全 文 ：被捕获。小檗碱具有多种药理作用 ,然而其对 GA-
TA-2和 GA TA-3的直接作用鲜有报道 。研究了小
檗碱对 3T3-L1 细胞分化的作用和对 GA TA-2 、
GA TA-3表达的影响 。
以M TT 法检测3T3-L1细胞增殖过程中 ,小檗
碱对细胞活力的影响;以 Huang 等的脂肪分解模型
和油红 O染色法检测 3T3-L1细胞向脂肪细胞的转
化;以 RT-PCR法测定 PPA Rγ、C/EBPα、GATA-2
和GA TA-3 mRNA 的表达;用免疫印迹分析法评
价 GATA-2和 GA TA-3 蛋白的表达。MT T 实验
结果显示 ,小檗碱对 3T3-L1 细胞活力仅有轻微的
影响 。采用 Huang 等的脂肪分解模型研究 3T3-L1
细胞分化的结果显示 ,3T3-L1细胞生长在含小檗碱
1 、2 、4 、8 μmol/L 的分化介质中 ,细胞分化受到明显
抑制 ,小檗碱 4 、8 μmol/ L 时产生的抑制作用最强;
油红 O 染色法检测显示 ,小檗碱 1 、2 、4 、8 μmol/ L
且在 3T3-L1细胞被诱导分化 6 d后 ,可使脂肪滴分
别减少30.6%、35.8%、40%、48.6%,诱导 8 d后使
脂肪滴分别减少 59.4%、58.4%、71.8%、72.6%。
与 β-肌动蛋白在分化细胞中的表达相比 , PPAR
γmRNA 、C/ EBP αmRNA 表达增加 ,而加入小檗碱
后 2者表达减少;与在正常介质中相比 , 3T3-L1 细
胞在加入小檗碱的分化介质中 , PPARγmRNA 、C/
EBP αmRNA 表达以浓度相关方式减少。与 3T3-
L1细胞在正常培养介质中相比 ,在分化培养介质中
GA TA-2 mRNA 、GA TA-3 mRNA 表达减少 ,而加
入小檗碱后这 2 个基因表达增加 ,并呈浓度相关 。
与小檗碱可使 GA TA-2 mRNA 、GA TA-3 mRNA
表达增加的情况相似 ,小檗碱也可使 GA TA-2 、GA-
TA-3 蛋白的表达增加 。上述结果提示 ,小檗碱作
为抗肥胖药极具潜力 。
(李　锦摘)
魁蒿在抗原刺激的 T细胞和调节性 T细胞中的抗
炎作用 〔英〕/Hang S H ∥J Pharm Pharmaco l.-
2009 ,61(8).-1043 ～ 1050
　　魁蒿 Artem isia princeps Pamp.为药食两用植
物。该植物对脂多糖处理的巨噬细胞具有抗炎作
用 ,并能促进内皮细胞分裂。然而其对 T 细胞的抗
炎作用还鲜为人知。研究了该植物提取物对抗-
CD3和抗-CD28刺激的 CD4+CD25-T 细胞与抗原
扩展的调节性 T 细胞的抗炎作用。
将魁蒿的茎制备甲醇提取物 ,并用磷酸盐缓冲
盐水(PBS)调成质量浓度为 20 mg/mL ,进一步稀
释成 3 ～ 30 μg/mL ,用于脾 T 细胞 、CD4+CD25- T
细胞体外实验 。CD4+CD25- T 细胞用抗-CD3 和
抗-CD28激活 ,并在有或无多种质量浓度的魁蒿提
取物存在条件下培养 6 d。用[ 3H]胸苷掺入法进行
CD4+CD25-T 细胞增殖分析;用细胞计数试剂盒测
定细胞活力;用 ELISA 试剂盒分析 CD4+CD25- T
细胞中细胞因子 IL-2 、IL-10 、IFN-γ的分泌 ,以及抗
原扩展的调节性 T 细胞 IL-10 的分泌;用流式细胞
仪分析调节性 T 细胞中 Foxp3基因的表达;用 GC-
MS联用技术分析魁蒿甲醇提取物中的药用成分。
结果显示 ,魁蒿提取物 30 μg/mL 有效抑制抗-CD3
或抗-CD28刺激的 CD4+CD25-T 细胞的增殖 ,并
对无抗原刺激的脾细胞无细胞毒性。对魁蒿的该抑
制作用进行了时程测定 ,结果魁蒿提取物的抑制作
用呈质量浓度和时间相关。在 CD4+CD25- T 细胞
被激活第 6天且在魁蒿提取物 30 μg/mL 存在的条
件下 , I L-2 、IFN-γ的分泌比无魁蒿提取物的减少。
在 CD4+CD25-T 细胞用抗-CD3 、抗-CD28 刺激第
2天 ,魁蒿提取物仅轻微增加 IL-10 的产生;用抗-
CD3 和抗-CD28 扩展(7 d)的自然出现 CD4+
CD25
+调节性 T 细胞与或不与魁蒿提取物 30 μg/
mL 培养 7 d ,每隔 1 d加入魁蒿提取物 ,可使 IL-10
的产生在第 7天增加 1.3倍 ,使 Foxp3基因的表达
增加 5.36%。用GC-MS 鉴别出包括龙脑 、斯巴醇 、
植醇等在内的 15个潜在的药用成分 。以上结果提
示 ,魁蒿通过抑制炎性 T 细胞的增殖 ,阻止抗原刺
激的 CD4+CD25-T 细胞炎症发展进程 ,增加扩展
的调节性 T 细胞的活性 ,对自身免疫疾病 、器官移
植排斥反应可能产生治疗作用。
(何　远摘)
158 现代药物与临床　　Drugs &Clinic　　2010年第 25卷第 2 期