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蜘蛛香野生转家种品质评价研究
郜红利1， 谭玉柱2*
(1． 湖北民族学院，湖北 恩施 445000;2． 成都中医药大学，四川 成都 611137)
收稿日期:2013-03-12
基金项目:湖北省自然科学基金重点项目 (2010CDA047)
作者简介:郜红利 (1967—) ，男，副教授，研究方向:民族药物的开发与利用。
* 通信作者:谭玉柱 (1985—) ，男，研究方向:中药有效成分及质量标准化。Tel:(028)61800033，Email:365762996@ qq. com
摘要:目的 对恩施州产野生与栽培蜘蛛香品种进行质量评价研究。方法 基于蜘蛛香野生与栽培品的外观性状、显
微鉴别、TLC鉴别、化学成分分析与指标性成分 HPLC定量测定等方面进行质量评价。结果 野生品与栽培品外观几
乎一致，显微和薄层显示没有差异，HPLC分析显示色谱峰出现 15 个，总黄酮和缬草三酯类成分量高于野生品。结论
蜘蛛香栽培品品质较好，可以推广应用作为野生药材的替代资源。
关键词:蜘蛛香;野生品;栽培品;缬草三酯;品质评价
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)12-2710-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 12. 034
Evidence of wild Valeriana jatamansi Jones into man-made planting
GAO Hong-li1， TAN Yu-zhu2*
(1． Hubei Institute for Nationalities，Enshi 445000，China;2． Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China)
ABSTＲACT:AIM To make the quality evaluation of wild species and cultivar of Valeriana jatamansi Jones in
Enshi district． METHODS Comparative analysis based on appearance trair，microscopicali identification，TLC
and HPLC analysis of components and marker constituents were carried out． ＲESULTS There was no difference
between wild species and cultivar of Valeriana jatamansi Jones in character and identification． Analysis presented
fifteen peaks of chemical constituents． The contents of total flavonoids and valepotriate in cultivar were richer than
these in the wild species of V． jatamansi． CONCLUSION Cultivated species have good quality，and it is sug-
gested that the cultivated species could be used instead of the wild species and served as alternative resources of
wild products．
KEY WOＲDS:Valeriana jatamansi Jones;wild species; cultivated species; valepotriate; quality control
and evaluation
蜘蛛香为败酱科植物蜘蛛香 Valeriana jatamansi
Jones的干燥根茎和根［1］。性味辛、苦，温，具有
理气和中、散寒除湿、活血消肿的功效，主要用于
治疗脘腹胀痛、呕吐泄泻、风寒湿痹、小儿疳积、
脚气水肿、跌打损伤等症［2］。其化学成分主要是
挥发油、环烯醚萜、黄酮及其他一些成分［3］。现
代药理研究表明，蜘蛛香有镇静、催眠、抗焦虑、
抗肿瘤等药理作用［4］。蜘蛛香主要分布在云南、
湖北、贵州等偏远山区［5］，其中湖北恩施自治州
各县市资源丰富。随着蜘蛛香药用价值的日益提
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高，其野生资源已难以满足市场需求，开展野生蜘
蛛香转家种的研究迫在眉睫［6］，本课题组通过其
根茎无性繁殖，对其野生转家种技术进行初步研
究，培育了不同生长年限的栽培品，从其产量及外
观性状上观察，二者并无较大差异，但是有关其栽
培品的品质评价尚无定论。因此，课题组分别收集
不同栽培年限的蜘蛛香与野生蜘蛛香，从其性状、
鉴别、化学成分分析、指标性成分定量测定等方面
进行质量评价，以期对野生品种与栽培品种进行科
学评价，探讨野生转家种的可行性，也为蜘蛛香栽
培技术的推广应用提供技术支持。
1 试剂与试药
1. 1 仪器与试剂 Angenlent 1200 高效液相色谱
仪;BP121S型电子天平 (北京 Sartorius 天平有限
公司，十万分之一) ;显微镜 (上海炳宇光学仪器
有限公司) ，DiamonsilC-18 色谱柱 (250 mm × 4. 6
mm，5 μm)。缬草三酯 (纯度 ＞ 98%，成都植标
化纯生物科技有限公司，110756-200110)、橙皮苷
(纯度 ＞ 98%，中国药品生物制品检定研究院，
110721-200512) ，乙腈、甲醇 (色谱纯，美国
Fisher公司) ，超纯水 (实验室自制) ，其余试剂均
为分析纯。
1. 2 药材 实验用蜘蛛香药材分别来自湖北省恩
施州利川市、宣恩县、巴东县、咸丰县、建始县等
5 个县市，每个县市各有栽培品与野生 1 个批次，
共计 10 个批次，野生与栽培品经中药鉴定教研室
朱敏英教授鉴定为败酱科植物蜘蛛香 Valeriana jat-
amansi Jones的干燥根茎和根，来源见表 1。
表 1 不同批次蜘蛛香药材来源
Tab. 1 Sources of different batches of Valeriana jatamansi
批次 产地 采集年月 备注
1 建始景阳镇 201209 野生
2 建始景阳镇 201209 栽培 1 年
3 利川福宝山 201210 野生
4 利川福宝山 201210 栽培 2 年
5 巴东野三关 201209 野生
6 巴东野三关 201209 栽培 2 年
7 咸丰黄金洞 201210 野生
8 咸丰清平镇 201210 栽培 3 年
9 宣恩东门关 201209 野生
10 宣恩东门关 201209 栽培 3 年
2 方法与结果
2. 1 性状
2. 1. 1 野生品 本品根茎呈圆形或扁圆形，略弯
曲，不分叉，长 3 ～ 5 cm，直径为 0. 5 ～ 1. 6 cm，
棕褐色或茶褐色，表面有绸密的环纹突起，不甚规
则，底面有须根痕。芦头平截，可见茎、叶残基。
质坚实，断面黄褐色。下侧具多数须根，多卷缩弯
曲。味略苦、辛质坚脆，易折断，断面浅绿色。
2. 1. 2 栽培品 本品根茎呈扁圆柱形，略弯曲，
不分叉，长 2 ～ 6 cm，直径为 0. 6 ～ 1. 7 cm，茎基
残穴处稍膨大，表面褐色，表面有较绸密的环纹突
起，不甚规则，底面有多数须根痕，须根多卷缩弯
曲。味略苦、辛，质坚脆，易折断，断面浅绿色。
栽培品种主要特点:个头较野生品大、颜色较
浅、茎基残穴处膨大、底面须根甚多。
2. 2 鉴别
2. 2. 1 显微鉴别 野生与栽培品一致。本品粉末
灰褐色，置显微镜下观察发现淀粉粒众多，类圆
形，脐点裂缝状，有的可见层纹;复粒由 2 ～ 4 粒
组成。易见含黄棕色内含物与油滴的薄壁细胞碎
片。根毛为单细胞与多细胞组成。木栓细胞淡黄
色，多角形。导管多为网纹导管和单纹孔导管。薄
壁细胞内含有橙皮苷结晶和淡棕褐色物。
2. 2. 2 TLC鉴别 分别取本品野生与栽培品粉末
1 g，加乙醚 10 mL，振摇，放置 5 min，滤过，滤
液挥去乙醚，残渣加甲醇 0. 5 mL 使溶解，作为供
试品溶液。另取缬草三酯对照品，加甲醇制成每 1
mL各含 1 mg的对照溶液。照薄层色谱法 (附录Ⅵ
B)试验，吸取供试品溶液 5 μL、对照品溶液 2
μL，分别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以石油醚
(30 ～ 60 ℃)-丙酮 (5 ∶ 1)为展开剂，展开，取
出，晾干，置紫外光灯 (254 nm)下检视。供试
品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同
颜色的斑点。野生品与栽培品显色斑点没有明显
差异。
2. 3 化学成分比较
2. 3. 1 色谱条件 Kromasil C18色谱柱 (250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ，以乙腈-水为流动相进行梯度洗
脱，0 ～ 20 min，10% ～ 55% 乙腈，20 ～ 60 min，
55% ～ 95%乙腈。体积流量 0. 8 mL /min，柱温 30
℃，检测波长 254 nm。
2. 3. 2 色谱结果 见图 1。图 1 中的 12 号峰 (缬
草三酯)为参照峰，野生品与栽培品化学成分比
较没有明显差异，根据特征图谱共有峰标记，显著
差异峰主要集中在 3、4 号峰，根据极性较大的黄
酮类成分与极性较小的环烯醚萜类成分主要集中在
图谱的首尾段，观察发现野生品与栽培品在首尾段
无显著差异，说明影响其药效的主要化学成分一
致，主要差异集中在中间段。
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S1-S5． 野生品 S6-S10． 栽培品
S1-S5． wild sample S6-S10． cultivated sample
图 1 野生品与栽培品的化学成分对照图谱
Fig. 1 Fingerprint of wild and cultivated products
of Valeriana jatamansi Jones
2. 4 成分测定
2. 4. 1 缬草三酯含有量比较
2. 4. 1. 1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为
填充剂;以乙腈-水 (60 ∶ 40)为流动相;检测波
长为 256 nm。理论板数按缬草三酯峰计算应不低
于 5 000。
2. 4. 1. 2 对照品溶液的制备 取缬草三酯对照品
适量，精密称定，加甲醇制成每 1 mL 含缬草三酯
0. 109 6 mg的溶液，即得。
2. 4. 1. 3 供试品溶液的制备 分别取野生与栽培
品粉末 (过三号筛)约 2 g，精密称定，置具塞锥
形瓶中，精密加入甲醇 50 mL，密塞，称定质量，
超声处理 (功率 500 W，频率 28 kHz)30 min，取
出，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，
摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 4. 1. 4 线性关系考察 分别精密吸取缬草三酯
对照品 2、5、10、15、20 μL注入液相色谱仪，按
照 2. 4. 1. 1 项色谱条件下检测峰面积，同一进样体
积连续测 3 次取平均峰面积，以进样量为横坐标
x，以平均峰面积为纵坐标 y 进行线性回归，即得
线性关系为 y = 194. 09x + 12. 729，r = 0. 999 6，线
性范围为 0. 219 2 ～ 2. 192 μg。
2. 4. 1. 5 精密度考察 取同一份对照品溶液，按
2. 4. 1. 1 项中色谱条件，连续进样 5 次，计算缬草
三酯峰面积 ＲSD为 2. 34% (n = 5)。
2. 4. 1. 6 稳定性考察 将 “批次 1”供试品溶液
室温下放置，分别于第 0、2、4、6、8、12 h 进样
测定，计算缬草三酯色谱峰峰面积 ＲSD 值为
2. 40% (n = 5) ，表明缬草三酯在 12 h内稳定。
2. 4. 1. 7 加样回收率试验 分别称取 6 份供试品
约 0. 5 g，加入与 “批次 1”供试品缬草三酯含有
量相当的同一对照品溶液，分别制备 6 份样品。分
别测定，平均加样回收率为 100. 93%，ＲSD 为
3. 37% (n = 6)。
2. 4. 1. 8 样品测定 称取不同来源的野生品与不
同生长年限的栽培品蜘蛛香药材粉末各 2 g，按照
2. 4. 1. 3 项下供试品制备方法制备，依次进样
10 μL，按照 2. 4. 1. 1 项色谱条件测定各供试品峰面
积，外标法计算。图谱见图 2。
图 2 缬草三酯 HPLC图谱
Fig. 2 HPLC chromatogram of valepotriate
2. 4. 2 总黄酮与总缬草三酯量比较
2. 4. 2. 1 标准曲线的制定 准确称取橙皮苷和缬
草三酯对照品适量，分别加甲醇溶解配制成质量浓
度为 0. 110 6 mg /mL 和 0. 109 6 mg /mL 的标准溶
液。分别移取上述标准液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、
2. 5 mL置于 10 mL 量瓶中，加甲醇定容，摇匀，
以甲醇作空白，分别于最大吸收波长 284 nm 和
256 nm处测吸光度。以吸光度 A 对标准溶液质量
浓度 C 作图，即得标准工作曲线分别为 Y =
0. 035x － 0. 006，r = 0. 999 3，线性范围为 5. 53 ～
27. 65 μg /mL;Y = 31. 427x + 0. 037 2，r = 0. 999 2;
线性范围为 2. 19 ～ 27. 4 μg /mL。
2. 4. 2. 2 供试品的制备及测定 分别称取 2 g 已
脱脂和未脱脂处理的野生和栽培蜘蛛香粉末各 3 批
次，分别加入 50 mL甲醇溶剂，密塞，摇匀，超声
提取 1 次，30 min /次，取出放冷，离心分离，取
上清液于旋转蒸发器上浓缩至干，加 30 mL甲醇溶
解，滤去不溶物，滤液加甲醇定容至 50 mL，即得
总黄酮和缬草三酯供试品溶液。分别移取 0. 2 mL
供试品溶液，加甲醇定容至 10 mL，以甲醇作空
白，分别于 284 nm和 256 nm处测吸光度。并根据
标准曲线计算蜘蛛香总黄酮和缬草三酯量。
2. 4. 2. 3 精密度考察 取橙皮苷和缬草三酯对照
品适量，以甲醇作空白，分别于 284 nm 和 256 nm
处测吸光度，连续测定 5 次，计算橙皮苷和缬草三
酯 ＲSD分别为 3. 14%和 2. 89% (n = 5)。
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2. 4. 2. 4 稳定性考察 将橙皮苷和缬草三酯对照
品溶液室温下放置 0、2、4、6 h，以甲醇作空白，
分别于 284 nm和 256 nm处计算橙皮苷和缬草三酯
对照品吸光度的 ＲSD 值，分别为 1. 98%和 1. 87%
(n = 4) ，表明橙皮苷和缬草三酯在 6 h内稳定。
2. 4. 2. 5 加样回收试验 称取 “批次 1”已知总
黄酮和总缬草三酯含有量的蜘蛛香供试品 6 份，分
别加入等量的橙皮苷和缬草三酯对照品，以甲醇作
空白，分别于 284 nm和 256 nm处测吸光度，计算
平均加样回收率分别为 96. 31%和 95. 74%，ＲSD
分别为 3. 34%和 3. 21% (n = 6)。
2. 4. 3 测定结果 见表 2。
表 2 蜘蛛香野生品与栽培品指标性成分含有量比较
Tab. 2 Content determination of wild and cultivated prod-
ucts of Valeriana jatamansi
类 别 产地
总黄酮
/%
总缬草
三酯 /%
缬草
三酯 /%
建始景阳 2. 01 3. 03 1. 61
野生品 咸丰黄金洞 1. 94 3. 10 2. 32
利川福宝山 2. 50 3. 02 2. 77
均值 2. 15 3. 05 2. 23
建始景阳镇 2. 68 3. 07 2. 83
栽培品 利川福宝山 2. 76 3. 54 3. 39
宣恩东门关 2. 67 3. 31 2. 97
均值 2. 70 3. 31 3. 06
综上，蜘蛛香栽培品的总黄酮、缬草三酯类成
分含有量均高于野生品。
3 结论
3. 1 野生蜘蛛香与栽培蜘蛛香的外观性状无明显差
异，显微和薄层鉴别亦未发现明显差异，其特征化
学成分分析共有峰均存在，仅在中间段 3、4 号共
有峰上有明显不同，提示野生品较栽培品化学成分
复杂，但是差异成分是否是其活性成分还有待商
榷;野生品与栽培品的指标性成分含有量比较发
现，总黄酮和缬草三酯量后者均高于前者。综上，
蜘蛛香栽培品品质在指标性成分含有量上优于野
生品。
3. 2 蜘蛛香总黄酮是其抑菌、抗肿瘤作用的主要
药效成分［7］，橙皮苷是蜘蛛香黄酮类的主要化学
成分［8］，利用它作为标准测定总黄酮不仅测定准
确而且具有衡量其质量的意义，已有研究表明家种
蜘蛛香中橙皮苷量较野生蜘蛛香高，提示其野生转
家种的可行性［9］。缬草三酯类成分具有抗肿瘤、
镇静催眠、抗焦虑、解痉等多种药理活性［10］，是
其主要活性成分及质量控制指标［11］，蜘蛛香中缬
草三酯类成分量的测定方法主要有电位滴定法［12］、
比色法［13］、酸碱滴定法［14］。利用紫外分光光度法
测定蜘蛛香中总缬草三酯量，方法准确、快速、重
复性好、操作简便［7］。蜘蛛香药材集中九月采集，
主要是考虑缬草三酯类成分在九月药材中含有量较
高［15］。本课题基于性状鉴别、化学成分比较、指
标性成分量比较等方面对蜘蛛香野生品与栽培品品
质进行系统评价，为蜘蛛香野生转家种品质评控提
供重要科学依据，证实了野生转家种的可行性，同
时该项目的开展将极大缓解其资源匮乏的现状，有
效保护蜘蛛香野生资源，有利于中药资源的可持续
开发利用。
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