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试 验 研 究 农业开发与装备 2014年第7期
摘要：初步研究了蔗糖浓度以及光照对橡胶草试管苗培养的影响。
结果表明：培养基最佳蔗糖浓度为10g/L；有光照时无菌苗生长健
壮，暗处理无菌苗纤细无愈伤组织。在研究蔗糖浓度对种子发芽影
响的实验时，发现有些无菌苗呈现浅黄色、质地半透明，怀疑出现
了玻璃化现象。本实验进一步研究了蔗糖浓度对橡胶草试管苗玻璃
化的影响，结果表明：选择低的蔗糖浓度（5g/L）有利于降低玻璃
化率。
关键词：橡胶草；试管苗；优化
0 引言
橡胶草，菊科蒲公英属多年生宿根型草本植物，与巴西橡胶
树、银胶菊一起并称为全球三大产胶植物。橡胶草能生产优质的橡
胶，具有良好的研究价值和开发前景[1-2]。本研究在已有研究成果
的基础上，对橡胶草试管苗的组织培养进行适当优化，以期提高试
管苗的成活率。
1 材料与方法
1.1 实验材料
橡胶草种子，橡胶草无菌苗。
1.2 实验方法
1.2.1　培养的过程中光照对无菌苗生长状况的影响。将正常接种
后的培养瓶进行光照和无光照处理，每个处理3次重复，每个重复
播种20粒种子。培养温度为26℃（下同）。
1.2.2　橡胶草种子最适蔗糖浓度试验。对应的蔗糖浓度为0、10、
20、30g/L，每个处理三次重复，每个重复20粒种子。
1.2.3　蔗糖浓度对橡胶草试管苗玻璃化的影响。将橡胶草种子离
体萌发后的无菌苗，接种在MS标准培养基中，分别设蔗糖浓度为
5、15、25g/L共三个梯度，每个组合两次重复，30天后统计实验结
果。
2 实验结果与分析
2.1 橡胶草种子无菌萌发条件的优化
2.1.1　光照对种子发芽的影响。橡胶草种子在光照和暗处理的条
件下，发芽率无显著差异，说明光照对橡胶草种子的萌发没什么影
响。但无菌苗的生长是需要光的。有光照时无菌苗茎粗生长健壮，
无光照时无菌苗纤细且植株呈现浅黄。
2.1.2　培养基中蔗糖浓度对种子发芽的影响。实验显示，在橡胶
草种子无菌发芽的无激素MS固体培养基中，无蔗糖的条件下，发芽
率较高，长势良好，有蔗糖的条件下则出现玻璃化现象，蔗糖浓度
为30g/L的培养基上发芽率仅为32.4%。
2.2 蔗糖浓度对橡胶草试管苗玻璃化的影响
蔗糖浓度对玻璃化率的影响大，当浓度为25g/L时，玻璃化率
最高，平均值为30.4%，植株矮小，丛生芽多，且多为小叶，大部
分芽出现肥肿透明，长势弱；其次是浓度为15g/L时，玻璃化率平
均值为14.0%，植株较高丛生芽较多，长势强；蔗糖浓度为5g/L的
玻璃化率最低，平均值仅为7.2%，植株高大，抽芽量少，节间较
长，部分苗茎段下端呈红色，叶大茎粗，且苗颜色较深，长势强。
蔗糖浓度越低玻璃化率越低，因此，在橡胶草组织培养中，选择
0～15g./L的蔗糖浓度有利于降低玻璃化率。
3 结论与讨论
3.1 橡胶草种子无菌萌发条件的优化
3.1.1　实验表明，橡胶草种子无菌萌发与培养基中蔗糖浓度都有
一定的关系，而与光照关系不明显。
3.1.2　本试验研究了培养基中一定浓度范围的蔗糖对种子萌发的
影响。结果表明，高浓度蔗糖（30g/L）对种子萌发不利，最终导
致试管苗褐化死亡，这可能与高糖带来的培养基高渗透压有关。
3.2 组织培养中玻璃化的解决方法
国内外研究指出，组织培养过程中的玻璃化与外植体的选择、
组培光照、培养温度、培养基的类型等因素有关。玻璃化是植物组
织培养中的非正常现象，严重制约着组织培养的成功。目前，主要
通过以下几点措施抑制玻璃化现象：
3.2.1　增加培养容器的透气性，降低培养湿度及温度。刘非燕等
[3]在进行重瓣丝石竹组织培养时发现，试管苗的玻璃化程度与培养
温度成正比。Phan[4]对苹果两个品种进行4℃的冷处理，成功将玻
璃苗转为正常苗。在厚荚相思组织培养研究中，丁国昌[5]指出，塑
料膜和透气性薄膜能显著抑制试管苗的玻璃苗，并且在培养中选用
塑料瓶+透气膜，从而获得了更好的效果。
3.2.2　增加培养过程中自然光照时间。自然光照能够降低试管苗
的玻璃化概率，将玻璃苗置于自然光照下一段时间，会发现茎叶变
红，此时玻璃化程度逐渐降低，这是因为自然光中的紫外线对试管
苗的成熟有促进作用，能够加快试管苗的木质化。戴园园等[6]在甜
瓜的组织培养中选用不同颜色光照培养，结果发现：光的颜色对玻
璃苗的发生有着显著影响，蓝光会加剧试管苗玻璃苗而白光则对玻
璃化有着明显抑制作用。另有研究者认为，太长的光照时间会显著
提高试管苗玻璃化率[7]。
3.2.3　调节培养基成分。孙庆春[8]在菊花的组织培养研究中发
现，培养基蔗糖浓度为35g /L时，试管苗玻璃化程度明显下降。马
济民[9]在桉树组织培养研究中发现，用自来水代替蒸馏水能够显著
降低玻璃化率。
参考文献
[1]　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志[M]．北京：科
学出版社，1999：45-46.
[2]　罗士苇，冯午，吴相钰．橡胶草[M]．北京：中国科学院，1951.
[3]　刘非燕，郭达初．重瓣丝石竹试管苗玻璃化发生原因初探[J]．
杭州大学学报（自然科学版），1996，23（4）：382-387.
[4]　Phan C T，Egedus P．Possible metabolic basis for
the development anomaly observed in vitro culture，
called-vitreous plants[J]．Plant Cell Tissue，1986，（6）：
83-94.
[5]　丁国昌，马钟丽，林思祖.厚荚相思玻璃化苗细胞超微结构的变
化[J].福建林学院学报，2007，27（1）：40-43.
[6]　戴园园，孙永林，周晓阳.甜瓜试管苗继代培养玻璃化现象的研
究[J].生物学杂志，2008，25（2）：48-50.
[7]　孙满芝，尹成涛．植物组培过程中玻璃化程度的发生与解决措
施[J].山东林业科技，2001，（6）：19-20.
[8]　孙庆春，郑成淑，丰震．菊花玻璃化苗与正常苗的生理特征比较
[J].山东农业科学，2009，（5）：45-47.
[9]　马济民．桉树组织培养中的玻璃化现象及其克服措施[J]．安徽
农业科学，2009，37（27）：29-30.
橡胶草试管苗培养条件的优化
罗成华1，闫 洁2*
（1.新疆石河子工程技术学校，新疆石河子 832003；
2.石河子大学，新疆石河子 832003）
作者简介：罗成华（1989—），男，湖北公安人，硕士，助理讲师，
现任教于新疆石河子工程技术学校。
通讯作者：闫洁，女，副教授，硕士生导师，主要从事植物基因工程
研究。