全 文 :蜘蛛香不同部位中总缬草三酯含量测定
罗喜荣1,罗 俊1,杨 军2* ,田弋夫2 (1.贵阳医学院,贵州贵阳 550004;2.中国科学院地球化学研究所,贵州贵阳 550002)
摘要 [目的]建立一种测定蜘蛛香中总缬草三酯含量的新方法。[方法]以缬草三酯为标准品,在测定波长 256 nm条件下,采用紫外分
光光度法测定蜘蛛香中总缬草三酯的含量。[结果]缬草三酯在 5 ~25 μg /ml范围内浓度与吸光度的线性关系良好(R = 0. 999 8),精密
度 RSD为 0. 07%,稳定性 RSD为 0. 77%,重复性 RSD为 1. 73%,平均回收率为 99. 55%;蜘蛛香根中总缬草三酯的含量为 3. 048%;蜘蛛
香根茎中总缬草三酯的含量为 2. 219%;蜘蛛香根茎及根中总缬草三酯的含量为 2. 676%。[结论]该方法准确、快速、重复性好,可用于
蜘蛛香中总缬草三酯含量的测定。
关键词 蜘蛛香(VALERIANAE JATAMANSI RHIZOMA ET RADIX);总缬草三酯;紫外分光光度法
中图分类号 S567;R284. 1 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2012)16 -08884 -01
Determination of Total Valepotriates Content in Different Parts of Valeriana Jatamansi Jones.
LUO Xi-rong et al (Guiyang Medical University,Guiyang,Guizhou 550004)
Abstract [Objective]To develop a new method for determining total valepotriates in V. jatamansi. [Method]Total valepotriates in V. Jata-
mansi was determined by UV spectrophotometer with valtrate as standard reference at the detection wavelength of 256 nm. [Result]The meth-
od had good linear relationship within the range of 5 - 25 μg /ml (R = 0. 999 8),the RSD of precision was 0. 07%,the RSD of stability was
0. 77%,and the RSD of repeatability was 1. 73%,the recovery was 99. 55% . The valepotriates content was 3. 048% in the root;2. 219% in
the rhizome and 2. 676% in both the rhizome and root. [Conclusion]The method is accurate,rapid,reproducible and can be used for meas-
uring the total valepotriates in V. jatamansi.
Key words VALERIANAE JATAMANSI RHIZOMA ET RADIX;Total valepotriates;UV spectrophotometry
基金项目 贵州省科学技术基金项目(黔科合 J字[2011]2288 号)。
作者简介 罗喜荣(1973 -) ,女,贵州松桃人,副教授,硕士,从事天然
药物化学研究,E-mail:yjco2@ 163. com。* 通讯作者,副研
究员,硕士,E-mail:yjsfe@ sina. com。
收稿日期 2012-02-27
蜘蛛香(VALERIANAE JATAMANSI RHIZOMA ET RA-
DIX)又名马蹄香、心叶缬草、臭药,为败酱科(Valerianaceae)
缬草属(Valeriana)植物蜘蛛香(Valeriana Jatamansi Jones)的
干燥根茎及根,在《本草纲目》中即有记载,是目前唯一被
2010 年版《中国药典》收载的缬草类生药。其性温、味辛、微
苦,具有镇静安神、理气止痛、消炎止泻和祛风除湿等功效。
缬草三酯类成分(缬草三酯、乙酰缬草三酯)是其主要活性成
分及质量控制指标[1]。缬草三酯类成分(Valepotriates)具有
镇静催眠、抗焦虑、抗病毒、抗胃癌、解痉和血管舒张等药理
作用[2 -7]。目前,蜘蛛香中缬草三酯类成分含量的测定方法
有 HPLC法和电位滴定法[8 -9],而关于采用紫外分光光度法
测定蜘蛛香中总缬草三酯含量的研究鲜有报道。笔者以缬
草三酯为对照品,采用紫外分光光度法测定蜘蛛香药材中总
缬草三酯含量,以期为蜘蛛香的进一步开发利用提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。蜘蛛香,于 2011年 11月采自贵州关岭,
经鉴定为 Valeriana Jatamansi Jones。
1. 1. 2 主要仪器。KQ5200超声波清洗器,购自昆山市超声
仪器公司;T6新世纪紫外可见分光光度计,购自北京普析通
用仪器公司。
1. 1. 3 主要试剂。缬草三酯标准品,购自四川维克奇生物
科技公司;甲醇为分析纯,市售。
1. 2 方法
1. 2. 1 标准溶液的制备。取缬草三酯适量,用无水甲醇溶解
配制成浓度 100 μg /ml的标准贮备液;分别取缬草三酯标准贮
备液0. 25、0. 50、0. 75、1. 00和1. 25 ml置于5 ml比色管中,用无
水甲醇定容至刻度,摇匀,配制成系列标准工作溶液。
1. 2. 2 样品的初处理。取采摘的蜘蛛香样品,自然阴干后
取不同部位粉碎成细粉,过 60目筛后备用。
1. 2. 3 样品溶液的制备。准确称取0. 500 g蜘蛛香粉,置具
塞锥形瓶中,加入 50 ml 乙酸乙酯浸泡 24 h后,超声提取 40
min,过滤,用乙酸乙酯定容至 50 ml,取滤液 0. 2 ml,挥干,按
标准工作溶液制备方法处理得到待测样品溶液。
1. 2. 4 测定波长的选择。取缬草三酯标准溶液和样品溶
液,在 200 ~400 nm范围内进行扫描,确定最佳测定波长。
1. 2. 5 方法学考察。①线性关系的考察。取配制好的系列
标准工作溶液,在 256 nm波长处进行测定,以缬草三酯浓度
为横坐标(X) ,吸光度为纵坐标(Y)绘制标准曲线,计算回归
方程。②精密度试验。取样品溶液,按试验方法重复测定 6
次,计算吸光度的 RSD。③稳定性试验。取样品溶液,按试
验方法在 5 h内每隔 1 h测定 1 次,计算吸光度的 RSD。④
重复性试验。取同一样品溶液,按试验方法平行测定 6 次,
计算其总缬草三酯含量的 RSD。⑤加样回收率试验。在样
品溶液中加入适量缬草三酯标准溶液,进行回收试验并计算
平均回收率和 RSD。
1. 2. 6 样品的含量测定。以无水甲醇作空白试剂,在 256
nm 处测定缬草三酯标准工作溶液的吸光度,以吸光度对相
应的浓度绘制工作曲线,以相同条件测定蜘蛛香的根、根茎
和根及根茎中总缬草三酯的吸光度,再用回归方程计算其总
缬草三酯的含量。
2 结果与分析
2. 1 测定波长的选择 图 1表明,缬草三酯标准溶液及样品
(下转第 9106页)
责任编辑 石金友 责任校对 卢瑶安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2012,40(16):8884,9106
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.16.093
根本性的生态补偿机制,以政府统筹、财政转移支付为主,
辅以碳交易的市场方式进行。要创新社会保障机制,以项
目扶持等方式资助就业、创业等后续产业的实施,提高社会
保障的可持续作用。
4 结语
三江源生态移民搬迁到新定居点后,享受到了国家给予
的基本的社会保障和公共服务,解决了生活温饱,社会效益
明显,生态效益开始显现。但要使三江源移民“移得出、稳得
住、能致富、不反弹”,需要“着力保障和改善民生”,根据经济
社会的发展提高其社会保障水平,建立健全生态补偿机制,
切实解决移民就业问题,帮助发展适合三江源区经济社会和
生态环境的后续产业,使得移民群众“少有所学,中有所事,
老有所养”,社会和谐、稳定,经济效益、社会效益和生态效益
同步发展,共同走小康之路。
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3706 -3711.
(上接第 8884页)
溶液均在 256 nm处有最大吸收,故选择测定波长为 256 nm。
注:1为标准溶液,2为样品溶液。
图 1 缬草三酯标准溶液及样品溶液的紫外光谱
2. 2 方法学考察 ①线性关系的考察。计算得线性回归方
程为 Y =0. 038 3X +0. 004 2,R =0. 999 8。试验结果表明,缬
草三酯浓度与吸光度在 5 ~ 25 μg /ml 范围内具有良好的线
性关系。②精密度试验。计算得吸光度的 RSD 为 0. 07%,
表明仪器精密度良好。③稳定性试验。计算得吸光度的
RSD为 0. 77%,表明样品溶液在 5 h内稳定性良好。④重复
性试验。计算得总缬草三酯含量的 RSD 为 1. 73%,表明方
法重现性良好。⑤加样回收率试验。由表 1可知,平均加样
回收率为 99. 55%,试验结果表明,该方法准确、快速、重复性
好,可用于蜘蛛香中总缬草三酯含量的测定。
表 1 样品回收率试验结果
样品
原含量
μg /ml
加入量
μg /ml
测定值
μg /ml
回收
率∥%
平均回
收率∥%
1 13. 369 4 17. 623 101. 46 99. 55
2 13. 369 6 19. 038 98. 29
3 13. 369 8 21. 134 98. 90
2. 3 样品测定 由表 2 可知,蜘蛛香不同部位中总缬草三
酯的含量不同。其中,蜘蛛香根中总缬草三酯的含量为
3. 048%;蜘蛛香根茎中总缬草三酯的含量为2. 219%;蜘蛛
表 2 蜘蛛香不同部位中总缬草三酯的含量
样品 部位 总缬草三酯含量∥%
1 根 3. 048
2 根茎 2. 219
3 根茎及根 2. 676
香根茎及根中总缬草三酯的含量为 2. 676%。
3 结论与讨论
缬草三酯是各种缬草共有的特征性化合物。缬草三酯、
乙酰缬草三酯和异缬草三酯均在 256 nm处有最大吸收。以
缬草三酯为对照品,应用紫外分光光度法测定蜘蛛香中总缬
草三酯含量,方法学的线性关系、精密度、稳定性、重复性、回
收率结果都较满意。该方法简便易行、结果稳定可靠、分析
费用低,可用于蜘蛛香中总缬草三酯的含量测定。
不同地区的蜘蛛香入药部位不尽相同,有的用根茎及
根,有的仅用根茎或根。研究结果表明,蜘蛛香根茎和根中
总缬草三酯含量虽有较大差异,但从提高生药利用率的角度
分析,以根茎及根入药为宜。
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6019 安徽农业科学 2012年