全 文 ： 中国现代应用药学 2013年 8月第 30卷第 8期 Chin JMAP, 2013 August, Vol.30 No.8 ·839·

图 2 病理切片显微图(10×)
A正常对照组；B模型组；CSASP组；D赋形剂组；E高剂量组 1；F高剂量组 2；G中剂量组；H低剂量组 1；I低剂量组 2
Fig 2 Pathological section microscopic diagram(10×)
Acontrol group; Bmodel group; CSASP; Dexcipient group; Ehigh dose group one; Fhigh dose group two; Gmiddle dose group; Hlow dose
group one; Ilow dose group two
局灶区黏膜固有层腺体数目减少，腺上皮轻-中度
异型增生，杯状细胞明显减少，间质伴淋巴细胞，
浆细胞，单核细胞等炎症细胞浸润，淋巴组织增
生，淋巴滤泡形成。显示中度炎症。
4 讨论
本实验研究提示，芪连白术颗粒对 DSS 诱导
的小鼠慢性溃疡性结肠炎有明显的疗效。本研究
为临床更有针对性的应用提供了实验依据。
中医药对溃疡性结肠炎的影响具有多系统、
多层面、多功效、多靶点的特点，本实验从生理
及病理的角度进行了初步的研究，分子角度的研
究和相关指标的定量检测有待进一步深入研究。
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收稿日期：2012-10-30



香青兰总黄酮对哮喘大鼠白细胞介素-6、13、17和肿瘤坏死因子-α的
影响

康小龙 1，何承辉 2*，邢建国 2，闫丽丽 2(1.新疆医科大学附属中医医院，乌鲁木齐 830000；2.新疆维吾尔自治区药物研究所，乌
鲁木齐 830004)

摘要：目的 观察香青兰总黄酮对哮喘大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、13、17 等细胞因子水平的影响。
方法 采用卵白蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型，给予香青兰总黄酮进行干预后，ELISA 法检测大鼠 BALF 中 TNF-α、
IL-6、IL-13 和 IL-17 的含量。结果 香青兰总黄酮 180 和 360 mg·kg1·d1 可降低哮喘大鼠 BALF 中 TNF-α、IL-6、IL-13
和 IL-17 含量(P<0.05 或 P<0.01)。结论 香青兰总黄酮对哮喘 TNF-α、IL-6、IL-13 和 IL-17 等炎症因子的释放具有一定
抑制作用。
关键词：香青兰总黄酮；肿瘤坏死因子-α；白介素-6；白介素-13；白介素-17
中图分类号：R965.2 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2013)08-0839-04


基金项目：新疆维吾尔自治区自然科学基金(2011211A098)
作者简介：康小龙，男，博士，主管药师 Tel: (0991)5853365 E-mail: kangxiaolong_163@163.com *通信作者：何承辉，女，硕士，
助理研究员 Tel: (0991)2318172 E-mail: 408705201@qq.com
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2013.08.011
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Effects of Moldavica Total Flavone on Interleukin-6, 13, 17 and Tumor Necrosis Factor-α Levels in
Asthma Rats

KANG Xiaolong1, HE Chenghui2*, XING Jianguo2, YAN Lili2(1.Hospital of Chinese Medicine Affiliated to Xinjiang
Medical University, Urumqi 830000, China; 2.Xinjiang Medicine Research Instirute, Urumqi 830004, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To investigate the effects of moldavica total flavone on interleukin-6, 13, 17 and tumor necrosis
factor-α levels in ovalbumin-induced asthmatic rats. METHODS Rats asthma model was established by ovalbumin challenge
methods. After therapy by moldavica total flavone, TNF-α, IL-6, IL-13 and IL-17 in BALF were detected respectively by ELISA.
RESULTS The levels of TNF-α, IL-6, IL-13 and IL-17 in BALF were markedly decreased(P<0.05 or P<0.01) after
administration of 180 and 360 mg·kg1·d1 moldavica total flavone in ovalbumin-induced asthmatic rats. CONCLUSION
Moldavica total flavone can inhibit the release of inflammatory cytokines of TNF-α, IL-6, IL-13 and IL-17 on asthma.
KEY WORDS: moldavica total flavone; tumor necrosis factor-α; interleukin-6; interleukin-13; interleukin-17

支气管哮喘(哮喘)是由多种细胞和细胞组分
参与的气道慢性炎症性疾病。研究表明[1]：白细胞
介素(IL)和肿瘤坏死因子(TNF)在炎症反应过程中
对增强、维持和减轻炎症反应起重要的调节作用，
在哮喘的发病机制中起重要的作用。据《维吾尔药
志(上)》记载[2]，唇形科植物香青兰(Dracocephalum
moldavica L.)具有镇咳、袪痰、平喘作用，在维吾
尔医和民间用于治疗气管炎已有几百年的历史。
本课题组从香青兰中提取的有效部位香青兰总黄
酮，拟用于治疗哮喘。本研究观察了香青兰总黄
酮对哮喘大鼠 TNF-α、IL-6、IL-13 和 IL-17 等细
胞因子水平的影响，以探讨香青兰总黄酮防治哮
喘的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物
清洁级SD大鼠，♀♂各半，体质量180~220 g，
由新疆实验动物研究中心提供，实验动物合格证
号：SCXK(新)2003-0002。
1.2 药材与试剂
香青兰药材购自安徽省亳州市德昌药业有限
公司，经新疆维吾尔自治区药物研究所何江研究
员鉴定为正品。卵白蛋白(OVA)(sigma公司，批号：
1001115808)；氢氧化铝(西安化学试剂厂，批号：
080912)；大鼠 TNF-α ELISA试剂盒(美国 ADL公
司，批号 42853)；大鼠 IL-6 ELISA 试剂盒(美国
ADL 公司，批号：51612)；大鼠 IL-13 ELISA 试
剂盒(北京晶美生物工程公司，批号：201107)；大
鼠 IL-17 ELISA 试剂盒(美国 ADL 公司，批号：
31192)；二辛可宁酸蛋白定量试剂盒(江苏碧云天
生物技术研究所，批号：20110511)。
1.3 仪器
402A 型超声雾化器 (江苏鱼跃医疗设备公
司)；680型酶标仪(美国 BIO-RAD公司)。
1.4 方法
1.4.1 香青兰总黄酮制备方法 香青兰药材经
40%乙醇回流提取 1 次，3 h，提取液用 HPD100
型大孔吸附树脂纯化，70%乙醇洗脱，浓缩干燥，
得香青兰总黄酮，经 UV测定，总黄酮含量为 60%
以上。
1.4.2 动物分组及哮喘模型的复制 清洁级 SD
大鼠 60只，♀♂各半，体质量(200.3±19.4)g，随
机分为 6 组：空白对照组，哮喘模型组，地塞米
松组，香青兰总黄酮低、中、高剂量组，每组 10
只。采用 OVA致敏法制备动物模型。除空白对照
组外，其他 5组动物第 1，2，3天用含 OVA 10 mg、
Al(OH)3干粉 100 mg的生理盐水混悬液 l mL腹腔
注射致敏，第 8天重复致敏 1次，第 15天开始除
空白对照组外各组动物超声雾化 1% OVA 进行激
发，约 30 min·次1，于每天早上 8~9 时进行。直
至大鼠出现哮喘样发作，共 4 周。雾化时见大鼠
出现烦躁不安、打喷嚏、大小便失禁、抓耳朵、
紫绀等症状，说明哮喘模型复制成功。第 5 周起
各给药组分别灌胃给予香青兰总黄酮 90，180，360
mg·kg1·d1，地塞米松 1 mg·kg1·d1，空白对照组
及哮喘模型组灌胃给予生理盐水，1次·d1，共 30 d。
1.4.3 支气管肺泡灌洗液(BALF)的收取 末次给
药后 1 h，用 2%戊巴比妥钠(40 mg·kg1)腹腔注射
麻醉，然后消毒无菌分离气管，夹闭右主支气管，
剪开气管用相应导管插入左主气管内，从导管注
入 4 mL生理盐水灌洗左肺，反复 3次，回收率为
60%~70%，回收灌洗液即为 BALF，将 BALF 在
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4 ℃ 3 000 r ·min1条件下离心 10 min，上清液保
存于80 ℃，用于细胞因子的测定。
1.4.4 BALF中 TNF-α、IL-6、IL-13和 IL-17含量
测定 首先用二辛可宁酸蛋白定量试剂盒测定
BALF中蛋白浓度，TNF-α、IL-6、IL-13和 IL-17
采用 ELISA法测定，操作均按试剂盒说明书进行，
测定结果以每毫升 BALF中蛋白含量(pg·mgprot1)
进行校正。
1.5 统计方法
数据均以 sx  表示，各组间显著性差异比较
用方差分析，采用 SPSS 11.0 for Windows 统计软
件进行统计。
2 结果
2.1 香青兰总黄酮对哮喘大鼠 BALF中 TNF-α含
量的影响。
与空白对照组比较，模型组大鼠 BALF 中
TNF-α含量明显升高(P<0.01)；与模型组比较，香
青兰总黄酮及地塞米松均可降低大鼠 BALF 中
TNF-α 含量(P<0.05 或 P<0.01)，但香青兰总黄酮
对 TNF-α 的抑制作用明显低于地塞米松
(P<0.005)。结果见表 1。
表 1 香青兰总黄酮对哮喘大鼠 BALF中 TNF-α含量的影
响( sx  ，n=10)
Tab 1 Effects of moldavica total flavone on the levels of
TNF-α in BALF of asthmatic rats ( sx  , n=10)
组 别 TNF-α/pg·mgprot1
空白对照组 6.24±1.01
模型组 20.42±2.921)
香青兰总黄酮 90 mg·kg1·d1组 17.64±2.362)
香青兰总黄酮 180 mg·kg1·d1组 14.60±1.793)
香青兰总黄酮 360 mg·kg1·d1组 14.10±1.443)
地塞米松组 9.73±1.563)
注：与空白对照组比较，1)P<0.01；与模型组比较，2)P<0.05，3)P<0.01
Note: Compared with blank control group, 1)P<0.01; compared with
model group, 2)P<0.05, 3)P<0.01
2.2 香青兰总黄酮对哮喘大鼠 BALF 中 IL-6、
IL-13和 IL-17含量的影响。
与空白对照组比较，模型组大鼠 BALF 中
IL-6、IL-13、IL-17 含量明显升高(P<0.01)；与模
型组比较，香青兰总黄酮中、高剂量及地塞米松
可降低大鼠 BALF 中 IL-6、IL-13、IL-17 含量
(P<0.05或 P<0.01)；香青兰总黄酮高剂量组 BALF
中 IL-6、IL-13含量与地塞米松组比较差异没有显
著性意义(P>0.05)，但对 IL-17的抑制作用明显低
于地塞米松(P<0.05)。结果见表 2。
表 2 香青兰总黄酮对哮喘大鼠 BALF中 IL-6、IL-13和 IL-17含量的影响( sx  ，n=10)
Tab 2 Effects of moldavica total flavone on the levels of IL-6, IL-13 and IL-17 in BALF of asthmatic rats( sx  , n=10)
组 别 IL-6/pg·mgprot1 IL-13/pg·mgprot1 IL-17/pg·mgprot1
空白对照组 3.52±0.62 7.17±1.02 18.77±1.90
模型组 6.86±1.131) 14.17±2.091) 30.28±3.251)
香青兰总黄酮 90 mg·kg1·d1组 6.44±0.90 13.50±1.95 28.04±2.02
香青兰总黄酮 180 mg·kg1·d1组 6.48±0.87 11.58±1.773) 27.23±1.452)
香青兰总黄酮 360 mg·kg1·d1组 5.25±1.083) 10.42±2.043) 24.38±1.873)
地塞米松组 5.37±0.623) 8.95±1.273) 22.15±2.153)
注：与空白对照组比较，1)P<0.01；与模型组比较，2)P<0.05，3)P<0.01
Note: Compared with blank control group, 1)P<0.01; compared with model group, 2)P<0.05, 3)P<0.01
3 讨论
支气管哮喘是一种以气道炎症为特征的疾
病，多种免疫细胞和细胞因子参与其发病过程。
在支气管哮喘的免疫损伤反应中，IL和 TNF起重
要调节作用[1]。
本课题组前期研究表明：香青兰总黄酮具有
明显镇咳、平喘作用；能抑制哮喘嗜酸性粒细胞
浸润，降低哮喘大鼠 IgE水平，抑制哮喘Ⅰ型变态
反应，通过离体气管螺旋条张力实验发现：香青
兰总黄酮可减小哮喘大鼠气管螺旋条张力变化
值，改善哮喘大鼠气道高反应性[3]；并且能够调节
TH1/TH2 类细胞因子的平衡，改善支气管哮喘慢
性炎症[4]，提示香青兰总黄酮对哮喘有一定治疗
作用。
TNF-α 由单核巨噬细胞激活产生，能引起呼
吸道不可逆阻塞以及组织损伤，促进哮喘发作和
气道炎症的加重[5]。Puthothu等[6]研究表明，吸入
或静脉注射 TNF-α 可引起气道阻力延迟性增高，
且随着 TNF-α 水平升高，嗜酸粒细胞逐渐浸润支
气管，提示 TNF-α 可能与哮喘炎症发生的启动有
关。本实验表明：香青兰总黄酮可降低哮喘大鼠
肺部 TNF-α 水平，提示香青兰总黄酮可能通过减
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少 TNF-α释放而抑制哮喘气道炎症。
Th1/Th2 细胞失衡是变应性哮喘发生过程中
重要的免疫学改变。Th1/Th2失衡表现为哮喘患者
体内 T细胞趋向于产生高水平的 Th2型细胞因子，
特别是 IL-4、IL-6、IL-13 等[7]。IL-6 在哮喘炎症
反应中扮演了重要的角色，在 IL-6的作用下，IL-4
可诱导产生大量 IgE，并且可以诱导内皮细胞表达
黏附分子和促进单核细胞趋化因子的产生，促进
单核细胞等炎症因子在炎症及感染部位的聚集[8]。
IL-13是一种重要的由活化的 Th2细胞分泌的多效
能细胞因子，主要由 CD4、CD8 T细胞产生，肥
大细胞和中性粒细胞在一定条件下也能产生，具
有多种生物学功能。通过激活嗜酸性粒细胞减少
其凋亡，促进 IgE分泌等机制，参与哮喘炎症的维
持，诱导气道高反应性和小气道结构重建[9]。本研
究表明，香青兰总黄酮中、高剂量可降低哮喘大
鼠肺部 IL-6、IL-13水平，提示香青兰总黄酮可抑
制 Th2 细胞因子的产生，纠正 Th1/Th2 细胞失衡
而干预哮喘的发生。
最新研究表明 Th17细胞及其产物 IL-17等在
炎性反应性疾病中发挥着重要的作用[10-11]。IL-17
是 T 细胞诱导的炎性反应的早期启动因素，通过
调节不同炎性介质的表达，使中性粒细胞向呼吸
道聚集。活化 IL-17还激活上皮细胞、成纤维细胞
和巨噬细胞，释放 TNF-α、IL-6 等，参与呼吸道
的重构，促进呼吸道炎症的进一步加剧[12]。本研
究表明，香青兰总黄酮中、高剂量可降低哮喘大
鼠肺部 IL-17产生，提示香青兰总黄酮可能通过抑
制哮喘 Th17细胞及 IL-17的生成而缓解哮喘气道
炎症。
目前控制和治疗哮喘最有效的药物是糖皮质
激素[13]，它不仅对炎症细胞迁移和活化、细胞因
子的生成以及炎症介质的释放有抑制作用，同时
使平滑肌细胞受体的反应性增高，从而抑制炎症
反应。但长期口服糖皮质激素会产生很多不良反
应，如向心性肥胖，股骨头坏死，骨质疏松，消
化性溃疡等，使其应用受到很大限制[14]。本研究
发现，香青兰总黄酮高剂量对哮喘大鼠 IL-6、IL-13
的抑制作用与地塞米松组比较差异没有显著性意
义，对 TNF-α 和 IL-17 的抑制作用明显低于地塞
米松，提示香青兰总黄酮对哮喘炎症因子的释放
有一定抑制作用，但效果可能还与地塞米松有一
定差距，但香青兰总黄酮作为中药提取物，可能
在不良反应方面优于地塞米松，这还需要进一步
研究加以证实。
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收稿日期：2012-12-07