全 文 ：表 2　样品含量测定结果
样品 平均含量 C /m g g- 1 RSD(%)
盐附片 0. 017 5 2. 12
盐附片 0. 038 8 2. 51
黑顺片 0. 026 9 1. 49
黑顺片 0. 015 7 2. 62
白附片 0. 028 2 1. 42
白附片 0. 014 8 1. 04
　　n=3
3　讨论
3. 1　 供试品溶液制备的提取溶媒是参考《中国药典》2000年版
Ⅰ部 “川乌”项下的乙醚-氯仿(3∶1)。文献 [ 4 , 5]报道的流动相多
碱性过强或加入氯仿 。本文实验参考文献 [ 3]报道的流动相。经
实验 0. 2%冰醋酸(用三乙胺调 pH 6. 25)-乙腈 (63∶37)时 ,次乌
头碱能与其客它成分达到较好分离效果。
3. 2　 生附子中含有毒性很大的乌头碱 , 临床上使用的附子多为
炮制品 , 炮制目的是使乌头碱水解 , 成为毒性较小的次乌头碱和
新乌头碱。经试验附子中乌头碱的量极低或未能检出 ,新乌头碱
的量也很低 , 次乌头碱的量最大 , 与文献 [ 4]报道的结果基本
一致。
参考文献:
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2000, 22(9):662.
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[ 4 ] 　王慕邹. 炮制附子中生物碱含量的变化 [ J] . 中草药 , 1983, 14
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[ 5 ] 　谭炳炎.液相色谱法测定保心胶囊中次乌头碱的含量 [ J] .中药材 ,
2001, 24(1):52.
[ 6 ] 　王浴铭.活血壮筋丹中乌头碱含量的双波长薄层扫描法测定 [ J] .
中成药研究 , 1988, 10(1):13.
收稿日期:2005-03-31;　修订日期:2005-11-15
作者简介:肖　丹(1962-),女(汉族),四川成都人 ,现任成都中医药大学
副教授 ,博士学位 ,主要从事教学和中药新制剂 、新剂型的开发及应用
工作.
蜘蛛香药材中总缬草素的含量测定
肖　丹 , 管咏梅 , 边燕红
(成都中医药大学药学院 ,四川 成都　610075)
摘要:目的 建立测定蜘蛛香药材中总缬草素含量的方法。方法 用电位滴定法进行测定 ,用一级微商法确定终点。 结
果 该方法操作简便 ,设备普及率高 ,可操作性强 , 结果准确客观。结论 电位滴定法可作为测定蜘蛛香药材中总缬草素
含量的一种方法。
关键词:蜘蛛香;　总缬草素;　含量测定;　电位滴定法
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2006)02-0198-02
　　蜘蛛香 Valeriana ja tam ansii Jones又名马蹄香 、老虎七 、印度
缬草等 , 系败酱科缬草属植物。主产于四川 、贵州 、云南等地 ,临
床主要用于消化不良 、腹痛 、止水泻 、流感等。近年来 , 运用马蹄
香(即蜘蛛香)制剂治疗某些病毒感染和抗抑郁等方面均有一定
疗效 , 该属植物的药用价值已越来越引起重视 , 其化学成分含有
缬草素类(Valepo rtriates)、挥发油类 (Vo latile o ils)、生物碱类(a l-
kalo ids)、黄酮类( flavono ids)等多种成分 , 其中 , 缬草素类成分是
其镇静催眠 、抗病毒等作用的主要活性成分 [ 1] 。因此总缬草素
的含量可以作为评价蜘蛛香质量的主要指标。 文献报道缬草类
生药中总缬草素的含量测定方法有:电位滴定法 [ 2] 、比色法 [ 3] 、
酸碱滴定法 [ 4] 、硝苯吡啶法 [ 5]等 , 其中电位滴定法操作简便 , 设
备普及率高 , 判断滴定终点不受颜色等其他主观因素的干扰 ,结
果准确客观 , 故本文选择电位滴定法测定蜘蛛香中总缬草素的
含量。
1　仪器与试药
PHS - 3型酸度计(上海第二分析仪器厂 );232型甘汞电极 ,
231型玻璃电极(上海电光器件厂);蜘蛛香购于贵州各地 , 由成
都中医药大学药学院中药室签定为 Va leriana ja tam ansii Jone s的
干燥根茎和根。所用二氯甲烷等试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　电位滴定曲线的制备 精密称取生药粉末(40目)[同时另
取本品粉末测定水分 ]约 10 g, 置索氏提取器中 , 用二氯甲烷 80
m l提取至几乎无色 ,提取液转移并定容至 100 m l的量瓶中。精
密量取样品液 5 m l,置 40℃水浴蒸干 , 残渣加丙酮 30 m l溶解后 ,
精密加入氢氧化钠滴定液(0. 01 m o l /L)25 m l, 置 56 ～ 59℃水浴
上加热 30 m in,照电位滴定法(附录Ⅷ电位滴定法与永停滴定法
项下),用盐酸滴定液 (0. 01 m o l /L)滴定 , 以酸度计指示电位变
化 , 记录电位值 , 以 VHCL为横坐标 , 电位值 E为纵坐标作图。结
果见图 1。
图 1　滴定曲线
由图 1可知 , 该滴定为一级滴定 , 故可以用一级微商法确定
终点。
2. 2　终点确定方法的选择 因本品颜色较深 , 干扰指示剂终点
变色的观察 , 导致用指示剂法不能客观地判定终点 ,故选用电位
法指示终点 , 并通过一级微商法进行数据处理 , 可准确判断其滴
定终点 。以消耗盐酸滴定液的量为横坐标 , 以△E /△V为纵坐
标 , 作图。结果见图 2。
结果表明 ,用一级微商法确定终点直观可行 , 结果精确 ,误差
小 , 可以作为确定终点的可靠方法。
2. 3　滴定时样品溶剂的选择 根据被测成分的性质 , 对滴定时样
品溶液的溶剂进行考察 ,被测成分常用的溶剂有乙醇和丙酮 , 取
同一样品 ,分别用两种溶剂进行滴定 , 结果表明 ,两种溶剂所测得
的结果比较接近 ,由于以丙酮为溶剂滴定时 , 电位变化较明显 , 故
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选择丙酮作为滴定时样品溶液的溶剂。
2. 4　线性关系的考察 精密量取已知含量的样品溶液 1, 3, 5, 7,
9 m l,分别按样品测定方法测定含量 ,以总缬草素的量(mg)为横
坐标(X),所消耗的氢氧化钠滴定液 (0. 01mo l /L)的体积(m l)为
纵坐标(Y), 进行回归。结果见表 1, 图 3。
表 1　线性关系考察结果
总缬草素的量 m /m g 消耗的氢氧化钠滴定液的体积 V /m l
3. 39 2. 25
10. 17 7. 15
16. 95 12. 05
23. 73 16. 80
30. 51 21. 75
图 2　滴定终点图
图 3　总缬草素滴定线性关系考察图
结果表明:总缬草素含量在 3. 39 ～ 30. 51 mg范围内与滴定
所消耗的氢氧化钠滴定液 (0. 01 m ol /L)的体积呈良好的线性关
系 , 回归方程为 Y=1. 407 8 X , 相关系数为 r=0. 999 9。
2. 5　精密度实验 同一样品溶液 , 精密量取 10份 , 每份 5 m l,按
含量测定项下方法进行测定 , 计算 5次测定结果的 RSD 值为
1. 25%,表明该方法精密度较好。
2. 6　重复性实验 取药材粗粉 6份 ,每份约 10 g,精密称定 ,分别
按药材提取方法提取并进行含量测定 , 根据测定结果计算 RSD
为 1. 70%, 结果表明该方法重复性良好。
2. 7　药材提取方法的研究
2. 7. 1　药材提取方法的选择 取生药粉末(40目) 3份 , 每份约
10 g, 精密称定 ,分别加二氯甲烷 80 m l后 , 分别用超声法 、回流提
取法 、索氏提取法进行提取 ,将提取液转移并定容至 100 m l的量
瓶中 , 摇匀 ,分别精密量取样品液各 5 m l, 置 40℃水浴上蒸干 ,残
渣加丙酮 30m l溶解后 ,精密加入氢氧化钠滴定液(0. 01 m o l /L)
25 m l,置 56 ～ 59℃水浴上加热 30 m in,立即冷却 , 照电位滴定法
(附录 36页),用盐酸滴定液(0. 01 mo l /L)滴定 ,并将滴定结果用
空白实验 [精密量取 5 m l, 置 40℃水浴上蒸干 ,残渣加丙酮 30 m l
使溶解 , 照电位滴定法 (附录 36页), 用氢氧化钠滴定液(0. 01
m ol /L)滴定 ]校正。 每毫升氢氧化钠滴定液 (0. 01 m ol /L)相当
于 1. 41 mg的缬草三酯(C
22
H
30
O
8
)。测定结果见表 2。
结果表明:索氏提取方法提取效果较好 , 故药材选用索氏提
取。
2. 7. 2　提取溶剂的选择 取生药粉末 (40目 )4份 , 每份约 10 g,
精密称定 , 分别用甲醇 、氯仿 、石油醚 、二氯甲烷提取 ,同提取方法
的选择项下测定。结果见表 3。
表 2　提取方法的考察及结果 %
提取方法 总缬草素含量
索氏提取 3. 33
回流提取 2. 70
超声提取 2. 86
表 3　提取溶剂的考察及结果 %
提取方法 总缬草素含量
甲醇 3. 02
二氯甲烷 3. 34
氯仿 2. 83
石油醚 1. 40
结果表明 ,以二氯甲烷为溶剂提取效果较好 , 故选择二氯甲
烷为提取溶剂。
根据以上研究结果 , 确定药材的提取方法为:取生药粉末
(40目)约 10 g, 精密称定 ,加二氯甲烷 80 m l, 置索氏提取器中提
取至将近无色。
2. 7. 3　贵州不同产地蜘蛛香药材的含量测定 按既定药材含量
测定方法 ,对安顺 、纳雍 、长顺 、关岭等不同产地的蜘蛛香药材中
总缬草素的含量进行测定。结果见表 4。
表 4　不同产地蜘蛛香药材含量测定结果 %
序号 产　地 总缬草素含量
1 贵州安顺 3. 12
2 贵州纳雍 3. 49
3 贵州关岭 5. 22
4 贵州长顺 5. 70
3　讨论
该方法精密度高 、重复性好 , 能作为测定蜘蛛香中总缬草素
含量的一种方法 ,用该方法测定贵州各地产蜘蛛香中总缬草素的
含量范围在 3% ～ 6%之间 , 与全国其它地方产蜘蛛香中总缬草
素的含量 [ 2]相比 , 相对较高。
蜘蛛香根茎部比例较大 ,应粉碎均匀(40目), 否则因取样不
均或提取不完全会带来测定误差。
本方法在做空白扣除实验时 , 出现多个电位突跃点 , 这可能
是由于蜘蛛香中含有多种有机酸 ,有机酸与 0. 01 m o l /L的 NaOH
逐步反应所致 , 为了使有机酸与碱反应完全 ,实验中确定以最后
一个突跃点为反应终点。
本实验研究过程中受到刘晓晴教授指导和成都中医药大学
药学院中药鉴定教研室马逾英副教授及同学王森 、罗琴的帮助 ,
在此表示衷心感谢 
参考文献:
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 2 时珍国医国药 2006年第 17卷第 2期