全 文 ：华西药学杂志W CJ· PS　2009, 24(2)：145 ～ 146 　　
基金项目:西南民族大学青年重点资助项目(05NQZ004);留学回国人员科研启动基金(2004527)
作者简介:张苏阳(1984-),女 ,云南安宁 ,正攻读天然药物化学专业的硕士学位。 Email:suyangzhang@yahoo.cn
＊通讯作者(Correspondentauthor), Email:yongpinghan@mail.china.com
甘松多糖的体外抗氧化性研究
张苏阳 ,蒋开年 ,王　煜 ,韩泳平＊
(西南民族大学少数民族药物研究所 ,四川 成都 610041)
摘要:目的　探究甘松多糖的体外抗氧化活性。方法　分别采用超氧阴离子自由基 、羟基自由基 、还原力等几种不同的体外
抗氧化模型 , 首次研究了水提醇沉得到的甘松多糖的抗氧化能力。结果和结论　甘松多糖表现出较高的抗氧化性 , 其浓度与
抗氧化活性呈现一定的量效关系。
关键词:甘松;多糖;提取;抗氧化性;自由基
中图分类号:R96　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2009)02-0145-02
TheantioxidantcapabilityofpolysaccharidesextractedfromNardostachychinensisBatal
ZHANGSu-yang, JIANGKai-nian, WANGYu, HANYong-ping＊
(SouthwestUniversityforNationnalitles, Chengdu, Sichuan, 610041P.R.China)
Abstract:OBJECTIVE　Tostudytheantioxidantcapability(invitro)ofpolysaccharidesextractedfromNardostachychinensis
Batal.METHODS　TheinvitroantioxidantcapabilityofthepolysaccharideextractedfromNardostachychinensisBatalwasstudiedfor
thefirsttime.Diferentantioxielationmodels, suchassuperoxideanionfreeradical, hydrixylfreeradicalandreducingpowerwereused.
RESULTSandCONCLUSION　 TheresultsshowedthatthepolysaccharidefromNardostachychinensisBatalhadhighantioxidant
activityinalofthesediferentantioxidantdetectingmodels.andtheantioxidantactivitywaslinearwithitsconcentrationinthesolu-
tion.
Keywords:NardostachychinensisBatal;Polysaccharide;Extraction;Antioxidantcapability;Freeradicals
CLCnumber:R96　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2009)02-0145-02
　　甘松 NardostachyschinensisBatal别名甘松香 、
香松 ,始载于 《本草拾遗 》,为败酱科植物甘松和匙
叶甘松的干燥根及根茎 ,分布于西藏 、青海 、四川 、云
南 、甘肃等省[ 1] 。甘松味甘 、性温 ,具有理气止痛 、
开郁醒脾之功效 。用于治疗脘腹胀痛 、食欲不振 、呕
吐 、牙痛 、脚肿 、心律不齐 、胃脘痛 、胃及十二指肠溃
疡 、癫痫等多种疾病。甘松提取的有效成分还具有
镇静 、解痉 、降血糖 、抗心律失常 、增强耐缺氧能力 、
抗心肌缺血 、抗菌等作用 [ 2] 。有关甘松多糖抗氧化
性的研究还未见报道 。为此 ,特通过考察甘松多糖
清除超氧阴离子自由基 、羟基自由基 、还原力等作
用 ,初步研究了甘松多糖的抗氧化活性。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
UnicamUV500紫外可见分光光度计 (美国
ThermoNicolet公司);721分光光度计(上海第三分
析仪器厂);旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);
DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市英
峪予华仪器厂)。甘松(市售)由成都中医药大学卢
先明教授鉴定为 NardostachyschinensisBatal;所用试
剂均为分析纯 。
1.2　方法与结果
1.2.1　甘松多糖的提取　用清水清洗甘松数次 ,除
去泥沙等 ,置通风处风干 ,粉碎机破碎 。称取 1 kg
甘松干粉 ,加蒸馏水 , 在 85℃恒温水浴锅内浸提
(2 h×3)。合并 3次药液 ,利用旋转蒸发仪减压浓
缩至原体积的 1/5, 药液经过 Sevag法[ 3] 脱蛋白 ,
H2O2法脱色处理后 ,用流水和蒸馏水各透析 1d,浓
缩透析袋内液体。浓缩液加入乙醇至醇浓度 80%,
沉淀 、静置过夜 、离心 、干燥得黄色物质 ,即甘松
多糖 。
1.2.2　总糖的含量测定 [ 4] 　以葡萄糖为标准对照
品 ,采用苯酚 -硫酸法测定甘松多糖的总糖量。吸
取 1 ml10 μg·ml-1的样品液 ,测定吸光度 ,通过标
准曲线法求得相应甘松多糖的浓度 ,计算总糖的含
量为 80.13%。
1.2.3　溶液的制备　精密称取 1 g甘松多糖 ,用蒸
馏水定容到 100 ml量瓶中 ,制备 10 mg·ml-1的溶
液。再分别移取 12.5、15.0、17.5、20.0、22.5 ml此
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2009.02.013
溶液定容到 25 ml量瓶中 ,稀释为 5、6、7、8、9 mg·
ml-1的多糖溶液备用。
1.2.4　甘松多糖对 [ O-·2 ]的清除能力　采用邻苯
三酚自氧化法 [ 5] 测定。取 4.5 ml50 mmol·L-1
Tris-HCl(pH8.2)缓冲溶液 、4.2 ml蒸馏水 ,混匀
后在 25℃水浴中保温 20min,取出后立即加 0.3 ml
在 25℃预热过的 3 mmol·L-1邻苯三酚 (以 10
mmol·L-1的 HCl配制)、空白管加 10 mmol·L-1的
HCl, 20 min后于 325 nm测定吸光度 ,并计算清
除率。
超氧阴离子自由基是基态氧接受一个电子后形
成的第一个氧自由基 ,可经过一系列反应生成其他
的氧自由基 。邻苯三酚在碱性条件下发生自氧化释
放 [ O-·2 ] ,并生成有色中间产物 ,当有自由基清除
剂存在时 ,可清除 [ O-·2 ] ,从而阻止中间产物的积
累 。所以 ,可通过比色法来检测有色中间产物的含
量 ,可检验物质清除 [ O-·2 ]的能力 。图 1可知 ,甘松
多糖对超氧阴离子自由基有较强的清除能力 ,并随
浓度的增加 ,对超氧阴离子自由基的清除作用也逐
步增强 ,呈现一定的量效关系。
图 1　甘松多糖对超氧阴离子的清除能力
Fig1　Eliminationefectofthepolysaccharideson[ O-·
2
]
1.2.5　甘松多糖对 [ .OH]的清除能力　采用邻二
氮菲 Fe2+氧化法测定 [ 6] 。取 0.75 ml0.75 mmol·
L-1的邻二氮菲无水乙醇溶液 、2.0 ml磷酸盐缓冲
溶液(pH7.4)、0.5ml0.75mmol·L-1的硫酸亚铁溶
液 、2.5 mlH2O2 ,充分混匀后 ,加入 0.5mlH2O2(质
量分数 1%),反应在 37℃保温 1h,测定 A536损伤 。以
2.5ml的甘松多糖样品溶液代替 2.5 ml双脱氧水 ,
按上述方法于 37℃启动此反应 1h后 ,测定 A536加药 ,
未损伤管中以等体积的双脱氧水代替 H2O2(质量分
数 1%)及多糖样品溶液 ,测定 A536未损伤 ,多糖对羟基
自由基的清除率 E(%)=(A536加药 -A536损伤 )∕
(A536未损伤 -A536损伤)×100%。
羟基自由基的化学性质非常活泼 ,可损伤蛋白
质 、核酸 、脂质等多种生物大分子 ,尤其对脂质过氧
化的作用最强。由羟基自由基的清除实验结果可
知 , 甘松多糖对羟基自由基有良好的清除能力 ,且
随浓度增大 ,清除率也不断增加 ,呈现出良好的量效
关系 。
1.2.6　甘松多糖还原力的测定 　采用三氯乙酸
法[ 7]测定。分别取 1 ml甘松多糖样品溶液 ,加 2.5
mlpH6.6磷酸盐缓冲溶液和 2.5ml1%铁氢化钾溶
液 ,混合后 ,于 50℃下放置 20min,加入 2.5ml质量
分数为 10%的三氯乙酸溶液 , 4.8×103 r·min-1离
心 10min。取 2.5ml上清液 ,加入 2.5ml蒸馏水和
2.5 ml0.1%三氯化铁溶液 ,混匀 ,静置 10 min,在
700 nm测定吸光度 。吸光度越高 ,抗氧化性越好 ,
还原力越强。抗氧化剂的还原力与其抗氧化活性之
间存在联系[ 8] ,抗氧化剂是通过自身的还原作用给
出电子而清除自由基 ,还原力越大 ,抗氧化性越强。
因此 ,可通过测定还原力来说明抗氧化活性的强弱。
在 700 nm处的吸光度依次递增说明了甘松多糖还
原力的大小与其浓度大小成正比 ,即甘松多糖浓度
越大 ,其还原力越大 ,抗氧化性越强。
2　讨论
抗氧化活性测定的结果表明 ,甘松多糖具有较
强的还原能力 ,对超氧阴离子自由基 、羟基自由基均
有较好的清除能力 ,且在一定范围内对二者的清除
作用呈现良好的量效关系。多糖具有良好的抗氧化
活性和清除自由基的功能且不良反应较小。甘松多
糖所具有的抗氧化活性使其有望作为天然抗氧化剂
和功能性食品而得到开发应用 ,具有较高的开发价
值。
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收稿日期:2008-08
146 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 24卷