表明，大部分单芽都产生了新的丛生芽，而且都有
不同程度的生长。继代培养采用原有的初代培养基中
添加１．０ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ的２种激素配比诱导丛生芽的
效果都比较差，而降低了６－ＢＡ浓度的培养基诱导丛生
芽的效果比初代时候要好，当激素浓度为０．５ｍｇ／Ｌ
６－ＢＡ，０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ时，继代培养中丛生芽的诱导效
果最好，诱导率可达到６８．８％，而且生长情况最好。
表６ 继代培养激素浓度筛选结果
Ｔａｂｌｅ ６ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
６－ＢＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｎｕｍｂｅｒ／个
产生丛生芽外植体数
Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｈｏｏｔｓ／个
丛生芽诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｍｕｌｔｉｐｌｅ
ｓｈｏｏｔｓ／％
平均丛生芽数
Ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｈｏｏｔｓ／个
生长情况
Ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
１
２
３
４
１．０
１．０
０．５
０．５
０．０５
０．１０
０．０５
０．１０
４０
４０
４４
３８
１８
１７
２３
２５
４５．０±０．８９ｃ
４２．５±２．３５ｃ
５２．２±１．９０ｂ
６８．８±３．０３ａ
２．７±０．３６ｂ
２．６±０．４４ｂ
２．８±０．２６ｂ
３．９±０．６２ａ
＋＋
＋
＋＋
＋＋＋
３ 结论与讨论
在山杏外植体灭菌筛选试验中，升汞的消毒时间设
置为３ｍｉｎ最佳。另外取材季节以材料积累了较丰富的
营养和内源激素为佳，此时外植体抵抗病菌的能力强，一
般情况下，大多在材料休眠末期或萌动前期取材最为有
利［２］。在马琳等［３］的锯叶班克木的外植体消毒试验中可
知，夏季气温较高，各类菌的活跃程度较高，污染率也高。
该试验以春季４～５月份最佳，污染率极低。该试验的基
本培养基筛选设置了３个培养基，分别是 ＷＰＭ、ＭＳ和改
良ＭＳ［Ｃ（ＮＨ４＋）∶Ｃ（ＮＯ３－）＝０．１６］培养基。该试验结
果表明，最适培养基为改良ＭＳ培养基，在改良ＭＳ培养
基上外植体分化效果最好，而且生长健壮，这与齐高强［４］
的试验结果一致。在激素浓度筛选中，得到最利于外植体
诱导丛生芽和生长的激素浓度为１．０ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ和
０．０５ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ。茎尖是山杏的最适外植体，丛生芽
诱导效果比较好，而且丛生芽容易向高生长。这可能由
于不同外植体的内源激素水平不同所导致的。而且茎
尖相对于茎段和叶片来说可能未高度分化，组织代谢旺
盛，再生能力强。在继代培养中，筛选出的最适浓度配比
是０．５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ、０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，该浓度下外植体的
丛生芽诱导率明显高于初代，而且生长较健壮。但一般情
况下继代培养中６－ＢＡ和ＮＡＡ的浓度相对降低会有利于
组培苗的生长，这与该试验结果有所不同，这可能由于继
代培养的激素筛选要考虑外植体的继代次数和外植体的
激素积累等情况。在接下来的试验中，课题组将对继代培
养的激素配比筛选进行进一步的研究。
参考文献
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ＺＨＥＮＧ Ｋｅ１，ＤＯＮＧ Ｓｈｅｎｇ－ｊｕｎ１，ＴＩＡＮ Ｍｉｎｇ－ｆａｎｇ２，ＬＩＵ Ｍｉｎｇ－ｇｕｏ１，ＷＵ Ｙｕｅ－ｌｉａｎｇ１，ＡＮ Ｃｈｅｎｇ－ｌｉａｎｇ１
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Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｆｕｘｉｎ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ １２３０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ Ｐｒｕｎｕｓ ｓｉｂｉｒｉｃａ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ ｋｉｎｄ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅ ｋｉｎｄ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｉｍｐａｃｔ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｖａｒｉｏｕｓ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｅｆｅｃｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ＨｇＣｌ２１ｇ／Ｌ ａｓ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｔｏ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔ ３ｍｉｎ；ｔｈｅ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ
ｇｒｏｗｔｈ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｉｎ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ＭＳ［Ｃ（ＮＨ４＋）∶Ｃ（ＮＯ３－）＝０．１６］ｍｅｄｉｕｍ；ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ
ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗａｓ ｓｈｏｏｔ ｔｉｐｓ；ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｗａｓ ６－ＢＡ １．０ｍｇ／Ｌ ａｎｄ ＮＡＡ ０．０５ｍｇ／Ｌ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ
ｃｕｌｔｕｒｅ；ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｗａｓ ６－ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ ａｎｄ ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ ｉｎ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｒｕｎｕｓ ｓｉｂｉｒｉｃａ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
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