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朝药关苍术提取物对无水乙醇致小鼠胃黏膜损伤的影响



全 文 :20 10年 3月第 3期 中目民族 医药杂志 l 4
朝药关苍术提取物对无水乙醇致小鼠胃赫膜损伤的影响△
刘 男 ’ 张颖 丽 ’ 张善玉 2`
( 1
.延边大学医学部药学院 , 吉林 延吉 13 优旧 ;
2
, 延边大学长白山 生物资源与功能分子教育部重点实验室 , 吉林 延吉 13 3以X) )
摘 要 : 目的 : 通过实脸观察研究关苍术的不 同提取物对小鼠无水乙醉实脸性胃钻膜损伤的保护作用 。 方法 : 采用无水乙
醉小 鼠急性胃清疡模型 ,观察胃私膜报伤面积 ,侧定胃钻膜组织 中一氧化氮 ( N O ) 和前列腺素 ( PE q ) 的含食 。 结果 : 关苍
术 C仇一 乙醉组 、 C仇 组和正丁醉组小 鼠清疡指数明显低 于 乙醉模型组 ; 关苍术 CO : 一 乙醉组和 C飞 组小 鼠胃组织中
此凡含童及关苍术 C仇 一 乙醉组 N O 含童显著高于 乙醉模型组 。 结论 : 关苍术不 同提取物中 COZ 一乙醉提取部分拮杭无
水乙醉所致小民急性 霄钻膜损伤作用校好 ,该作用可能与增加 胃钻膜中 N O 、 PG E : 含童有关 。
关健词 : 关苍术 ;无水乙醉 ; 胃清疡 ; N ;O GP 凡
中圈分类号 二R2 9 1· 9 文献标识码 : B 文章编号 : 1以拓 一 6 8 10( 20 1 0) 03 一以抖 1 一 03
关苍术为多年生菊科植物关苍术 ( tA acr y l od es 。 ia op in 一 天诚超临界萃取有限公司 : D 一 l驯洲) 型紫外 一可见分光光
ca ioK ds
.
ex
. 儿腼 . )的干燥茎根 ,又名东苍术 、枪头菜 。 性
味辛 、苦 ,温 ;归脾 、 胃 、 肝经 : 能燥湿健脾 ,祛风散寒 ,明 目 ;
用于院腹胀满 , 泄泻 , 水肿 , 脚气疾盛 , 风湿痹痛 ,风寒感
冒 ,夜盲症等 ,在临床上广为应用川 。 在朝鲜族民间经常
把关苍术作为治疗胃溃疡 、 慢性胃炎及消化系统疾病的药
物 ,疗效甚佳 。 也有实验表明关苍术正丁醇提取物降低乙
酸型溃疡模型 、消炎痛型溃疡模型和幽门结扎型溃疡模型
大鼠胃溃疡的溃疡指数 ,明显降低幽门结扎型溃疡模型胃
蛋白酶活性 、 胃液游离酸度和总酸度 ,并增加胃液中 P G F :
含量 z[] 。 为了进一步探讨关苍术治疗胃溃疡的物质基础 ,
本实验通过观察关苍术的超临界 0C 2 、 超临界 C o : 一 乙醇 、
正丁醇和水层等不同提取物对无水乙醇致小鼠急性胃猫
膜损伤模型的影响 ,探讨其拮抗乙醇型胃猫膜损伤的作
用 ,同时初步确定其有效部位。
1 实脸材料
1
.
1 实验动物 :昆明种小鼠 129 只 ,雄性 ,体重 ( 20 土 2 ) g ,
由延边大学医学部实验动物科提供 ,动物实验室喂养 3 天
后开始实验 。
1
.
2 药物与试剂 :关苍术采集于吉林省汪清县 ,经延边大
学药学院生药学教研室鉴定为 A tr aC y耐 esj a卯 in ca ioK ds .
.ex 苟 t am · 的干燥根茎 ; N O 测定试剂盒 (硝酸还原酶法 ) 由
南京建成生物工程研究所提供 ;其他试剂均为分析纯 。
1
.
3 实验仪器 : CT 一 SF H 一 50 一 12 05 超临界萃取仪 ,沈阳
△基金项 目: 国家自然科学基金 ( 308 60 3 4 3 ) , 延边大学 2 1 工
程项 目 ( Y班 n 一 . ` 2 )
通讯作者 : E - . u , y山咧夕 yb u .咖 . cn
度计 , 日本 H I T AC H工公司生产 。
2 实验方法
2
.
1 关苍术不同提取物的制备
2
.
1
.
1 超临界萃取物的制备 :取干燥粉碎的关苍术根茎粉
末装人萃取釜 ,在萃取压力为 25 M aP ,温度为 45 ℃ , c0 : 流
量为 145 k酬L 的条件下萃取 h2 ,得棕色油状的物质 ( 以下
简称 CO : 提取物 ) ,得率为 4 . 3% ;药渣继续以 1 . s mU g 加
人无水乙醇做夹带剂 ,与前者相同工艺萃取 2 . h5 ,萃取得
物回收乙醇并浓缩致浸膏 ( 以下简称 CO : 一 乙醇提取物 ) ,
得率为 1 . 1% 。
2
.
1
.
2 正丁醇和水层提取物的制备 :将超临界萃取后的药
渣用水提取 ,提取液过滤 ,正丁醇萃取 ,将正丁醇层和水层
减压回收并浓缩至浸青 ,得率分别为 0 . 57 % 和 2 . 36 % 。
2
.
2 关苍术提取物对无水乙醇致小鼠急性胃猫膜损伤的
影响 。
2
.
2
.
1 对胃溃疡面积的影响 : 取小鼠 60 只 , 随机分成 7
组 ,每组 10 只 ,分别为空白对照组 、模型组 、 C仇 组 、 C仇 -
乙醇组 、正丁醇组和水层组 。 给药组灌服相应提取物 0 . 5
了K岁d( 用 0 . 5% CM C 一 N 。 和吐温 一 80 溶解成相应浓度的
混悬液后灌胃 ) ; 空 白对照组和模型组给予等量的溶有
0
.
5% CM C一Na 和吐温 so 的蒸馏水 。 连续给药 5 天 ,实验
前禁食不禁水 24 h ,末次灌胃给药 30 m in 后 ,除对照组和阴
性对照组外所有小鼠均灌服无水乙醇 , 0 . Z m U只 , l h 后颈
椎脱臼处死 ,解剖取胃 ,结扎胃的责门部和幽门部并经胃
壁向胃腔内注人 5% 甲醛 2祖 ,将胃取出浸人 5% 甲醛溶液
中固定待测 ,沿胃大弯剪开 , 于 4℃生理盐水中冲洗 ,展开
平铺于显微镜下 , 用直尺测量溃疡面积 , 按下列公式计算
DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2010. 03. 028
42 中闯民族医药杂志 2 0 0 1年 3月第 3期
溃疡抑制率 ,溃疡抑制率 二【(模型组平均溃疡面积一给药
组平均溃疡面积 ) /模型组平均溃疡面积」x 10 % 。
2
.
2
.
2 对小鼠胃猫膜组织中 N0 和 GP E 含量的影响 : 取
小鼠 6 只 ,随机分为 6 组 ,每组 n 只 ,分别为对照组 、 模型
组 、 c o : 组 、 c o : 一 乙醇组 、 正丁醇组和水层组 。 给药剂量
和方法同上述实验 ,末次灌胃给药 30 而 n 后 , 除对照组以
外 ,听有小鼠均灌服无水 乙醇 , 0 . 2 m u 只 ,性h 颈椎脱臼处
死 ,解剖取胃 ,沿胃大弯剪开 ,生理盐水冲洗 ,剪取溃疡组
织处 , 用滤纸吸干水分 ,称取质量 ,制备胃组织匀浆液 ,严
格按照试剂盒说明书测定胃组织中 N0 含量 : 按文献方
树 , 〕测定 GPE Z 含量 ;用考马斯亮蓝法测定蛋白含量

2
.
3 统计学处理 :所得实验数据用均数 土 标准偏差 (又 土
s) 表示 ,两样本均数间比较采用 t检验进行统计学分析。
3 实验结果
3
.
1 不同提取物对无水乙醇致小鼠胃毅膜损伤面积的影
响 C 0 2 : 乙醇组 、 C o Z 组和正丁醇组均可明显降低小鼠胃溃
疡指数 (尸 < 0 . 01 ) ,而水层有降低溃疡指数的趋势 ,但无显
著性差异 。 结果如表 1所示 。
表 1 关苍术不同提取物对无水乙醉致小鼠急性胃油疡的作用
组别 n 溃疡指数 ( ~ 2 ) 溃疡抑制率 (% )
模型组 9 25 . 89 士 5 . 90 -
C O: 一 乙醇组 9 5 . 8 9 士 6 . 9 8 * 77 . 2 5
C0 2 组 9 7 . 3 3 士 4 . 19 * 7 1 . 67
正丁醇组 9 13 . 1 1 士 7 . 2 0 * 4 9 . 36
水层组 9 2 2 . 3 3 土 4 . 6 1 3 . 7 3
* 与模型组相比 , P < 0 . 01
3
.
2 不同提取物对小 鼠胃组织中 N O 和 P G E : 含量的影
响 : 与模型组 比较 , C O : 一 乙醇组小鼠胃勃膜中 N0 含量明
显增加 (尸 < 0 . 05 ) , CO : 组和正丁醇组有增加 的趋势但无
显著性差异 浑0 2 一 乙醇组和 C O Z 组勃膜中 PG E Z 含量明显
增加 ,与模型组 比较都有显著性差异 (尸 < 0 . 05 ) ,其他组有
增加的趋势 ,但不明显 。
4 讨 论
无水乙醇所致胃溃疡模型是一种急性胃溃疡模型 ,其
形成机制主要是乙醇直接损伤胃勃膜 ,引起胃壁血液循环
障碍 、组织坏死脱落 ,导致溃疡形成 [’1 。 本实验结果表明 ,
关苍术 CO : 一 乙醇组 、 CO : 组和正丁醇组均减轻无水乙醇
致小鼠胃豁膜损伤 ,其中 CO : 一 乙醇组作用最明显 。 说明
c o : 一 乙醇提取物可能具有改善胃壁血液循环 ,促进受损
胃戮膜愈合的作用 。
表 2 关苍术不同提取物对胃猫膜中 NO 、 PG EZ 的影响 (X 士 S )D
组别 n NO (肿心 g)I 以 ) P G EZ
空白对照组 1 1 2 . 5 1 士 0 . 5 7 40 . 2 8 士 9 . 04
模型组 1 2 . 05 土 0 . 科 3 . 5 士 4 . 7
CO : 一 乙醇组 1 2 . 64 士 0 . 75 * 4 . 04 土 1 1 . 03 *
C0 2组 1 1 2 . 45 上 0 . 8 2 4 1 . 15 土 8 . 16 *
正丁醇组 1 1 2 . 2 6 土 0 . 5 0 3 8 . 06 土 12 . 48
水层组 1 1 2 . 3 2 士 0 . 4 5 3 8 . 2 3 士 9 . 19
* 与模型组相比 ,尸 < 。 . 05
N O是由一氧化氮合酶 ( N O)S 催化产生的一种神经介
质和信使分子 ,具有增强胃猫膜保护作用 ,与胃溃疡修复
之间存在着密切联系 。 N0 参与调节胃酸和胃猫液的分泌
及碳酸氢盐的生成 ,可有效地舒张血管 ,增加胃翁膜血流
量 ,从而在维持猫膜完整性和猫膜防御中直接发挥作用 ;
并且 N o 对溃疡愈合也有促进作用 5[] 。 P G E小是胃猫膜中
的主要前列腺素之一 , 可改善胃猫膜血流 ,充足的翁膜血
流可迅速清除对上皮屏障具有损伤作用 的物质 ,还为猫膜
细胞提供丰富的氧气和营养物质 ,对胃钻膜的完整起到重
要的保护作用 。 本实验中 CO : 一 乙醇组胃组织 N O 含量和
增加 GP E Z 含量都明显增加 ,提示 CO Z 一 乙醇提取物可能
通过增加 N0 的释放 ,提高胃组织中 P G E Z 含量 ,发挥对胃
猫膜的保护作用 。
参考文献
【1〕殷俊芳 ,黄宝康 , 吴锦忠 . 苍术属药用植物 的药理作用
研究进展〔J] . 第二军医大学学报 , 20 8 , 26 ( 4) : 25 2一
254
.
【2」朴世浩 ,朴惠善 ,金德男 ,等 . 关苍术正 丁醉萃取物 的抗
清疡作用研究汇J] . 中草药 , 19 6 , 27 ( 7 ) : 4 10一 - 4 1.2
〔3」于海玲 ,郭建鹤 , 王丹 . 老鹤草片小 鼠无水乙 醉型 胃溃
疡的影响【J] . 时珍国医国药 , 20 7 , 18 ( 4) : 874 一 875 .
〔4 ]何绍珍 ,任建林 , 乙醉对 胃钻膜作用机制的研究进展
[ J ]
. 世界华人消化杂志 , 2 0 5 , 13 ( 2 1 ) : 2 59 1 一 25 96 .
【5 ]李备 ,刘华蓉 ,潘永全 ,等 . 黄连 总生物碱对 乙醉致大鼠
胃钻膜损伤的保护作用及其机制探讨【J ] . 中国中药杂
志 , 2X() 6 , 3 1 ( l ) : 5 1 一 54 .
20 10 年 l 月 15 日收稿
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,
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一 1 1 , Z H A N G 弘an 一 y l口
hP amr 朗y COl
e罗 Of Y田山i a n COl e ge , Yanj i 1331洲洲) , J击 n , C ih n a
2 0 0 1年 3月第 3期 中目民族 医药杂志 4 3
2
.
Ky e肠 bo r aty or o fNt aul r e R asou r cs o e fC h an gb苗 M ~t i an &u Fnt cion M dol e cul es
(Yl a山 in a Un i e vo iy t ), Mi址 s ytr Of E d u e iat o n , Yanj i 133X() 2 , Jil n , Chi n a
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伪h o l g or u p , C仇 g 脚叩 an d n 一 b u tan o l g 旧u p we er m akr e dl y , dce er as cd ; het c o n t ent of GP 玛 in C仇 一 alC ho ol 脚叩 阴 d C仇 孚皿 p ,
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八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响 △
杨玉梅 , 草建民 , 李月玲 , 庞 海 , 武宇科 2 王玉华3
( 1
. 包头 医学院心血管研究室 , 内蒙古 包头 01 4以刃 ; 2 . 天津科技大学材料科学与化学工程学院 06 级 ,天津 3 0( 抖 57 ;
3
. 内蒙古 医学院药学院 , 内蒙古 呼和浩特 01 佣 59 )
摘 要 : 目的 :观察八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响 。 方法 : 通过 lB 一 Z0 0 E 医用 图象分析仪观察记录大鼠
肠系膜微动脉和微静脉的 口径 、 血流速度及毛细血管开放的数 目 ; 用 B铭 7 一 3 型实验性体内血检形成仪刺激预 动脉 ,观察
颐动脉血检形成时间 。 结果 :八味沉香胶囊 1 . 2『掩、 0 . 6岁kg 、 0 . 3留 kg 连续给药 巧 天 ,可使大鼠体内血检形成时间延长 ;
使大鼠肠系膜微动脉和徽静脉的 口径增大 ,肠 系膜微动脉和微静脉的血流速度加快 ,毛细血管开放的数 目增加 。 结论 :八
味沉香胶囊具有明显的改善微循环 、抑制血检形成作用 。
关键词 : 八味沉香胶囊 ;血检 ;微循环 ; 影响
中图分类号 : 2R 91 . 2 文献标识码 : B 文章编号 : 10 6 一 6 81 0 ( 2 01 0 )03 一 O以 3 一 02
八味沉香胶囊是蒙药制剂八味沉香散的的改进剂型 。 成都泰盟科技有限公司 。
由沉香 、 肉豆范 、丁香 、 广枣 、 木香等组成的 ,具有平息气血 2 方法与结果
相搏 、 止痛 、补心益气之功效 ,用于气血相搏 、 心区疼痛 、 昏 2 . 1 八味沉香胶囊对大鼠肠系膜微循环的影响 :取健康
厥 、 心悸 、失眠 、 急躁不安 、健忘症 、癫痛等的治疗。 本实验 大鼠 50 只 ,体重 180 一 2 30 9 ,雌雄各半 ,随机分为 5 组 : 第 1
拟观察八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响 ,为 组 ,正常对照组 ,给予等容量生理盐水 ; 第 2 组 , 阳性对照
其临床应用提供实验依据。 组 ,复方丹参片 0 . 3岁掩 (相当于临床治疗量 ) ;第 3 一 5 组 ,
1 实验材料 八味沉香胶囊大 、 中 、小剂量组 ,分别为 1 . 2扩吨 (相当于临
1
.
1 药物 :八味沉香胶囊内容物 (下称八味沉香 ) , 内蒙古 床治疗量的 2 倍 ) 、 。 . 6岁吨 (相当于临床治疗量 ) 、 0 . 3『吨
蒙医学院药学院提供 ,批号价 031 0 ,临用时充分研磨后用 (相当于临床治疗量的 12/ 倍 ) 。 各组均按 Z n 1F l o g 灌胃
蒸馏水配成所需浓度的混悬液 ;复方丹参片 ,批号 06 120 7 , 给药 ,连续 巧 天 ,在最后一次给药后 24 小时 ,腹腔注射
安徽古井集团九方制药有限公司生产 ,临用时用充分研磨 3% 戊巴比妥钠麻醉 ,腹正中线切 口 1 一 cZ m 后 ,放人 自动
后用蒸馏水配成所需浓度的混悬液。 恒温微循环观察箱内 ,轻轻取出被观察的肠系膜放人观察
1
.
2 动物 : iw s atr 大鼠 ,清洁级 , 雌雄兼有 ,由内蒙古大学 盒内 ,用任氏液灌流湿润肠系膜 ,通过 BI 一 2姗 E 医用图象
实验动物研究中心提供 ,许可证号 sc x K (蒙 ) 2 0 2 一 0 1
。 分析仪观察记录大鼠肠系膜微动脉和微静脉的 口径 、 血流
1
.
3 主要仪器 :明 7 一 3 型实验性体内血栓形成仪 ,包头 速度及毛细血管开放的数目 。
医学院心血管研究室研制。 BI 一 2以刃 B 医用图象分析仪 , 结果表明 ,八味沉香胶囊可使大鼠肠系膜微动脉和微
静脉的口径增大 ,使肠系膜微动脉和微静脉的血流速度加
△基金项目 :内蒙古自然科学基金重点项目 , 编号双众刃 80 1撇 快 ,毛细血管开放的数目增加 。 详见表 1 。