全 文 ：2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
* 基金项目:河南省科技厅重点科技攻关项目(122102310185)
禹州漏芦活性部位的研究及其对小鼠急性肝损伤的保护作用*
李祥昀1，胡春月2，胡利欣2，王优湑2，张伟晓2，安硕2
1．河南中医学院第三附属医院，河南 郑州 450008;2．河南中医学院，河南 郑州 450046
摘要:目的:筛选禹州漏芦保护肝损伤的有效部位，并分析其对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠急性肝损伤的保护机制。方
法:将 110 只昆明种小鼠随机分为 11组，包括正常组，模型组，阳性组，水高剂量、低剂量组，正丁醇高剂量、低剂量组，乙
酸乙醇高剂量、低剂量组，石油醚高剂量、低剂量组。分别每天给予不同剂量的药物:阳性药组(25 mg·kg －1)，石油醚高
剂量、低剂量组(138． 65、69． 33 mg·kg －1)，乙酸乙醇高剂量、低剂量组(40、20 mg·kg －1)，正丁醇高剂量、低剂量组
(119． 95、59． 98 mg·kg －1)及机制。方法:将 110 只昆明种小鼠随机分为 11 组，包括正常组，模型组，阳性组，(175． 79、
87． 40 mg·kg －1)，正常组和模型组给予等体积的羧甲基纤维素钠溶液。7 d 后，除正常组外各组小鼠腹腔注射 0． 2%
CCl4 花生油溶液制备急性肝损伤模型，16 h后取血检测血清中谷草转氨酶(aspertate aminotransferase，AST)、谷丙转氨酶
(alanine transaminase，ALT)活性;测定肝匀浆中丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione
peroxidase，GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性及观察肝脏病理学变化，观察各组肝损伤。结
果:模型组肝脏系数为 5． 3 ± 2． 3，ALT 为(111． 61 ± 22． 21)U·L －1，AST 为(244． 08 ± 55． 09)U·L －1，MDA 为(15． 53 ±
10. 01)nmol·mg －1，SOD为(56． 03 ± 26． 66)U·mg －1，GSH-Px 为(102． 23 ± 53． 71)μmol·mg －1。正丁醇高剂量、低剂量
组肝脏系数分别为 4． 6 ± 2． 8、4． 7 ± 3． 3，ALT 分别为(66． 95 ± 28． 01)U·L －1、(81． 83 ± 29． 54)U·L －1，AST 分别为
(135. 29 ± 89． 05)U·L －1、(163． 39 ± 77． 83)U·L －1，MDA分别为(7． 90 ± 1． 90)nmol·mg －1、(9． 25 ± 3． 31)nmol·mg －1，
SOD分别为(94． 30 ± 29． 22)U·mg －1、(88． 03 ± 27． 84)U·mg －1，GSH-Px 分别为(208． 22 ± 71． 63)μmol·mg －1、
(176． 89 ± 72. 48)μmol·mg －1。水高剂量、低剂量组肝脏系数分别为(4． 6 ± 3． 4)、(4． 7 ± 4． 9)，ALT 分别为(74． 50 ±
29. 28)U·L －1、(83. 17 ± 30． 60)U·L －1，AST分别为(150． 23 ± 81． 31)U·L －1、(175． 34 ± 80． 87)U·L －1，MDA 分别为
(8． 49 ± 4． 45)nmol·mg －1、(9． 00 ± 4． 93)nmol·mg －1，SOD分别为(80． 86 ± 23． 96)U·mg －1、(78． 03 ± 20． 20)U·mg －1，
GSH-Px分别为(205. 07 ± 62． 91)μmol·mg －1、(162． 21 ± 46． 46)μmol·mg －1。正丁醇高剂量、低剂量组，水高剂量、低剂
量组以上指标与模型组比较，差异均有统计学意义(P ＜ 0． 05)。光镜下可见，正丁醇高剂量、低剂量组，水高剂量、低剂量
组均可明显缓解小鼠急性肝损伤。结论:禹州漏芦保护肝脏的药效学活性部位为正丁醇部位和水部位，其保护肝脏的作
用机制与其抗脂质过氧化有关。
文献引用:李祥昀，胡春月，胡利欣，等． 禹州漏芦活性部位的研究及其对小鼠急性肝损伤的保护作用［J］． 中医学报，
2016，31(2):232 － 237．
关键词:禹州漏芦;活性部位;肝功能;小鼠
DOI:10． 16368 / j． issn． 1674 － 8999． 2016． 02． 065
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标志码:A 文章编号:1674 － 8999(2016)02 － 0232 － 06
Study on the Active Site of Ｒadix Echinopsis and Its Protective
Effect on Acute Liver Injury in Mice
LI Xiangyun1，HU Chunyue2，HU Lixin2，WANG Youxu2，ZHANG Weixiao2，An Shuo2
1． The Third Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou Henan China 450008;
2． Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou Henan China 450046
Abstract:Objective:To study and screen the effective part of Echinopsis Ｒadix and mechanism of action in carbon tetrachloride
·232·
2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
(CCl4)induced acute liver injury in mice． Methods:110 mice were randomly divided into 11 groups as follows:the drug groups
mice were treated with positive medicine (25 mg·kg －1) ，Petroleum ether extraction(138． 65，69． 33mg·kg －1) ，acetic ether ex-
traction(40，20 mg·kg －1) ，n-butyl alcohol extraction (119． 95，59． 98mg·kg －1)and aqueous extraction(175． 79，87． 40 mg·
kg －1)for 7 day． At the same time，the normal control group and the model control group took equivalent amount of CMC-Na solu-
tion by the same route． And mice in the positive control group were treated with 25 mg /(kg ·d)－ 1 biphenyl dimethyl dicarboxy-
late． After the last administration，all groups except the normal control were injected with 0． 2% CCl4 solution to induce acute he-
patic injury． Thereafter，the contents of ALT and AST in serum;the activity of MDA，SOD and GSH in the liver were measured and
the hepatic histological changes were observed by optical microscope． Ｒesults:The liver coefficient in the model group was(5． 3 ±
2． 3) ，ALT was (111． 61 ± 22． 21)U·L －1，AST was (244． 08 ± 55． 09)U·L －1，MDA was (15． 53 ± 10． 01)nmol·mg －1，
SOD was (56． 03 ± 26． 66)U·mg －1，GSH-Px was(102． 23 ± 53． 71)μmol·mg －1 ． The liver coefficient in the n-butyl alcohol
high dose and low dose group respectively was (4． 6 ± 2． 8)and (4． 7 ± 3． 3) ，ALT was (66． 95 ± 28． 01)U·L －1 and (81． 83 ±
29． 54)U·L －1 respectively，AST was(135． 29 ± 89． 05)U·L －1 and(163． 39 ± 77． 83)U·L －1 respectively，MDA respectively
was (7． 90 ± 1． 90)nmol·mg －1 and(9． 25 ± 3． 31)nmol·mg －1 and SOD was (94． 30 ± 29． 22)U·mg －1 and(88． 03 ± 27． 84)
U·mg －1，GSH PX was (208． 22 ± 71． 63)μmol·mg －1 and(176． 89 ± 72． 48)μmol·mg －1 ． The liver coefficient in the aqueous
extraction high dose and low dose group respectively was (4． 6 ± 3． 4)and (4． 7 ± 4． 9) ，ALT was (74． 50 ± 29． 28)U·L －1 and
(83． 17 ± 30． 60)U·L －1 respectively，AST was(150． 23 ± 81． 31)U·L －1 and( (175． 34 ± 80． 87)U·L －1 respectively，MDA
respectively was (8． 49 ± 4． 45)nmol·mg －1 and(9． 00 ± 4． 93)nmol·mg －1 and SOD was (80． 86 ± 23． 96)U·mg －1 and
(78. 03 ± 20． 20)U·mg －1，GSH-PX was (205． 07 ± 62． 91)μmol·mg －1 and(162． 21 ± 46． 46)μmol·mg －1 ． The above inde-
xes in the n-butyl alcohol high dose and low dose group，aqueous extraction high dose and low dose group compared with the model
group showed that the differences were statistically significant(P ＜ 0． 05)． Under the light microscope，it was found that n-butyl al-
cohol high dose and low dose group，aqueous extraction high dose and low dose group could obviously alleviate the acute liver inju-
ry in mice． Conclusion:The results show that the pharmacody namicactive extracts of Echinopsis Ｒadix are the n-butanol and water
fractions． The mechanism of liver protection action is apply to it anti-lipid peroxidation．
Ｒeference citation:LI Xiangyun，HU Chunyue，HU Lixin，et al． Study on the Active Site of Ｒadix Echinopsis and Its Protective
Effect on Acute Liver Injury in Mice［J］． Acta Chinese Medicine，2016，31(2) :232 － 237．
Key words:Echinopsis Ｒadix;active site;liver function;mice
禹州漏芦(Ｒadix Echinopsis)为菊科蓝刺头属
植物蓝刺头(Echinops lati-folius Tausch)及华东蓝刺
头(E． grijisii Hance)的干燥根［1］，始载于《神农本草
经》，列为上品，为河南传统的道地药材。《救荒本
草》首次将产于河南的漏芦命名为“禹漏芦”。祁州
漏芦称为漏芦，禹州漏芦和漏芦实为同科不同属的
两种植物，功效不同。《中华人民共和国药典》1995
年版首次将禹州漏芦和漏芦作为两个中药品种收
载。现代科学研究也已充分证实了禹州漏芦与漏芦
的化学成分、药理活性、临床作用明显不同，但受历
史用药习惯的影响，目前二者仍多混在一起使用，品
种十分混乱［2-3］。禹州漏芦的近代研究以噻吩类组
分的化学成分报道居多，但是该组分保肝、抗炎、抗
肿瘤等作用的药效学相关研究少见报道［4］。目前
为止国内还没有人进行禹州漏芦保肝作用的研究，
本实验应用系统的溶剂萃取法与保肝药效实验相结
合，探讨禹州漏芦醇提物不同萃取部位的保肝作用，
以进一步确定禹州漏芦治疗急性肝损伤的活性部
位，并探索保肝作用机制，为禹州漏芦保肝新药的开
发提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 实验动物 昆明种小鼠 110 只，雄雌各半，体
质量(20 ± 2)g(由河南医学院实验动物中心提供，
动物生产许可证号 SCXK(豫)2010-0002)。实验
前，小鼠均适应性饲养 1 周，实验期间每天观察动物
外观，体征及活动情况等，分别于实验前及造模前记
录 1 次体质量，只进食和饮水。
1． 2 药品与试剂
1． 2． 1 实验药物 禹州漏芦采自新乡市辉县，经
河南中医学院药学院生药学科董诚明教授鉴定为
菊科蓝刺头属植物蓝刺头(Echinops lati-folius
Tausch)单个品种。禹州漏芦药材经粉碎后充分混
合，过二号筛，取 200 g 用体积分数 95%乙醇加热
·332·
2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
回流提取，加 10 倍量提取 3 h 后再加入 8 倍量提
取 3 h，第 3 次 6 倍量提取 2 h，合并 3 次提取液，回
收乙醇，得总浸膏 20． 15 g，加蒸馏水 300 mL，成混
悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃
取，萃取 3 次，每次 300 mL，回收溶剂，得石油醚部
位浸膏 3． 94 g，乙酸乙酯部位 1． 16 g，正丁醇部位
4． 97 g，水部位 7． 30 g。灌胃之前，分别用体积分
数 0． 2%羧甲基纤维素钠溶解，配成实验用药浓度
即可。联苯双酯滴丸(批号:110312，浙江万邦药
业有限公司)。
1． 2． 2 试剂 谷丙转氨酶(alanine transaminase，
ALT)和 谷 草 转 氨 酶 (AST)试 剂 盒 (批 号:
20120311) ，丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化
物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过
氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)及考马斯
亮兰蛋白测定试剂盒(批号:20120409) ，均购于南
京建成生物工程研究所;四氯化碳(CCl4，批号:
091101，开封市试剂总厂) ;体积分数 0． 2% CCl4 油
溶液要现用现配，恒温磁力搅拌器搅拌 6 h，其他试
剂均为分析纯。
1． 3 仪器 UV-2000 型紫外分光光度仪(上海尤尼
柯) ;LDZA-0． 8 型低速自动平衡微型离心机(北京
医用离心机厂) ;FA2004B电子天平(上海越平科学
仪器有限公司)、DF-1 集热式恒温磁力搅拌器(金坛
市中大仪器厂)。
1． 4 方法 取 110 只小鼠，雌雄各半，随机分为 11
组，每组 10 只，分别为模型组，正常对照组，阳性组
(25 mg·kg －1) ，石油醚高剂量、低剂量组(138． 65，
69． 33 mg·kg －1) ，乙酸乙酯高剂量、低剂量组(40，
20 mg·kg －1) ，正丁醇高剂量、低剂量组(119． 95、
59． 98 mg·kg －1)及水高剂量、低剂量组(175． 79、
87． 40 mg·kg －1)。正常组和模型组每天灌胃给予
0． 01 mL·10 g －1的体积分数 0． 2%羧甲基纤维素钠
溶液，受试药各组和阳性组的动物每天按等体积灌
胃给药 1 次。第 7 天灌胃 2 h 后，正常对照组腹腔
注射 0． 01 mL·g －1花生油，其余各组动物均腹腔注
射等体积的体积分数 0． 2% CCl4 花生油，禁食不禁
水。灌胃期间，供给小鼠食用河南省实验中心提供
的标准饲料，自由饮用纯净水。观察记录各组小鼠
实验前后的体质量及精神状态、活动情况、皮毛光
泽、食欲排泄等。造模 16 h，3 000 r·min －1离心 15
min，离心半径 8 cm分离血清，冷藏待测。取小鼠全
血后，快速脱颈椎处死，剖腹取肝脏，测定每只小鼠
的肝脏湿质量。取肝右叶组织 0． 5 g 左右，冷生理
盐水浸洗，滤纸拭干，用生理盐水制成质量分数
10%肝组织匀浆，离心，取上清待测。同时取肝左外
叶相同位置，取材修块并保存于体积分数 10%甲醛
溶液中。
1． 4． 1 生化指标的检测 ALT、AST 活性测定采用
改良赖氏法;SOD 含量测定采用采用亚硝酸盐法;
GSH-Px和 MDA含量测定分别采用硫代巴比妥酸比
色法和 5，5-双硫代对硝基苯甲酸显色法。准确称
量肝脏质量，计算肝脏系数(肝脏系数 =小鼠肝脏
湿质量 /处死前小鼠体质量)。
1． 4． 2 组织切片观察 经甲醛处理后的肝组织切
块，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，切片厚度 4 μm，HE染
色，光镜下观察肝组织病理学变化。将肝组织损伤
程度分为 4 级:0 级(－) ，肝组织结构正常，无明显
变性，坏死及炎症细胞浸润;1 级(+) ，肝小叶结构
尚正常，可见气球样变或脂肪变性，散在点状坏死，
偶见炎症细胞浸润;2 级(+ +) ，肝小叶结构不清，
可见明显的灶状坏死，伴有较多炎症细胞浸润;3 级
(+ + +) ，肝小叶结构紊乱、可见明显的片状坏死，
伴有明显区域性炎症细胞浸润。
1． 5 统计学方法 采用 SPSS 20． 0 统计学软件，所
有数据均以均数 ±标准差(珋x ± s)表示;组间比较采
用 t检验，等级资料进行秩和检验。P ＜ 0． 05 为差
异有统计学意义。
2 结果
2． 1 禹州漏芦不同萃取部位对小鼠一般活动状况
的影响 连续观察 7 d，各组小鼠在造模前，除个别
雄鼠有掐咬现象外，饮食、活动、精神状态、皮毛、大
小便等均无异常变化。造模后，大部分小鼠出现倦
缩、竖毛懒动、稀样便等异常情况。与正常组比较，
实验前后各组小鼠的体质量无显著性差异(P ＞
0. 05) ，造模后，与正常组比较，模型组的小鼠肝脏
系显著性增大(P ＜ 0． 01) ，禹州漏芦正丁醇和水部
位的高剂量、低剂量，乙酸乙酯的高剂量组肝脏系数
均较模型组显著降低(P ＜ 0． 05) ，且正丁醇及水部
位的高剂量组与阳性对照药联苯双酯效果相当。见
表 1。
·432·
2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
表 1 实验前后各组小鼠的体质量变化
及肝脏系数 (珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg·kg － 1)
实验前小鼠
体质量(m / g)
造模前小鼠
体质量(m / g)
肝脏系
数 /%
正常组 － 23． 7 ± 0． 9 25． 9 ± 1． 5 4． 4 ± 4． 8＊＊
模型组 － 22． 1 ± 1． 1 24． 8 ± 1． 7 5． 3 ± 2． 3
阳性组 25． 00 21． 8 ± 1． 7 24． 1 ± 1． 9 4． 6 ± 2． 4＊＊
水高剂量 175． 79 23． 5 ± 1． 5 26． 4 ± 1． 3 4． 6 ± 3． 4＊＊
水低剂量 87． 40 22． 8 ± 2． 1 26． 7 ± 1． 9 4． 7 ± 4． 9*
正丁醇高剂量 119． 95 23． 1 ± 1． 4 27． 9 ± 2． 5 4． 6 ± 2． 8＊＊
正丁醇低剂量 59． 98 22． 4 ± 1． 9 25． 4 ± 2． 3 4． 7 ± 3． 3*
乙酸乙酯高剂量 40． 00 23． 2 ± 1． 9 25． 8 ± 1． 7 4． 9 ± 3． 6*
乙酸乙酯低剂量 20． 00 23． 4 ± 1． 7 26． 6 ± 1． 6 5． 0 ± 4． 1
石油醚高剂量 138． 65 22． 8 ± 2． 4 25． 4 ± 2． 1 5． 1 ± 2． 5
石油醚低剂量 69． 33 23． 5 ± 1． 7 27． 1 ± 2． 4 5． 2 ± 2． 9
注:与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01
2． 2 禹州漏芦不同极性部位萃取物对小鼠血清
ALT、AST的影响 通过血清中两种典型的转氨酶
和肝组织中具有代表性的 3 种活性指标的测定，
AST /ALT值 ＞ 1 且模型组与正常对照组比较，差异
有统计学意义(P ＜ 0． 05) ，提示模型成功。与模型
组比较，各给药组均能不同程度地降低小鼠血清中
ALT、AST活性。禹州漏芦水、正丁醇部位的高剂量
组能显著降低小鼠血清中 ALT、AST 活性(P ＜
0. 01)。水、正丁醇部位的低剂量组及乙酸乙酯的
高剂量组能明显降低小鼠血清中 ALT 活性(P ＜
0. 05)。石油醚的高剂量、低剂量及乙酸乙酯的低
剂量对这两种转氨酶的活性稍有改变，但差异无统
计学意义(P ＞ 0． 05)。水部位和正丁醇部位的保肝
降酶作用最强，且保肝作用具有剂量依赖性。同时，
正丁醇部位与阳性药组效果相当，保肝作用明显。
见表 2。
2． 3 禹州漏芦不同极性部位萃取物对小鼠肝组织
MDA、SOD 和 GSH-Px 水平的影响 与正常组比
较，模型组小鼠肝组织中的 MDA 水平显著增加，
SOD和 GSH-Px 活性显著降低，提示造模成功。与
模型组比较，禹州漏芦水、正丁醇部位的高剂量组能
显著降低小鼠肝组织中 MDA水平(P ＜ 0. 01) ，显著
升高 SOD和 GSH-Px 活性(P ＜ 0． 01) ，同时水及正
丁醇部位的低剂量组能明显降低小鼠肝组织中
MDA水平(P ＜ 0． 05) ，升高 SOD 和 GSH-Px 活性
(P ＜ 0． 05)。乙酸乙酯及石油醚的高剂量、低剂量
对这 3 种指标稍有改变，但差异无统计学意义(P ＞
0． 05)。因此，初步判断水部位和正丁醇部位为禹
州漏芦的药效活性部位，且该活性部位具有较强的
抗脂质过氧化作用。见表 3。
表 2 禹州漏芦 4 个不同极性部位萃取物对小鼠
血清 ALT、AST的影响 (珋x ± s，n = 10)
组别 剂量(mg·kg － 1) ALT(U·L －1) AST(U·L －1)
正常组 － 44． 40 ± 19． 76＊＊ 97． 05 ± 77． 59＊＊
模型组 － 111． 61 ± 22． 21 244． 08 ± 55． 09
阳性组 25． 00 58． 69 ± 20． 86＊＊ 124． 95 ± 95． 46＊＊
水高剂量 175． 79 74． 50 ± 29． 28＊＊ 150． 23 ± 81． 31＊＊
水低剂量 87． 90 83． 17 ± 30． 60* 175． 34 ± 80． 87*
正丁醇高剂量 119． 95 66． 95 ± 28． 01＊＊ 135． 29 ± 89． 05＊＊
正丁醇低剂量 59． 98 81． 83 ± 29． 54* 163． 39 ± 77． 83*
乙酸乙酯高剂量 40． 00 82． 82 ± 28． 31* 180． 76 ± 88． 47*
乙酸乙酯低剂量 20． 00 94． 54 ± 32． 85 232． 67 ± 73． 04
石油醚高剂量 138． 65 93． 76 ± 36． 98 194． 49 ± 70． 85
石油醚低剂量 69． 33 102． 27 ± 39． 23 229． 32 ± 108． 52
注:与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01
表 3 禹州漏芦四个不同极性部位萃取物对小鼠肝组织
MDA、SOD和 GSH-Px水平的影响 (珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg·kg － 1)
MDA
(μmol·g － 1)
SOD
(U·mg － 1)
GSH-Px
(mmol·g － 1)
正常组 － 6． 25 ± 1． 41＊＊ 106． 15 ± 27． 24＊＊ 279． 35 ± 95． 22＊＊
模型组 － 15． 53 ± 10． 01 56． 03 ± 26． 66 102． 23 ± 53． 71
阳性组 25． 00 7． 33 ± 2． 34＊＊ 101． 10 ± 27． 07＊＊ 226． 09 ± 66． 20＊＊
水高剂量 175． 79 8． 49 ± 4． 45＊＊ 80． 86 ± 23． 96＊＊ 205． 07 ± 62． 91＊＊
水低剂量 87． 90 9． 00 ± 4． 93＊＊ 78． 03 ± 20． 20* 162． 21 ± 46． 46*
正丁醇高剂量 119． 95 7． 90 ± 1． 90＊＊ 94． 30 ± 29． 22＊＊ 208． 22 ± 71． 63＊＊
正丁醇低剂量 59． 98 9． 25 ± 3． 31* 88． 03 ± 27． 84* 176． 89 ± 72． 48*
乙酸乙酯高剂量 40． 00 11． 39 ± 2． 33 70． 54 ± 21． 56 135． 72 ± 85． 15
乙酸乙酯低剂量 20． 00 14． 00 ± 4． 19 62． 82 ± 26． 27 120． 44 ± 69． 97
石油醚高剂量 138． 65 13． 35 ± 2． 05 63． 91 ± 25． 50 136． 90 ± 58． 66
石油醚低剂量 69． 33 14． 84 ± 2． 89 59． 83 ± 22． 06 124． 66 ± 56． 47
注:与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01
2． 4 禹州漏芦不同萃取部位对急性肝损伤小鼠的
肝组织病理形态学的影响
2． 4． 1 肉眼观察 正常组小鼠肝脏表面呈鲜红色，
质地柔软，光滑亮泽，有弹性;模型组小鼠肝脏组织
表面呈暗红色，粗糙，附着肉眼可见的黄色颗粒，质
地变硬，缺乏弹性，体积肿大。而与模型组比较不同
部位给药组的小鼠肝脏病变均不同程度减轻。
2． 4． 2 光镜观察 空白组小鼠肝脏的肝小叶结构
正常，肝细胞无变性、坏死等损伤性改变;模型组小
鼠肝小叶结构紊乱，中央区肝细胞出现严重的水样
变性或脂肪变性，甚至坏死，伴炎症细胞浸润;阳性
组与四个不同极性的萃取部位给药组不同程度的缓
·532·
2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
解了 CCl4 造成的急性肝损伤中的水性或脂肪变性，
坏死及炎性细胞浸润。其中水部位与正丁醇部位较
明显地缓解小鼠 CCl4 造成的急性肝损伤。见表 4。
病理切片的电镜观察见图 1。
A:禹州漏芦水萃取(175． 79 mg·kg －1) ;B:禹州漏芦水萃取(87． 40 mg·kg －1) ;C:禹州漏芦正丁醇萃取(119． 95
mg·kg －1) ;D:禹州漏芦正丁醇萃取(59． 98 mg·kg －1) ;E:禹州漏芦乙酸乙酯萃取(40 mg·kg －1) ;F:禹州漏芦乙酸乙
酯萃取(20 mg·kg －1) ;G:禹州漏芦石油醚萃取(138． 65 mg·kg －1) ;H:禹州漏芦石油醚萃取(69． 33 mg·kg －1) ;I:正
常组;J:模型组;K:阳性组(25 mg·kg －1)
图 1 急性肝损伤小鼠肝组织病理切片图(HE染色，×100)
表 4 禹州漏芦不同萃取部位对 CCl4 所致肝损伤小鼠肝组织的影响 (珋x ± s，n = 10)
组别
肝细胞变性
－ + + + + + +
炎性浸润
－ + + + + + +
肝细胞坏死
－ + + + + + +
正常组 9 1 0 0 10 0 0 0 10 0 0 0
模型组 0 0 1 9 0 1 1 8 0 2 1 7
阳性组 6 3 1 0＊＊ 7 2 1 0＊＊ 7 3 0 0＊＊
水高 0 7 3 0＊＊ 2 5 3 0＊＊ 4 4 2 0＊＊
水低 0 6 2 2＊＊ 1 6 2 1＊＊ 2 5 2 1*
正丁醇高 0 8 1 1＊＊ 4 5 1 0＊＊ 5 4 1 0＊＊
正丁醇低 0 6 2 2＊＊ 3 5 1 1＊＊ 3 4 2 1＊＊
乙酸乙酯高 0 1 2 7* 0 2 2 6* 1 1 2 6*
乙酸乙酯低 0 0 2 8 0 1 1 8 0 0 4 6
石油醚高 0 2 1 7 0 2 2 6 0 3 2 5
石油醚低 0 0 1 9 0 1 2 7 0 3 3 4
与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01
3 讨论
肝脏是人体最重要的消化腺体，但其也最容易
受到毒性物质损害引起肝损伤。经多年研究发现，
中医药综合治疗，可以减轻或控制非暴力性肝损伤
的发生，对肝损伤有一定的促进再生和修复作用。
因此，运用中医药保肝应当是一种既有效又切实可
行的治疗途径。
CCl4 致肝损伤是经典的化学性肝损伤动物模
型，中毒机理为 CCl4 经肝细胞微粒体内细胞色素
P450 代谢及过氧化连锁反应生成 3 种毒性作用较
强的自由基，磷脂分子受自由基的攻击引起脂质过
氧化从而造成的肝细胞损伤［5］。CCl4 是强毒性化
学制剂，其诱导的肝损伤模型能准确反映肝细胞功
能、代谢及形态学变化，既经济重复性又好。但
CCl4 同时也会损伤动物的心、脾、肺、肾、脑等器官;
另外，蒸汽和液体可由呼吸道、皮肤吸收，对人体有
·632·
2016 年 2 月 1 日 第 2 期
No． 2 1 February 2016
中 医 学 报
ACTA CHINESE MEDICINE
第 31 卷 总第 213 期
Vol． 31 Serial No． 213
一定的毒性，故在配置 CCl4 油溶液及腹腔注射造模
的时候一定要谨慎操作。
在肝细胞内，反映急性肝损伤细胞损伤时以
ALT最为敏感，而反映其损伤程度时则以 AST 最为
敏感［6］。当肝细胞轻度变性、细胞膜通透性增加
时，从细胞内逸出的主要是 ALT。当肝细胞严重病
变、坏死时，AST 便逐渐从线粒体和胞浆中释放出
来，因此 AST /ALT 的比值与肝脏损伤程度呈正相
关［7］。MDA是脂质过氧化的重要终产物之一，是反
映受自由基攻击肝细胞氧化损伤的重要检测指
标［8］。同时为保护机体免受氧化损伤，细胞形成一
套复杂的抗氧化酶防御系统，这个系统主要包括
SOD、GSH。它们能清除体内多种有毒性或氧化性
物质，从而消除这些物质对 DNA及生物功能蛋白的
破坏，以维持机体内环境的稳定，起到抗毒、抗氧化
的作用［9-10］。
从数据分析可知，AST /ALT ＞ 1，表明急性肝损
伤诱导程度为重症肝炎，其比值不仅可以作为肝病
严重程度的一个标志，同时也为临床医生正确做出
肝病诊断、鉴别及预后判断提供极为重要的信
息［11-12］。与模型组比较，阳性组及正丁醇、水部位
给药组 MDA 的含量和 GSH、SOD 的活性变化说明
减少了过氧化氢及脂质过氧化物的形成，保护细胞
膜结构，维持了细胞的正常代谢。该结果与病理切
片结果一致，表明禹州漏芦的活性保肝作用是通过
增强肝脏抗氧化能力，减少脂质过氧化物的生成，抑
制 CCl4 代谢所产生的活性自由基对肝细胞膜的损
伤及维持细胞的正常代谢，进而减少肝细胞的肿胀、
破裂及坏死。从代表性的生化指标的检测及病理切
片的光镜观察得到的结果，均显示不同极性萃取部
位中正丁醇及水部位为禹州漏芦保肝活性部位。
综上所述，禹州漏芦的有效部位通过抗氧化及
清除自由基的作用而发挥了对 CCl4 诱导的急性肝
损伤的保护作用，并且保肝活性主要富集中于极性
较大的部位。从而为目前禹州漏芦的研究研发提供
了实验基础。
参考文献:
［1］中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国药典:一部
［M］．北京:中国医药科技出版社，2010:244．
［2］石铸．中国植物志［M］．北京:科学出版社，1987:1 － 2．
［3］中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国药典［M］．
北京:化学工业出版社，2005:183 － 154．
［4］汪毅，李铣，张鹏． 禹州漏芦化学成分及药理活性的研究进展
［J］．中草药，2005，36(2) :309 － 311．
［5］Kew MC． Serum aminotransferase concentration as evidence of hepa-
tocellular damage［J］． Lancet，2000，355(9204) :591 － 592．
［6］罗蓉，李卓成，陈剑雄，等．肝损害患者血清 mAST /AST比值的动
态变化及其临床意义［J］．热带医学杂志，2008，8(6) :567 － 569．
［7］朱建芸，陈幼明，谢仕斌，等． 28 例妊娠期重型病毒性肝炎的临床
研究［J］．热带医学杂志，2007，7(3) :232 － 234．
［8］Dhakshinamoorthy S，Long DJ，Jaiswal AK． Antioxidant regulation of
genes encoding enzymes that detoxify enobiotics and carcinogens［J］．
Curt Top Cell Ｒsgul，2000，36:201 － 216．
［9］宋玉果，王涤新．谷胱甘肽作为脂质过氧化损伤指标的研究［J］．
中华预防医学杂志，1999，33(5) :317 － 3191．
［10］Cooke MS，Evans MD，Dizdaroglu M，et al． Oxidative DNA damage:
mechanisms，mutation，and disease．［J］． FASEB J，2003，17(10) :
1195 － 1214．
［11］易敏，付元元．血清 TBA、AST /ALT比值的测定在肝病诊断中的
临床意义［J］．实用预防医学，2011，18(7) :1337 － 1338．
［12］孙桂梅，韩金玲，赵莉，等．肝病与血清酶 AST /ALT 比值的相关
性［J］．中国现代药物应用，2009，3(1) :44 － 45．
收稿日期:2015 － 08 － 20
作者简介:李祥昀(1977 －) ，女，河南郑州人，医学学士，主
管药师，研究方向:中药质量标准的研究。
通信作者:胡春月(1986 －) ，河南开封人，研究方向:中药新
药及质量标准研究。Email:h_chunyue@ 126． com
编辑:秦小川
(上接第 231 页)
［11］Goteri G，Lucarinin G，Zizzi A，et al． Pro-angiogenetic molecules，hy-
poxiainducible factor-1 alpha and nitric coxide synthase isoforms in
ovarian endometriosis cysts［J］． Virhows Arch，2010，456:703 －
710．
［12］Cho S，Choi YS，Jeon YE，et al． Expression of vascular endothelial
growth facfor(VEGF)and its soluble receptor-1 in endometriosis
［J］． Microvasc Ｒes，2012，83(3) :237 － 242．
［13］Machado DE，Abrao MS，Berardo PT，et al． Vascular density and
distribution of vascular endothelial growth factor(VEGF)and its re-
ceptor VEGFＲ-2(FIK-1)are significantly higher in patients with
deeply infiltrating endometriosis affecting the rectum［J］． Fertil Ster-
il，2008，90(1) :148 － 155．
［14］温薇．丹参的药理作用及临床应用［J］中医药信息，2007，24
(4) :54 － 55．
［15］Zhou ZH，Weng Q，Zhou JH，et al． Extracts of salvia miltiorrhiza
bunge on the cytokines of rat endometriosis models［J］． Afr J Tradit
Complement Altern Med，2012，9(3) :303 － 314．
收稿日期:2015 － 09 － 16
作者简介:朱小琳(1986 －) ，女，黑龙江哈尔滨人，博士研究
生，研究方向:从分子水平探讨经验方诊治 EMs作用机制。
通信作者:韩延华(1952 －) ，女，教授，主任医师，博士研究
生导师，研究方向:从分子水平探讨经验方诊治 EMs 作用机
制。Email:936805195@ qq． com
－ 编辑:秦小川
·732·