全 文 :[收稿日期] 20120314(002)
[基金项目] “重大新药创制”国家科技重大专项“十一五”计划(2009ZX09103-370) ;教育部中央高校基本科研业务费专项资金
(WJTU09CX063,SWJTU09ZT29)
[第一作者] 陈朝勇,硕士研究生,从事中药药理学研究,E-mail:cychen1989@ 163. com
[通讯作者] * 闫智勇,博士,教授,从事中药药理学研究,Tel:028-66367214,E-mail:yzhiy@ swjtu. edu. cn
蜘蛛香对高脂血症大鼠血脂及肝功能的影响
陈朝勇,闫智勇 * ,李少华,陈冲,左长英
(西南交通大学生命科学与工程学院,成都 610031)
[摘要] 目的:探讨蜘蛛香对高脂血症大鼠血脂及肝功能的影响。方法:清洁级 SD 大鼠,除正常组外,其余各组采用高脂
饲料喂养 25 d 建立高脂血症大鼠模型后,洛伐他汀组按 3 mg·kg - 1每日 ig 给予一次洛伐他汀溶液,蜘蛛香醇提物低、中、高 3 个
剂量组每日分别按相当于生药 1. 25,2. 5,5 g·kg - 1 ig 给药 1 次,造模各组仍喂食高脂饲料。2 周后,检测血清胆固醇(TC)、甘油
三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织 TC,TG。结
果:高脂饲料诱导后,模型对照组大鼠血清及肝组织中 TC,TG,LDL-C 较空白对照组显著升高(P < 0. 05,P < 0. 01) ,且血清 ALT,
AST 也显著升高(P < 0. 05)。洛伐他汀,蜘蛛香醇提物给药后,均能显示显著降低血清及肝组织的 TG,肝组织中 TC 及血清中
ALT,AST 的作用(P < 0. 01)。结论:蜘蛛香能降低实验性高脂血症大鼠血脂,并能保护高血脂动物的肝功能。
[关键词] 蜘蛛香;高脂血症大鼠;血脂;肝功能
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2012)19-0154-04
[网络出版地址] http:/ / www. cnki. net / kcms / detail /11. 3495. R. 20120727. 1036. 001. html
[网络出版时间] 2012-07-27 10:36
Effect of the Extract of Valeriana jatamansi on the Blood Lipid
and Liver Function in Experimental Hyperlipidemia Rats
CHEN Chao-yong,YAN Zhi-yong* ,LI Shao-hua,CHEN Chong,ZUO Chang-ying
(School of Life Science and Engineering,Southwest Jiaotong University,Chengdu 610031,China)
[Abstract] Objective:To observe the effect of the extract of Valeriana jatamansi Jones on the blood lipid
and liver function in experimental hyperlipidemia rats. Method:All the rats,except for the normal group,were
fed with high-fat diets for 25 days to establish hyperlipidemia model. Then lovastatin group was given lovastatin at
the doses of 3 mg·kg - 1 once a day,and V. jatamansi high,medium,and low group were respectively given the
alcohol extract of V. jatamansi at the doses of 1. 25,2. 5,5 g·kg - 1 equivalently to the crude V. jatamansi by
intragastric administration once a day. After administration,every group was still fed with high-fat diets. Two weeks
later,the serum level of total cholesterol (TC) ,triglycerides (TG) ,lipoproten cholesterol (LDL-C) ,high
density lipoprotein cholesterol (HDL-C) ,alanine aminotransferase (ALT) ,aspartate aminotransferase (AST)
and liver TC,TG was detected. Result:the TC,TG,LDL-C levels in the serums and livers in model rats were
higher than these in normal rats (P < 0. 05,P < 0. 01) ,and the serum levels of ALT and AST also increased
significantly (P < 0. 05). Both lovastatin and the alcohol extract of V. jatamansi showed significantly decreased TG
level in serum and liver (P < 0. 01) ,the TC level in liver (P < 0. 01) and the ALT and AST in serum (P <
0. 01). Conclusion:V. jatamansi can regulate blood lipids level,and protect liver in hyperlipidemia rats.
[Key words] Valeriana jatamansi;experimental hyperlipidemia rats;blood lipid;liver function
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 19
Oct.,2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.19.048
蜘蛛香系败酱科缬草属植物蜘蛛香的根茎和
根,2010 年版《中国药典》(一部)称其“功能理气止
痛、消食止泻、祛风除湿、镇静安神,用于脘腹胀痛、
食积不化、腹泻痢疾、风湿痹痛、腰膝酸软、失
眠[1]”。高脂血症为临床上常见病、多发病,随着人
们生活水平不断提高,生活方式也随之发生改变,其
发病率逐年增加,严重威胁着人们的生命健康。本
研究通过高脂饮食建立实验性高脂血症大鼠模型,
探讨了蜘蛛香对高脂血症大鼠血脂水平及肝功能的
影响,从而为其防治高脂血症及其相关疾病提供实
验依据。
1 材料
1. 1 动物 SPF 级 SD 大鼠,雌雄各半,体重(170 ±
10)g,由成都达硕生物科技有限公司提供。合格证
号 SCXK(川)2008-24。
1. 2 药物 蜘蛛香,购于贵州遵义药材市场,经由
西南交通大学生命科学与工程学院宋良科副教授鉴
定,确认为败酱科缬草属植物蜘蛛香(Valeriana
jatamansi Jones)药材的根及根茎。洛伐他汀胶囊
(20 mg /粒) ,江苏大洋制药有限公司生产,批
号 091201。
1. 3 试剂 蛋黄粉(批号 20110319) ,江苏西美食
品科技有限公司生产;胆固醇(批号 110204) ,安徽
天启 化 工 有 限 有 限 公 司 生 产;牛 胆 盐 (批 号
20110318) ,北京奥博星生物技术有限责任公司生
产;羧甲基纤维素钠(CMC-Na,批号 20100813) ,成
都市科龙化工试剂厂生产;总胆固醇(TC,批号
20110303)、甘油三酯(TG,批号 20110302)、低密度
脂蛋白胆固醇(LDL-C,批号 0110312)和高密度脂
蛋白胆固醇试剂盒(HDL-C,批号 20110303) ,均为
北京北化康泰临床试剂有限公司生产;丙氨酸转氨
酶(ALT,批号 20110601)和天冬氨酸转氨酶试剂盒
(AST,批号 20110530) ,均为南京建成生物工程研
究所生产。
1. 4 仪器 RE52-86A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化
仪器厂) ,BS 224S 1 /万精密电子天平(北京赛多利
斯仪器系统有限公司) ,DY89-Ⅱ电动玻璃匀浆机
(宁波新芝生物科技股份有限公司) ,TGL-16 台式高
速冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司) ,
Multiskan Spectrum 全波长酶标仪(赛默飞世尔科技
有限公司)。
2 方法
2. 1 药物的制备 蜘蛛香乙醇提取物:蜘蛛香药材
分别加 10 倍量 80%乙醇、40 KHz 超声 90 min 提取
两次,合并两次滤液,40 ℃旋蒸挥去乙醇,用 0. 5%
CMC-Na 溶液配成分别含生药 0. 3,0. 15,0. 075 g·
mL - 1的高、中、低 3 种浓度。洛伐他汀溶液:用
0. 5% CMC-Na 将洛伐他汀配成 0. 2 g·L - 1的溶液。
以上药物密封,置 4 ℃冰箱中冷藏备用。
2. 2 动物模型的制备 大鼠适应实验环境 3 d 后,
随机分出 10 只(雌雄各半)为空白对照组,喂饲普
通饲料;其余大鼠喂饲高脂饲料[2](78. 8% 基础饲
料 + 10%猪油 + 10%蛋黄粉 + 1%胆固醇 + 0. 2%胆
盐) ,进行高脂血症动物模型造模。
2. 3 分组及给药 造模 25 d 后,将造模大鼠随机
分为 5 组(模型对照组、洛伐他汀组、蜘蛛香乙醇提
取物高、中、低剂量组) ,每组 10 只,雌雄各半,加造
模前分出的空白对照组共 6 组。空白组仍喂饲普通
饲料,其他组仍喂饲高脂饲料,同时给药,其中蜘蛛
香乙醇提取物低、中、高 3 个剂量组分别按 1. 25,
2. 5,5 g·kg - 1每日 ig 给药 1 次;洛伐他汀组按 3 mg·
kg - 1给予洛伐他汀每日 ig 给药 1 次;模型对照组和
空白对照组分别 ig 等体积的 0. 5% CMC-Na 溶液,
各组连续给药 14 d。
2. 4 指标检测
2. 4. 1 血清 TC,TG,HDL-C,LDL-C 测定 最后 1
次 ig 后禁食 12 h,不禁水,股动脉取血,高速冷冻离
心机 4 000 r·min - 1离心 10 min[3],取上清液制得血
清样本。按检测试剂盒说明方法,用全波长酶标仪,
测定血清 TC,TG,HDL-C,LDL-C 含量。
2. 4. 2 血清 ALT,AST 测定 按上述方法得血清,
按检测试剂盒说明方法测定血清 ALT,AST 活性。
2. 4. 3 肝组织 TC,TG 测定[4] 各组大鼠取血后,
迅速取出肝,冰生理盐水冲洗、滤纸吸湿后,称取湿
重 0. 3 g 左右,按质量体积比 1∶ 9加入预冷的生理盐
水,冰水中用电动匀浆机制成 10% 肝匀浆,高速冷
冻离心机 4 ℃ 6 000 r·min - 1离心 5 min,取上清制
得肝组织匀浆。按检测试剂盒说明方法,测定肝组
织 TC,TG 含量。
2. 5 数据处理 采用 SPSS 13. 0 对数据进行单因
素方差分析,进行各组间比较,后采用 t 检验。各组
实验数据用 珋x ± s 表示。P < 0. 05 具有统计学差异。
3 结果
3. 1 对大鼠血清、肝组织脂质生化指标的影响
3. 1. 1 对大鼠血清 TC、TG,肝组织 TC、TG 的影响
由表 1 可见,模型对照组血清及肝组织 TC 含量
明显高于空白对照组(P < 0. 01) ,血清及肝组织 TG
也显著高于空白对照组(P < 0. 05,P < 0. 01)。与模
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陈朝勇,等:蜘蛛香对高脂血症大鼠血脂及肝功能的影响
型对照组相比,洛伐他汀及蜘蛛香高、中、低剂量对
血清 TC 含量的影响均无显著性差异,蜘蛛香中、低
剂量都具有降低肝组织 TC 的作用(P < 0. 01) ,蜘蛛
香高、中剂量均能降低血清 TG 含量(P < 0. 01) ,而
对于肝组织 TG,蜘蛛香 3 个剂量组都具有明显的降
低作用(P < 0. 01)。
表 1 蜘蛛香对实验性高脂血症大鼠血清、肝组织 TC,TG 含量的影响(珋x ± s,n = 7) mmol·L - 1
组别 剂量 / g·kg - 1 血清 TC 肝组织 TC 血清 TG 肝组织 TG
空白对照 - 1. 42 ± 0. 33 0. 57 ± 0. 13 1. 98 ± 0. 38 0. 92 ± 0. 27
模型对照 - 3. 49 ± 0. 822) 1. 93 ± 0. 632) 2. 64 ± 0. 451) 1. 90 ± 0. 322)
洛伐他汀 0. 003 3. 33 ± 0. 66 1. 47 ± 0. 36 0. 95 ± 0. 154) 1. 82 ± 0. 32
蜘蛛香醇提物 5 3. 43 ± 1. 01 1. 93 ± 0. 64 1. 22 ± 0. 574) 1. 05 ± 0. 254)
2. 5 3. 59 ± 0. 58 0. 70 ± 0. 244) 1. 13 ± 0. 484) 0. 44 ± 0. 184)
1. 25 4. 23 ± 1. 21 1. 03 ± 0. 374) 2. 55 ± 0. 78 0. 33 ± 0. 114)
注:与空白对照组比较1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;与模型对照组比较3)P < 0. 05,4)P < 0. 01(表 2 ~ 3 同)。
3. 1. 2 对大鼠血清 LDL-C,HDL-C 的影响 由表 2
可见,模型对照组血清 LDL-C 含量明显高于空白对
照组(P < 0. 01) ,与模型对照组比较,蜘蛛香 3 个剂
量组血清 LDL-C 含量都没有显著变化;而对于血清
HDL-C 含量,模型对照组和空白对照组没有统计学
差异,阳性药洛伐他汀组及蜘蛛香高、中剂量组却明
显降低(P < 0. 01)。
表 2 蜘蛛香对实验性高脂血症大鼠血清 LDL-C,
HDL-C 含量的影响(珋x ± s,n = 7) mmol·L - 1
组别
剂量
/ g·kg - 1
LDL-C HDL-C
空白对照 - 1. 19 ± 0. 30 0. 55 ± 0. 14
模型对照 - 2. 23 ± 0. 682) 0. 64 ± 0. 19
洛伐他汀 0. 003 2. 63 ± 0. 60 0. 34 ± 0. 054)
蜘蛛香醇提物 5 2. 37 ± 0. 77 0. 38 ± 0. 084)
2. 5 2. 67 ± 0. 63 0. 39 ± 0. 054)
1. 25 3. 06 ± 0. 81 0. 60 ± 0. 20
3. 2 对大鼠血清 ALT,AST 活性的影响 由表 3
可见,模型对照组血清 ALT,AST 活性明显高于正
常组。与模型对照组比较,蜘蛛香高、中剂量能显著
降低血清 ALT 活性(P < 0. 01) ,中剂量能显著降低
血清 AST 活性(P < 0. 01)。
表 3 蜘蛛香对实验性高脂血症大鼠血清
ALT,AST 活性的影响(珋x ± s,n = 7) U·L - 1
组别
剂量
/ g·kg - 1
ALT AST
空白对照 - 8. 50 ± 1. 70 12. 43 ± 1. 76
模型对照 - 12. 05 ± 2. 171) 18. 31 ± 2. 432)
洛伐他汀 0. 003 8. 14 ± 1. 443) 10. 14 ± 2. 534)
蜘蛛香醇提物 5 4. 91 ± 2. 254) 16. 60 ± 4. 80
2. 5 6. 41 ± 2. 554) 9. 89 ± 2. 754)
1. 25 9. 63 ± 5. 94 14. 31 ± 2. 63
4 讨论
高脂血症是导致动脉粥样硬化和冠心病等多种
心脑血管疾病发生的重要因素[5]。目前临床常用
西药长期服用均有一定的副作用,且停药后血脂回
升情况也较普遍。而中药降血脂作用在中医药理论
指导下,具有疗效稳定,副作用小的一些特点[6]。
本课题组前期在对蜘蛛香的研究中,发现蜘蛛香醇
提物给药组实验动物饮食正常、精神良好,但较其他
组动物体重明显减轻的现象,启示了本实验研究。
从现代医学研究来讲,高脂血症为血脂异常或
血脂紊乱的惯称,是指人体内血液中一种或多种脂
质成分异常升高,超出正常范围。血脂是指血液中
所含脂类的总称,包括:甘油三酯(TG)、胆固醇
(TC)及其酯、磷脂和游离脂肪酸等。血脂在与血浆
中的蛋白质结合,形成溶解度大的脂蛋白复合体而运
输。各种脂蛋白可分为 4 类:乳糜微粒(CM)、极低密
度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋
白(HDL)。TC,TG 为血管粥样斑块的构成物质,LDL
可进入血管内壁而促使 TC 沉积,增高的血浆胆固醇
(TC)、甘油三酯(TG)可通过改变凝血系统和纤溶系
统的功能,促进血栓形成,加快动脉粥样硬化的形成
和发展,从而导致心血管疾病的发生[7]。
从本实验结果可以看出,模型对照组血清 TC,
TG,LDL-C 及肝组织中 TC,TG 含量较空白对照组明
显增高,说明本实验中高脂血症模型复制成功。蜘
蛛香高、中剂量组能够显著降低实验性高脂血症大
鼠血清中的 TG,高、中、低剂量均能显著降低肝组织
中 TG,中、低剂量对肝组织 TC 也有明显的降低作
用,这表明中药蜘蛛香具有一定的降低实验性高脂
血症大鼠血脂的作用,其中对肝组织、血清 TG 和血
清 TC 的降低作用比较明显。由于脂蛋白错综复杂
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 19
Oct.,2012
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
的网状代谢过程,影响 TC,TG 代谢的因素较多,其
机制有待进一步研究。
ALT 主要存在于肝细胞浆中,而在肝细胞损害、
坏死甚至在细胞变性时会释放到血清中使血清 ALT
升高,为最敏感的肝功能检测指标之一。AST 在心
肌中含量最高,其次为肝脏,当肝损伤时,血清中
AST 可明显升高。通过检测血清 ALT,AST 的变化,
发现模型对照组血清 ALT,AST 较空白对照组显著
升高,说明高脂血症大鼠肝功能受到损伤。蜘蛛香
高、中剂量组 ALT,中剂量组 AST 的活性较模型对
照组显著降低,其余各组也均有降低的趋势,说明蜘
蛛香醇提物具有保护高血脂条件所造成的大鼠肝损
伤的作用。
[参考文献]
[1] 中国药典 .一部[S]. 2010:345.
[2] GB15193. 1-94. 食品安全性毒理学评价程序和方法
[S]. 2003,2:35.
[3] 谭梦晖,于波,谷颖敏,等 . 香青兰不同部位提取物对
大鼠实验性高脂血症的影响[J]. 中国实验方剂学杂
志,2011,17(21) :209.
[4] 徐叔云,卞如濂,陈修 . 药理实验方法学[M]. 北京:
人民卫生出版社,2002:1202.
[5] Ahmed M H,Saad R A,Osman M H. Ezetimibe:effective
and safe treatment for gyslipidaemia associated with
nonalcoholic fatty liver disease[J]. Expert Opin Drug
Saf,2006,5(3) :487.
[6] 李凤玲,孙健,杜力军 . 近年来不同中药剂型降血脂疗
效概述[J]. 中国中医药信息杂志,1995,2(5) :14.
[7] 陈修 . 心血管药理学[M]. 北京:人民卫生出版社,
1989:89.
[责任编辑 聂淑琴]
[收稿日期] 20111204(012)
[基金项目] 国家重点基础研究发展规划(973 计划)项目(2009CB522704)
[第一作者] 全贞雪,博士研究生,从事《伤寒论》辨证论治规律研究,Tel:010-64510283,E-mail:qzx1122@ 126. com
[通讯作者] * 李宇航,博士生导师,教授,从事《伤寒论》辨证论治规律研究,Tel:010-64287002,E-mail:liyuhang@ bucm. edu. cn
“通利大肠”对 COPD大鼠气道重构的影响
全贞雪,钟相根,李宇航 * ,张前,贾旭,解华,周晓卫,马小鑫,
刘晓辉,田彦,王蔚,刘蕾,刘妙,王毅,徐云,田浩君
(北京中医药大学基础医学院,北京 100029)
[摘要] 目的:观察“通利大肠”对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长
因子-β(TGF-β)蛋白表达和细胞信号转导分子 Smad3mRNA,Smad7mRNA 基因水平变化,从气道重构角度探讨 COPD“从肠论
治”的效应机制。方法:用气管注射脂多糖加熏香烟联合造模方法建立 COPD 大鼠模型,随机分为正常组、模型组、治肠组、治
肺组及肺肠同治组。正常组、模型组灌胃 10 mL·kg - 1纯净水,各给药组灌胃相应中药(治肠组、治肺组、肺肠同治组的药量分
别为 1. 50,4. 25,5. 75 g·kg - 1) ,连续 14 d。用免疫组化法测量肺组织中 MMP-9,TGF-β 蛋白阳性表达面积比率,用实时荧光定
量 PCR 法测定肺组织 Smad3 和 Smad7 的 mRNA 水平。结果:①与正常组比较,模型组大鼠肺组织 MMP-9 和 TGF-β 表达增强,
蛋白阳性面积比率值分别为 1. 231% 和 3. 002%,Smad3mRNA 水平升高至 14. 804,Smad7mRNA 水平降低至 0. 2(P < 0. 01)。
②与模型组比较,治肠组肺组织 MMP-9,TGF-β 分别为 0. 944%和 1. 989%,二者表达减少,Smad3mRNA 水平降低,Smad7mRNA
水平升高(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。③与治肺组比较,肺肠同治组的肺组织 TGF-β 表达和 Smad3mRNA 水平减少,而
Smad7mRNA 水平升高至 0. 784(P < 0. 01) ,MMP-9 的表达则有减少的趋势。结论:通利大肠或在治肺的基础上增加通利大
肠,能抑制慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的气道重构,从而减轻气道阻塞,改善通气障碍及肺功能,这可能是 COPD“从肠论治”
效应产生的作用环节之一。
[关键词] 慢性阻塞性肺疾病;宣白承气汤;从肠论治;气道重构
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2012)19-0157-05
[网络出版地址] http:/ / www. cnki. net / kcms / detail /11. 3495. R. 20120731. 0956. 001. html
[网络出版时间] 2012-07-31 9:56
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第 18 卷第 19 期
2012 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 19
Oct.,2012