全 文 ：收稿日期：2013-09-10
基金项目：国家自然科学基金新疆联合基金重点项目（U1203204），国家“重大新药创制”科技重大专项（2012zx09102201-009）
作者简介：袁勇（1967-），男，副主任药师，从事中药民族药研究，e-mail:13899529020@163.com。
通信作者：王新春（1969-），女，主任药师，从事中药民族药研究,e-mail:cwjwxc@163.com。
第 32卷 第 1期
2014年 2月
石河子大学学报(自然科学版)
Journal of Shihezi University(Natural Science)
V01.32 No.1
Feb．2014
文章编号：1007-7383(2014)01-0069-04
香青兰总黄酮在大鼠体内的药代动力学研究
袁勇 1，邢建国 2，王立萍 3，姚佳茗 3，王新春 1，3
（1 石河子大学医学院第一附属医院，石河子 832002；2 新疆维吾尔自治区药物研究所，乌鲁木齐 830004；
3 石河子大学药学院,石河子 832002）
摘要：为探讨香青兰总黄酮在大鼠体内的药代动力学。 采用以田蓟苷为指标， HPLC 法测定大鼠灌胃给药后血浆中田
蓟苷的浓度，并采用 DAS2.0 软件计算药代动力学参数。 结果显示，血浆中田蓟苷浓度在 0.031～39.68 μg/mL 范围内线
性关系良好（R=0.9990），日内精密度（RSD）＜5%，日间精密度（RSD）＜10%，方法回收率在 98.01%～103.23%之间，提取回
收率在 72.67%～90.35%之间 。 香青兰总黄酮在大鼠体内呈二室分布 ， 大鼠灌胃香青兰总黄酮提取物 3 个剂量
（300，600，1200 mg/kg） 后，t1/2β 分别为 （6.904±0.922），（6.512±3.302），（9.820±3.116）h，AUC （0-t） 分别为 （0.527±
0.018），（0.980±0.097），（1.215±0.108） mg/L/h，Tmax 分别为（0.292±0.083），（0.139±0.048），（0.222±0.048）h，Cmax 分别为
(0.177±0.018)，（(0.451±0.064），（0.656±0.115） mg/L。由此可知，该法适用于测定香青兰总黄酮在大鼠体内的血药浓度并
进行药代动力学研究。
关键词：香青兰总黄酮；药代动力学；高效液相色谱法
中国分类号；R283 文献标志码：A
Study on the Pharmacokinetic Behavior ofDracocephalum
Moldavica L. Flavonoids in Rat
YUAN Yong1,XING Jianguo2,WANG Liping3,YAO Jiaming3,WANG Xinchun1，3
（1 The First Affiliated Hospital,School of Medicine,Shihezi University,Shihezi 832002,China;
2 Xinjiang Institute of Materia Medica,Urumqi 830004,China;3 Pharmacy of College,Shihezi University,Shihezi 832002,China）
Abstract:To study pharmacokinetics of Dracocephalum Moldavica L.Flavonoids in rat. Plasma concentration of tilianin was used
as the indicators,which was measured by HPLC.The pharmacokinetic parameters were calculated by DAS2.0.It was showed good
linear relationship when the concentration of tilianin in the range of 0.031～39.68 μg/mL with the correlation coefficient of
0.9990.The intra-day precision of this method was less than 5%,and the inter-day precision was less than 10%.The accuracy
was 98.01%~103.23%.The extraction recovery was 72.67%~90.35%.The main pharmacokinetics parameters of tilianin after oral
administration with three different doses (300,600,1200 mg/kg) to rats were: t1/2β:(6.904±0.922),(6.512±3.302),(9.820±3.116)h;
AUC(0-t):(0.527±0.018),(0.980±0.097),(1.215±0.108) mg/L/h;Tmax:(0.292±0.083),(0.139±0.048),(0.222±0.048)h;Cmax:(0.177±0.018),
(0.451 ±0.064), (0.656 ±0.115) mg/L.The method is proved to be suitable for the pharmacokinetic study of Dracocephalum
Moldavica L.Flavonoids in rats.
Key words：Dracocephalum Moldavica L.Flavonoids;Pharmacokinetic; HPLC
香青兰 Dracocephalum moldevica L. 为唇形科
青兰属植物，又名巴迪然吉布亚，味甘、苦，性凉，归
肝、脾经，有泻火、清热、止血的功能，香青兰药理作
用广泛，尤其对冠心病、高血压、动脉粥样硬化等心
血管疾病具有较好的疗效[1-2]。香青兰主要含有挥发
油、萜类、黄酮类、氨基酸、微量元素等多种化学成
分，其中，黄酮类成分是其发挥药理作用的主要活
性成分[3-4]。 目前，香青兰总黄酮在大鼠体内的药动
学研究还未见报道，因此，本研究以主要成分田蓟
苷为指标，建立了测定大鼠血浆中田蓟苷浓度的高
效液相色谱方法，测定大鼠灌胃给予香青兰总黄酮
提取物后田蓟苷的血药浓度，研究香青兰总黄酮在
大鼠体内的药代动力学特征，为其合理开发和应用
提供药动学依据。
1 材料
1.1 仪器
LC-10AT 高效液相色谱仪（日本岛津）；超声波
发生器（美国科学系统公司）；CT-64 电子分析天平
（奥豪斯国际贸易有限公司)；TGL-16C 高速离心机
(上海安亭科学仪器厂）。
1.2 试药
香青兰总黄酮提取物 （石河子大学实验室自
制，批号 20080310，总黄酮含量为 57%）；田蓟苷对
照品 (新疆自治区药物研究所提供， 经 1H NMR、
13C NMR 、MS、IR 等方法鉴定结构。 经 HPLC 测
定，纯度大于 98%)；PEG400(北京化学试剂公司)；乙
腈（天津市福晨化学试剂厂）；水为重蒸水；其余试
剂均为分析纯。
1.3 实验动物
实验动物 SD 大鼠，清洁Ⅱ级，体重（250~280）
g，雌雄各半，由新疆医科大学实验动物中心提供，
合格证号：新医动字第 2003-0001号。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
流动相： 乙腈-0.4%磷酸水 （34∶66）； 色谱柱：
AgilentC18（4.6×250 mm，5 μm）；流速：1.0 mL/min；
柱温：35℃；进样量：20 μL；检测波长 327 nm。
2.2 溶液的配制
2.2.1 对照品储备液的配制
精密称取田蓟苷对照品 5 mg置于 10 mL容量
瓶，乙腈定容，作为田蓟苷的储备液。
2.2.2 口服给药供试液的配制
分别精密称取香青兰总黄酮提取物及 CMC-Na
适量放入研钵中，再加入适量超纯水，边加水边搅
拌至 CMC-Na 为 0.5%， 继续研磨至香青兰总黄酮
提取物粉末成悬浮状态即可。
2.3 血浆样品的处理[5]
精密吸取血浆样品 200 μL， 加入 2 mL 乙腈，
涡旋 3 min， 然后置离心机中，12000 r/min 离心 10
min。 分离有机层，N2吹干， 残渣用 100 μL 乙腈复
溶，离心，上样测定。
2.4 方法学验证
2.4.1 专属性试验
分别取空白血浆、 加田蓟苷对照品的空白血
浆、给药后的血浆样品，按 2.3 项下方法处理后，在
上述色谱条件下各进样 20 μL。色谱图见图 1，结果
表明，在本试验条件下，血浆中内源性物质不干扰
样品的测定。
2.4.2 线性关系考察
精密吸取田蓟苷对照品储备液适量置于 200
μL 空白血浆中， 按倍数稀释法配制田蓟苷浓度为
0.031，0.124，0.248，1.984，3.968，19.840，39.680 μg/
mL的血浆样品，按 2.3项下处理。 HPLC分析测定，
以血浆中田蓟苷浓度对峰面积进行加权(1/X2)最小
a: 空白血浆 b: 添加田蓟苷对照品的血浆 c：香青兰总黄酮血浆样品
图 1 田蓟苷血浆样品的 HPLC 图
Fig.1 Chromatograms of Tilianin in plasma by HPLC
70 石河子大学学报（自然科学版） 第 32 卷
血浆浓度（μg/mL）
Mean±SD RSD/% Mean±SD RSD/%
39.680 39.247±0.471 1.20 38.902±0.568 1.46
3.968 3.912±0.064 1.64 3.878±0.078 2.01
0.031 0.032±0.001 3.13 0.033±0.002 6.07
日内 日间
表 1 田蓟苷血浆样品精密度 x ±S, n=5
Tab.1 The precision of tilianin in plasma
理论浓度/（μg / mL） 测量浓度/ （μg / mL） 回收率 / %
39.680 39.150 38.209 39.457 39.162 38.470 98.01±1.35
3.968 3.957 3.969 3.816 3.877 3.941 98.59±1.64
0.031 0.032 0.033 0.031 0.032 0.032 103.23±2.28
表 2 田蓟苷血浆样品回收率
Tab.2 The recovery of tilianin in plasma x ±S, n=5
2.4.4 提取回收率试验
配制高、中、低 3 个浓度的血浆样品，按 2.3 项
下血浆样品处理方法处理后经 HPLC测定， 测得提
取回收率在 72.67%～90.35%之间，结果见表 3。
表 3 田蓟苷血浆样品提取回收率 x±S, n=5
Tab.3 The extraction recovery of tilianin in plasma
2.5 大鼠体内药动学研究
2.5.1 样本的采集[6-7]
取 SD 大鼠 24 只，雌雄各半，随机分成 4 组，每
组 6只，禁食 12 h(自由饮水)。 前 3组以高、中、低 3
个剂量(1200，600，300 mg/kg)灌胃香青兰总黄酮提
取物，给药后 0.083，0.167，0.250，0.417，0.750，1，2，
3，5，7，9 h眼眶采血 0.5 mL，离心，分离血浆，-20℃
保存待用。 大鼠口服给药后，香青兰总黄酮中田蓟
苷的药动学参数见表 4，药时曲线见图 2。
3.968
0.050
浓度 / （μg / mL）
39.680
Mean±SD RSD/%
90.03±2.83 3.14
90.35±1.96 2.17
72.67±1.53 2.10
Cmax / mg/L 0.177±0.018 0.451±0.064 0.656±0.115
香青兰总黄酮提取物给药剂量/（mg/kg）
300 600 1200
K/h 1.065±0.383 1.835±1.081 0.560±0.351
Ka/h 8.814±3.793 6.735±2.419 5.505±3.723
t1/2α/h 0.221±0.112 1.218±0.672 0.527±0.173
t1/2β/h 6.904±0.922 6.512±3.302 9.820±3.116
V1/F/（L/kg） 854.127±311.053 2353.604±349.273 418.230±99.161
CL/F/（L/（h/kg）） 419.227±27.169 457.394±16.566 192.257±13.702
AUC（0-t）/（mg/（L/h）） 0.527±0.018 0.980±0.097 1.215±0.108
MRT（0-t）/h 3.445±0.089 3.131±0.152 2.450±0.150
Tmax /h 0.292±0.083 0.139±0.048 0.222±0.048
参数
表 4 大鼠灌胃香青兰总黄酮提取物后田蓟苷的药代动力学参数
Tab.4 Pharmacokinetic parameters of Tilianin after oral administration of TFDM x ±S, n=6
二乘法回归， 得血浆中田蓟苷的标准曲线为：Y=
34317.354X+1772.737，r=0.9990 （n=5）， 线性范围
0.031-39.68 μg/mL，定量限为 0.031 μg/mL。
2.4.3 准确度与精密度
按标准曲线项下方法，分别吸取不同体积的田
蓟苷对照品溶液加入 200 μL 空白血浆中， 得高、
中、低 3个浓度（39.680，3.968，0.031 μg/mL）的血浆
样品，每个浓度制备 5 份，按 2.3 项下血浆样品处理
方法处理后进样分析， 计算本法的回收率和精密
度。 结果田蓟苷日内、日间精密度 RSD 均＜10%，回
收率为 98.01%～103.23%,分别见表 1和表 2。
袁勇，等：香青兰总黄酮在大鼠体内的药代动力学研究第 1 期 71
图 2 大鼠灌胃香青兰总黄酮提取物后田蓟苷的药-时曲线
Fig.2 The plasma concentration-time courses of
Tilianin after oral administration of TFDM
3 讨论
本实验结果显示大鼠灌胃香青兰总黄酮后田
蓟苷的药代动力学过程符合二室模型。 口服吸收较
迅速，Tmax为 8-22 min，提示其在胃和小肠上部即被
吸收。 分布相半衰期 t1/2α仅在 0.218-1.218 h，说明
其从中央室向周边室分布较快。在各给药剂量下 K12
均大于相应的 K21，表明从中央室向周边室的转运速
率大于药物从周边室向中央室的速率。
香青兰总黄酮由低剂量增加至中剂量时，大鼠
血浆中田蓟苷的 AUC（0-t）和 Cmax逐渐增加，总消除速
率常数 K，清除率 CL/F 和消除相半衰期 t1/2β无显著
性变化，呈线性动力学特征。 但当由中剂量增至高
剂量时，AUC（0-t）和 Cmax增加较慢，K 和 CL/F 明显减
少，t1/2β显著延长（P＜0.05），药动学呈非线性动力学
特征。 这可能是由于香青兰总黄酮在体内涉及容量
限制过程，当给药剂量及产生的血药浓度超过一定
限度时，体内酶的催化能力和载体转运能力达到饱
和，药动学呈现明显的剂量依赖。 前期 Caco-2细胞
摄取实验结果表明田蓟苷是 Na+依赖葡萄糖转运载
体 1（SGLT1）和 P-糖蛋白（P-gp）的底物，这可能是
其药动学呈非线性特征的重要原因[8]。
实验中还考察了高、中、低 3 个浓度的血浆样
品在反复冻融 3 次、-20 ℃冷藏 6 d 和室温放置 6
h条件下的稳定性， 结果田蓟苷在各条件下均无显
著浓度变化，说明样品在测定条件下是稳定的。
参考文献：
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72 石河子大学学报（自然科学版） 第 32 卷