全 文 ：·中药化学·
祁州漏芦水煎液中二萜化合物 Diosbulbin-B的分离鉴定＊
刘　斌1　石任兵1　涂光忠2　王　伟1　杨春梅1
(1北京中医药大学中药学院　北京 100102)
(2 北京微量化学研究所　北京 100091)

摘要:目的　研究祁州漏芦水煎液的化学成分 。方法　祁州漏芦水煎液用大孔吸附树脂吸附纯化 ,
硅胶色谱分离 ,波谱分析和应用二维核磁共振技术(1H-1H COSY谱 、HMQC 谱 、HMBC谱 、NOESY谱
和TOCSY谱等)解析结构 。结果　分离鉴定出 1个二萜化合物 diosbulbin-B(V)。结论　该化合物
系首次从祁州漏芦中分离得到 ,并首次在祁州漏芦属植物中发现 。
关键词:祁州漏芦;二萜;diosbulbin-B
中图分类号:R284.1
　　祁州漏芦为菊科植物 Rhaponticum uniflorum
(L.)DC.的干燥根 ,始载于《神农本草经》 ,列为上
品。具有清热解毒 、消痈排脓 、通乳的功效。药理研
究表明 ,祁州漏芦水煎液具有较好的抗动脉粥样硬
化和抗脂质过氧化作用[ 1] 。近年来 ,虽有有关祁州
漏芦化学成分的研究报道[ 2 , 3] ,但对其水煎液化学成
分的研究很少。为了阐明祁州漏芦水煎液的药效物
质基础 ,我们对其水煎液的化学成分进行了研究 。
继参考文献[ 4]分离得到牛蒡子酸(arctic acid)(Ⅰ),
蜕皮甾酮(ecdysterone)(Ⅱ),土克甾酮(turkesterone)
(Ⅲ)和甘草苷(liquiritin)(Ⅳ)4个化合物 ,此次又分
离得到 1个二萜化合物 ,通过光谱分析和应用二维
核磁共振技术鉴定为 diosbulbin-B(Ⅴ)(结构式见图
1)。参考文献[ 5]报道了该化合物的1H-1H 和13C-
1
H COSY NMR研究结果 ,但未能对其所有氢信号进
行归属 。本文采用多种二维核磁共振技术 ,确定了
该化合物的结构 ,并首次对其所有氢和碳的二维核
磁共振数据进行了全归属 。该化合物系首次从祁州
漏芦中分离得到 ,并首次在祁州漏芦属植物中发现 。
其是否为水煮过程中产生的 2次天然产物 ,有待进
一步研究 。有关该化合物的生物活性正在试验中 。
1　仪器和材料
Boetius PHMK05型显微熔点测定仪(温度计未
校正),VG20-250型质谱仪 , Bruker Avance DRX-500
型超导核磁共振光谱仪。
柱色谱硅胶(100 ～ 160目)及硅胶 G 薄层板购
自青岛海洋化工厂 ,AB-8型大孔吸附树脂购自天津
图 1　化合物 V结构式
南开大学化工厂。
祁州漏芦药材 2000年 8月购自北京同仁堂集
团公司药材批发部 ,经北京中医药大学中药学院陈
玉婷副教授鉴定为祁州漏芦 Rhaponticum uniflorum
(L.)DC.的根。标本保存于北京中医药大学中药
学院中药化学教研室。
2　提取分离
祁州漏芦4 kg适当破碎后 ,加水煎煮 2次(10倍
量水 ,1 h;8倍量水 ,40 min)。2次水煎液合并后浓缩
至 8 L ,加1倍量95 %乙醇 ,静置48 h ,过滤 ,滤液浓缩
得浸膏 240 g 。浸膏加水12 L 使完全溶解 ,通过 AB-8
·58·
北京中医药大学学报
Journal of Beijing University of TCM
　 　　　　　　 2004 年 11月第 27 卷第 6 期
November 2004 , Vol.27 , No.6

国家自然科学基金资助项目(No.39970907)
刘　斌 ,男, 37岁 ,在读医学博士生 ,副教授
型大孔吸附树脂柱进行吸附。树脂柱先用水洗至水
洗液色浅 ,再用 95 %乙醇洗脱。收集95 %乙醇洗脱
液 ,回收溶剂至干 ,残留物加甲醇加热回流溶解 ,放
冷 ,过滤 ,滤液回收溶剂得甲醇可溶物 36 g 。
甲醇可溶物进行硅胶干柱层析 , 用 CHCl3 -
CH3OH-H2O(13∶1∶0.1)的混合溶剂自上至下进行
展开。待展开完毕 ,依色带分离情况对色谱柱进行
切割 ,自下至上共得 17份。每个切割部分用甲醇洗
脱 ,甲醇洗脱液回收溶剂后得洗脱物 1 ～ 17。其中
洗脱物 6 用硅胶柱层析分离 , CHCl3 -EtOAc -
CH3OH(20∶5∶1)洗脱 ,每流份100mL ,共收集 20份 。
自流份14 、15析出无色结晶 ,经纯化得化合物V 。
3　结构鉴定
化合物 V　无色针状结晶(CHCl3-MeOH), mp
281 ～ 282 ℃。HR-EI m z:344.1260(M +),300.1385 ,
255.1383 , 206.0967 , 164.0851 , 131.0042 , 111.0437 ,
94.0417 , 69.0039 , 确定分子式为 C19 H20O6(m z:
344.1260 ,计算值:344.1260)。EI-MS m z:344 ,300 ,
285 , 272 , 255 , 239 , 219 , 213 , 206 , 199 , 192 , 178 , 173 ,
164 ,161 , 148 , 134 , 131 , 121 , 111 , 94 , 81 , 67。 1H-NMR
谱给出 1个甲基质子信号 δ1.165(3H , s), 3个连氧
碳上质子信号δ:4.759(1H , d , J =5.5 Hz), 4.831
(1H , dd , J =5.0 , 5.0 Hz), 5.227(1H , dd , J =5.0 ,
10.5 Hz)和 3个烯碳上质子信号δ:6.846(1H ,d , J =
1.8Hz),7.582(1H ,d , J =1.8 Hz), 7.677(1H , s)。 13
C-NMR谱显示 19 个碳信号 ,其中 4 个连氧碳信号
δ:74.208 , 76.695 , 77.156 , 89.314 , 4 个烯碳信号 δ:
110.252 ,125.954 , 140.949 ,143.178和 2个羰基碳信
号δ:176.162 ,177.380。DEPT 谱示有 1个 CH3 ,4个
CH2 , 9 个 CH 和 5 个季 C , 分别为 δ16.157(CH3),
28.778(CH2), 36.730(CH2), 38.236(CH2), 38.480
(CH), 40.932(CH), 41.354(CH), 41.484(CH2),
45.396(季 C), 74.208(CH), 76.695(CH), 77.156
(CH), 89.314(季 C),110.252(CH),125.954(季 C),
140.949(CH),143.178(CH),176.162(季 C), 177.380
(季 C)。该化合物的1H-NMR谱 、13 C-NMR谱 、1H-
1
H COSY谱 、HMQC 谱 、HMBC 谱 、NOESY谱和 TOC-
SY谱数据见表 1。经上述数据分析及与文献[ 5]对
照 ,鉴定为 diosbulbin-B。
表 1　化合物 V的核磁共振(NMR)光谱数据(DMSO-d6)
位置 1H-NMR谱 13C-NMR谱 1H-1H COSY谱 NOESY谱 HMBC谱 TOCSY 谱 HMQC 谱
1 1.632
(1H ,m , 1-H)
28.778 1.868 1.901 , 4.831 ,
1.165
38.236 , 40.932 ,
45.396 , 38.480
1.868 , 1.901 , 2.170 ,
2.386 , 4.831
28.778
　
1.868
(1H ,m , 1-H)
1.632 1.632 , 2.386 76.695 , 40.932 ,
38.236 , 38.480
4.831 , 2.170 , 2.386 ,
1.632 , 1.901
28.778
　
2 4.831(1H , dd ,
J =5.0 , 5.0 Hz)
76.695 1.901 , 2.386 1.632 , 1.901 176.162 , 38.236 ,
38.480 , 41.354
2.386 , 1.901 , 2.710 ,
1.632 , 1.868
76.695
　
3 1.901(1H , d ,
J=12.0 Hz , 3-H)
38.236 2.386 , 4.831 1.632 , 2.170 ,
2.710 , 4.831
176.162 , 76.695 , 40.932 ,
41.354 , 28.778
4.831 , 2.710 , 2.170 ,
2.386 , 1.632 , 1.868 38.236
2.386(1H , dd ,
J=5.0 ,
12.0 Hz , 3-H)
4.831 , 1.901 ,
2.710
1.868 76.695 , 40.932 ,
41.354 , 28.778
4.831 , 2.710 , 2.170 ,
1.868 , 1.901 , 1.632
38.236
　
4 2.710(1H , d ,
J=5.5 Hz)
41.354 2.386 1.632 , 1.901 ,
2.170 , 4.759
176.162 , 76.695 , 77.156 ,
38.236 , 38.480 , 40.932
4.831 , 2.386 , 1.901 ,
1.632 , 2.170
41.354
　
5 2.170(1H , d ,
J=5.5 Hz)
40.932 1.632 1.165 , 1.632 ,
1.901 , 2.426 ,
2.710 , 4.759
176.162 , 28.778 , 36.730 ,
38.236 , 38.480 , 41.354 ,
45.396
4.759 , 4.831 , 2.386 ,
2.426 , 1.868 , 1.901 ,
1.632
40.932
　
6 4.759(1H , d ,
J=5.5 Hz)
77.156 2.426 2.170 , 2.426 ,
2.710
177.380 , 89.314 , 36.730 ,
38.480 , 40.932 , 41.354
2.144 , 2.170 ,
2.426
77.156
　
7 2.144(1H , d ,
J=11.5 Hz , 7-H)
36.730 2.144 1.632 177.380 , 89.314 ,
40.932 , 45.396
4.759 , 2.426 ,
2.170
36.730
　
2.426(1H , dd ,
J =5.5 , 11.5 Hz ,
7-H)　　
2.144 , 4.759 2.170 , 4.759 177.380 , 89.314 , 77.156 ,
45.396 , 40.932
4.759 , 2.144 ,
2.170
36.730
　
8 89.314
9 45.396
·59·第 6期　　　　　　　　刘　斌等　祁州漏芦水煎液中二萜化合物 Diosbulbin-B的分离鉴定
　　续表 1
位置 1H-NMR谱 13C-NMR谱 1H-1H COSY谱 NOESY谱 HMBC谱 TOCSY 谱 HMQC 谱
10 1.632
(1H ,m)
38.480 2.170 , 1.868 ,
1.632　　　
1.801 , 1.868 ,
2.144
16.157 , 28.778 , 40.932 ,
41.354 , 41.484 , 45.396 ,
76.695 , 77.156
4.831 , 1.632 , 1.868 ,
2.170 , 2.710
38.480
　
11 1.801(1H , dd ,
J =10.5 , 11.5 Hz ,
11-H)　　
41.484 2.001 2.001 , 6.846 ,
1.632
125.954 , 74.208 , 45.396 ,
16.157 , 38.480
2.001 , 5.227 41.484
　
2.001(1H , dd ,
J =5.0 , 11.5 Hz ,
11 -H)　　
1.801 1.801 , 5.227 ,
1.165
89.314 , 45.396 ,
16.157
1.801 , 5.227 ,
1.165
41.484
　
12 5.227(1H , dd ,
J =5.0 , 10.5 Hz)
74.208 2.001 , 1.801 7.677 , 2.001 ,
1.165 , 6.846
140.949 , 125.954 ,
110.252 , 89.314 , 41.484
2.001 , 1.801 74.208
　
13 125.954
14 6.846(1H , d ,
J=1.8 Hz)
110.252 7.582 7.582 , 5.227 ,
1.801
143.178 , 140.949 ,
125.954 , 74.208
7.582 , 7.677 110.252
　
15 7.582(1H , d ,
J=1.8 Hz)
143.178 7.677 , 6.846 6.846 140.949 , 125.954 ,
110.252
7.677 , 6.846 143.178
　
16 7.677(1H , s) 140.949 7.582 5.227 , 1.801 143.178 , 125.954 ,
110.252 , 74.208
6.846 , 7.582 140.949
　
17 177.380
18 176.162
19 1.165
(3H , s , CH3)
16.157 1.632 , 2.001 ,
2.170 , 5.227
38.480 , 41.484 ,
45.396 , 89.314
2.001 , 5.227 16.157
　
参　考　文　献
1　邹立波 ,于庆海 , 蔡　虹.祁州漏芦抗氧化作用研究.沈
阳药学院学报 , 1992 , 9(1):73 ～ 74
2　姜晓峰 ,李　铣.祁州漏芦地上部位的植物蜕皮激素化
合物.中草药 , 1997 , 28(5):262～ 264
3　陈　莉 , 丁新苞.祁州漏芦化学成分的研究.中草药 ,
1997 , 28(11):648～ 650
4　刘　斌 , 石任兵 , 杨春梅 , 等.祁州漏芦水煎液化学成分
研究.北京中医药大学学报 , 2003 , 26(1):53～ 55
5　Michiko Yonemitsu , Naomichi Fukuda , Takeatsu Kimura , et al.
Diosbulbin-B from the Leaves and Stems of Dioscorea bulbifera:
1H-1H and 13C-1H COSY NMR Studies.Planta Med , 1993 , 59:
577 (收稿日期:2004-03-10)
Isolation and Identification of Diosbulbin-B in the Aqueous Extract
of Rhaponticum uniflorum
Liu Bin(刘　斌), Shi Renbing(石任兵), Tu Guangzhong(涂光忠), et al.
(School of Chinese Materia Medica , Beijing University of Traditional Chinese Medicine , Beijing 100102)
ABSTRACT:Objective　To investigate the chemical constituents of the aqueous extract of Rhaponticum uniflorum
(L)DC.Methods　First , the aqueous extract of Rhaponticum uniflorum was processed with macroporous adsorbing res-
in for absorption and purification , and then , silica gel chromatography was used to isolate the constituents of the extract.
Finally , the spectral analytic technique and 2D-NMR technique (including 1H-1H COSY , HMQC , HMBC , NOESY ,
TOCSY , etc.)were used to elucidate the chemical structure of the constituents.Results　A diterpenoid compound , di-
osbulbin-B(V)was isolated from the aqueous extract of Rhaponticum uniflorum and its structure was identified.Conclu-
sion　Diosbulbin-B(V)has been found in Rhaponticum uniflorum for the first time , and it is also the first time to find
Diosbulbin-B(V)existing in a plant of the Rhaponticum genus.
KEYWORDS:Rhaponticum uniflorum;diterpenoid;Diosbulbin-B
·60· 北京中医药大学学报　 　 　　　　　　　　　　　　2004 年第 27卷