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漏芦降脂作用的研究



全 文 :漏芦降脂作用的研究
王媛,张春凤,杨中林*
(中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室,江苏 南京 210009)
摘 要:目的:研究祁州漏芦水提物和醇提物的降血脂活性的差异。方法:采用 75%蛋黄乳造模的小鼠
高脂血症模型,以小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL - C)和高密度脂蛋白
(HDL - C)为指标研究漏芦醇提液和水提液的降脂作用的差异。结果:与模型组相比,漏芦醇提液低剂
量组和漏芦水提取液高剂量组小鼠 TC、TG和 LDL - C 的水平显著降低(P < 0. 05) ,漏芦水提取液低剂
量组小鼠 HDL - C(P < 0. 01)的水平有极显著升高。结论:漏芦水提液的降脂作用优于漏芦醇提液的
作用。
关键词:祁州漏芦;TC;TG;LDL - C;HDL - C
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1002 - 2392(2012)04 - 0024 - 02
收稿日期:2012 - 04 - 07 修回日期:2012 - 06 - 15
基金项目:江苏省高校优势学科建设工程资助项目
作者简介:王媛(1986 -) ,女,硕士研究生,从事中药制剂研究。
* 通讯作者:杨中林(1950 -) ,女,教授,博士生导师,主要从事中药炮
制与制剂研究工作。
漏芦[Rhaponticum uniflorum(L.) ],为菊科植物
祁州漏芦的干燥根,其苦寒,归胃经。有清热解毒,消
痈,下乳,舒筋通脉的作用。可治疗乳痈肿痛,痈疽发
背,瘰疬疮毒,乳汁不通,湿痹拘挛[1]。我国之前有人
报道,漏芦中所含的蜕皮甾酮有一定的降血脂的作用,
仅有以 LDL - C为指标研究了漏芦水煎液的降胆固醇
作用的报道。本文用蛋黄乳复制小鼠高血脂模型来分
别研究漏芦水提取液和漏芦醇提取液的降血脂作用极
其差异。
1 实验材料
1. 1 药物与试剂
漏芦饮片(产地:江苏,购自南京同仁堂药店,并
经杨中林教授鉴定为菊科植物祁州漏芦 Rhaponticum
uniflorum(L.)的干燥根) ;血脂康胶囊 (批号:
20100908;北京北大维信生物科技有限公司) ;辛伐他
汀片(批号:1009015;哈药集团三精制药股份有限公
司) ;总胆固醇(CHO)测定试剂盒(批号:20110303;北
京北化康临床试剂有限公司) ;总甘油三酯(TG)测定
试剂盒(批号:20110112;北京北化康临床试剂有限公
司) ;低密度脂蛋白胆固醇(LDL - C)试剂盒(批号:
20110312;北京北化康临床试剂有限公司) ;高密度脂
蛋白胆固醇(HDL - C)试剂盒(批号:20110303;北京
北化康临床试剂有限公司)。
1. 2 动物
昆明杂种小鼠 80 只,体质量 18 ~ 22g,雌雄各半。
1. 3 仪器
B -260 型恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂) ;
TDL80 - 2B 型低速离心机(上海安亭科学仪器厂) ;
DG5033A型酶联免疫检测仪(上海坤肯生物化工有限
司)。
2 实验方法
2. 1 供试品溶液的制备
2. 1. 1 漏芦水提取液高低剂量组样品液的制备
称取漏芦 7. 5g 和 67. 5g,分别用 10 倍量、8 倍量
和 8 倍量水煎煮 3 次,时间分别为 1h、40min、40min,
合并 3 次滤液,两组滤液分别浓缩定容至 100mL,使漏
芦水提取液低剂量组样品液浓度为 0. 075g /mL,漏芦
水提取液高剂量组样品液浓度为 0. 675g /mL。各样品
液置 4℃冰箱冷藏备用。
2. 1. 2 漏芦醇提取液高低剂量组样品液的制备
称取漏芦 7. 5g和 67. 5g,分别用 8 倍量、6 倍量和
6 倍量 70%的乙醇煎煮 3 次,时间分别为 1h、40min、
40min,合并 3 次滤液,两组滤液分别浓缩定容至
100mL,使漏芦醇提取液低剂量组样品液浓度为
0. 075g /mL,漏芦醇提取液高剂量组样品液浓度为
0. 675g /mL。各样品液置 4℃冰箱冷藏备用。
2. 1. 3 阳性对照药组的药液制备
血脂康药液的制备,精密称取血脂康内容物
5. 005 3g,研磨至细小的粉末,并加入 100mL水溶配制
成浓度为 0. 05g /mL的药液待用。辛伐他汀片药液的
制备,精密称取辛伐他汀 7 片,共 1. 667 5g,研磨至细
小的粉末,并加入 100mL 水配制成浓度为 0. 001 4g /
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中 医 药 学 报
Acta Chinese Medicine and Pharmacology
2012 年第 40 卷第 4 期
Vol. 40,No. 4,2012
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mL的药液待用。
2. 1. 4 蛋黄乳溶液的制备
量取蛋黄液 75mL,用生理盐水稀释至 100mL,配
置成 75%的蛋黄乳均匀溶液。
2. 2 实验方法
80 只小鼠,按体重随机分为 8 组,每组 10 只,分
别为空白组、模型组、辛伐他汀组、血脂康组、漏芦水提
低剂量组(水漏 - L)、漏芦水提高剂量组(水漏 - H)、
漏芦醇提低剂量组(醇漏 - L)、漏芦醇提高剂量组(醇
漏 - H) ,灌胃给药。空白组、模型组分别灌胃给予等
体积(20mL /kg /d)生理盐水。辛伐他汀组、血脂康组、
漏芦低剂量组和漏芦高剂量组的剂量分别为
0. 001 4g / kg /d、1g /kg /d、1. 5g /kg /d 和 13. 5g /kg /d。
连续灌胃给药 14 天,末次给药后禁食 4h,空白组小鼠
腹腔注射生理盐水,其他组均腹腔注射蛋黄乳[2],注
射体积均为 20mL /kg。造模后继续禁食 20h,摘眼球
取血约 0. 5mL,血液在 3 000r /min 离心 10min,分离得
到血清。按照总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高
密度脂蛋白试剂盒说明书操作,测定血清 TC、TG、
LDL - C和 HDL - C的浓度。
2. 3 统计方法
实验数据采用 Excel 软件处理,数据以(珋x ± s)表
示,以 t检验法分析各组别之间的显著性差异。
3 实验结果
测得给药 14 天后不同浓度的漏芦水提取液和醇
提取液对高脂血症小鼠血清 TC、TG、LDL - C 和
HDL - C的影响结果,测定各组小鼠血清的 TC、TG、
LDL - C和 HDL - C浓度(见表 1)。
表 1 不同浓度的漏芦水提取液和漏芦醇提取液对小鼠血脂的影响(珋x ± s)
分组 只数 给药天数 剂量(g /kg /d) TC(mmoL / l) TG(mmoL / l) LDL(mmoL / l) HDL(mmoL / l)
空白 10 14 - 4. 26 ± 0. 60 1. 59 ± 0. 38 0. 22 ± 0. 70 4. 38 ± 0. 74
模型 10 14 - 13. 55 ± 0. 76** 40. 52 ± 5. 44** 3. 06 ± 1. 41** 3. 01 ± 0. 20**
辛伐他汀 10 14 0. 0014 9. 31 ± 2. 99△△ 33. 95 ± 3. 47△ 0. 91 ± 0. 45△△ 1. 79 ± 0. 42
血脂康 10 14 1 9. 78 ± 1. 99△△ 32. 15 ± 9. 22△ 0. 51 ± 0. 72△△ 2. 03 ± 0. 48
漏醇 - L 10 14 1. 5 9. 55 ± 1. 73△△ 34. 96 ± 5. 10△ 1. 31 ± 0. 77△△ 1. 87 ± 0. 40
漏醇 - H 10 14 13. 5 11. 69 ± 2. 67△ 39. 12 ± 8. 08 1. 52 ± 1. 16 1. 98 ± 0. 38
漏水 - L 10 14 1. 5 11. 69 ± 1. 68△ 37. 50 ± 6. 13 1. 34 ± 0. 71△△ 3. 43 ± 0. 50△■■
漏水 - H 10 14 13. 5 10. 89 ± 2. 93△ 33. 31 ± 5. 01△ 1. 30 ± 0. 34△△ 2. 82 ± 0. 61
注:与空白对照组比较,**P < 0. 01;与髙脂模型组比较,△△P < 0. 01,△P < 0. 05;与漏芦醇提低剂量组比较,■■P < 0. 01。
实验结果显示,高脂模型组小鼠血清的 TC、TG、
LDL - C的水平与空白组比较显著升高(P < 0. 01) ,
HDL - C 水平与空白组比较显著降低(P < 0. 01) ,表
明小鼠高脂模型建立成功;与模型组比较,漏芦醇提液
组中低剂量组小鼠血清中 TC(P < 0. 01)、TG(P <
0. 05)和 LDL - C(P < 0. 01)的水平显著降低,高剂量
组仅有 TG的水平显著降低(P < 0. 05) ;漏芦水提取液
组中低剂量组小鼠血清中 TC(P < 0. 05)和 LDL - C
(P < 0. 01)的水平显著降低,HDL - C(P < 0. 05)的水
平显著升高,高剂量组则有 TC(P < 0. 05)、TG(P <
0. 05)和 LDL - C(P < 0. 01)的水平显著降低的作用。
4 讨论
漏芦有抗动脉粥样硬化、抗氧化、免疫调节、抗缺
氧及改善记忆障碍[3]等方面的药理作用,应用广泛。
实验结果表明,不同浓度的漏芦的水提取液和醇提取
液有不同程度的抗高血脂的功效。总体来说,漏芦水
提液的降脂作用强于漏芦醇提液,尤其在 HDL - C 水
平上,漏芦水提液相较于醇提液有明显的升高 HDL -
C水平的作用。
参考文献:
[1] 中华人民共和国国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)
[S].北京:化学工业出版社,2010:348.
[2] 邵淑丽,徐兴军,马德滨,等.柴胡、姜黄对小白鼠实验性高脂血症
的预防作用[J].中医药学报,2002,30(4) :59.
[3] 张强,苏黎红.漏芦药理及实验性研究[J]. 时珍国医国药,2000,
11(6) :567.
Experimental Study of Rhaponticum uniflorum for Antihyperlipidemia
WANG Yuan,ZHANG Chun - feng,YANG Zhong - lin
(China Pharmaceutical University,State Key laboratory of Natural Products
and Functions,Nanjing 210009,China)
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中 医 药 学 报
Acta Chinese Medicine and Pharmacology
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Abstract:Objective:To investigate the effect of ethanol extract and water extract of Rhaponticum uniflorum on reducing
plasma lipoproteins. Methods:Establishing hyperlipoidemia mice model by intraperitoneal injection of 75% egg - yolk e-
mulsion. The levels of TG,TC,LDL - C and HDL - C were examined to study the effects of Rhaponticum uniflorum
(L.)on Blood. Results:TC,TG and LDL - C levels in the higherer dose of ethanol extract group and the lower dose of
water extract group were less then those in model groups(P < 0. 05) ;HDL - C level in the lower dose of ethanol extract
group was significantly increased compared with that in the model group(P < 0. 01). Conclusion:The effect of water ex-
tract of Rhaponticum uniflorum on reducing plasma lipoproteins is better than the ethanol extract.
Key words:Rhaponticum uniflorum(L.) ;TC;TG;LDL - C;
檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼
HDL - C
芪竹方中单体及配伍对人胃癌细胞
MGC - 803 抑制作用研究
王卯,叶丽红*
(南京中医药大学,江苏 南京 210029)
摘 要:目的:观察芪竹方单体成分薯蓣皂苷、莪术醇及两者配伍对人胃癌细胞 MGC - 803 的增殖抑制
作用,初步探讨芪竹方复方在抗肿瘤治疗中的有效成分及作用机制。方法:选用 5 个剂量的薯蓣皂苷、
莪术醇单药组,及 2 个剂量的两药配伍组在 24h、48h 2 个不同时间点作用人胃癌细胞 MGC - 803,采用
MTT法检测药物对 MGC -803 的增殖抑制率。结果:一定浓度范围内,薯蓣皂苷及莪术醇均对 MGC -
803 细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用,且两药配伍使用较单药能产生更好的抑制作用。结论:薯
蓣皂苷及莪术醇可能为芪竹方抑制人胃癌细胞 MGC -803 增殖的有效成分。
关键词:胃癌;芪竹方;薯蓣皂苷;莪术醇
中图分类号:R285. 15;R735. 2 文献标识码:A 文章编号:1002 - 2392(2012)04 - 0026 - 03
收稿日期:2012 - 04 - 22 修回日期:2012 - 06 - 26
基金项目:江苏省科技厅科技基础实施建设计划项目(BM2009903 -
KF13)
作者简介:王卯(1987 -) ,男,硕士研究生,从事中医肿瘤内科学研究。
* 通讯作者:叶丽红(1967 -) ,女,副教授,副主任医师,从事中医内科
常见病多发病尤其是恶性肿瘤的教学与临床工作。
芪竹方是江苏省中医院单兆伟教授根据 40 余年
经验,创研出的治疗胃肠道肿瘤的临床经验方。该方
由黄芪、玉竹、莪术、仙鹤草等 8 味中药组成。临床研
究证实,芪竹方能有效改善胃癌术后患者生存质
量[1]。前期研究表明[1 - 3],芪竹方在肿瘤的发生发展
中发挥阻断效应,可显著抑制多种人类肿瘤细胞的生
长,诱导其凋亡,尤其对人胃癌细胞 MGC -803 作用明
显,在 50μg /mL ~ 500μg /mL 的浓度范围,芪竹方可明
显抑制 MGC -803 细胞增殖,并表现出时间和浓度依
赖性,其作用机制可能由抑制 VEGF 表达、介导
Caspase - 3 的增殖、诱导端粒酶凋亡、下调 survivin 基
因、对化疗药物的增敏作用和抗多药耐药等多途径多
靶点而发挥作用。本研究选取芪竹方组方:滋阴养胃
之扶正主药玉竹的已知成分薯蓣皂苷[4],破积通络之
抗癌主药莪术的已知成分莪术醇[5]。拟通过观察两
单体成分独立及配伍对于 MGC - 803 的增殖抑制作
用,从而初步探讨芪竹方对胃癌细胞作用的有效成分
及机制。
1 材料与方法
1. 1 材料
人胃癌细胞株 MGC -803 由南京中医药大学药学
院实验室提供;薯蓣皂苷(HPLC≥98%)购自南京泽
朗医药科技有限公司;莪术醇(HPLC≥98%)购自上
海源叶生物科技有限公司;氟尿嘧啶为天津金耀氨基
酸有限公司产品;MTT、DMSO 购自美国 Sigma 公司;
RPMI - 1640 培养基、新生牛血清、胰蛋白酶购自美国
GIBCO公司。
1. 2 方法
1. 2. 1 实验分组
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Acta Chinese Medicine and Pharmacology
2012 年第 40 卷第 4 期
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