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田基黄水煎液对应激+高脂血症模型大鼠血脂、血液流变的作用研究



全 文 :田基黄水煎液对应激 +高脂血症模型
大鼠血脂、血液流变的作用研究
胡向阳1,舒晓春1,马 义2
(1. 中山大学附属第五医院,广东 珠海 519000;2. 暨南大学生命科学院,广东 广州 510632)
摘要 目的:观察田基黄水煎液对应激 +高脂血症模型大鼠血脂、血液流变进程的影响。方法:将 60 只 Wistar
雄性大鼠随机分为 4 组:正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组、田基黄水煎液组,建立应激负荷下的高脂血症大鼠
模型,检测各组大鼠血脂、血压流变学指标的变化。结果:与模型对照组比较,田基黄水煎液组 TC、TG、LDL-C、AI
含量均有不同程度的降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,HDL-C 含量升高(P < 0. 05)。田基黄水煎液组低、中、高切全血
黏度、红细胞压积及血浆黏度均不同程度降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。田基黄水煎液组 RBC 聚集指数、刚性指数
均不同程度降低(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ;RBC变形指数显著升高(P < 0. 01)。结论:田基黄水煎液对应激负荷下高
脂血症模型大鼠血脂、血压流变学指标有调节作用。
关键词 田基黄;高脂血症;应激;血液流变
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)09-1418-03
收稿日期:2011-03-05
基金项目:广东省自然科学基金项目(NO:04105837)
作者简介:胡向阳(1975-) ,男,博士,主治医师,主要从事脑血管及代谢疾病研究;Tel:0756-2528851,13928005055,E-mail:aikongzhi@
163. com。
随着人们生活节奏的加快和竞争意识的增强,
遭遇的应激性事件越来越多,研究显示,持续的应激
负荷导致高血压、动脉粥样硬化、血脂代谢紊乱、糖
尿病等疾病的发生率增高〔1,2〕。随着饮食结构中高
脂质、高热量成分的增多,高脂血症的发病率逐年升
高,高脂血症是促进动脉粥样硬化和冠心病的主要
危险因素之一,与脂肪肝、脑血管病、肥胖等病的发
生发展密切相关〔3〕。田基黄为藤黄科金丝桃属植
物地耳草的干燥全草,具有清热散瘀、消肿解毒的功
效,药理研究表明具有保护肝脏、调节免疫、抑制癌
细胞及抗氧化等作用〔4,5〕。本研究拟在应激负荷 +
高脂血症大鼠模型基础上,探讨田基黄水煎液对模
型大鼠血脂、血液流变的作用。
1 材料与方法
1. 1 实验动物 SPF 级雄性 Wistar 大鼠,体质量
(200 ± 20)g,由南方医科大学实验动物中心提供,
合格证号:粤检证字 2009C413,室温适应性饲养 1 w
后用于本实验。
1. 2 实验药物 辛伐他汀(商品名:舒降之) ,杭州
默沙东制药有限公司生产,批准文号 H19990366,20
mg /片,临用前以生理盐水溶解浓度为 1 mg /mL。
田基黄饮片由广东省中医院提供,水煎液制备:田基
黄 3. 0 kg,以每 1 g生药加水 6 mL,冷水浸泡 40 min
后,开始武火煎煮,煮沸后用文火慢煎 30 min,趁热
过滤。煎煮第 2 遍按每 1 g 生药加水 4 mL,煎法同
上,合并滤液。60 ℃恒温下旋转蒸发浓缩,浓缩为
含生药 2. 25 g /mL的水煎液,置 4 ℃冰箱保存备用。
1. 3 试剂与仪器 高脂饲料(0. 2%胆酸钠 + 2%
胆固醇 + 10%食用油 + 87. 8%基础饲料) ,胆固醇、
胆酸钠、丙基硫氧嘧啶,广州天马精细化工厂;10%
泰洛沙泊批号:2009030046,上海复星药业有限公
司;胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆
固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂
盒,南京建成生物试剂公司;LDZ5-2 型离心机,北京
医用离心机厂;MVIS-2035 全自动血液流变分析系
统,重庆天海医疗设备有限公司;全自动生化分析
仪,日本日立-7060 型。
1. 4 动物分组 Wistar 大鼠 60 只,数字随机分组
法分为 4 组,即正常对照组、模型组、辛伐他汀组、田
基黄水煎液组。
1. 5 动物模型制备 参照 Bozoky〔6〕等方法建立大
鼠高脂血模型,除正常对照组外,其余各组均以高脂
饲料喂养,大鼠腹腔注射 10%泰洛沙泊溶液 5 mL /
kg ,禁食 12 h后进行试验。辛伐他汀组、紫檀芪组
均以 10 mg /kg剂量灌胃,正常对照组、模型对照组
则以等体积生理盐水灌胃。参照何蓉蓉〔7〕等方法,
除正常对照组外,其余各组大鼠在给药后 2 h ,放进
大鼠束缚装置,束缚应激负荷 12 h,束缚应激期间禁
食禁水,连续 8 W。动物处死前禁食 12 h,腹腔静脉
取血,分离血清。
1. 6 指标检测 将采取的新鲜血加入含肝素抗凝
的试管中,混匀,4 ℃,3 500 r /min离心 15 min,收取
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2011.09.037
上清液(血清)。采用酶比色法在全自动生化分析
仪测定 TC、TG、HDL-C、LDL-C,操作步骤均按照试
剂盒说明书进行,并依据公式计算动脉粥样硬化指
数(Atherosclerotic index,AI) ,计算公式:AI =(TC -
HDL-C)/HDL-C。用 MVIS-2035 全自动血液流变分
析系统检测全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和红细
胞聚集指数、变形指数、刚性指数。
1. 7 统计学处理 使用 SPSS 14. 0 统计软件对数
据进行重复测量资料的方差分析,定量指标以 珋x ± s
表示,组间两两比较采用 q 检验,P < 0. 05 认为差异
有统计学意义。
2 结果
2. 1 各组大鼠血脂代谢情况 与正常对照组比
较,模型组大鼠血清 TC、TG、LDL-C、AI 含量均显著
升高(P < 0. 01) ;HDL-C 含量降低(P < 0. 01)。与
模型对照组比较,辛伐他汀组、田基黄水煎液组大鼠
TC、TG、LDL-C、AI 含量均有不同程度的降低(P <
0. 01 或 P < 0. 05) ,HDL-C 含量均升高(P < 0. 05)。
与辛伐他汀组比较,田基黄水煎液组 TC、LDL-C、AI
含量降低(P < 0. 05)。见表 1。
表 1 各组大鼠血脂情况比较 (mmol /L,珔x ± s,n =15)
组别 TG TC HDL-C LDL-C AI
正常对照组 0. 34 ± 0. 01 1. 57 ± 0. 10 1. 31 ± 0. 12 0. 34 ± 0. 01 0. 20 ± 0. 01
模型对照组 4. 68 ± 0. 131) 19. 36 ± 1. 35** 0. 54 ± 0. 01** 4. 17 ± 0. 11** 33. 47 ± 3. 25**
辛伐他汀组 0. 72 ± 0. 012,3 3. 36 ± 0. 21* ## 1. 12 ± 0. 01# 1. 23 ± 0. 12**# 1. 79 ± 0. 21**##
田基黄水煎液组 0. 64 ± 0. 012,3) 2. 23 ± 0. 10##▲ 1. 26 ± 0. 01# 0. 59 ± 0. 01##▲ 0. 75 ± 0. 14##▲
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与模型对照组比较,#P < 0. 05,##P < 0. 01;与辛伐他汀组比较,▲P < 0. 05
2. 2 各组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积变
化 与正常对照组比较,模型组大鼠低、中、高切全
血黏度、红细胞压积及血浆黏度均不同程度升高(P
< 0. 01 或 P < 0. 05)。与模型对照组比较,辛伐他
汀组、田基黄水煎液组大鼠低、中、高切全血黏度、红
细胞压积及血浆黏度均不同程度降低(P < 0. 01 或
P < 0. 05)。与辛伐他汀组比较,田基黄水煎液组大
鼠中、高切全血黏度均降低(P < 0. 05)。见表 2。
表 2 各组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积比较(珔x ± s,n =15)
组别
全血黏度 /mps
低切 中切 高切
血浆黏度 /
mps
红细胞压积 /
%
正常对照组 10. 26 ± 0. 43 4. 22 ± 0. 31 3. 16 ± 0. 12 1. 32 ± 0. 02 24. 17 ± 2. 31
模型对照组 18. 33 ± 1. 12** 7. 46 ± 0. 33** 6. 36 ± 0. 22* 2. 46 ± 0. 11* 37. 22 ± 3. 52*
辛伐他汀组 12. 26 ± 1. 32# 5. 48 ± 0. 26# 4. 39 ± 0. 21# 1. 75 ± 0. 10* # 25. 23 ± 2. 23#
田基黄水煎液组 11. 17 ± 1. 34**## 4. 15 ± 0. 30#▲ 3. 13 ± 0. 22#*▲ 1. 54 ± 0. 12# 28. 64 ± 3. 32#
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与模型对照组比较,#P < 0. 05,##P < 0. 01;与辛伐他汀组比较,▲P < 0. 05
表 3 各组大鼠 RBC聚集指数、变形指数、
刚性指数比较(珔x ± s,n =15)
组别 RBC聚集指数 RBC变形指数 RBC刚性指数
正常对照组 2. 23 ± 0. 01 1. 15 ± 0. 02 5. 34 ± 0. 12
模型对照组 4. 26 ± 0. 11** 0. 71 ± 0. 03** 9. 20 ± 0. 13**
辛伐他汀组 2. 42 ± 0. 03# 0. 84 ± 0. 02* 6. 28 ± 0. 11* #
田基黄水煎液组 2. 65 ± 0. 01## 1. 12 ± 0. 01##▲ 5. 42 ± 0. 12#▲
注:与正常对照组比较,* P < 0. 05,** P < 0. 01;与模型对照组
比较,#P < 0. 05,##P < 0. 01;与辛伐他汀组比较,▲P < 0. 05
2. 3 各组大鼠 RBC聚集指数、变形指数和刚性指
数变化 与正常对照组比较,模型组大鼠 RBC 聚集
指数、刚性指数均显著升高(P < 0. 01)。与模型对
照组比较,辛伐他汀组大鼠 RBC 聚集指数、刚性指
数均降低(P < 0. 05) ;田基黄水煎液组 RBC 聚集指
数、刚性指数均不同程度降低(P < 0. 01 或 P <
0. 05) ;RBC变形指数显著升高(P < 0. 01)。与辛伐
他汀组比较,田基黄水煎液组 RBC 变形指数升高
(P < 0. 05) ,刚性指数降低(P < 0. 05)。见表 3。
3 讨论
高脂血症指血中的胆固醇(TC)、低密度脂蛋白
胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)超过正常及(或)高
密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低下的一种表现。TG
升高使血液凝固性增高,抑制纤维蛋白降解,促进血
栓形成;LDL-C 增高使患冠心病的危险因素增加,
HDL-C 如同血管内的清道夫,将胆固醇从组织转移
到肝脏,具有防止动脉粥样硬化的作用〔8〕。血液流
变学研究血液的流动性、粘滞性和血液中有形成份
的聚集性和变形性,血液黏度变化与红细胞数量、聚
集能力、变形能力及血浆成分等因素密切相关〔9〕。
红细胞是血液的重要组成部分,其形态和功能特性
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直接影响其携带及释放氧气的能力,血液的黏度或
血液的流动性质主要受红细胞变形性的影响〔10〕。
高脂血症属中医“湿浊”之范畴,是由于饮食不
节,情志内伤,脾胃失调,饮食中的糟粕、杂质混入营
血,形成“湿热痰浊毒”。田基黄清热散瘀、消肿解
毒,有保护肝脏、调节免疫及抗氧化等作用。以剥夺
身体自由活动、束缚制动刺激为应激原造成的应激
称为束缚应激,束缚应激模型与当今社会人们精神
应激和活动减少的生活方式相近〔11〕。本实验在应
激 +高脂血症大鼠模型基础上,选用辛伐他汀作为
对照药物,辛伐他汀是临床上应用广泛的调脂药,研
究发现其还具有抗炎、免疫调节作用、改善血管内皮
功能、稳定和逆转粥样硬化斑块等作用〔12〕。本实验
结果发现:与模型对照组比较,田基黄水煎液组 TC、
TG、LDL-C、AI 含量均降低,HDL-C 含量升高,低、
中、高切全血黏度、红细胞压积及血浆黏度降低,
RBC聚集指数、刚性指数均不同程度降低;RBC 变
形指数显著升高。田基黄水煎液的上述药理效应可
能与其“清热散瘀、消肿解毒”作用相关,但其作用
或调控机制需要进一步研究。
参 考 文 献
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黑乳海参皂苷 nobilisideⅠ和 nobilisideⅡ的体外
抗真菌及抗肿瘤活性
张佳佳1,巫 军2
(1. 浙江医药高等专科学校,浙江 宁波 315010;2. 宁波拜奥生物医药科技有限公司,浙江 宁波 315200)
摘要 目的:阐明黑乳海参皂苷 nobilisideⅠ和 nobilisideⅡ的体外抗真菌及抗肿瘤活性。方法:对黑乳海参的
总提取物采取硅胶柱色谱及半制备 HPLC等分离手段进行活性追踪分离,通过理化性质及波谱学手段进行化学结
构鉴定,以 SRB法评价化合物的抗肿瘤活性。结果:分离得到了 2 个新的三萜皂苷元类化合物,命名为 nobilisideⅠ
和 nobilisideⅡ。2 个新化合物均显示了较强的体外抗真菌及抗肿瘤活性。结论:通过该研究为研制新的抗肿瘤药
物提供了先导化合物,为充分开发利用我国的海洋生物资源提供了物质基础和科学依据。
关键词 黑乳海参;皂苷 nobilisideⅠ和 nobilisideⅡ;体外抗真菌及抗肿瘤活性
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2010)09-1420-04
收稿日期:2011-01-20
基金项目:浙江省自然科学基金(Y2110082) ;浙江省科技厅公益项目(2010C33136) ;宁波市自然科学基金项目 (2007A610083) ;浙江省医
药卫生科学研究基金(2008B163) ;浙江省高校科研基金(Y200805910)
作者简介:张佳佳(1975-) ,女,硕士,副教授,主要从事海洋药物研发;Tel:13486086927,E-mail:zjj@ zjbti. net. cn。
·0241· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 9 期 2011 年 9 月