全 文 ：·专　栏·
　·中药与天然药·
全叶马兰的抗炎镇痛作用研究
徐庆荣　张保功　刘　娟　杜秀娟　李　娜(滨州 256603山东省滨州医学院)
摘要　目的:探讨全叶马兰的抗炎镇痛作用。方法:用大白鼠足趾肿胀法和小白鼠耳廓肿胀法观察其抗炎作用;用大白鼠钾
离子皮下透入致痛法和小白鼠扭体法 ,观察全叶马兰的镇痛作用。结果:全叶马兰能对抗新鲜鸡蛋清和二甲苯的致炎作用 ,
并能加强哌替啶的镇痛作用 ,与生理盐水对照组比较差异非常显著(P<0.01)。结论:全叶马兰有明显的抗炎镇痛作用。
关键词　全叶马兰;大白鼠;小白鼠;抗炎;镇痛
Analgesic and anti-inflammatory effects of Quanyemalan
Xu Qing rong , Zhan Baogong , Lu Juan et al(Binzhou Medical College , Binz hou , 256603)
ABSTRACT　OBJECTIVE:To study the analgesic and anti-inflammatory effects of Quanyemalan.METHOD:The anti-inflammatory
effects w as determined w ith the model of the swelling of mouse ear and the rat carrageenin paw edema.The analgesic effect w as
edtermined with , mouse w rithing me thod and rat subcutaneous K + penetrate mo thod.RESULTS:Compared with NS control group ,
Quanyemalan could reduce the sw elling degree of mouse ear and rat paw edema , and could also streng then the analg esic effect of
pethidine(P <0.01).CONCLUSION:Quanyemalan has prominent analgesic and anti-inflamma tory effects.
KEY WORDS　Quanyemalan , ra t , mouse , anti-inflammatory , analg esic
　　全叶马兰系菊科植物(Kalimeris intergrifolia Farca),野生
于山东各地 ,资源丰富 , 民间早已用其全草煎服治疗慢性支
气管炎 ,疗效很好 , 在 1970 年我们为了探讨全叶马兰的药理
作用 ,对其根 , 茎 , 叶 , 全草的镇咳及中枢抑制作用进行了研
究 ,实验证明 , 全叶马兰有明显的镇咳及中枢抑制作用 ,全草
作用最强[ 1 , 2] 。但对其抗炎镇痛作用未见有人报道 , 现将其
抗炎镇痛作用报道如下:
1　材料
动物:大白鼠:由山东省卫生防疫站提供;小白鼠:由滨
州医学院动物室提供。
药品:全叶马兰乙醇提取物:滨州医学院药理研究室制
备;哌替啶:沈阳制药厂生产;二甲苯和醋酸:上海试剂一厂
生产;地塞米松:山东新华制药厂生产。
仪器:痛阈测量仪(Wa-9E 型):北京海淀电子医疗仪器
厂生产:二道生理记录仪(LMS-2B 型):成都仪器厂生产。
2　方法[ 3 , 4]
2.1　抗炎作用
2.1.1　对抗新鲜鸡蛋清致大白鼠足趾肿胀作用。(足趾肿
胀法)
取体重 180-200g wistar大白鼠 48只(雌雄不拘),随机
分为四组 ,药前用自制的容积测定仪测定左侧足趾容积。 然
后分别用下列药物灌胃;全叶马兰(1)组 1ml/100g 体重;全
叶马兰(2)组 1ml/100g体重;地塞米松 5mg/100g体重;等容
量的生理盐水。 30min 后每只大白鼠左侧足趾均皮下注射
10%新鲜鸡蛋清 0.1ml。药后 30 、60 、90、120min 均以药前相
同的方法测定左侧足趾容积。用药前后足趾容积之差作为
肿胀程度。
2.1.2　对抗二甲苯致小白鼠耳廓肿胀作用:(耳廓肿胀法)
取昆明种小白鼠 60 只 , 随机分为四组 ,然后分别用下列
药物灌胃:全叶马兰(1)组 0.1ml/ 10g 体重;全叶马兰(2)组
0.1ml/10g 体重;地塞米松:0.25mg/ 10g;等容量的生理盐
水。给药 1h 后 , 左耳涂 30ug 二甲苯致炎 , 3h 后颈椎脱臼处
死。用直径 9mm 打孔器在左右两耳相同的部位打下耳片。
称重 ,以左右耳片之差作为肿胀程度。
2.2　镇痛作用[ 2 , 5]
2.2.1 　加强哌替啶的镇痛作用。(钾离子皮下透入致痛
法)[ 4]
取 180-200g wistar大白鼠 60 只 , (雌雄不拘), 随机分
为五组 ,药前每只大白鼠均用(WQ-9E 型)痛阈测量仪测每
只大白鼠的痛阈值 3 次 ,(作尾部皮肤致痛刺激 , 根据大白鼠
甩尾报痛时电流的大小 ,表示痛阈值的高低), 取均数作为药
前痛阈值。然后分别用下列药物灌胃:全叶马兰(1)组 1ml/
100g 体重;全叶马兰(2)组 1ml/100g 体重;全叶马兰加哌替
啶;哌替啶;等容量的生理盐水 , 哌替啶均为 0.01g/kg 体重
(阈下剂量)。药后 30 、60 、90 、120min 均用药前相同方法测
得每只大白鼠的痛阈值。用药前后痛阈值之差作为痛阈提
·199·中国现代应用药学杂志 2002年 6月第 19卷第 3期　　　　　　　　　　　　　　　Chin JMAP , 2002 June , Vol.19 No.3
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2002.03.015
高程度。
2.2.2　加强哌替啶的镇痛作用。(扭体法)
取昆明种小白鼠 75 只(雌雄不拘),随机分为五组 ,然后
分别用下列药物灌胃:全叶马兰(1)组 0.1ml/10g 体重;全叶
马兰(2)组 0.1ml/ 10g 体重;全叶马兰(1)组加哌替啶;哌替
啶;等容量的生理盐水 , 哌替啶均为 0.01g/ kg 体重(阈下剂
量), 药后 30min 每只小白鼠均腹腔注射醋酸 0.9mg , 药后
10min内观察是否出现扭体反应。
3　结果:
3.1　抗炎作用:
3.1.1　对抗新鲜鸡蛋清致大白鼠足趾肿胀作用。
实验表明:全叶马兰(1)组药后 30 、60min 足趾肿胀程度
与生理盐水对照组比较有显著的差异(P <0.05)。 90min ,
120min 与生理盐水对照组比较 , 差异非常显著(P <0.01),
与地塞米松组比较无明显差异(P>0.05)。全叶马兰(2)药
后足趾肿胀程度与生理盐水对照组比较无明显差异(P>0.
05)。结果见表 1。
表 1　全叶马兰抗新鲜鸡蛋清致大白鼠足趾肿胀作用(足趾肿胀法)n=12
组　　别 剂量(g/ kg) 药后不同时间足趾肿胀程度(ml)( x±s)
30min 60min 90min 120min
全 叶马 兰(1) 5 0.01±0.02* 0.09±0.10* 0.05±0.10** 0.03±0.11**
全 叶马 兰(2) 2.5 0.19±0.01■ 0.15±0.02■ 0.17±0.01■ 0.16±0.05■
地 塞 米 松 0.05 0.08±0.01** 0.05±0.04＊＊ 0.03±0.01** 0.01±0.05**
生 理 盐 水 10 0.22±0.03 0.25±0.05 0.29±0.03 0.27±0.04
注:与生理盐水对照组比较:＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 , ■:P>0.05
3.1.2　对抗二甲苯致小白鼠耳廓肿胀作用:
实验表明:全叶马兰(1)组 ,药后小白鼠耳廓肿胀程度与
生理盐水对照组比较 ,差异非常显著(P <0.01);与地塞米松
组比较无明显差异(P>0.05)。全叶马兰(2)组 ,药后小白鼠
耳廓肿胀程度与生理盐水对照组比较有明显差异(P <0.
05),结果见表 2。
表 2　全野马兰对抗二甲苯致小白鼠耳廓肿胀作用(n =15)
组别 剂量(g/ kg) 左右耳片重量之差(mg)( x±s)
全叶马兰(1) 5 0.09±0.12**
全叶马兰(2) 2.5 0.50±0.13*
地塞米松 0.025 0.05±0.13**
生理盐水 10 0.9±0.01
注:与生理盐水对照组比较::＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 , ■:P>0.05
3.2　镇痛作用:
3.2.1　加强哌替啶的镇痛作用:(钾离子皮下投入致痛法)
实验表明:全叶马兰(1)加哌替啶组 , 痛阈提高程度与生
理盐水对照组比较 ,差异非常显著(P <0.01);全叶马兰(1)
组 ,与生理盐水对照组比较有明显的差异(P<0.05);全叶马
兰(2)组药后痛阈提高程度与生理盐水对照组比较无明显差
异(P>0.05);哌替啶组与生理盐水对照组比较无明显差异
(P>0.05),(证明哌替啶是阈下剂量),结果见表 3。
3.2.2　加强哌替啶的镇痛作用(扭体法):
实验表明:全叶马兰(1)组加哌替啶组扭体反应动物数
与生理盐水对照组比较 ,差异非常显著(P<0.01);全叶马兰
(1)组与生理盐水对照组比较有明显差异(P <0.05);哌替啶
组与生理盐水对照组比较无明显差异(P>0.05),(证明哌替
啶是阈下剂量)结果见表 4。
表 3　加强哌替啶的镇痛作用(钾离子皮下投入致痛法)n=12
组　　别 剂量(g/ kg) 药后不同时间痛阈提高程度(mA)( x ±s)
30min 60min 90min 120min
全叶马兰加哌替啶 5 0.30±0.10** 0.33±0.07** 0.38±0.21** 0.36±0.13**
全 叶 马 兰( 1) 5 0.13±0.12* 0.25±0.02* 0.24±0.20* 0.23±0.20*
全 叶 马 兰( 2) 2.5 0.05±0.01■ 0.06±0.04■ 0.04±0.03■ 0.07±0.02■
哌 替 啶 0.01 0.06±0.02■ 0.08±0.04■ 0.05±0.01■ 0.09±0.03■
生 理 盐 水 10 0.03±0.01 0.02±0.13 0.04±0.01 0.02±0.03
注:与生理盐水对照组比较:＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 , ■:P>0.05
表 4　加强哌替啶的镇痛作用(扭体法)n =15
组别 剂量(g/ kg) 扭体反应的动物数
全叶马兰加哌替啶 5 3＊＊
全叶马兰(1) 5 7*
全叶马兰(2) 2.5 10■
哌替啶 0.01 11■
生理盐水 10 13
注:与生理盐水对照组比较::＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 , ■:P>0.05
4　统计方法:计数资料用 x 2 检验;计量资料用 t检验。
5　讨论:
动物实验证明:全叶马兰(1)组有明显的抗炎作用 ,并能
加强哌替啶的镇痛作用 ,与生理盐水对照组比较有非常显著
的差异(P<0.01);全叶马兰(2)组与生理盐水对照组比较无
明显差异(P>0.05)。所以全叶马兰(1)组可试用于临床治
疗由物理 ,化学 , 免疫等因素引起的炎症。用药后可以改善
红 ,肿 , 热 ,痛的症状 ,降低炎症反应对机体造成的损害 , 但对
细菌 ,病毒和其他微生物引起的炎症是否有对抗作用有待进
一步研究。
·200· Chin JMAP , 2002 June , Vol.19 No.3　　　　　　　　　　　　　　　中国现代应用药学杂志 2002年 6月第 19卷第 3期
参考文献
1 徐庆荣 ,吕世杰 ,石乐鸣等.全叶马兰对中枢神经系统的抑制作
用.中药材杂志 , 1991 , 14(7):41.
2 石乐鸣 ,刘忠华 ,田春林等.全叶马兰平喘作用实验研究.中国
特色医药杂志 , 2000 , 2(5):71.
3 徐庆荣 ,李娜.牛黄千金散抗火镇痛及对免疫功能的调节作用.
中药新药与临床药理 , 2001 , 3(12):12.
4 徐庆荣 ,李娜 , 万巧云等.风湿佳抗炎镇痛作用初探.中国行为
医学科学杂志 , 2000 , 9(40):59.
5 徐淑云 , 卞如谦 ,陈修.药理学实验方法.北京:人民卫生出版
社 ,第二版 , 1994:162.
收稿日期:2001-06-11
黄芪新的化学成分研究
曹津铭(天津 300052天津医科大学总医院药剂科中药房)
　　黄芪为最常用的中药之一。[ 1]我们对膜夹黄芪[ Aslragalus-
memkranaceus(Fisch.)Bge.]根的化学成分进行了研究。共分离
得到七个单体。经鉴定分别为Ⅰ蔗糖(suorose), Ⅲβ-谷甾醇(β-sito-
sterol), Ⅳ芒柄花素(formononetin),Ⅴ毛蕊异黄酮(calycosin);芒柄
花素和毛蕊异黄酮系从黄芪属植物中分离出。
药材为 A.memkranaceus(F isch)Bge.的根 , 系购自本市
中药集团有限公司。本药材经药品监督检验所鉴定。紫外
光谱用日立-200 型紫外分光仪测定 , 红外光谱用岛津 IR-
27G 型红外分光仪测定 , 核磁共振谱用 Rerkin-Elmer R-32 型
核磁共振仪 , TMS 为内标测定 , 质谱用 JMS-D300 型质谱仪
测定。柱层析用硅胶为上海五四农场试剂厂生产 100 ～ 140
目。薄层层析用。硅胶 G 为青岛海洋化工厂生产。柱层层
析用聚酰胺为解放军 83305 部队 701 厂生产 , 30-60 目。 纸
层析用滤纸为杭州新华滤纸。试剂包括:95%乙醇 , 乙酸乙
酯 ,丁醇 , 甲酸 ,仿均为分析醇。
1　提取分离
黄芪根粉 2kg , 用乙醚连续回流提取得乙醚提取液。 残
留物用 95%乙醇回流提取 ,提取液减压浓缩后放置 , 析出粗
晶 ,乙醇重结晶得晶Ⅰ 。 其母液中乙醇挥尽 , 所得浸膏状物
用乙酸乙酯萃取。萃取液浓缩至约 25g , 加 10g聚酰胺拌匀 ,
经 250g 聚酰胺柱层析(5.5×100cm , 湿法装柱)。依次用水
和浓度递增的乙醇洗脱。洗脱液减压浓缩后 ,经硅胶 G 薄层
层析 , 用乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10:3:1:1)展开 , 紫外光下
观察 ,检查各流份。从 30%乙醇洗脱部分 ,析出粗晶 , 乙醇重
结晶 , 得晶Ⅱ 。上述乙醚提取液回收乙醚 , 残留物挥尽乙醚
后用石油醚提取。分为石油醚提取液和石油醚不溶物。 不
溶物(30g),加适量乙醚溶解 , 加入 50g 硅胶拌匀 。提取液经
浓缩后(约 25g),加入 50g硅胶拌匀。二者分别经 100g硅胶
柱层析(均有 5.5×100cm , 湿法装柱)。依次用氯仿和氯仿-
乙醇极性递增洗脱。每一流份收集约 500ml。洗脱液浓缩
后 ,经硅胶 G 薄层层析 , 用氯仿-乙醇(不同比例)展开 , AlCl3
及碘显色 ,紫外光下观察 , 检查各流份。不溶物经柱层析 , 由
氯仿洗脱部分依次得晶Ⅲ与晶Ⅳ, [ 2]二者分别用甲醇和氯仿
重结晶 、氯仿-乙醇(19:1)洗脱物 , 经无水乙醇重结晶得晶
Ⅴ。氯仿-乙醇(1:1)洗脱物 , 经乙酸乙酯重结晶 , 得晶 Ⅵ 。
石油醚提取液 , 经柱层析 , 氯仿洗脱物 , 经氯仿重结晶 , 得晶
Ⅲ 。氯仿-乙醇(9:1)洗脱物 , 经无水乙醇重结晶 ,得晶 Ⅶ 。
2　鉴定
2.1　晶Ⅰ经鉴定为蔗糖(sucrose)。[ 3]
2.2　晶Ⅲ的鉴定:甲醇重结晶 ,得无色片晶。mp137-138℃。
Likeermann-Burcharol反应阴性 。与 β-谷甾醇标准品共薄层
Rf值一致 , 混合熔点也不下降。其红外光谱与 β-谷甾醇标准
红外光谱一致。故晶Ⅲ鉴定为 β-甾醇(β-sitosterol)。[ 4]
2.3　晶Ⅳ的鉴定:为无色针晶。mp247 ～ 250℃。纸层析:Rf
值:0.38(15%HAC), 0.87[ 叔丁醇-醋酸-水(3;1:1)] , 0.70
[ 苯-醋酸-水(125:72:3)] UVλMeoH
max
nm(logε):241sh(4.30),
251(4.33), 259sh(4.30), 307(4.00);加 NaOAc:258(4.50),
308(3.99), 335(3.93)。以上结果表明晶Ⅳ为异黄酮类化合
物 ,且 C7 位有游离羟基。 IRv KBr
max
:3184(-OH), 1640(共轭>
C =0), 1610 , 1570.1515(-Ar), 2980 , 2835 , 1455 , 1385(-
CH3)。 NMR(DMSO-d6)Sppm;3.82(3H , S , 4 四-OCH3), 10.
75(1H , S(宽)C7-OH), 8.4(1H , S , H-2), 8.07(1H , d , J=9H2 ,
H-5 ), 7.6(2H , d , J=9HZ ,H-2四,H-6四), 6.9-7.14(4H , m ,
H-6 ,H-8 , H-3 四, H-5 ), Ms , m/e(%):268(M + , 100)267
([ M-H] +35.2), 253([ M-CH3] +, 16.6), 136(RDA 开裂 ,
A +1 , 4.84), 132(RDA 开裂 B+1 , 87.48)。以上 UV , NMR 与
文献报道芒柄花素一致。 用重氮甲烷常法制得甲基化物 ,
mp159-161℃。与文献报道芒柄花素甲基化物熔点一致 。综
上鉴定晶Ⅳ为芒柄花素(formononetin)。 其结构为:7-羟基-
4 -甲氧基异黄酮。[ 5]
2.4　晶Ⅴ的鉴定:
为无色针晶。mp227-229℃。纸层析在紫外光下呈淡蓝
色斑点 , NH3 熏后变为亮绿蓝色。 Rf值 0.33(15%HAC), 0.
78[ 叔丁醇-醋酸-水(3:1:1)] , Gibb s 反应阴性 UVλMeoH
max
nm(logε):220(4.38)249(4.28), 255sh , 292(4.06)。 加
NaOAC:259(4.54), 290sh , 336(4.03)。以上结果表明晶
·201·中国现代应用药学杂志 2002年 6月第 19卷第 3期　　　　　　　　　　　　　　　Chin JMAP , 2002 June , Vol.19 No.3