全 文 ： 2006 年第 26 卷 有 机 化 学 Vol. 26, 2006
第 3 期, 372～374 Chinese Journal of Organic Chemistry No. 3, 372～374

* E-mail: tgs395@yahoo.com.cn
Received April 4, 2005; revised June 23, 2005; accepted September 12, 2005.
·研究简报·
麦斛细胞毒活性成分研究
谭桂山*,a,b 孙 丽 c 曹建国 c 王秀梅 b 李福双 b 徐康平 b
邓银华 b 颜冬兰 b 章 为 b 周应军 b 李元建 b
(a中南大学湘雅医院 长沙 410008)
(b中南大学药学院 长沙 410013)
(c南华大学肿瘤研究所 衡阳 421001)
摘要 利用硅胶、聚酰胺柱层析等分离方法, 从麦斛全草的乙醚萃取物中分离得到 4 个化合物, 经化学方法和光谱分
析(UV, IR, NMR, MS)鉴定为 3,4,7-三羟基-2-甲氧基菲(1), 2,5-二羟基-4-甲氧基菲(2), eugenitin (3)和 2,5-二羟基-4-甲氧
基-9,10-二氢菲(4), 其中 1 为新化合物. 采用 MTT 法分别测得化合物 1 和 2 对体外培养的人急性髓性白血病细胞和人
肝癌细胞增殖的抑制活性, 并分别考察了增敏剂葛根素对化合物 1 和 2 增殖活性的协同作用.
关键词 麦斛; 3,4,7-三羟基-2-甲氧基菲; 人急性髓性白血病细胞; 人肝癌细胞; 葛根素
Cytotoxic Constituents from Bulbuphyllum inconsipicum
TAN, Gui-Shan*,a,b SUN, Lic CAO, Jian-Guoc WANG, Xiu-Meib LI, Fu-Shuangb
XU, Kang-Pingb DENG, Yin-Huab YAN, Dong-Lanb ZHANG, Weib
ZHOU, Ying-Junb LI, Yuan-Jianb
(a Xiangya Hospital Affiliated to Central South University, Changsha 410008)
(b School of Pharmaceutical Sciences, Central South University, Changsha 410013)
(c Cancer Research Institute, Nanhua University, Hengyang 421001)
Abstract A novel compound, 2-methoxy-3,4,7-trihydroxy-phenanthrene (1), along with 4-methoxy-
2,5-dihydroxy-phenathrene (2), eugenitin (3) and 2,5-dihydroxy-4-methoxy-9,10-dihydroxyphenanthrene
(4), was isolated from Bulbuphyllum inconsipicum. 1 and 2 suppressing HL-60 and SMMC-7721 cells were
investigated in vitro with cytotoxic activity. Furthermore, synergistic inhibition of 1 and 2 with puerarin was
assessed.
Keywords Bulbuphyllum inconsipicum; 2-methoxy-3,4,7-trihydroxy-phenanthrene; cytotoxic activity;
puerarin
麦斛(Bulbuphyllum inconsipicum Maxin)为兰科石豆
兰属植物, 产于我国长江流域各省, 江西省南北丘陵山
地亦有分布. 主要化学成分为联苄类化合物, 具有抗肿
瘤、抗衰老及免疫调节等作用[1]. 为深入研究麦斛的细
胞毒活性成分, 笔者利用硅胶、聚酰胺柱层析等分离方
法, 从麦斛中分离得到 4 个化合物, 通过测定其理化性
质及波谱学特征, 分别鉴定为 3,4,7-三羟基-2-甲氧基菲
(1), 2,5-二羟基-4-甲氧基菲(2), eugenitin (3)和 2,5-二羟
基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(4), 其中 1 为新化合物, 2, 3 和
4 均首次从该植物中分离得到. 采用 MTT 比色法, 测定
了化合物 1 和 2 对体外培养的人急性髓性白血病
(HL-60)细胞和人肝癌(SMMC-7721)细胞的增殖抑制活
性; 并探讨了增敏剂葛根素对化合物 1 和 2 的增殖抑制
活性的协同作用.

No. 3 谭桂山等：麦斛细胞毒活性成分研究 373

1 实验部分
1.1 仪器与试剂
BüChi 熔点测定仪 (温度未校正 , 瑞士 ); 岛津
UV-2450 紫外-可见分光光度计 (日本 ); AVATAR
360FT-IR 红外光谱仪(美国); INOVA-400 核磁共振仪
(美国); LCQ-Advantage 质谱仪(美国); Micromass GCT-
MS 高分辨质谱仪(美国). 麦斛药材于 2002 年 10 月湖南
省张家界采收, 经湖南师范大学刘林翰教授鉴定; 原植
物标本(No. 0034)保存在中南大学药学院标本室. 葛根
素为教研室自制, HPLC 检测纯度＞99.0%.
1.2 提取分离
麦斛干燥全草 2.7 kg, 75%乙醇冷浸提取三次. 提取
液减压回收溶剂后, 乙醚萃取浓缩液, 得褐色浸膏 36.9
g, 粗硅胶拌样后, 进行硅胶柱层析, 石油醚和乙酸乙酯
梯度洗脱, 合并相同流份后得 Fractions 1～7. 其中
Fraction 6 (2.4 g)进行聚酰胺柱层析, 丙酮-水为洗脱剂,
分离得到化合物 1 (115 mg); Fraction 4 (3.2 g)进行聚酰
胺柱层析, 甲醇-水为洗脱剂, 纯化得化合物 2 (67.5
mg); Fraction 3 (7.5 g)进行硅胶柱层析, 石油醚和乙酸
乙酯梯度洗脱, 得到化合物 3 (7 mg)和化合物 4 (57 mg).
2 结果与讨论
化合物 1: 黄色片状结晶(Me2CO), m.p. 208.4～
208.9 ℃; UV (MeOH) λmax: 283, 257, 344, 362 nm; IR
(KBr) ν: 3329 (OH), 3031 (Ar—H), 2987 (CH3), 1634,
1513, 1439 (Ar) cm－1; HRMS 显示分子量为 256.0736
(C15H12O4, 计算值 256.0713), 不饱和度为 10; EIMS m/z:
256 ([M]＋, 100), 241 [M－CH3]＋, 223, 213, 185, 157, 139,
128, 与 2,3,7-三羟基 -4-甲氧基菲 [2]基本一致 . UV
(MeOH) λmax: 283, 257, 344, 362 nm, 提示该分子中含有
菲类骨架结构. 1H NMR 显示该化合物含有一个甲氧基
[δ 3.79 (s, 3H, OCH3)], 三个酚羟基[δ 9.54 (s, 2H)和 8.96
(s, 1H)]和六个芳氢. 其中 δ 7.08 (dd, J＝9.2, 2.0 Hz, 1H)
与 9.14 (d, J＝9.2 Hz, 1H)邻位偶合, 与 δ 7.12 (d, J＝2.0
Hz, 1H)间位偶合; HMBC 谱显示 δ 7.08 和 7.12 均与 δ
154.5 (C-7)具有远程偶合关系, 提示其分别为 H-6 和
H-8; 则δ 9.14归属为H-5. 根据文献对照可知, δ 7.47 (d,
J＝8.8 Hz, 1H )和 7.37 (d, J＝8.8 Hz, 1H )分别为 H-9 和
H-10[3]. HMBC 谱显示 δ 3.79 (OCH3)与 144.6 (C-2)具有
远程偶合关系, 提示甲氧基与 C-2 相连; δ 9.54 (s, 2H)和
8.96 (s, 1H)为三个酚羟基 , HMBC 谱显示其分别为
3-OH, 7-OH 和 4-OH. 综合上述波谱数据分析, 并与类
似化合物波谱数据比较, 确定该化合物结构为 3,4,7-三
羟基-2-甲氧基菲. 波谱数据归属见表 1, 主要远程相关
见图 1.
表 1 化合物 1 的波谱数据(DMSO-d6)
Table 1 NMR data of compound 1 in DMSO-d6
No. δC δH No. δC δH
1 108.4 7.03 (s) 8 111.1 7.12 (d, J＝2.0 Hz)
2 144.6 8a 133.1
3 139.6 9 123.9 7.37 (d, J＝8.8 Hz)
4 145.5 10 126.7 7.46 (d, J＝8.8Hz)
4a 117.4 10a 124.9
4b 122.2 2-OCH3 58.8 3.79 (s)
5 127.3
9.14 (d, J＝
9.2 Hz)
3-OH 9.54 (s)
6 116.5 7.08 (dd, J＝
9.2, 2.0 Hz)
4-OH 8.96 (s)
7 154.5 7-OH 9.54 (s)

图 1 化合物 1 的主要远程相关
Figure 1 The key HMBC correlations of compound 1
化合物 2: 黄色片状结晶 (MeOH), m.p. 192.3～
193.4 ℃; 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 10.00 (s, 1H,
2-OH), 9.47 (s, 1H, 5-OH), 7.62 (d, J＝8.8 Hz, 1H, H-9),
7.51 (d, J＝8.8 Hz, 1H, H-10), 7.38～7.41 (m, 2H, H-7,8),
7.05 (dd, J＝6.0, 3.2 Hz, 1H, H-6), 6.97 (d, J＝1.6 Hz, 1H,
H-1), 6.89 (d, J＝2.0 Hz, 1H, H-3), 4.07 (s, 3H, 4-OCH3);
13C NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 106.1 (C-1), 156.4
(C-2), 101.2 (C-3), 155.3 (C-4), 111.8 (C-4a), 118.3
(C-4b), 153.6 (C-5), 115.5 (C-6), 128.3 (C-7), 119.8 (C-8),
133.4 (C-8a), 126.2* (C-9), 126.1* (C-10), 135.4 (C-10a),
57.4 (4-OCH3) (*归属可互换); IR (KBr) ν: 3309 (OH),
3010 (Ar—H), 2940 (CH3), 1613, 1506, 1463 (Ar) cm－1.
综合以上光谱数据分析, 并与文献[4]光谱数据比较, 确
定该化合物为 4-甲氧基-2,5-二羟基菲.
化合物 3: 黄色柱状结晶(CHCl3), m.p. 157.9～159.1
℃; 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6.04 (s, 1H, H-3), 6.36
(s, 1H, H-8), 2.35 (s, 3H, 2-Me), 2.08 (s, 3H, 6-Me), 3.88
(s, 3H, 7-OMe); 13C NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 166.3
(C-2), 108.8 (C-3), 182.4 (C-4), 104.9 (C-4a), 158.4 (C-5),
108.8 (C-6), 163.2 (C-7), 89.1 (C-8), 156.3 (C-8a), 20.4
(2-Me), 7.2 (6-Me), 55.8 (7-OMe); IR (KBr) ν: 3444 (OH),
3095 (Ar—H), 2926, 1660 (C＝O), 1506, 1456 (Ar) cm－1;
EIMS m/z: 220 [M]＋, 205, 189, 137, 121. 综合以上光谱

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数据分析, 并与文献[5]光谱数据比较, 确定该化合物为
eugenitin.
化合物 4: 黄色砂晶(CHCl3), 能溶于 CHCl3, CH3-
OH. 与FeCl3反应呈淡褐色. UV (CH3OH) λmax: 212, 272,
302 nm 为二氢菲特征吸收. 结合 1H NMR, 13C NMR 和
DEPT谱确定其分子式为C15H14O3. 1H NMR (CDCl3, 400
MHz) δ: 7.94 (s, 1H, 5-OH), 7.15 (t, J＝7.6 Hz, 1H, H-7),
6.95 (d, J＝7.6 Hz, H-6), 6.86 (d, J＝7.2 Hz, H-8), 6.50 (s,
2H, H-1,3), 5.42 (brs, 1H, 2-OH), 3.93 (s, 3H, 4-OCH3),
2.65～2.68 (m, 4H, H-9,10); 13C NMR (CDCl3, 100 MHz)
δ: 109.2 (C-1), 155.6 (C-2), 99.1 (C-3), 155.1 (C-4), 115.3
(C-5), 120.6 (C-4b), 153.3 (C-5), 117.8 (C-6), 127.9 (C-7),
119.9 (C-8), 140.6 (C-8a), 30.8 (C-9), 31.1 (C-10), 143.9
(C-10a), 57.1 (4-OCH3). 综合以上光谱数据分析, 并与
文献[6]光谱数据比较, 确定该化合物为2,5-二羟基-4-甲
氧基-9,10-二氢菲.
3 细胞毒活性筛选
采用 MTT 比色法测定了化合物 1 和 2 对体外培养
的 HL-60 和 SMMC-7721 细胞增殖抑制活性; 并考察了
增敏剂葛根素对化合物 1 和 2 的增殖抑制协同作用. 实
验结果见表 2.
实验表明, 化合物 1 和 2 对体外培养的 HL-60 细胞
具有相当的增殖抑制活性; 增敏剂葛根素对化合物 1 和
2 的抑制活性具有增敏作用. 化合物 1 对体外培养的
SMMC-7721 生长具有一定的抑制活性; 葛根素对化合
物 1 的抑制活性具有协同作用.
表 2 化合物 1, 2 和葛根素对体外培养的 HL-60 和 SMMC-
7721 细胞毒活性实验
Table 2 Cytotoxic activities of compounds 1, 2 and puerarin
suppressing HL-60 and SMMC-7721 cells in vitro
HL-60 SMMC-7721
Compound
IC50/(μg•mL
－1) CI IC50/(μg•mL
－1) CI
1 45.99 75.86
2 48.24 ＞150
Puerarin 83.17 99.77
1＋puerarin 22.12 0.743 39.81 0.930
2＋puerarin 28.16 0.944 ＞1

致谢 感谢湖南师范大学刘林翰教授鉴定原植物, 湖南
大学生物传感与化学计量学国家重点实验室代测 1H
NMR, 13C NMR 和 MS 图谱, 中国军事医学科学院代测
HRMS 图谱.
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