全 文 ：收稿　2001-01-12　　　　修定　2001-04-16
　 ＊　国家自然科学基金资助项目。
魁蒿的组织培养及植株再生＊
王剑文　谭仁祥(南京大学生命科学学院 ,南京 210093)
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Artemisia princeps
WANG Jian-Wen , TAN Ren-Xiang(School of Li fe Sciences , Nanjing University , Nanjing 210093)
1　植物名称　魁蒿(Artem isia princeps)。
2　材料类别　采集 6月份生长在南京紫金山阳坡
的魁蒿 ,株高 20 ～ 30 cm ,取带腋芽的茎段 。
3　培养条件 　(1)诱导愈伤组织培养基:MS +
2 ,4-D 1 mg·L-1(单位下同)+NAA 2.0+KT 1.0;
(2)诱导芽分化培养基:MS +6-BA 2.0 +NAA
0.01;(3)继代分化培养基:MS+6-BA 2.0+IBA 0.
1;(4)生根培养基:1/2MS+NAA 0.5。培养基均附
加3%蔗糖 、0.7%琼脂 , pH 值为 5.8 ～ 6.0 ,培养温
度 25 ～ 27℃。光照时间每天 12 h ,光照度2 000 lx
左右 。
4　生长与分化情况
4.1　愈伤组织的诱导　切取魁蒿幼嫩茎段 ,先在加
有洗衣粉的洗涤液中漂洗 10 min ,再在自来水中冲
洗1 ～ 2 h 。然后在超净工作台上用 75%的酒精消
毒1 min ,0.1%的升汞表面消毒 5 min ,最后用无菌
水冲洗 5次 ,用刀切成带有 1个侧芽的茎段 ,接种于
(1)中 。培养 7 d后 ,茎段开始膨大 ,从基部切口处
形成浅黄绿色愈伤组织。15 d 后 ,愈伤组织开始生
长 ,并变得疏松易碎 。再过 15 d ,继代到培养基(1)
上 ,愈伤组织进一步生长 ,长势良好 。以后每隔 28 d
继代 1次 ,可获得大量愈伤组织。
4.2　芽的诱导与增殖　接种在培养基(2)上的带腋
芽茎段 ,7 d后腋芽启动 , 15 d后长出小芽 ,底部长出
浅黄绿色愈伤组织。30 d后新芽长成 4 ～ 5 cm 长的
芽苗。将上述芽苗从原茎段上切下成带腋芽的茎
段 ,转接到新鲜配制的芽繁殖培养基(3)上 ,促使幼
茎长出更多的芽苗。将初代培养的试管苗切割成带
芽茎段 ,接种于培养基(3)中 ,约 7 d后枝条基部形
成绿色愈伤组织突起 , 20 d 后叶腋出现丛芽。芽丛
数≥3的试管苗约占 80%。多次继代后 ,不仅生长
随继代数的增加而增快 ,增殖率也会逐渐增加 ,在外
植体继代培养中观察到 ,魁蒿芽的增殖受细胞分裂
素的调节控制。细胞分裂素中以 6-BA作用较好 ,生
长素以 IBA 较好。在继代培养中为保证芽迅速生
长 、伸长 ,应注意 6-BA的浓度不宜超过 2 mg·L-1 ,
IBA的浓度不宜超过 0.2 mg·L-1 。高浓度的 6-BA
和 IBA容易引起接种材料基部愈伤化 ,从而很难有
芽的分化和生长 。无根苗在继代培养基中长势好 ,
苗健壮。
4.3　诱导生根及移栽　将较健壮的无根苗分成单
株 ,去除基部的愈伤组织 ,接种在培养基(4)上。1
周后苗基部分化出不定根 , 20 d后生根率达 90%。
待根长至 2 ～ 3 cm 时 ,将试管苗瓶盖打开 ,室温下
(25 ～ 30℃)炼苗 3 d后 ,洗去根部琼脂 ,移栽至盛泥
碳土的花盆中 ,每周喷 1/2MS 营养液 ,保持 75%以
上的相对湿度 ,成活率可达 80%以上 。
5　意义与进展　魁蒿为菊科植物 ,全草入药 ,有驱
寒湿 、理气血 、调经 、安胎 、止血 、消炎的功效。从魁
蒿中分离得到的桉烷型倍半萜内酯-Yomogin 可抑
制细胞内一氧化氮合成酶及氨基己糖酯酶活性 ,从
而减少一氧化氮含量 ,抑制体内循环系统败血症的
发生。近来 ,对桉烷型倍半萜内酯的生物活性及药
理研究日趋深入 ,它可望成为治疗内毒素败血症及
相关炎症的新型药物。另外 ,魁蒿挥发油可抑制病
原真菌并具有较强的化感(Allelopathy)作用 ,有成为
生态型生物农药的开发前景。采用细胞培养进行工
厂化生产桉烷型倍半萜内酯等活性物质有可能成为
现实 。本文结果为魁蒿的快速繁殖和种质资源保存
提供了参考。关于魁蒿的组织培养 ,目前尚未见报
道。
38 植物生理学通讯　第 38 卷 第 1 期 , 2002 年 2 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2002.01.013