全 文 ：·中药制剂 ·
蜘蛛香中缬草素在不同溶媒中的稳定性研究＊
陈玉娟　石晋丽#　闫兴丽　刘　勇　肖培根
　陈玉娟 ,女 ,在读硕士生
#通讯作者:石晋丽 ,女 ,博士 ,副教授 ,硕士生导师 ,研究方向:植物化学分类 , E-mail:shijl@vip.sina.com
＊国家自然科学基金项目(No.30572463)
(北京中医药大学中药学院　北京 100102)
摘要:目的　研究缬草素在不同溶媒中的稳定性 。方法　采用 HPLC法测定以单体状态存在的缬
草素和不同蜘蛛香提取液中缬草素的含量变化。结果　缬草素在氯仿和无水乙醇中含量变化较
小 ,在 90%甲醇中降解最快 ,在 90%甲醇和 90%乙醇中产生缬草醛 。结论　缬草素在不同溶媒中
的稳定性差异较大。
关键词:蜘蛛香;缬草素;溶媒;稳定性
中图分类号:R283.1
StabilityofvaleportriateinValerianajatamansiJones.indiferentsolvents＊
CHENYu-juan, SHIJin-li#, YANXing-li, LIUYong, XIAOPei-gen
(SchoolofChinesePharmacy, BeijingUniversityofChineseMedicine, Beijing　100102)
Abstract:Objective　Tostudythestabilityofvaleportriateindiferentsolvents.Method　Thecontent
changesofvaleportriateinthemonomericstateandindiferentextractsfromValerianajatamansiJones.
weredetectedbyHPLC.Result　Thecontentofvaleportriatehadslightchangeinchloroformand
absoluteethylalcohol, thefastestdegradationin90% methanol, andproducedbaldrinalin90%
methanoland 90% ethanol.Conclusion　 Thestabilityofvaleportriateisdiferentgreatlyin
diferentsolvents.
Keywords:ValerianajatamansiJones.;valeportriate;solvents;stability
蜘蛛香 ValerianawalichiDC(V.jatamansi
Jones)为败酱科缬草属植物 ,曾收载于 《中国药典 》
(1977年版)[ 1] ,具有镇静安神 、理气止痛 、消炎止
泻 、祛风除湿等功效。其主要化学成分包括挥发油 、
缬草素类 、黄酮类等 ,其中缬草素类属环烯醚萜类化
合物[ 2] 。环烯醚萜类化合物属于臭蚁二醛的缩醛
衍生物 ,其半缩醛结构不稳定 ,容易发生酸水解 、热
降解等 [ 3] 。目前关于环烯醚萜类化合物稳定性的
研究很少 ,对蜘蛛香中缬草素稳定性的系统性研究
尚未见报道 。本文对缬草素在不同溶媒中的稳定性
进行研究 ,以期为蜘蛛香药材的提取 、制剂 、贮存提
供理论依据和技术支持。
1　材料
1.1　仪器与试剂
Agilent1100型高效液相色谱仪 (德国 Agilent
Technologies);LB801型超级恒温器(辽阳市恒温仪
器厂);KQ5200E超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司);Sartorius-BS110S型电子分析天平(北京赛
多利斯仪器系统有限公司)。乙腈(色谱纯 , 美国
Fisher公司);纯净水(屈臣氏 ,经 0.45μm水系滤膜
滤过);甲醇 、无水乙醇 、氯仿 (分析纯 , 北京化工
厂);缬草素对照品(自制)。
1.2　药材
蜘蛛香药材购自云南师宗县 ,经北京中医药大
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第 32卷第 5期 2009年 5月
Vol.32 No.5 May.2009　 　
北京中医药大学学报
JournalofBeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine
学石晋丽副教授鉴定为败酱科缬草属植物蜘蛛香
ValerianawalichiDC的干燥根茎及根 。
2　缬草素含量测定方法
2.1　色谱条件
色谱柱:LunaC18柱(250mm×4.6 mm, 5 μm)
(美国 Phenomenex公司);流动相乙腈-水(68∶32),
流速为 0.95 mL/min, 检测波长为 254 nm, 柱温
35 ℃。缬草素在此色谱条件下的保留时间为 15.7
min,吸收峰对称性好且没有拖尾现象 。
2.2　标准曲线的制备
精密称取缬草素 2.0mg,置 5mL棕色容量瓶中 ,
用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,得浓度为 0.40 g/L
的对照品溶液。依次精密吸取对照品溶液 ,分别以
0.1、10、20、30、40、50、60μL体积进样 ,按上述色谱条
件测定 ,以进样体积为横坐标(X),以峰面积为纵坐
标(Y)进行线性回归 ,得回归方程为 Y=747.54X-
197.35, r=0.999 8,说明缬草素在 0.04 ～ 24.00μg范
围内线性关系良好。
2.3　精密度实验
取上述对照品溶液按上述色谱条件连续进样 5
次 ,记录峰面积积分值 , 计算出峰面积 RSD值为
2.37%(n=5)。
2.4　重复性试验
取 5份上述对照品溶液 ,分别进样 ,测得峰面积
积分值 ,计算 RSD值为 1.36%(n=5),结果表明本
方法重现性较好 。
2.5　加样回收率试验
精密称取已测定含量的缬草素 5份 ,分别精密
加入缬草素对照品 ,甲醇溶解 ,按上述色谱条件测
定 ,测得峰面积积分值 ,计算回收率 ,平均回收率为
100.1%, RSD值为 0.98%(n=5),表明本方法具有
良好的回收率。
2.6　相对含量计算
计算各时间的相对含量 ,相对含量(%)=即时
样品中缬草素含量 /零时样品中缬草素含量 ×100%
3　稳定性实验与结果
3.1　缬草素单体在不同溶媒中的稳定性研究
精密称取缬草素 5份 ,每份 0.005 3 g,置于 25
mL容量瓶中分别用甲醇 、无水乙醇 、氯仿 、90%甲
醇 、90%乙醇溶解定容 ,把以上 5种缬草素溶液分别
分为 6份 ,封于棕色容量瓶中。将样品置于 25 ℃的
水浴锅内 ,定时取样 , HPLC法检测缬草素含量 ,按
2.6项下公式计算出缬草素的相对含量 ,结果见
表 1。
表 1　不同溶媒中不同放置时间缬草素相对含量的变化(%)
t/h n 甲醇 无水乙醇 氯仿
90%
甲醇
90%
乙醇
0 5 100 100 100 100 100
24 5 99.16 99.21 99.60 94.08 97.86
48 5 96.47 98.61 99.14 90.33 96.88
72 5 93.80 97.75 98.40 85.50 95.20
96 5 91.84 95.68 97.62 81.72 92.87
120 5 87.74 95.37 96.18 75.93 85.59
　　由表 1可以看出缬草素在 5种溶媒中随放置时
间的累积含量在逐渐下降 ,在氯仿和无水乙醇中变
化较慢 ,在甲醇和 90%乙醇中次之 ,在 90%甲醇中
降解最快 。说明氯仿 、乙醇 、甲醇对缬草素的溶剂化
效应不同 ,随着极性增大 ,稳定性逐渐下降;缬草素
在有水的条件下 ,降解快速 ,不稳定。
3.2　不同蜘蛛香提取液中缬草素的稳定性研究
将蜘蛛香药材冷冻粉碎过 60目筛 , 精密称取
蜘蛛香药材 5份 ,每份 1.0 g,分别加甲醇 、无水乙
醇 、氯仿 、90%甲醇 、90%乙醇各 50 mL,浸泡 0.5 h,
超声提取 40 min,补足失重 ,即得蜘蛛香提取液。把
以上 5种蜘蛛香提取液分别分为 6份 ,封于棕色容
量瓶中。将样品置于 25 ℃的水浴锅内 ,定时取样 ,
HPLC法检测缬草素的含量 ,按 2.6项下公式计算
出缬草素的相对含量 ,结果见表 2。
表 2　不同蜘蛛香提取液中不同放置时间
缬草素相对含量的变化(%)
t/h n 甲醇 无水乙醇 氯仿
90%
甲醇
90%
乙醇
0 5 100 100 100 100 100
24 5 95.20 98.53 98.75 91.15 95.90
48 5 95.00 97.21 97.23 87.05 95.20
72 5 92.21 96.38 96.65 81.46 92.70
96 5 89.80 95.62 96.15 75.75 91.00
120 5 86.03 95.17 95.77 69.74 87.27
　　由表 2可以看出 ,上述 5种蜘蛛香提取液中随
放置时间的累积缬草素的含量逐渐下降 ,在氯仿和
无水乙醇中变化较慢 ,在甲醇和 90%乙醇中次之 ,
在 90%甲醇中降解最快 ,其变化与缬草素的溶液变
化趋势基本一致。
4　讨论
缬草素在 90%乙醇和 90%甲醇中降解快速 ,产
生包括缬草醛在内的多个极性比缬草素大的物质 ,
推测可能是缬草素分子结构中含有酯键 、环氧乙烷
(下转第 353页)
·350· 北京中医药大学学报　 　 　 　　　　　　　　　　　　　　第 32卷
腑 ,多种病因致使脏腑生理功能失调 、阴阳失衡和气
机逆乱。对于疲劳 ,重在预防 ,应调节身心 ,使形神
合一;对其治疗应着重病机分析 ,辨证施治 [ 4] 。
针刺疗法对人体具有较好的行气活血 、舒筋止
痛的作用。循膀胱经背俞穴局部使用火罐法 ,即可
消瘀散结 ,又可以加强温经通络 、祛风散寒的作用 ,
达到缓解肌肉痉挛 、消除肌肉疲劳的作用 ,充分改善
CFS患者慢性疲劳的临床症状 [ 5] 。
西医认为 ,背部是躯体神经和植物性神经分布
于体表及脏腑的主要通道和枢纽 [ 6] 。而膀胱经第
一侧线也是交感神经和副交感神经中枢所在 ,在其
上进行针刺和火罐治疗 ,直接对交感神经和副交感
神经中枢及其周围进行良性刺激 ,从而整体调节全
身脏腑的机能。治疗前 、后肌电图的变化 ,也证实针
刺膀胱经背俞穴加火罐法治疗 CFS的效果良好 。
参考文献:
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学术会议论文汇编.2008:152.
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[ 6] 陈以国.背俞穴的椎体间力学相关性研究 [ J] .北京生物
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(收稿日期:2009-01-06)
(上接第 350页)
结构 ,这些官能团遇水容易分解 ,产生一系列物质;
在无水条件下降解缓慢 ,且随极性的减小稳定性更
好 ,原因可能是不同的溶剂具有不同的溶剂化效
应 [ 4] ,溶剂化效应不同 ,溶剂的极性对缬草素稳定
性的影响也不同 ,适当极性的溶剂如氯仿 ,可使缬草
素相对较稳定。
不同蜘蛛香提取液中的缬草素 ,随着溶媒极性
的增大 ,缬草素降解越来越严重 ,其降解趋势与缬草
素单体在不同溶媒中的变化基本一致 ,可见不同提
取物中的其他成分不改变缬草素的稳定性 。因此制
备缬草素的过程中 ,蜘蛛香提取应尽可能用极性较
小的溶媒 ,但考虑到乙醇的毒性较氯仿低 ,故使用较
高浓度的乙醇 ,减少提取过程中的水分 ,尽量避免水
分导致缬草素降解。
蜘蛛香药材和蜘蛛香制剂应贮存于干燥环境
中 ,尽量避免湿度的影响;缬草素单体可冷冻存放于
氯仿溶液中 ,使其保持相对稳定 。缬草素还可能受
湿度 、温度及光照的影响 ,故实验中样品处理及含量
测定均须在恒温 、黑暗 、密闭的环境中进行。
参考文献:
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研究 [ J] .青海医学院学报 , 1999, 20(2):15-17.
(收稿日期:2009-01-14)
·353·第 5期 刘明军　针刺背俞穴治疗慢性疲劳综合征的临床研究