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碳离子辐射大丽花矮化突变体的RAPD分析



全 文 :2009.25(增刊) 生物物理学报 《辐射与环境》专题墙报

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分单链/双链核酸分布密集度来确定细胞凋亡结果可靠。也解决了丝状真菌无法利用流
式细胞仪进行细胞损伤群体统计和分析的障碍。荧光显微方法能为研究真菌的辐射生物
效应提供更丰富的信息。

CK Irradiation with α particles
关键词:真菌 辐射损伤 Rhizopus oryzae 荧光成像

P8-47
碳离子辐射大丽花矮化突变体的 RAPD 分析
余丽霞 李文建 董喜存 周利斌 马爽
中科院近代物理研究所 兰州 城关区南昌路 509 号 730000 (bdian@impcas.ac.cn)
大丽花(Dahlia pinnata Cav.)又名西番莲、大丽菊,是菊科多年生草本,广泛用
于庭院栽培观赏花卉。离子束作为一种新的诱变源,具有传统的物理诱变和化学诱变技
术无可比拟的优点,利用重离子加速器辐照大丽花幼枝,能够创造出其它育种方式难以
获得的新的基因型,选育出适合盆栽的矮化品种。本研究利用兰州重离子加速器提供的
80Mev/u12C6+离子束对大丽花进行辐照诱变,采用随机扩增多态性 DNA(RAPD)技
术,用 25 条随机引物对野生型和诱变产生的矮化突变体进行分子水平的检测分析。结
果表明,10Gy 辐照后有 18 条引物扩增出现多态性片断,扩增条带多态率 19.57%;6Gy
辐照后仅有6条引物扩增出的条带有不同程度的差异,扩增条带多态率5.76%。据 Jaccard
公式,扩增片段相似性系数分别为 0.65、0.92(见表 1)。与 6Gy 辐照相比,10Gy 辐照
处理后大丽花 DNA 损伤较为严重,突变率高,所以较高剂量的辐照处理容易引起植物
分子改变,发生基因突变。对于植物改良和新种质的创新来说,相对较高的辐射剂量对
于各种突变体的产生可能更为有效。
表 1 25 条随机引物的 RAPD 扩增结果
D1(10Gy) D2(6Gy)
多态性引物(条) 18 6
特异性条带(条) 36 11
共有条带(条) 60 90
扩增条带多态率(%) 19.57 5.76
相似性系数 0.65 0.92

2009.25(增刊) 生物物理学报 《辐射与环境》专题墙报

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M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 M
图 1 野生种和突变体的扩增谱带
1、5、9:对照 1; 2、6、10:10Gy 辐射诱导的突变体;
3、7、11:对照 2; 4、8、12:6Gy 辐射诱导的突变体;M:marker
关键词 碳离子束,大丽花,矮化突变体,RAPD
参考文献
[1] Williams J G K, Kubelik A V, Levajk K J, et al. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic
markers. Nuc Acid Res, 1990, 18:6531-6535.
[2] Welsh J. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers. Nuc Acid Res, 1990, 18:7213-7518.

P8-48
γ-射线诱导的辐射适应性效应与 DNA 损伤修复之间的关系
袁德晓, 潘燕,张江虹,邵春林*
复 旦 大 学 放 射 医 学 研 究 所 , 上 海 200032 徐 汇 区 斜 土 路 2094 号
(yuandexiao758888@126.com; clshao@shmu.edu.cn)
目的: 探讨 γ-射线诱导的适应性效应及其细胞 DNA 损伤修复能力对辐射适应性效
应的影响。
方法: 采用野生型的中国仓鼠卵母细胞(CHO-9)及其 DNA 损伤修复缺陷型细胞:
EM-C11(由于XRCC1基因突变导致DNA单链断裂修复缺陷)和XR-C1(由于DNA-PKcs
基因突变导致 DNA 双链断裂修复缺陷),首先进行低剂量(0.016Gy 或 0.08Gy)的初始
照射,间隔一定的时间(4h 或 7h),再进行高剂量(1Gy)的攻击照射,然后检测细胞
微核形成率和克隆形成率的变化。用跨物种半定量 RT-PCR 法检测野生型 CHO 细胞不
同处理 XRCC1,DNA-PKcs mRNA 的表达变化。
结果和结论:○1对三株中国仓鼠细胞进行 γ 射线照射后的微核检测表明,XR-C1 细
胞的辐射敏感度最高,EM-C11 细胞次之,CHO-9 细胞的辐射敏感性低于前两者,即细
胞辐射敏感性与 DNA 损伤修复能力相关。○2以 0.08Gy 为初始照射剂量,间隔 4 小时再
进行 1Gy 的攻击照射,只有 CHO-9 细胞产生了 RAR;而 EM-C11 和 XR-C1 细胞微核
率均大于单独 1Gy 照射时的微核率,细胞克隆率均低于单独 1Gy 照射时的值,表现为
协同效应。○3以 0.08Gy 为初始照射剂量,间隔 7 小时再进行 1Gy 的攻击照射,发现除
了 XR-C1 细胞外 CHO-9 和 EM-C11 细胞均产生了 RAR。表明细胞要发生 RAR,初始
照射和攻击照射之间需要合适的时间间隔。○4以 0.016Gy 为初始照射剂量,间隔 4 小时