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不同生长期甘松中无机元素含量分析



全 文 :[收稿日期] 20140725(003)
[基金项目] 中国科学院藏药现代化重点实验室项目(Y34291OZ1)
[第一作者] 张宇霞,在读硕士,从事药材质量标准研究,Tel:18309714660,E-mail:yuxia10086@ 126. com
[通讯作者] * 马世震,博士,副研究员,从事植物化学研究,Tel:13709763487,E-mail:szma@ nwipb. cas. cn
不同生长期甘松中无机元素含量分析
张宇霞1,2,马世震1* ,迟晓峰1,冯海生1,冀恬1,李彩霞1
(1. 中国科学院 西北高原生物研究所,西宁 810001;2. 中国科学院大学,北京 100049)
[摘要] 目的:测定不同生长期甘松地上和地下部分 22 种无机元素的含量,调查该药材的重金属含量。方法:样品经微
波消解后分别采用原子吸收分光光度法测定 Pb和 Cd含量,原子荧光光谱法测定 Hg和 As含量。利用电感耦合等离子体原
子发射光谱法测定 Cu,P,S,K,Na,Ca,Mg,Fe,Mn 等其他元素含量,等离子体射频发射功率 1. 20 kW,等离子气流量 15. 0 L·
min -1,雾化器流量 0. 75 L·min -1,辅助气流量 1. 50 L·min -1,观察高度 10 mm,一次读数时间 3. 0 s,稳定时间 15 s。结果:甘松
不同部位中 Pb,Cd,Hg,As,Cu含量均符合 2010 年版《中国药典》规定;K,Mg,P,Ca,S,Ba含量较丰富,Al,Fe,Na次之,微量元
素 Li,Mn,Sr,Ti,V,Zn含量均较低,所有样品中均未检测出 Mo。结论:甘松不同部位中 22 种无机元素含量与药材生长期、生
长环境均有一定联系,为该药材的规范化栽培和综合开发利用提供参考。
[关键词] 甘松;生长期;药材部位;无机元素;电感耦合等离子体原子发射光谱法
[中图分类号] R282. 4;R931. 4;R284. 1 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2015)06-0079-05
[doi] 10. 13422 / j. cnki. syfjx. 2015060079
[网络出版地址] http:/ /www. cnki. net /kcms /detail /11. 3495. R. 20150127. 1149. 009. html
[网络出版时间] 2015-01-27 11:49
Analysis of Inorganic Elements in Nardostachys chinensis from Different Growth Stages ZHANG Yu-xia1,2,
MA Shi-zhen1* ,CHI Xiao-feng1,FENG Hai-sheng1,JI Tian1,LI Cai-xia1 (1. Northwest Institute of Plateau
Biology,Chinese Academy of Sciences,Xining 810001,China;2. University of Chinese Academy of Sciences,
Beijing 100049,China)
[Abstract] Objective:To determine 22 inorganic elements in the aerial and underground parts of
Nardostachys chinensis from different growth stages and investigate the content of heavy metal in N. chinensis.
Method:Samples were dissolved by microwave digestion using nitric acid. Contents of Pb and Cd were
determined by atomic absorption spectrophotometry (AAS) ,contents of Hg and As were determined by atomic
fluorescence spectrometry (AFS). Contents of Cu,P,S and other elements were determined by inductively
coupled plasma atomic emission spectrometry (ICP-OES) ,plasma radiofrequency transmission power was 1. 20
kW,plasma gas flow was 15. 0 L·min -1,atomizer gas flow was 0. 75 L·min -1,auxiliary gas flow was 1. 50 L·
min -1,observation height was 10 mm,one reading time was 3. 0 s,stability time was 15 s. Result:Contents of
Pb,Cd,Hg,As and Cu in different parts of N. chinensis were in line with the 2010 edition of Chinese
Pharmacopoeia requirements. Contents of K,Mg,P,Ca,S and Ba were rich,contents of Al,Fe and Na were
higher,contents of trace elements of Li,Mn,Sr,Ti,V and Zn were low. Mo was not detected in all samples.
Conclusion:Contents of 22 inorganic elements in different parts of N. chinensis are closely related to their growth
stages and growing environment, this study can provide a scientific basis for standardized cultivation and
comprehensive utilization of N. chinensis.
[Key words] Nardostachys chinensis;growth stages;medicinal parts;inorganic elements;inductively
coupled plasma atomic emission spectrometry
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2015 年 3 月
中国实验方剂学杂志
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Vol. 21,No. 6
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甘松具有理气止痛、开郁醒脾的功能,临床用于
治疗脘腹胀痛、头痛、癔病、胃痛及脚气等[1]。其富
含萜类和挥发油类成分[2],这些成分具有抗心律失
常、抑制黑斑产生、诱导神经干细胞选择性表达、抗
抑郁等药理作用[3-5],亦可与其他药材配伍使用以
保护早期糖尿病肾病大鼠的肾脏[6]。药材中无机
元素对植物本身的生理活动和新陈代谢具有重要
作用,而且与药材的药理作用密切相关[7-8]。目前
关于甘松的研究主要集中于化学成分及药理作用
方面[9-10],鲜见其无机元素含量及采收期的分析报
道。2010 年版《中国药典》一部规定甘松以根及
根茎入药,但文献报道该药材的地上部分也含有
一定量药效成分,且市场上流通的多为甘松全
草[11-12]。故本实验拟通过分析不同生长环境及生
长期甘松根茎中无机元素含量,结合挥发油含量
分析确定最佳采收期,同时测定甘松地上部分的
无机元素,为该药材的质量控制及合理开发提供
参考。
1 材料
MARS 6 型微波消解仪(美国 CEM 公司) ,
AA240Z型石墨炉原子吸收光谱仪和 725 型电感耦
合等离子体-原子发射光谱仪(美国 Aligent 公司) ,
AFS-8230 型原子荧光光度计(北京吉天仪器有限公
司) ,VB20 型赶酸装置(美国 Lab Tech 公司) ,
ESJ182-4 型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司)。5
批二年生栽培甘松(2013 年 6 ~ 10 月期间每月月底
在青海大通宝库药材栽培试验基地采集,种源为青
海省玉树巴塘乡,编号分别为 S1,S2,S3,S4,S5)和
2 批野生甘松(2013 年 7,9 月均采自青海玉树巴塘
乡,编号分别为 S6,S7)均经中国科学院西北高原生
物研究所卢学峰教授鉴定为败酱科植物甘松
Nardostachys chinensis 的全草;水为二次去离子水,
各元素对照储备液(1 g·L -1,中国计量科学研究
所)。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备 将甘松的地上部分和地
下部分分别干燥,粉碎,过 40 目筛后待用。精密称
取药材粉末约 0. 5 g,置聚四氟乙烯消解罐中,加入
浓硝酸 8 mL进行消解,30 min 升温至 180 ℃,保持
15 min,待温度下降至室温后取出,冷却,将消解罐
放入赶酸装置中赶酸,待蒸汽挥尽,用水转移至 50
mL量瓶并稀释至刻度,摇匀,即得。同法制备试剂
空白溶液。
2. 2 Pb和 Cd的含量测定 Pb 和 Cd 含量测定的仪
器工作条件见表 1,狭缝均为 0. 2 nm,干燥升温步骤
85 ~120 ℃。用水将 Pb 对照溶液稀释为 10,20,30,
40,50 μg·L -1,Cd 对照溶液稀释为 2,4,6,8,
10 μg·L -1,以质量浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为
纵坐标,得回归方程分别为 C = A /(- 0. 307A2 +
0. 005A +0. 000 77) ,C = A /(- 0. 115A2 + 0. 032A +
0. 021)。
表 1 甘松中 Pb和 Cd含量测定的石墨炉原子吸收仪工作条件
Table 1 Working conditions of graphite furnace atomic absorption
spectrometer for determination of contents of Pb and Cd in
Nardostachys chinensis
元素
灯电流
/mA
波长
/nm
升温步骤 /℃
灰化 原子化 清除
Pb 10. 0 283. 3 400 2 100 2 100
Cd 4. 0 228. 8 250 1 800 1 800
2. 3 Hg和 As的含量测定 Hg 和 As 含量测定的
灯电流分别为 30,60 mA,屏蔽气依次为 800,450
mL·min -1,原子化器高度均为 8 mm,负高压均为
270 V,载气 300 mL·min -1。用水将 Hg 对照溶液稀
释为 0. 1,0. 2,0. 4,0. 8,1. 0 μg·L -1,As 对照溶液稀
释为 1. 0,2. 0,4. 0,8. 0,10. 0 μg·L -1,以质量浓度
(C)为横坐标,荧光强度(I)为纵坐标,得回归方程
分别为 I = 860. 7C - 16. 8 (r = 0. 999 1) ,I =
393. 0C - 64. 5(r = 0. 999 0)。
2. 4 18 种无机元素的含量测定
2. 4. 1 ICP-OES工作参数 等离子体射频发射功
率 1. 20 kW,等离子气流量 15. 0 L·min -1,雾化器流
量 0. 75 L·min -1,辅助气流量 1. 50 L·min -1,观察高
度 10 mm,1 次读数时间 3. 0 s,稳定时间 15 s,高纯
氩气。
2. 4. 2 元素分析谱线与检测限 每个元素分别选
择 2 ~ 4 条特征谱线进行测定,选择干扰小且信号强
度较大的谱线作为分析谱线。按 2. 4. 1 项下参数对
空白溶液连续测定 12 次,以 3 倍标准偏差除以相应
元素标准曲线的斜率计算检出限,见表 2。
2. 4. 3 标准曲线绘制 加水将 K,Na,Ca 对照溶液
稀释为 20,40,60,80,100 mg·L -1,P 和 S 对照溶液
稀释为 10,20,30,40,50 mg·L -1,Mg和 Al对照溶液
稀释为 2. 5,5. 0,10,15,20 mg·L -1,Mo,B,Ba,Li,
Sr,V,Ti,Fe 对照溶液稀释为 1,2,3,4,5 mg·L -1,
Mn,Cu,Zn 对照溶液稀释为 0. 25,0. 50,1. 0,1. 5,
2. 0 mg·L -1。以质量浓度为横坐标,测量值为纵坐
标,绘制标准曲线,见表 2。
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表 2 甘松中各元素分析波长、检出限、回归方程及相关系数
Table 2 Wavelength,regression equation,correlation coefficient
and detection limit of each element in Nardostachys chinensis
元素
波长
/nm
回归方程 r
检出限
/ng·L -1
K 769. 9 Y = 776. 3X - 86. 6 0. 999 8 179. 2
Na 589. 0 Y = 4 248. 0X + 2 915. 6 0. 999 6 381. 1
Ca 422. 7 Y = 2 497. 1X - 392. 6 0. 999 7 934. 2
P 213. 6 Y = 54. 1X + 14. 2 0. 999 8 2 778. 2
S 180. 7 Y = 73. 5X + 50. 0 0. 999 9 6 078. 9
Mg 279. 6 Y = 25 172. 0X + 6 294. 4 0. 999 5 0. 3
Al 396. 2 Y = 2 333. 6X + 322. 0 0. 999 6 86. 0
Mo 281. 6 Y = 239. 1X + 51. 4 0. 999 4 20. 1
B 249. 8 Y = 1 450. 0X + 25. 1 0. 999 8 103. 9
Ba 455. 4 Y = 824. 7X + 48. 5 0. 999 7 157. 3
Li 670. 8 Y = 652. 1X + 21. 4 0. 999 6 17. 5
Sr 407. 8 Y = 439 141. 0X + 8 896. 8 0. 999 6 0. 008
V 311. 1 Y = 1 223. 1X + 511. 4 0. 999 5 2. 1
Ti 336. 1 Y = 339. 1X + 61. 4 0. 999 8 16. 5
Fe 238. 2 Y = 833. 9X + 61. 4 0. 999 7 302. 3
Mn 257. 6 Y = 431. 2X + 64. 4 0. 999 3 6. 3
Cu 324. 8 Y = 4 215. 5X + 188. 4 0. 999 9 3. 4
Zn 213. 9 Y = 1 715. 8X + 68. 14 0. 999 7 30. 2
表 3 甘松地上部分各元素的含量测定
Table 3 Determination of 22 inorganic elements in aerial parts of Nardostachys chinensis mg·kg -1
样品 Cd Hg As Cu Pb P S K Na Ca Mg Fe Mn Zn B Al Ba Li Sr V Ti
S1 0. 004 0. 019 0. 08 11. 61 0. 60 2 634. 95 1 934. 75 19 305. 38 288. 01 14 278. 87 3 522. 68 140. 71 12. 86 28. 72 35. 01 96. 81 1 427. 20 1. 44 109. 49 0. 91 1. 68
S2 0. 003 0. 005 0. 08 3. 32 0. 51 2 724. 43 2 219. 64 18 002. 54 283. 26 18 285. 83 3 960. 98 145. 85 13. 81 37. 84 40. 99 113. 87 1 527. 07 1. 55 136. 17 0. 61 1. 73
S3 0. 006 0. 008 0. 23 6. 59 0. 03 2 309. 22 1 967. 04 1 443. 66 438. 13 18 006. 59 4 522. 94 604. 88 36. 36 36. 08 43. 42 537. 14 990. 62 6. 11 126. 76 8. 90 8. 89
S4 0. 006 0. 004 0. 18 6. 03 0. 36 2 995. 54 2 184. 45 13 696. 80 301. 88 18 192. 09 4 098. 81 566. 37 35. 51 33. 51 40. 30 492. 67 1 265. 31 5. 85 128. 76 8. 03 7. 32
S5 0. 010 0. 004 0. 39 7. 93 0. 70 2 562. 07 2 009. 60 6 943. 34 432. 54 22 224. 63 4 606. 82 1 006. 93 56. 59 40. 66 59. 94 879. 78 1 476. 01 10. 53 149. 85 15. 88 13. 42
S6 0. 002 0. 008 0. 03 9. 37 0. 03 1 206. 90 1 253. 40 11 816. 43 138. 05 7 683. 90 1 284. 05 74. 74 8. 32 43. 35 23. 88 58. 38 529. 40 0. 66 117. 65 0. 14 0. 63
S7 0. 007 0. 010 0. 16 12. 82 1. 07 946. 02 908. 57 8 923. 46 143. 40 5 665. 78 3 733. 22 478. 31 32. 70 57. 72 38. 67 335. 60 2 117. 68 27. 04 153. 16 6. 91 10. 09
注:Mo均未检出(表 4 同)。
2. 5 样品测定 取 2. 1 项下供试品溶液,按上述条
件测定,结果见表 3,4。依据 2010 年版《中国药典》
及出口标准[11,13]中对重金属及有害元素的含量限
定,表明 7 批甘松地上和地下部分中重金属的含量
均未超标。数据显示甘松不同部位的无机元素种类
相似,但含量存在差异。甘松不同部位中,常量元素
K,Mg,P,Ca,S及 Ba 含量较其他元素高,Al,Fe,Na
次之,微量元素 Li,Mn,Sr,Ti,V,Zn 含量均较低,而
所有样品中均未检测出 Mo。就甘松地下部分而言,
比较 7 月份与 9 月份生长期甘松中各元素含量,结
果显示栽培与野生甘松中 Zn,Ca,K,Sr,Ba 的含量
变化呈相反趋势,其他元素含量变化趋势一致;常量
元素 Ca,P含量各月份间动态变化幅度较大,微量
元素 Ti,Mn,V 的变化幅度较大;Na 和 K 含量在 7
月份达最大值;Zn,Sr,Ca 含量在 7 月份达峰值后先
下降又逐渐升高,10 月份达最大值;Ba 和 P 分别在
8,9 月份含量最高;其他元素 6 ~ 10 月期间基本呈
上升趋势。
3 讨论
前期研究测定了野生甘松 7,9 月样品根茎中挥
发油质量分数分别为 0. 020,0. 052 mL·g -1,栽培甘
松 6,7,8,9,10 月样品根茎中则分别为 0. 050,
0. 050,0. 050,0. 033,0. 030 mL·g -1,均符合 2010 年
版《中国药典》规定[11]。表 4 数据显示野生甘松地
下部分 Na的 9 月份含量略低于 7 月份,其余元素均
是 9 月份高于 7 月份,且 9 月份样品中挥发油含量
明显高于 7 月份,说明野生条件下秋季采收较为适
宜,这与 2010 年版《中国药典》记录甘松春秋两季
采挖相一致。除少数几种元素外,栽培甘松地下部
分各元素含量在 9 月份后基本呈上升趋势,但 9 月
份后的样品中挥发油含量却下降,故需要根据采收
的目的,合理确定青海大通栽培甘松的最佳采收期。
药材的生长环境、生长年限及生长期对药材中
各元素含量均有很大的影响;同时药材不同部位中
元素的含量存在差异,可能与植物本身的生理活动,
包括对各种元素的选择性吸收、协同作用、富集等密
切相关[14]。栽培甘松与野生甘松的生长环境条件
不同,但后者的生长年限较难确定,故生长年限对元
素种类及含量的影响还有待确认。Mn 可防止动脉
粥样硬化,Mg对心脏血管具有重要的保护作用,Mg
和 Zn还具有抗衰老作用,上述无机元素表现出的生
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表 4 甘松地下部分各元素的含量测定
Table 4 Determination of 22 inorganic elements in underground parts of Nardostachys chinensis mg·kg -1
样品 Cd Hg As Cu Pb P S K Na Ca Mg Fe Mn Zn B Al Ba Li Sr V Ti
S1 0. 01 0. 014 0. 18 10. 04 0. 22 2 082. 56 638. 85 11 930. 98 331. 26 1 671. 90 1 260. 78 132. 00 5. 92 12. 95 11. 45 69. 45 798. 31 0. 69 39. 64 0. 41 1. 16
S2 0. 02 0. 004 0. 15 5. 78 0. 01 2 779. 00 898. 97 14 393. 32 693. 30 1 941. 37 1 411. 57 119. 57 9. 27 22. 63 12. 44 133. 56 653. 37 1. 09 44. 06 0. 83 2. 15
S3 0. 01 0. 003 0. 13 11. 30 0. 27 3 104. 21 930. 15 13 295. 29 413. 54 1 280. 15 1 587. 33 176. 67 12. 33 14. 27 12. 12 205. 68 1 180. 93 1. 46 39. 40 1. 03 2. 63
S4 0. 01 0. 002 0. 21 9. 27 0. 07 3 385. 63 1 023. 83 13 127. 15 336. 32 1 789. 80 1 636. 72 323. 54 16. 35 15. 67 13. 92 374. 35 650. 46 2. 04 42. 47 2. 37 6. 76
S5 0. 01 0. 032 0. 32 11. 79 0. 16 3 141. 64 1 155. 89 12 076. 74 327. 41 2 975. 66 1 854. 60 580. 31 26. 91 25. 04 18. 29 642. 19 718. 25 3. 33 49. 36 4. 93 8. 06
S6 0. 02 0. 002 0. 04 16. 74 0. 03 1 720. 26 729. 45 4 555. 21 398. 29 3 011. 27 385. 21 103. 29 2. 25 29. 26 13. 43 66. 43 641. 25 0. 39 18. 54 0. 03 0. 87
S7 0. 08 0. 010 0. 28 8. 02 0. 19 2 883. 20 1 383. 32 6 658. 50 366. 55 4 493. 21 1 074. 94 400. 23 14. 45 36. 30 23. 86 314. 58 1 437. 14 1. 99 45. 73 1. 48 6. 03
理功能与甘松具有的抗心律失常、抑制黑斑产生等
药理作用相一致;甘松中 K,Ca,Na,Mg,S 的含量均
较高,这些元素可能与该药材的抗肿瘤作用
有关[15-16]。
[参考文献]
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[责任编辑 刘德文]
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第 21 卷第 6 期
2015 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 21,No. 6
Mar.,2015