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田基黄水煎液对高脂血症模型大鼠动脉粥样硬化进程的影响



全 文 :田基黄水煎液对高脂血症模型大鼠动脉粥样
硬化进程的影响
胡向阳1,马 义2,李莉莉2
(1.中山大学附属第五医院,广东 珠海519000,2.暨南大学 生命科学院,广东 广州510632)
摘 要:目的:观察田基黄水煎液对高脂血症模型大鼠动脉粥样硬化进程的影响。方法:将48只 Wistar
雄性大鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组、田基黄水煎液组,建立高脂血症大鼠模
型,检测各组大鼠血脂、MCP-1、Lp-PLA2 及 MIF水平指标的变化。结果:田基黄水煎液组 TC、TG、
LDL-C、AI含量均有不同程度的降低(P<0.01或P<0.05),HDL-C含量升高(P<0.01);与模型对照
组比较,田基黄水煎液组 MCP-1、Lp-PLA2 及 MIF含量均有不同程度的降低(P<0.01或P<0.05);
与辛伐他汀组比较,田基黄水煎液组Lp-PLA2 含量降低(P<0.05)。结论:田基黄水煎液对高脂血症
模型大鼠动脉粥样硬化进程有抑制作用。
关键词:田基黄;高脂血症;动脉粥样硬化
中图分类号:R972+.6   文献标识码:A   文章编号:1673-2197(2011)11-0005-02
收稿日期:2011-08-10
作者简介:胡向阳(1975-),男,中山大学附属第五医院主治医师,研究方向为脑血管及代谢疾病。
  高脂血症是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)进程中
的重要独立危险因素,研究发现,因高脂肪饮食摄入引起的
高血脂状态通过诱导局部炎症反应、氧化应激损伤、损害血
管内皮细胞代谢等诸多作用,增进 AS的发生发展[1,2]。中
医认为,多食膏脂之人易于肥胖,久则气血运行不畅,气血
津液停聚为痰瘀,痰瘀蕴化为毒,损伤血脉,“痰、瘀、毒”是
AS进程中主要病理改变[3]。田基黄为藤黄科金丝桃属植
物地耳草的干燥全草,具有清热散瘀、消肿解毒的功效,药
理研究表明,其具有保护肝脏、调节免疫、抑制癌细胞及抗氧
化等作用[4,5]。本研究拟在高脂血症大鼠模型基础上,探讨
田基黄水煎液对模型大鼠AS进程的作用,笔者现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠,SPF级,雄性,体重(200±20)g,由南方医
科大学实验动物中心提供,合格证号:粤检证字2009C518,
室温适应性饲养1周后用于本实验。
1.2 实验药物
辛伐他汀(商品名:舒降之),杭州默沙东制药有限公司
生产,批准文号 H19990366,20mg/片,临用前以生理盐水溶
解浓度为1mg/mL。田基黄饮片由广东省中医院提供,水
煎液制备:田基黄3.0kg,以每克生药加水6mL,冷水浸泡
40min后,开始武火煎煮,煮沸后用文火慢煎30min,趁热过
滤。煎煮第二遍按每克生药加水4mL,煎法同上,合并滤
液。60℃恒温下旋转蒸发浓缩,浓缩为含生药2.25g/mL的
水煎液,置4℃冰箱保存备用。
1.3 试剂与仪器
高脂饲料(0.2%胆酸钠+2%胆固醇+10%食用油+
87.8%基础饲料),胆固醇、胆酸钠、丙基硫氧嘧啶(广州天
马精细化工厂)。10%泰洛沙泊((批号:2009030046,上海
复星药业有限公司)。胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度
脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试
剂盒(南京建成生物试剂公司)。单核细胞趋化蛋白-1
(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)原位杂交检
测试剂盒、脂蛋白相关磷脂酶 A2(lipoprotein associated
phospholipase A2,Lp-PLA2)原位杂交检测试剂盒、巨噬细
胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,
MIF)原位杂交检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公
司)。STAR72600酶标仪(ICAP-9000,美国Jarrel-ASH公
司),全自动生化分析仪(日本日立-7060型)。
1.4 动物分组
Wistar大鼠48只,数字随机分组法分为4组,即正常
对照组、模型对照组、辛伐他汀组、田基黄水煎液组。
1.5 动物模型制备
参照Bozoky等[6]方法建立大鼠高脂血模型,除正常对
照组外,其余各组均以高脂饲料喂养,大鼠腹腔注射10%泰
洛沙泊溶液5mL/kg,禁食12h后进行试验。辛伐他汀组、
田基黄水煎液组均以10mg/kg剂量灌胃,正常对照组、模型
对照组则以等体积生理盐水灌胃,连续8周。动物处死前
禁食12h,腹腔静脉取血,分离血清。
1.6 指标检测
将采取的新鲜血加入含肝素抗凝的试管中,混匀,4℃,
3 500转/min离心15min,收取上清液(血清)。采用酶比色
法在全自动生化分析仪测定TC、TG、HDL-C、LDL-C,操作
步骤均按照试剂盒说明书进行,并依据公式计算动脉粥样
—5—
硬化指数(Atherosclerotic index,AI),计算公式:AI=(TC
-HDL-C)/HDL-C。采用 ELISA 方法检测血清 MCP-1、
Lp-PLA2及 MIF水平,检测流程按照试剂盒说明操作。
1.7 统计学处理
使用SPSS14.0统计软件对数据进行重复测量资料的
方差分析,定量指标以(珚x±s)表示,方差分析,组间两两比
较采用q检验,P<0.05认为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组大鼠血脂代谢情况
与正常对照组比较,各实验组大鼠血清TC、TG、LDL-
C、AI含量均显著升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P
<0.01);与模型对照组比较,辛伐他汀组、田基黄水煎液组
TC、TG、LDL-C、AI含量均有不同程度的降低(P<0.01或
P<0.05);田基黄水煎液组 HDL-C含量升高(P<0.01);
与辛伐他汀组比较,田基黄水煎液组TG、TC含量升高(P
<0.05)(见表1)。
2.2 各组大鼠血清 MCP-1、Lp-PLA2 及 MIF的变化
与正常对照组比较,模型组大鼠血清 MCP-1、Lp-PLA2
及 MIF含量均显著升高(P<0.01);辛伐他汀组Lp-PLA2
含量升高(P<0.05),田基黄水煎液组 MCP-1含量升高(P
<0.05)。与模型对照组比较,辛伐他汀组 MCP-1、Lp-
PLA2及 MIF含量均显著降低(P<0.01);田基黄水煎液组
MCP-1、Lp-PLA2及 MIF含量均有不同程度的降低(P<
0.01或P<0.05)。与辛伐他汀组比较,田基黄水煎液组
Lp-PLA2含量降低(P<0.05)(见表2)。
表1 各组大鼠血脂情况比较 (n=12,mmol/L,珚x±s)
组别 TG  TC  HDL-C  LDL-C  AI
正常对照组 0.34±0.01  1.53±0.11  1.36±0.11  0.48±0.01  0.13±0.01
模型对照组 3.26±0.111) 13.81±1.641) 0.57±0.011) 4.12±0.111) 23.24±3.151)
辛伐他汀组 0.72±0.012,3) 3.46±0.512,3) 0.73±0.012) 1.16±0.122,4) 3.71±0.321,3)
田基黄水煎液组 1.25±0.012,4,5) 5.27±0.122,3,5) 1.18±0.013) 0.76±0.022,3) 3.44±0.221,3)
注:与正常对照组比较,1)P<0.01,2)P<0.05;与模型对照组比较,3)P<0.01,4)P<0.05;与辛伐他汀组比较,5)P<0.05。
表2 各组大鼠血清 MCP-1、Lp-PLA2
及 MIF的变化比较 (n=12,珚x±s)
组别 MCP-1(ng/mL)Lp-PLA2(ng/mL)MIF(ng/mL)
正常对照组 9.27±1.12  1.34±0.12  0.58±0.01
模型对照组 18.34±2.521) 6.37±0.121) 2.16±0.111)
辛伐他汀组 10.56±1.123)2.38±0.112,3) 0.75±0.033)
田基黄水煎液组 12.33±1.312,4)1.62±0.113,5) 0.82±0.023)
注:与正常对照组比较,1)P<0.01,2)P<0.05;与模型对照组比较,3)P
<0.01,4)P<0.05;与辛伐他汀组比较,5)P<0.05。
3 讨论
血脂异常是AS的独立危险因素之一,血脂异常可导致
血管局部脂质沉着,从而趋化巨噬细胞的聚集,促进泡沫细
胞的形成,从而始动了整个 AS的炎症过程[7]。MCP-1是
单核细胞趋化的重要信号蛋白,MCP-1水平反映动脉粥样
硬化负荷、斑块易损程度及炎症细胞活化状态[8]。Lp-PLA2
能水解氧化卵磷脂,生成溶血卵磷脂和游离氧化脂肪酸,导
致单核细胞由管腔向内膜聚集,是AS的一个独立风险预测
因子,并成为免疫调节的治疗靶点[9]。在 MIF基因敲除的
小鼠中,观察到AS进程被阻止,MIF的表达同动脉内膜的
厚度、动脉脂质的沉积及AS进展相关[10]。
随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变,高热量、
高脂肪食物的过度摄取,高脂血症发病逐年增加,高脂血症
属中医“湿浊”之范畴,是由于饮食不节,多食肥甘厚味,脾
胃失调,饮食中的糟粕、杂质混入营血,形成“痰瘀毒”邪,浸
淫脉道导致脉道痹阻不畅。张哲等[11]根据在AS的发生发
展过程中所出现的动脉壁内皮细胞损伤、血小板聚集、生物
活性物质释放、脂质浸润等病理改变,如同在血管内长的
“赘生物”,称其为“脉瘤”。基于上述病机分析,笔者认为防
治AS宜采用祛痰化瘀、清热解毒法为主。田基黄味甘、微
苦,性凉,具有清热利湿、散瘀止痛、消肿解毒的功效。本实
验在应激+高脂血症大鼠模型基础上,选用辛伐他汀作为
对照药物,辛伐他汀是临床上应用广泛的调脂药,研究发现
其还具有抗炎、免疫调节作用、改善血管内皮功能、稳定和
逆转粥样硬化斑块等作用[12]。本实验结果发现:与模型对
照组比较,田基黄水煎液组TC、TG、LDL-C、AI含量均有
不同程度的降低;HDL-C 含量升高。田基黄水煎液组
MCP-1、Lp-PLA2及 MIF含量均有不同程度的降低。与辛
伐他汀组比较,田基黄水煎液组Lp-PLA2 含量降低。田基
黄水煎液的上述药理效应可能与其“清热散瘀、消肿解毒”作
用相关,其缓解AS进程的作用或调控机制需要进一步研究。
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(责任编辑:姜付平)
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