全 文 ：蒌蒿组织培养
王新华1 ,刘 　伟2 ,赵 恒 田1
中图分类号:S647.03.6　文献标识码:B
文章编号:1001-0009(2002)04-0062-01
　　蒌蒿(Artemisia selengensis Turcz), 又名芦蒿 、水蒿 、香艾
蒿等 ,菊科蒿属 , 多年生草本植物。蒌蒿营养丰富 ,风味独特 ,
是深受人们喜爱的山野菜之一 ,以嫩芽为食用部分。
蒌蒿以地下茎繁殖 , 也可用种子繁殖 ,但种子难以成熟。
目前生产中多采取在野外挖掘蒌蒿根茎在棚室中栽培的办
法。此法严重破坏资源和生态环境 ,因此蒌蒿种苗的供应 ,是
当前蒌蒿生产中亟待解决的问题。利用组织培养的方法 , 繁
殖种苗速度快 ,繁殖系数高 , 又不造成资源的破坏 , 是较为理
想的繁殖方法 ,可实现蒌蒿周年生产。
1　材料与方法
1.1　材料
于 2001 年春采集于尚志市山间。将带有嫩芽的蒌蒿植
株连根挖取 ,栽到高 30 cm(厘米),直径 25 cm(厘米)的花盆
中 ,待嫩芽长到 15 cm(厘米)左右时 ,取嫩芽作为试验材料。
1.2　试验方法
1.2.1　培养基的筛选　①不同激素水平对组织生长 、分化的
影响:以 MS 为基本培养基 , 附加不同剂量的激素 , 分别制成:
M 1:MS +BA0.5 mg/ L(单位下同);M 2:MS +BA0.5 +NAA0.1;
M 3:MS+BA1+NAA 0.5。 ②培养基种类的筛选:从①的试验
中选出较适宜的激素水平 ,改变大量元素的量 , 配制不同种类
培养基 M 4 , M 5。筛选出最适宜的培养基。
1.2.2　继代培养基　在 1.2.1 的②中选出较适于蒌蒿生长
分化的培养基作为继代培养基。
1.2.3　生根培养基　继代培养基不添加任何激素即可作为
生根培养基。
以上培养基中均加入 3%蔗糖, 0.95%琼脂 , pH:5.8～ 6.0。
1.2.4　无菌材料的建立　①培养基高压灭菌:将灌装好的培
养基瓶放入灭菌锅中 ,待压力升至 0.5 kg/ cm2(公斤/平方厘
米)时 , 打开放气阀排出空气 , 再关上放气阀 , 当压力达到
1 kg/cm2(公斤/平方厘米)时 , 灭菌 13 min(分钟)～ 15 min
(分钟)。 ②材料灭菌:首先取蒌蒿 10 cm(厘米)～ 15 cm(厘
米)嫩芽 , 用清水洗净 ,然后置于已预灭菌 30 min(分钟)的超
净工作台中 ,剪成 1 cm(厘米)～ 2 cm(厘米)小段 , 每段带 1 ～
2 个芽。在 70%酒精中速蘸 , 然后用灭菌蒸馏水洗涤 3 ～ 5
次 ,制成无菌材料 , 备用。
1.2.5　接种　①用 70%酒精棉擦净手 、镊子 、解剖刀及其它
器具 ,用酒精灯烧烤镊子 、解剖刀 , 烧红晾干备用。 ②用镊子
将无菌苗接入无菌培养基中。注意要经常用酒精灯烧一烧瓶
口 、镊子等。每种培养基接 5 瓶 , 每瓶中接 4 株 , 接种苗尽量
保证大小 、长势相同。 ③接种后 , 将瓶口扎好 ,标号 , 将工作台
用 70%酒精棉擦净后关机。
1.2.6　培养与观察　在相同的条件下培养(温度 25±3 ℃,
光照 8 h(小时)～ 10 h(小时),光强 2 000 lux),每周目测生长
收稿日期:2002-04-17
分化情况 , 5 周后取出芽丛进行实际检测。
1.2.7　幼苗移栽
2　结果与分析
2.1　不同激素水平对蒌蒿生长 、分化的影响
由表 1 可知 , 在 M 1 中 , 植株长势弱 , 分化率低 , 在 M 3 基
中 , 有较多的分化 , 但植株较细弱 , 在 M 2 中 , 植株健壮 , 且分
化率高 , 因此 M 2 的激素水平更适于蒌蒿的生长 、分化 。
　　表 1 激素水平对蒌蒿生长 、分化的影响
培养基
项目 株高
(cm) 茎 分化总数 分化率
M 1 4～ 5 较细、短 56 2.8
M 2 4.5～ 5.5 较粗、短 112 5.6
M 3 6～ 7 较细、长 94 4.7
2.2　不同培养基种类的筛选
根据 2.1 的结果可知 BA0.5+NAA0.1是蒌蒿组培适宜的
激 素水平 , 据此配制培养基M 4:A2 +BA 0.5+NAA0 .1 , M 5:
1/2MS+BA0.5 +NAA0.1 , 与 M 2:MS+BA 0.5+NAA 0.1相比
较 ,以确定最适宜蒌蒿组培的培养基 , 培养基成分见表 2 , 试
验方法同上。 5 月 15日接种培养 , 6 月 20 日进行实际检测。
结果表明:三种培养基中苗的株高及分化率均无明显差别 ,
分化率均为 6左右。比较三种供试培养基的无机盐总量,M 2基
4 633.33 mg/ L(毫克/升),M 5基 2 368.33 ,M4 基 1 787.98 mg/ L
(毫克/升),其中:M4 基的含盐浓度明显低 , 相应的培养成本
也显著低于其它基。因此 , M 4基为最适于蒌蒿组培的基质。
2.3　继代培养
　　表 2 供 试 培 养 基 的 成 分
培养基
盐类品种 大量元素(mg/L)
NH4NO3 NH3HPO4 KNO2 KH2PO4 CaCl2·4H2O Ca(NO2)2·4H2O MgSO4·7H2O 合计
M2 1650 - 1900 170 440 - 370 4530
M 4 400 115 606 - 74 236 246 1677
注:M 5 基的大量元素为 M 2 基的一半 , M 4、M 5 与 M 2 基的微量元素用
量相同 ,皆为 MS培养基微量元素的用量 ,表中不再列出。
　　选 M 4 基作为继代培养的基质 , 每 40 d(天)进行一次继
代培养 , 从 2001 年 6 月 20日至 2002 年 1 月 10 日 ,植株总数
由最初的 4株达到 4万株左右 , 繁殖系数可达 1 万。
2.4　根的诱导与植株移栽
将不加任何激素的 M 4 基作为生根培养基 , 将经继代培
养的芽(丛)转移到生根培养基中 ,经 7 d(天)～ 10 d(天)即可
生根。当根长 2 cm(厘米)～ 3 cm(厘米)时 , 将苗从瓶中取
出 , 洗净培养基 ,移到基质中 , 放在冷凉处锻炼后即可栽入棚
室中 , 成活率可达 95%以上。
3　小结
3.1　通过本试验 , 认为 M 4 基为蒌蒿组织培养的最适培养
基 , 该培养基成本低 ,分化率高。
3.2　本试验中 ,每40 d(天)进行一次继代培养 ,若急需用苗时 ,
可 25 d(天)左右进行一次继代培养 ,这样可以加速繁殖速度。
参考文献
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[ 2] 　韩雪梅.草莓试管苗分化培养基优化研究[ J] .生物技术 , 1997
(2):27～ 29.
[ 3] 　宋元林.稀特蔬菜高效栽培[M ] .北京:中国农业出版社 , 1996.
(1.中国科学院黑龙江农业现代化研究所 , 哈尔滨
150040;2.黑龙江省农业综合开发设计所 ,哈尔滨 ,
150040)
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·生物技术·　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　北方园艺 2002(4):62