全 文 ：实验研究 。
甘松挥发油的体外抑菌实验研究
陈 武 (通化方大药业股份有限公司 , 吉林 通化 13 4。。 2)
摘 要 : 目的 : 研究甘松挥发油的体外抑菌活性。 方法 : 以水蒸气蒸馏法对甘松挥发油进行提取 , 采用滤纸片法对其进行体外抑菌活性实
验 。 结果 : 甘松挥发油对白色念珠菌和沙门氏杆菌有一别印菌作用 , 但对枯草杆菌的抑菌效果不明显 。
关键词 : 甘松 ; 挥发油 ; 抑菌活性
甘松 N a r d o s t a e h y s e h i n e n s i S B a t a l .系败酱科甘松属
植物甘松的干燥根及根茎 。 甘松属植物全世界仅有3种 , 我国2
种 , 分别为甘松 N a r d o s t a e h y S e h i n e n s i S B a t a l .及匙叶甘松
N
·
j
a t a m a n s i DC
【` 〕 。 本论文主要对其挥发油进行体外抑菌活
性研究 , 为甘松的进一步开发利用提供依据 , 现将结果总结如
下 。
1 实验材料
1
.
1 药品与试剂
药材 : 甘松N . ch i ne ns is B a t al .购自通化市医药公司 , 经鉴
定为败酱利甘松属植物甘松的干燥根及根茎 。
菌株 : 白色念珠菌 ( C a n d i d a al b ic a ns ) 、 沙门氏杆菌
(S
a l m o n e l l a )
、 枯草芽抱杆菌 (B a e i l l u S S u b t i l i S )为实验室存
留样本 。
培养基 : 成分为牛肉膏 3 9 、 蛋白陈 10 9 、 氯化钠 5 9 、 琼脂
2 0 9
、 蒸馏水 I 0 0 0m L 。
实验试剂 : 二甲基亚矾 ( DMOS ) ; 外%乙醇 (长春化学试剂
厂 ) ; 对照品 : 水杨酸 (购于门啊市医药工业研究所 ) 。
1
.
2 实验仪器
立式压力蒸汽灭菌锅YXQ一LS 一 5 05 11 上海博讯实业有限公
司医疗设备厂 F八 1604 A电子分析天平 日本岛津公司 ;
KQ
一
1。。E型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司 ;
净化工作台 上海新苗医疗器械有限 ;
Nz HW
一且型智能恒温电热套 郑州长城利工贸有限公司 ;
SP l l 5OB名型生化培养箱 上海博讯实业有限公司医疗设
备厂
微量定量移液器 上海狄士医疗器械有限公司 ;
酒精灯 ; IO0 m L锥形瓶 ; 培养皿若干 ; 试管若干等。
2 方法与结果
2
.
1 甘松挥发油提取
采用水蒸气蒸馏法提取挥发油 , 将甘松粉碎后 , 用挥发油
提取器按常规水蒸气蒸馏法提取挥发油 , 经无水硫酸钠干燥后
得挥发油 , 淡黄绿色 , 具有特殊嗅味 。
2
.
2 不同浓度挥发油的配制
用 DM SO溶解 , 配制浓度分别为 50 % (用微量定量移液器分
别取 DMOS s p L和挥发油 s p L混匀 ) 、 2 c5y0 (用微量定量移液器分
别取 DMS O 15 p L和挥发油 s p L混匀 ) 、 2c0y (用微量定量移液器
分别取 DMS O ZO p L和挥发油 s p L混匀 ) 。
2
.
3 滤纸片的制备
将普通定性滤纸用打孔机打成若干圆形纸片 , 直径为
5
.
Om m
, 置于干燥洁净的培养皿内 , 放入立式压力蒸汽灭菌锅中
经 12 1 . 3℃ 、 20 m in 高压灭菌后 , 取出放入恒温干燥箱内进行干
燥 。 在无菌操作条件下 , 取干燥后的纸片一定数量 , 放 入 挥发
油不同浓度溶液中 , 浸润后备用 。
2
.
4 培养基的制备
用电子天平称取培养基各成分于容量为 I 0 0 0 m L的烧杯
中 , 并加蒸馏水 I 0 0 0 m L于此烧杯中 , 将此烧杯放在电炉上加
热 , 并不断搅拌使之完全溶解 , l m ol · L一 1的氢氧化钠溶液调节
p H7
.
O
一
7
.
5
, 将溶解的培养基平均倒入3个 IO0 m L锥形瓶 , 用报纸
包扎好 , 然后放入立式压力蒸汽灭菌锅中经 12 1 . 3 OC 、 20 m in 高
压灭菌 。
2
.
5 菌株的培养
在无菌操作条件下 , 用接种环取沙门氏菌菌株一环 , 用划
线法接种在制作好的平板和固体斜面培养基中, 然后用不同接
种环分别以同样方法对枯草芽抱杆菌 、 白色念珠菌进行接种 。
把各菌种植于 3 7 0 0 恒温培养箱中进行培养2 h4 , 2 h4 后取出放入
4℃环境保存备用 。
2
.
6 体外抑菌实验
分别取上述菌株的新鲜培养物 , 在无菌操作条件下 , 用接
种环分别取不同的菌种置于三个装有无菌蒸馏水的试管中 , 制
成三种菌悬液 , 再用微量定量移液器接种菌种于平板培养基
上 , 分别用不同涂布棒均匀涂布接种过不同菌种的平板培养
基 , 再用无菌镊子 , 将浸润在不同浓度药液中的纸片均匀间隔
贴于各平板培养基表面 , 轻压纸片使之接触良好 , 放入 37 0 0 恒
温培养箱中 , 培养2 h4 后取出 , 观察抑菌圈大小 , 测量并记录结
果 , 结果见表 1 。 判定标准 : 抑菌圈直径小于 g m m为低度敏感 ;
9
.
1
一 l m m为中度敏感 ; 1 . 1一 15 m m为高度敏感 。
2
.
7 结果
表1 不同浓度甘松挥发油的抑菌结果
单位 : m m
供试菌种 空 白 对照品 5 0 % 2 5 % 2 0 %
白色念珠菌 l l l 2 l O 7
沙门氏杆菌 l l 8 7
丰古草芽抱杆菌 l l
三 结论
抑菌试验结果表明 : 甘松挥发油的抑菌作用弱于对照品水
杨酸 , 对白色念珠菌有明显的抑菌作用 , 最大抑菌圈的样品浓
度为50 % , 并且对白色念珠菌的抑菌活性随浓度的降低而减弱 ,
而对沙门氏杆菌有一定的抑菌活性 , 最大抑菌圈的样品浓度为
50 %
, 但对枯草芽抱杆菌无明显抑菌效果 。
〔参考文献〕
1j[ 张毅 ,徐丽珍 ,杨世林 .甘松化学成分的研究「J ] . 中草药 , 2 0 6 , 3 7 : 18 1-
18 3
.
[2 ]中国药典 [s ]一部 . 2 01 0 : 5 8 .「3 ]张 毅 , 徐 丽珍 , 杨 世林 . 甘 松化 学成分 的研究 ( 1 ) 「J ] . 中草
药 , 2 0 0 7 , 3 8 (6) : 8 2 3一 8 2 5 .
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