全 文 ： Journal of Pharmaceutical Analysis药物分析杂志
·1526· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
Chinese
成分分析
新疆紫草 HPLC特征图谱和紫草类药材 6种萘醌类成分含量测定 *
昝珂 1，苏蕊 2，滕爱君 3，王红 4，刘杰 1，过立农 1，郑健 1**，马双成 1**
（1.中国食品药品检定研究院，北京 100050；2.甘肃省药品检验研究院，兰州 730070；
3.广西壮族自治区食品药品检验所，南宁 530021；4.云南省文山州食品药品检验所，文山 663000）
摘要　目的：采用高效液相色谱法建立新疆紫草药材的特征图谱，并同时测定 5种紫草类药材（软紫草属
新疆紫草、内蒙紫草、滇紫草属长花滇紫草、滇紫草属滇紫草、硬紫草属硬紫草）6个主要羟基萘醌色素类
成分的含量，比较不同基原紫草的化学成分差异。方法：以紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡
宁、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素为对照品，采用 YMC Pack ODS-A
色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈 -0.05%甲酸水溶液（70∶30）为流动相，流速 1 mL·min-1，检测
波长 275 nm，柱温 30 ℃；采用 CHEMPATTERN化学计量学软件对结果进行处理分析。结果：建立新疆
紫草特征图谱，标定 10个特征峰，30 min内紫草的主要色谱峰能够达到完全分离，对 5种紫草类药材 6个
特征峰成分进行含量测定。紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β，β′-二
甲基丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素质量浓度分别在 2.13~1 065 μg·mL-1 （r=0.999 3，n=6）、2.01~
1 004 μg·mL-1 （r=0.999 8，n=6）、2.05~1 026 μg·mL-1 （r=0.999 7，n=6）、1.92~960 μg·mL-1 （r=0.999 9，
n=6）、2.00~1 001 μg·mL-1 （r=0.999 8，n=6）和 1.87~937 μg·mL-1 （r=0.999 9，n=6）范围内线性关系良
好，方法的平均回收率（n=6）分别为 97.6% （RSD=1.9%）、96.6% （RSD=2.2%）、97.9% （RSD=1.1%）、98.4%
（RSD=1.2%）、96.2% （RSD=1.1%）和 97.3% （RSD=1.7%）；19批新疆紫草中上述 6个羟基萘醌类成分含量
分别为 0.01%~0.37%、0.02%~2.42%、0.02%~1.42%、0.02%~0.98%、0.05%~1.66%和 0.09%~3.15%，2批内
蒙紫草中均未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁。结论：所建立新疆紫草特征图谱专属性强，结合 6个主要
羟基萘醌类成分含量测定能够区分各基原紫草，有助于全面评价紫草的质量，为规范紫草药材的使用提供
科学依据。
关键词：紫草类；羟基萘醌类色素；紫草素；乙酰紫草素；β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁；异丁酰紫草素；β，
β′-二甲基丙烯酰阿卡宁；2-甲基丁基酰紫草素；特征图谱；中药多组分含量测定；高效液相色谱；软紫
草属新疆紫草；内蒙紫草；滇紫草属长花滇紫草；滇紫草属滇紫草；硬紫草属硬紫草
中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793（2016）09-1526-10
doi：10.16155/j.0254-1793.2016.09.03
　　 *　 十二五国家科技重大专项（2014ZX09304307-002）
　　**　 通信作者　郑　健　Tel：（010）67095739；E-mail：bjzj825@163.com
　　　　　马双成　Tel：（010）67095272；E-mail：masc@nifdc.org.cn
第一作者　Tel： （010） 67095739；E-mail：6206310@qq.com
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·1527· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
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HPLC specific chromatogram of Arnebia euchroma and
determination of six naphthoquinones in Boraginaceous herbs*
ZAN Ke1，SU Rui2，TENG Ai-jun3，WANG Hong4，LIU Jie1，
GUO Li-nong1，ZHENG Jian1**，MA Shuang-cheng1**
（1. National Institutes for Food and Drug Control，Beijing 100050，China；
2. Gansu Institute for Drug Control，Lanzhou 730070，China；
3. Guangxi Institute for Food and Drug Control，Nanning 530021，China；
4. Wenshan Institute for Food and Drug Control，Wenshan 663000，China）
Abstract　Objective：To establish the HPLC specific chromatogram of Boraginaceous herbs，so as to determine
six main hydroxyl naphthoquinone derivatives in them，including Arnebia euchroma （Royle） Johnst，Arnebia
guttata Bunge，Onosma hookeri Clarke var. longiflorum Duthie，Onosma paniculatum Bur. et Franch.，and
Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc. Methods：HPLC analysis was performed on an YMC Pack ODS-A column （250 mm×4.6 mm，5 μm）. The mobile phase was acetonitrile-0.05% formic acid solution （70∶30）
with isocratic elution. The flow rate was 1 mL·min-1，the detection wavelength was 275 nm and the column
temperature was 30 ℃ . Chemometrics software Chempattern was employed to analyze the research data. Results：
HPLC specific chromatogram of Arnebia euchroma was established and ten characteristic peaks were marked. Six
characteristic peaks were simultaneously determined by HPLC in five Boraginaceous herbs. The linear ranges
of shikonin，acetylshikonin，β-acetoxy-isovalerylshikonin，isobutyrylshikonin，β，β′-dimethylacrylshikonin
and 2-methylbutyrylshikonin were 2.13-1 065 μg·mL-1 （r=0.999 3，n=6），2.01-1 004 μg·mL-1 （r=
0.999 8，n=6），2.05-1 026 μg·mL-1 （r=0.999 7，n=6），1.92-960 μg·mL-1 （r=0.999 9，n=6），2.00-
1 001 μg·mL-1 （r=0.999 8，n=6） and 1.87~937 μg·mL-1 （r=0.999 9，n=6），respectively. The average
recoveries （n=6） of six hydroxyl naphthoquinones were 97.6% （RSD=1.9%），96.6% （RSD=2.2%），97.9%
（RSD=1.1%），98.4% （RSD=1.2%），96.2% （RSD=1.1%） and 97.3% （RSD=1.7%），respectively. The contents of
the six hydroxyl naphthoquinones in 19 samples of Arnebia euchroma were 0.01%-0.37%，0.02%-2.42%，0.02%-
1.42%，0.02%-0.98%，0.05%-1.66%，and 0.09%-3.15%，respectively. β-acetoxy-isovalerylshikonin was not
detected in 2 samples of Arnebia guttata. Conclusion：The HPLC specific chromatogram was established，and
contents of six hydroxyl naphthoquinones can be distinguished from different origin of Boraginaceous herbs. These
results can be used for the quality control of Boraginaceous herbs，and provide the scientific basis for standardizing
the use of the crude drugs.
Keywords：Boraginaceae；hydroxyl naphthoquinones；shikonin；acetylshikonin；β-acetoxy-isovalerylshikonin；
isobutyrylshikonin；β，β′-dimethylacrylshikonin；2-methylbutyrylshikonin；specific chromatogram；content
determination of multi-components for TCM；HPLC；Arnebia euchroma （Royle） Johnst.；Arnebia guttata Bunge；
Onosma hookeri Clarke var. longiflorum Duthie；Onosma paniculatum Bur. et Franch.；Lithospermum erythrorhizon
Sieb. et Zucc.
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·1528· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
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紫草为常用药材，最早见于《神农本草经》，历代
本草均有收载。1990年到 2005年版中国药典［1-4］
收录了紫草科的 3种植物，即软紫草属的新疆紫草
Arnebia euchroma （Royle） Johnst．、内蒙紫草 Arnebia
guttata Bunge和 紫 草 属 的 硬 紫 草 Lithospermum
erythrorhizon Sieb. et Zucc. 的干燥根，而 2010年版
中国药典［5］收载了紫草科软紫草属植物新疆紫草
Arnebia euchroma （Royle） Johnst．和内蒙紫草 Arnebia
guttata Bunge的干燥根，具有清热凉血、活血解毒、透
疹消斑的功能，用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、
疮疡、湿疹、水火烫伤。
除药典标准外，滇紫草 Onosma paniculatum Bur.
et Franch.的干燥根为《云南省中药饮片标准》［6］收
录的品种，长花滇紫草 Onosma hookeri Clarke var.
longiflorum Duthie的根为《卫生部药品标准》1995年
版［7］收载藏紫草基原之一，两者均来源于滇紫草属
植物。
现代药理学研究证明，紫草中主要活性成分为
羟基萘醌色素类成分，包括紫草素及其衍生物，这类
物质主要有抗炎、抗菌、抗病毒等作用［8］。针对紫草
的质量控制研究有一些报道：姜云云等［9］采用 HPLC
法同时测定了紫草凡士林中的 5种萘醌类化合物的
含量；郝鹤等［10］采用梯度洗脱 HPLC法测定了新
疆紫草中的 7种萘醌类成分；Min Cheng等［11］采用
HPLC法测定了新疆紫草和内蒙紫草中的左旋紫草
素和β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量并进行分
析；毛艳和 Mei Liao等［12-13］采用液质联用技术对紫
草药材的化学成分进行了快速鉴定。
由于药品标准众多以及药用习惯等原因导致紫
草基原较为复杂，药材市场上存在不同基原的紫草药
材。本研究主要针对市场上存在的紫草药材品种，采
用恒流 HPLC法 30 min内完成洗脱，建立新疆紫草
的特征图谱，并同时测定 6种羟基萘醌类色素的含
量，为紫草类药材的质量控制提供科学依据。
1　仪器、试药及样品
1.1　仪器
岛津 2010A HT型液相色谱仪（岛津公司），紫外
检测器（岛津公司），Sartorius QUINTIX313-1CN型万
分之一电子天平（Sartorius公司），Sartorius MSE125S
型十万分之一电子天平（Sartorius公司），KQ-
500DV型超声波清洗器（江苏昆山市超声仪器有限
公司）。
1.2　试药
对照品左旋紫草素（中国食品药品检定研究
院，批号 110769-200405，纯度 97.3%）、乙酰紫草素
（上海士锋生物技术有限公司，批号 15062715，纯度
99.7%）、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁（上海源叶生
物技术有限公司，批号 P20N6FC331，纯度 99.6%）、
异丁酰紫草素（上海源叶生物技术有限公司，批号
T02D6Z6828，纯度 98.6%）；β，β′-二甲基丙烯酰
阿卡宁（中国食品药品检定研究院，批号 111689-
201504，纯度 98.6%）、2-甲基丁基酰紫草素（日本化
成工业株式会社，批号：AV51-LSFK，纯度 92.7%）。
甲酸、甲醇和乙腈为色谱纯，石油醚（60～ 90 ℃）为
分析纯，水为 Milli-Q超纯水。
1.3　样品
药材样品来自药材市场或产地采集，经中国
食品药品检定研究院郑健研究员鉴定。1～ 19号
样品为紫草科软紫草属新疆紫草 Arnebia euchroma
（Royle） Johnst的干燥根，20～ 21号样品为内蒙紫
草 Arnebia guttata Bunge的干燥根，22～ 24号样品
为滇紫草属长花滇紫草 Onosma hookeri Clarke var.
longiflorum Duthie的干燥根，25号样品为滇紫草属
滇 紫 草 Onosma paniculatum Bur. et Franch.的 干 燥
根，26及 27号样品为硬紫草属硬紫草 Lithospermum
erythrorhizon Sieb. et Zucc.的干燥根。
2　溶液的制备
2.1　混合对照品溶液
取左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊
酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿
卡宁、2-甲基丁基酰紫草素的对照品各约 10 mg，精
密称定，分别置 10 mL量瓶中，用乙腈溶解并定容至
刻度，即得各对照品储备液；分别取各对照品储备液
适量，置同一个 10 mL量瓶中，加乙腈配制成上述 6
个成分分别约 20、100、50、50、100、100 μg·mL-1的
混合溶液，即得。
2.2　供试品溶液
取样品粉末（过 4号筛）约 0.5 g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入石油醚（60～ 90 ℃）
25 mL，称量，超声处理（功率 250 W，频率 33 kHz）
30 min，放冷，再称量，用石油醚（60～ 90 ℃）补足减
失的量，摇匀，滤过；精密量取续滤液 10 mL，蒸干，残
渣加乙腈溶解，转移至 10 mL量瓶中，加流动相至刻
度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
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·1529· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
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3　色谱条件
色谱柱：YMC-Pack ODS-A（250 mm×4.6 mm，
5 μm）；流动相：乙腈 -0.05%甲酸水溶液（70∶30）；
流速：1 mL·min-1；检测波长：275 nm；柱温：30 ℃；
进样量：10 μL。
4　特征图谱
4.1　新疆紫草特征图谱的建立
取不同批次的新疆紫草（1～ 19号样品）粉
末，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，精密吸
取 10 μL，分别进样测定，记录 30 min的 HPLC色
谱图（见图 1）。根据结果，采用 Chempattern化学
计量学软件进行数据分析处理，设定 1号样品的
图谱为参照图谱，将其他样品的色谱图与参照图
谱进行自动匹配，生成新疆紫草的特征图谱（见
图 2）。
图 1　19批新疆紫草 HPLC色谱图
Fig. 1　HPLC chromatograms of 19 batches of Arnebia euchroma
图 2　新疆紫草 HPLC特征图谱
Fig. 2　HPLC specific chromatogram of Arnebia euchroma
4.2　特征峰的标定
根据 19批紫草的特征图谱检测结果，共标定 10
个特征峰。经过与对照品比对，可知 2号峰为左旋紫
草素，4号峰为乙酰紫草素，6号峰为β-乙酰氧基
异戊酰阿卡宁，8号峰为异丁酰紫草素，9号峰为β，
β′-二甲基丙烯酰阿卡宁，10号峰为 2-甲基丁基
酰紫草素；经与文献［12-13］比对，1号峰推测为紫
草呋喃 A，3号峰推测为β-羟基异戊酰阿卡宁，5
号峰为未知化合物，7号峰推测为去氧紫草素。
4.3　方法学考察
4.3.1　精密度试验　精密吸取同一新疆紫草供试品
溶液（2号样品）10 μL，按上述色谱条件连续进样
测定 6次，记录色谱图。以β，β′-二甲基丙烯酰
阿卡宁峰为参照峰，计算特征峰的相对保留时间及相
对峰面积，结果各特征峰相对保留时间的 RSD<1%，
单峰面积占总峰面积大于 2%的特征峰的相对峰
面积的 RSD<2%；采用科迈恩（北京）科技有限公
司 Chempattern化学计量学软件进行评价，相似度为
0.99。结果表明仪器精密度良好。
4.3.2　稳定性试验　精密吸取同一新疆紫草供试
品溶液（2号样品）10 μL，分别于 0、2、4、6、8、12、
24 h按上述色谱条件进样测定，记录色谱图。以β，
β′-二甲基丙烯酰阿卡宁峰为参照峰，计算特征峰
的相对保留时间及相对峰面积，结果各特征峰相对保
留时间的 RSD<1%，单峰面积占总峰面积大于 2%的
特征峰的相对峰面积的 RSD<2%；采用 Chempattern
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·1530· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
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化学计量学软件进行评价，相似度为 0.99。结果表明
供试品溶液在 24 h内稳定性良好。
4.3.3　重复性试验　取同一批新疆紫草样品粉末（2
号样品） 6份，精密称定，按“2.2”项下方法制备供
试品溶液，精密吸取供试品溶液 10 μL，分别进样测
定，记录色谱图。以β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁
峰为参照峰，计算特征峰的相对保留时间及相对峰
面积，结果各特征峰相对保留时间的 RSD<1%，单峰
面积占总峰面积大于 2%的特征峰的相对峰面积的
RSD<2%；采用 Chempattern化学计量学软件进行评
价，相似度为 0.99。结果表明该方法重复性好。
5　紫草中 6个成分的含量测定
5.1　系统适用性试验
按“3”项下色谱条件进行检测，以β，β′-二
甲基丙烯酰阿卡宁峰计算理论塔板数大于 6 000，分
离度大于 1.5。对照品及样品的色谱图见图 3。
A. 混合对照品（mixed reference substances）　B.新疆紫草（Arnebia euchroma）　C.内蒙紫草（Arnebia guttata）　D.长花滇紫草（Onosma hookeri var.
longiflorum）　E.滇紫草（Onosma paniculatum）　F.硬紫草（Lithospermum erythrorhizon）
2.左旋紫草素（shikonin）　4.乙酰紫草素（acetyl shikonin）　6.β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁（β-acetoxy isovaleryl shikonin）　8.异丁酰紫草素
（isobutyryl shikonin）　9. β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁（β，β′-dimethylacryl shikonin）　10. 2-甲基丁基酰紫草素（2-methylbutyryl shikonin）
图 3　紫草类药材 HPLC色谱图
Fig. 3　HPLC chromatogram of Boraginaceae herbs
5.2　线性关系考察
精密吸取各对照品储备液均 0.02、0.1、0.5、1.0、
2.0 mL，分别置 5个 10 mL量瓶中，加乙腈定容至刻
度，摇匀，即得各系列浓度的混合对照品溶液。分别
精密吸取各系列浓度的混合对照品溶液及对照品储
备液各 10 μL，注入液相色谱仪，测定，以各对照品质
量浓度 X （μg·mL-1）为横坐标，峰面积 Y为纵坐标，
进行线性回归，各被测成分回归方程和线性范围见
表 1。结果表明，6个成分在一定质量浓度范围内，
进样浓度与峰面积线性关系良好。
5.3　检测限与定量限测定
取“2.1”项下混合对照品溶液，用乙腈逐级稀释
后进样测定，以信噪比为 3∶1时的测得量为检测限，
信噪比为 10∶1时的测得量为定量限。结果左旋紫
草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异
丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-甲
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基丁基酰紫草素的检测限分别为 1.2、0.8、0.9、1.6、
0.8和 1.1 ng，定量限分别为 4.7、3.6、4.1、5.1、3.1和
3.8 ng。
5.4　精密度试验
精密吸取“2.1”项下混合对照品溶液 10 μL，
连续进样 6次，记录峰面积。结果左旋紫草素、乙
酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草
素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-甲基丁基酰
紫草素峰面积的 RSD（n=6）分别为 0.35%，0.22%、
0.30%、0.19%、0.18%和 0.21%，表明仪器精密度
良好。
5.5　重复性考察
取样品粉末（2号样品）6份，分别按照“2.2”项
下方法制备供试品溶液，按“3”项下色谱方法测定，
记录峰面积，计算含量。结果各份供试品溶液中左
旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、
异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-
甲基丁基酰紫草素的平均含量（n=6）分别为 0.11%、
0.94%、0.41%、0.38%、0.81%和 1.69%，RSD分别为
1.23%、1.62%、1.69%、1.52%、1.37%和 0.95%，结果
表明重复性良好。
5.6　溶液稳定性试验
取同一份供试品溶液（2号样品），分别于 0、2、
4、8、12、24 h进样测定。结果左旋紫草素、乙酰紫草
素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β，
β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-甲基丁基酰紫草素
峰面积的 RSD （n=6）分别为 0.49%、1.94%、1.21%、
2.00%、0.42%和 0.32%，表明供试品溶液在 24 h内
稳定。
5.7　加样回收率试验
以乙腈配制左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰
氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基
丙烯酰阿卡宁、2-甲基丁基酰紫草素质量浓度分别
为 0.275、2.411、1.031、0.985、2.052、4.281 mg·mL-1
的 6个对照品溶液。取已知含量的样品粉末（2号
样品）6份，每份各约 0.25 g，精密称定，分别置具
塞锥形瓶中，分别精密加入上述 6个对照品溶液各
1.0 mL，按照“2.2”项下方法平行制备供试品溶液，进
样分析，计算回收率，结果见表 2，表明该方法加样回
收试验结果良好。
5.8　紫草 6种成分含量测定
每个样品取 2份，分别按“2.2”项下方法制备供
试品溶液。精密吸取各供试品溶液 10 μL，按“3”
项下色谱条件进行测定，用外标法计算出 19批新疆
紫草、2批内蒙紫草、3批长花滇紫草、1批硬紫草和
1批滇紫草中 6个主要有效成分的含量，结果见表
3～ 6。
6　讨论
6.1　色谱条件的选择
本文采用等度洗脱色谱法分离紫草类药材中
的 6个主要羟基萘醌色素成分，30 min内完成分离，
左旋紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡
宁、异丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁
和 2-甲基丁基酰紫草素分离效果良好，符合含量测
定要求。本文通过二极管阵列检测器考察所测物质
紫外吸收，6个待测成分具有相同的结构母核，主要
是取代基不同，紫外最大吸收均在 275 nm，因此选择
275 nm为检测波长。
6.2　特征图谱分析
19批新疆紫草均含有 10个特征峰，通过对照品
比对法，标定了 6个羟基萘醌类成分，由于各批次之
间成分含量差别较大，HPLC图谱与特征图谱之间的
相似度不佳，不宜用相似度来评价新疆紫草。同时分
析内蒙紫草和长花滇紫草发现，新疆紫草的 HPLC图
表 1　各被测成分的标准曲线方程、相关系数和线性范围
Tab. 1　Regressive equations，correlation coefficients，and linear ranges of the investigated components
成分（composition） 回归方程（regressive equations） r
线性范围（linear range）/
（μg·mL-1）
左旋紫草素（shikonin） Y=1.641×105X+6.256×103 0.999 3 2.130~1 065
乙酰紫草素（acetyl shikonin） Y=1.344×105X-1.100×103 0.999 8 2.008~1 004
β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁（β-acetoxy isovaleryl shikonin） Y=1.264×105X-4.359×103 0.999 7 2.052~1 026
异丁基紫草素（isobutyryl shikonin） Y=1.662×105X-4.489×103 0.999 9 1.920~960
β，β′-二甲基异丙酰阿卡宁（β，β′-dimethylacryl shikonin） Y=1.916×105X-1.229×103 0.999 8 2.002~1 001
2-甲基丁基酰紫草素（2-methylbutyryl shikonin） Y=1.516×105X-1.806×103 0.999 9 1.874~937
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表 2　加样回收率试验结果
Tab. 2　Recoveries of six components
成分（component）
称样量
（weight of
sample）/g
样品中的量
（content in
sample）/mg
加入量
（addtion）/
mg
测得量
（measured）/
mg
回收率
（recovery）/
%
平均回收率
（average
recovery）/%
（n=6）
RSD/
%
左旋紫草素（shikonin） 0.250 8 0.276 0.275 0.544 97.5 97.6 1.9
0.251 3 0.276 0.275 0.542 96.6
0.249 9 0.275 0.275 0.546 98.6
0.252 0 0.277 0.275 0.544 97.0
0.253 3 0.279 0.275 0.541 95.4
0.252 7 0.278 0.275 0.555 100.7
乙酰紫草素（acetyl shik-
onin）
0.250 8 2.383 2.411 4.677 95.1 96.6 2.2
0.251 3 2.387 2.411 4.672 94.8
0.249 9 2.374 2.411 4.762 99.0
0.252 0 2.394 2.411 4.666 94.2
0.253 3 2.406 2.411 4.766 97.9
0.252 7 2.401 2.411 4.772 98.4
β-乙酰氧基异戊酰阿
卡宁（β-acetoxy isov-
aleryl shikonin）
0.250 8 1.053 1.031 2.045 96.2 97.9 1.1
0.251 3 1.055 1.031 2.065 97.9
0.249 9 1.050 1.031 2.057 97.7
0.252 0 1.058 1.031 2.078 98.9
0.253 3 1.064 1.031 2.084 98.9
0.2527 1.061 1.031 2.067 97.5
异丁基紫草素（isobutyryl
shikonin）
0.250 8 0.953 0.985 1.929 99.1 98.4 1.2
0.251 3 0.955 0.985 1.906 96.6
0.249 9 0.950 0.985 1.945 101.1
0.252 0 0.958 0.985 1.954 101.2
0.253 3 0.963 0.985 1.906 95.8
0.252 7 0.960 0.985 1.914 96.8
β，β′-二甲基异丙酰阿
卡宁（β，β′-dimeth-
ylacryl shikonin）
0.250 8 2.006 2.052 3.975 95.9 96.2 1.1
0.251 3 2.010 2.052 3.969 95.4
0.249 9 1.999 2.052 3.995 97.3
0.252 0 2.016 2.052 3.962 94.8
0.253 3 2.026 2.052 3.996 96.0
0.252 7 2.022 2.052 4.022 97.5
2-甲基丁基酰紫草素
（2-methylbutyryl shik-
onin）
0.250 8 4.289 4.281 8.439 96.9 97.3 1.7
0.251 3 4.297 4.281 8.552 99.4
0.249 9 4.273 4.281 8.396 96.3
0.252 0 4.309 4.281 8.474 97.3
0.253 3 4.331 4.281 8.404 95.1
0.252 7 4.321 4.281 8.558 99.0
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表 3　19批新疆紫草中 6个成分含量测定结果（%）
Tab. 3　Contents of six components from 19 batches of Arnebia euchroma
样品号
（sample
No.）
左旋
紫草素
（shikonin）
乙酰紫草素
（acetyl
shikonin）
β-乙酰氧基
异戊酰阿卡宁
（β-acetoxy
isovaleryl shikonin）
异丁酰紫草素
（isobutyryl
shikonin）
β，β′-二甲基丙
烯酰阿卡宁（β，
β′-dimethylac-
rylshikonin）
2-甲基丁
基酰紫草素
（2-methylbutyryl
shikonin）
总量
（total）
1 0.01 0.02 0.14 0.02 0.05 0.09 0.33
2 0.11 0.95 0.42 0.38 0.80 1.71 4.37
3 0.01 0.04 0.32 0.06 0.05 0.11 0.59
4 0.07 1.08 0.20 0.41 0.57 1.00 3.33
5 0.06 0.19 0.25 0.18 0.26 0.68 1.62
6 0.01 0.08 0.03 0.14 0.06 0.17 0.49
7 0.04 0.12 1.25 0.07 0.16 0.30 1.94
8 0.03 0.15 0.43 0.05 0.15 0.29 1.10
9 0.37 2.42 0.67 0.98 1.66 3.15 9.25
10 0.01 0.04 0.74 0.07 0.05 0.15 1.06
11 0.04 0.27 0.98 0.33 0.12 0.36 2.10
12 0.05 0.35 0.85 0.23 0.26 0.75 2.49
13 0.11 1.47 0.65 0.88 1.15 2.65 6.91
14 0.08 1.41 0.64 0.69 0.70 1.35 4.87
15 0.22 1.95 0.45 0.58 0.95 1.53 5.68
16 0.04 0.75 0.03 0.11 0.28 0.58 1.79
17 0.05 0.95 0.02 0.21 0.60 1.05 2.88
18 0.03 0.35 0.05 0.18 0.13 0.28 1.02
19 0.02 0.35 1.42 0.17 0.12 0.32 2.40
表 4　2批内蒙紫草中 6种成分含量测定结果（%）
Tab. 4　Contents of six components from 2 batches of Arnebia guttata
样品号
（sample
No.）
左旋
紫草素
（shikonin）
乙酰紫草素
（acetyl
shikonin）
β-乙酰氧基
异戊酰阿卡宁
（β-acetoxy
isovaleryl shikonin）
异丁酰紫草素
（isobutyryl
shikonin）
β，β′-二甲基丙
烯酰阿卡宁（β，
β′-dimethylac-
rylshikonin）
2-甲基丁
基酰紫草素
（2-methylbutyryl
shikonin）
总量
（total）
20 0.09 0.42 — 0.13 0.08 1.79 2.50
21 0.21 1.11 — 0.29 0.14 4.29 6.04
　注（note）：“-”表示未检出或低于定量限（The symbol “-” showed that the contents were not detected or below quantification limit ）
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表 5　3批长花滇紫草中 6种成分含量测定结果（%）
Tab. 5　Contents of six components from 3 batches of Onosma hookeri. var. longiflorum
样品号
（sample
No.）
左旋
紫草素
（shikonin）
乙酰紫草素
（acetyl
shikonin）
β-乙酰氧基
异戊酰阿卡宁
（β-acetoxy
isovaleryl shikonin）
异丁酰紫草素
（isobutyryl
shikonin）
β，β′-二甲基丙
烯酰阿卡宁（β，
β′-dimethylac-
rylshikonin）
2-甲基丁
基酰紫草素
（2-methylbutyryl
shikonin）
总量
（total）
22 0.02 0.41 0.76 0.11 0.05 1.00 2.34
23 0.03 0.47 1.17 0.09 0.06 1.35 3.16
24 0.01 0.08 — 0.08 — 0.52 0.69
　注（note）：“-”表示未检出或低于定量限（The symbol “-” showed that the contents were not detected or below quantification limit ）
表 6　滇紫草和硬紫草中 6种成分含量测定结果（%）
Tab. 6　Contents of six components of Onosma paniculatum and Lithospermum erythrorhizon
样品号
（sample
No.）
左旋
紫草素
（shikonin）
乙酰紫草素
（acetyl
shikonin）
β-乙酰氧基
异戊酰阿卡宁
（β-acetoxy
isovaleryl shikonin）
异丁酰紫草素
（isobutyryl
shikonin）
β，β′-二甲基丙
烯酰阿卡宁（β，
β′-dimethylac-
rylshikonin）
2-甲基丁
基酰紫草素
（2-methylbutyryl
shikonin）
总量
（total）
25 0.01 0.14 — 0.01 0.21 0.04 0.41
26 0.07 0.39 0.02 0.21 0.05 0.25 0.99
27 0.03 0.34 0.06 0.19 0.03 0.19 0.84
　注（note）：“-”表示未检出或低于定量限；25号样品为滇紫草，26及 27号样品为硬紫草（The symbol “-” showed that the contents were not detected
or below quantification limit. No. 25 sample was Onosma paniculatum. No. 26 and 27 samples were Lithospermum erythrorhizon）
谱和其他紫草整体观不同，含有的成分不同。长花滇
紫草色谱图中，在β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和
2-甲基丁基酰紫草素 2个色谱峰之间存在 1个较大
的特征峰（峰 9），但该峰为未知化合物；所测 2批内
蒙紫草和 1批滇紫草均未检出β-乙酰氧基异戊酰
阿卡宁（峰 6）成分；2批硬紫草中 3号峰（β-羟基
异戊酰阿卡宁）为较大的峰，19批新疆紫草的 3号
峰均为较小的峰。因此，建立的特征图谱对于区分不
同基原紫草类药材具有一定意义。
6.3　含量测定
由表 3～ 6可见，19批新疆紫草中均含有左旋
紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异
丁酰紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-甲
基丁基酰紫草素 6个羟基萘醌类成分。不同批次新
疆紫草中 6个羟基萘醌类成分总量差别较大，可能是
由于产地或加工方式等原因导致；2批内蒙紫草中均
未检出β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁；19批新疆紫草
中 2-甲基丁基酰紫草素的含量均高于β，β’-二
甲基丙烯酰阿卡宁，两者含量比值在 1.6～ 3.0倍，与
本文测定的其他几种紫草有显著区别，该比值具有一
定的鉴别意义。
6.4　小结
本实验在同一色谱条件下，建立了新疆紫草的
特征图谱，并同时测定不同基原紫草药材中左旋紫草
素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰
紫草素、β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和 2-甲基丁
基酰紫草素 6个有效成分的含量，方法简便、快速、准
确，具备了定性和定量双重作用，为有效控制紫草及
其制剂的质量提供了科学依据。此外，由于样品收集
存在难度，本实验除新疆紫草外，其余品种批次较少，
结果具有一定的局限性，需收集更多批次的各类紫草
进行更深入的研究。
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·1535· 药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2016,36(9)
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（本文于 2016年 3月 28日收到）