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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2014年第9期
人参为五加科人参属多年生宿根性植物，是我
国传统名贵中草药，有“百草之王”的美誉。人参
主要分布于东三省，其中，吉林省长白山区是人参
的主产区，产量达全国总产量的 70%-80%［1］。人参
病害是影响人参产量与质量的一个重要因素。目前，
在人参中发现的侵染性和非侵染性病害有 50 余种，
我国已报道的有 30 余种。其中，立枯病、黑斑病、
收稿日期 ：2014-01-20
基金项目 ：国家科技支撑计划项目（2011BAI03B01-02），国家自然科学基金项目（31270371），吉林省科技发展计划重点项目（20125068）
作者简介 ：史册，女，硕士研究生，研究方向 ：生物农药 ；E-mail ：742964373@qq.com
通讯作者 ：韩梅，女，教授，研究方向 ：中药资源生态与规范化栽培 ；E-mail ：HanMei77@sohu.com
人参病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定
史册 韩梅 张一鸣 郭双双 杨利民
（吉林农业大学中药材学院 吉林农业大学省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室，长春 130118）
摘 要 ： 采用平板对峙法、生长速率测定法等对人参根际分离得到的 4 株放线菌的抑菌活性进行了研究，并通过形态学特
征观察、生理生化测定和 16S rDNA 序列分析进行分类鉴定。结果表明，4 株放线菌对人参常见病病原真菌的抑菌效果明显。其中，
FX-10 对毁灭柱孢菌、灰葡萄孢菌和 FX-61 对人参核盘菌的抑制率分别达到 91.28%、91.8% 和 90.07%。FX-10、FX-61、FX-137 对
人参的 5 种病原菌和 FX-139 对人参的 7 种病原菌有抑制作用，并且抑菌效果稳定。通过形态、生理生化和分子生物学鉴定，FX-
139 为酒红土褐链霉菌（Streptomyces vinaceus-drappus），FX-10 为黑浅灰链霉菌（Streptomyces nigrogriseolus），FX-137 为酒红链霉菌
（Streptomyces vinaceus），FX-61 为链霉属的灰褐类群。
关键词 ： 人参病原真菌 放线菌 拮抗作用 筛选 鉴定
Isolation，Screening and Identification of Antagonistic Actinomycetes
of Panax ginseng Pathogenic Fungus
Shi Ce Han Mei Zhang Yiming Guo Shuangshuang Yang Limin
（College of Herbal Medicine，Jilin Agricultural University，State Key Laboratory for Ecological Restoratipn and Ecosystem Management of
JLP-MOST Collective Construct-KLUER，Changchun 130118）
Abstract: The antimicrobial activity of four actinomycetes isolated from ginseng rhizosphere was studied with plate-confrontation method
and growth rate method. The four strains were identified through their morphological features, physiological and biochemical characteristics and
16S rDNA sequence alignment analysis. The result showed that the four actinomycetes strains could inhibit Panax ginseng pathogenic fungus
obviously. In the antagonistic examination in vitro, the inhibition rate of FX-10 against Cylindrocarpon destructans, Botrytis cinerea and the
inhibition rate of FX-61 against Sclerotinia ginseng were 91.28%、91.8%、90.07%, respectively. FX-10、FX-61、FX-137 could inhibit 5
kinds of ginseng pathogenic fungus, while FX-139 could inhibit 7 kinds of ginseng pathogenic fungus. The inhibition activity of both was stable.
Based on the identifications of morphological, physiological and biochemical characteristics and molecular biology, FX-139 was ascertained
as Streptomyces vinaceus-drappus, FX-10 as Streptomyces nigrogriseolus, FX-137 as Streptomyces vinaceus and FX-61 as griseofuscus group of
streptomces.
Key words: Panax ginseng pathogenic fungus Actinomycetes Antagonism Screen Identification
锈腐病、根腐病、疫病、菌核病及灰霉病是人参 7
种主要真菌性病害。常年发病率在 10%-30%，严重
时达到 60%-70%，甚至绝收。目前，对人参病害防
控主要依靠化学农药。化学农药防治人参病害虽然
是很有效的方法，但是，长期使用化学农药不仅导
致农药残留和环境污染，并且易诱导病原微生物产
生抗药性［2，3］。开发环境友好的生防制剂成为替代
2014年第9期 103史册等：人参病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定
化学农药的重要措施。生物防治是以生态学原理为
基础，利用生物物种间的相互作用，以一种或一类
生物抑制另一种或另一类生物。生物防治最大的优
点是不污染环境，无农药残留，这是化学农药等非
生物防治措施无法比拟的。利用拮抗微生物防治病
原微生物是生物防治技术的重要组成部分。放线菌
因其来源广泛，代谢产物活性较高等引起广泛关注，
其拮抗机制和作用主要有抗生作用、竞争作用和重
寄生作用［4］。放线菌能够产生抗生素、有机酸、甾
体化合物及酶的抑制剂等多种生物活性物质，对植
物病害产生抑制或杀灭作用［5］。目前，在人参生产中，
使用的放线菌生防制剂还较少，而且均来源于农作
物，无人参专用生防制剂。为此，本研究对人参进
行根际土壤拮抗性放线菌的筛选、分离和鉴定研究，
旨在为开发人参专用放线菌制剂提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试病原菌 引起人参的根腐病、锈腐病、
疫病、菌核病、灰霉病、黑斑病和立枯病的主要病
原真菌，分别是腐皮镰孢菌（Fusarium solani）、毁
灭 柱 孢 菌（Cylindrocarpon destructans）、 恶 疫 霉 菌
（Phytophthora cactorum）、 人 参 核 盘 菌（Sclerotinia
ginseng）、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）人参链格
孢 菌（Alternaria panax）、 立 枯 丝 核 菌（Rhizoctonia
solani），均由吉林农业大学农学院植物病理教研室
提供。
1.1.2 土壤样品 来源于吉林省抚松县万良镇不同
年限人参栽培基地土壤，风干过 40 目筛。
1.1.3 主要培养基 高氏一号培养基 ；马铃薯葡萄
糖（PDA）培养基 ；ISP2 液体培养基 ；形态学观察
和生理生化培养基［6］。
1.1.4 主要试剂 TaKaRa MiniBEST Bacterial Geno-
mic DNA Extraction Kit Ver.2.0 试 剂 盒 ；放 线 菌 16S
rDNA 序列扩增引物 8-27f ：5-AGAGTTTGATCCTG-
GCTCAG-3，1523-1504r ：5-AAGGAGGTGATCCAG-
CCGCA-3 由长春联星生物技术有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 土壤放线菌的分离 称取土样 10 g，放入装有
玻璃珠和 90 mL 无菌水的三角瓶中，28℃ 180 r/min
充分振荡 30 min，使样品与无菌水混合均匀，制得
样品悬液。在无菌条件下取 1 mL 样品悬液加入 9
mL 无菌水，制得 10-1 稀释液，以此类推按梯度依次
制成 10-3、10-4 和 10-5 的稀释液。分别吸取各梯度
稀释液 100 μL，在高氏一号平板上采用平板稀释涂
布法分离放线菌菌株［7］，28℃培养 10 d。根据菌落
形态、颜色、边缘，可溶性色素等特征挑取放线菌，
进行平板划线纯化，将纯化获得的菌株编号，4℃保
存备用。
1.2.2 拮抗放线菌的筛选 采用平板对峙法进行初
筛［8］。在 PDA 培养基中心分别接入 1.1.1 中的人参
病原菌菌饼（Φ=5 mm），将用打孔器打好的直径 5
mm 放线菌菌饼置于距病原菌 25 mm 两侧，每个处
理重复 3 次，置于 25℃培养箱暗培养，观察是否产
生抑菌圈，定期观察、测量抑菌圈的大小，挑选抑
菌效果好的菌株进行复筛。
拮抗放线菌的复筛。采用滤纸片法测定分离的
放线菌对人参病原菌的抑制作用，在 PDA 培养基中
心接入 7 mm 人参病原菌，将 4 片直径为 1 cm 的灭
菌滤纸片置于距病原菌 25 mm 处的 4 个点上。将 7
mm 的放线菌菌饼接入装有 50 mL ISP2 培养基的三
角瓶中。28℃，180 r/min 条件下振荡 4 d，每 100 μL
点接到 4 片滤纸圆片上，每个处理重复 3 次，对照
为不加滤纸片的病原菌平板，置于 28℃培养箱培养，
待对照组菌落长满平板，测量处理菌落直径。
抑菌率（%）=（对照病原菌直径 - 处理病原菌
直径）/ 对照病原菌直径 ×100%
拮抗放线菌发酵液对人参病原真菌的抑制作用：
采用菌丝生长速率法［9］，发酵上清液的制备参考
林福呈等［10］方法，将发酵上清液与 PDA 培养基按
1∶10 的比例混匀，倒入培养皿中。待培养基凝固后，
在每个培养基平面接入 1 个供试真菌菌饼（直径 7
mm），使带菌丝一面贴在培养基表面。以加入相同
比例无菌水的 PDA 平板上生长的病菌作为对照，每
个处理重复 3 次，置于 28℃培养箱培养，待对照组
菌落长满平板，十字交叉法测量处理菌落直径，计
算抑菌带宽度。
1.2.3 菌株的生长曲线的绘制 采用比浊法测定。
将放线菌菌饼接种于 ISP2 培养基中，28℃条件下
180 r/min 振荡培养，每隔 6 h，通过紫外分光光度计
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第9期104
测定波长 600 nm 下的吸光值，判断放线菌生长状况。
1.2.4 菌株的分类鉴定
1.2.4.1 菌株形态学观察 采用插片法，并参照张
纪忠等［11］方法进行观察 ：挑取菌种培养物在高氏
一号平板上划线接种。在无菌条件下，用镊子将灭
菌的盖玻片以大约 45 角插入琼脂内。将插片平板
倒置，28℃培养，分别在 7、15 和 30 d 时镜检观察，
记录气生菌丝，基内菌丝和可溶性色素的颜色变化，
取成熟时期颜色作为定种依据［12］。
1.2.4.2 菌株的培养特征和生理生化特性 参考李
文均等［13］方法，并结合《伯杰细菌鉴定手册》，《链
霉菌鉴定手册》进行鉴定［14，15］。
1.2.4.3 细胞壁化学成分分析 采用快速薄板层析
法（TCL）对 4 株放线菌的细胞壁化学类型及全细
胞水解物糖型的进行分析［16］。
1.2.4.4 放 线 菌 总 DNA 的 提 取 按 照 TaKaRa
MiniBEST Bacterial Genomi cDNA Extraction Kit Ver.2.0
试剂盒的说明书进行 DNA 的提取。
1.2.4.5 16S rDNA 序列的扩增 以总 DNA 为模板，
8-27f 和 1523-1504r 作 为 引 物 扩 增 16S rDNA 序 列。
反应体系 ：Premix Ex Taq 10 μL，10 mmol/L Forward
Primer 0.6 μL，10 mmol/L Reverse Primer 0.6 μL， 模
板 2 μL，补充 H2O2 至 20 μL。PCR 反应条件 ：94℃
变性 5 min ；94℃变性 40 s，56℃退火 40 s，72℃延
伸 90 s，35 个循环 ；72℃延伸 5 min。PCR 产物进
行 1% 琼脂糖凝胶电泳检测。PCR 产物送上海生物
工程技术服务有限公司测序。将测序得到的序列与
GenBank 中的核酸序列进行比对分析，从 GenBank
中检索同源性高的菌株用于系统发育分析，利用
MEGA5.0 的 Neighbor-Joining 法构建系统发育树，并
计算株间 16S rDNA 序列的相似性。
2 结果
2.1 土壤放线菌的分离及活性菌株的筛选
从人参根际土壤中分离得到放线菌菌株 206 个，
经过平板对峙法筛选出 36 株对人参真菌性病害有
抑制作用，其中编号为 FX-10、FX-61、FX-137 和
FX-139 的 4 个菌株对供试 7 种人参病原真菌具有较
强的抑制作用。FX-10 对毁灭柱孢菌、灰葡萄孢菌
和 FX-61 对人参核盘菌的抑制率分别达到 91.28%、
91.8% 和 90.07%，具有显著的抑制作用（表 1）。4
株放线菌均对人参核盘菌表现出最强的抑制作用，
其平均抑制率为 88.59% ；对灰葡萄孢菌的平均抑制
率为 75.37% ；对恶疫霉菌的平均抑制率为 71.43% ；
仅 FX-139 菌株对立枯丝核菌有抑制作用，抑菌率为
78.22% ；而 FX-137 对腐皮镰孢菌无抑菌作用，对人
参核盘菌的抑菌效果最好，抑菌率达 84.40%（表 1）。
表 1 四株放线菌对人参病原真菌生长的抑制作用
人参病原真菌
抑制率（%）
标准偏差
FX-10 FX-61 FX-137 FX-139
立枯丝核菌（Rhizoctonia solani） - - - 78.22a 0
恶疫霉菌（Phytophthora cactorum） 76.52a 77.19a 66.96b 65.04b 6.32
人参核盘菌（Sclerotinia ginseng） 91.28a 90.07a 84.40c 88.62b 3.00
灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea） 90.80a 78.24b 69.01c 63.43d 11.96
人参链格孢菌（Alternaria panax） 59.74b 60.12b 63.64a 62.20a 1.83
腐皮镰孢菌（Fusarium solani） 57.31b 54.97b - 70.00a 8.09
毁灭柱孢菌（Cylindrocarpon destructans） 46.25c 82.5a 18.75d 66.09b 27.44
同行中不同小写字母表示差异显著（P<0.05），下同
2.2 拮抗放线菌发酵液对人参病原真菌的抑制作用
菌株 FX-139 发酵上清液对人参菌核病菌无抑制
作用，对人参锈腐病菌和人参黑斑病菌的抑菌带为
6.0 mm，对人参根腐病菌的抑菌带为 9.7 mm，抑制
率较好。对人参疫病菌的抑菌带为 14.3 mm，对人
参立枯病菌的抑菌带为 11.9 mm，对人参灰霉病菌
的抑菌带为 11.4 mm，体现了明显的抑制效果，其
他菌株的抑菌谱见表 2。
2.3 菌株的生长曲线的绘制
接入 FX-139 菌块之后的 6-12 h，菌体的生长
量稍有下降，18-24 h 处于一个缓慢增长的趋势，从
24-30 h，菌体处于对数期，菌体以几何数增加，增
2014年第9期 105史册等：人参病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定
长速度快 ；细胞代谢旺盛 ；从 30-60 h 菌体生长处
于稳定期，生长速率下降，死亡率上升，菌体数量
处于一个动态平衡状态，是获得次级代谢产物的重
要时期。72 h 后由于培养基内生存条件急剧恶化，
导致菌体的增值速度小于死亡速度，此时菌体的数
量急剧下降，其他菌株的生长曲线见图 1-图4。
基内菌丝分支少、直、无横隔，无断裂。气生菌丝直，
生长旺盛，头部紧密螺旋形（图 5）。其他菌株的形
态学特征见表 3。
2.4.2 菌株的生理生化特性 菌株 FX-139 在不同培
表 2 四株放线菌对人参病原真菌抑菌谱
人参病原真菌
抑菌带（mm）
标准偏差
FX-10 FX-61 FX-137 FX-139
人参核盘菌（Sclerotinia ginseng） 12.0a 6.0b - - 4.24
灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea） 12.5b 18.0a 8.6c 11.4b 3.94
人参链格孢菌（Alternari apanax） 5.0b 5.8a 2.6c 6.0a 1.56
腐皮镰孢菌（Fusarium solani） 8.2b 8.3b 7.9b 9.7a 0.8
毁灭柱孢菌（Cylindrocarpon destructans） 16.6b 23.9a - 6.0c 9
恶疫霉菌（Phytophthora cactorum） 15.8a 13.2c 13.2c 14.3b 1.23
立枯丝核菌（Rhizoctonia solani） - - - 11.9a 0
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18 30 42ᰦ䰤 h 51 57 66
图 1 菌株 FX-137 的生长曲线
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18 30 42ᰦ䰤 h 51 57 66
图 2 菌株 FX-61 的生长曲线
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图 3 菌株 FX-10 的生长曲线
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图 4 菌株 FX-139 的生长曲线
2.4 菌株的鉴定
2.4.1 菌落形态特征及培养特征的观察 菌株 FX-
139 的菌落边缘整齐，稍突起。菌株 FX-139 在高氏
一号培养基上生长良好，孢子卵圆形，表面光滑。 图 5 FX-139 在显微镜下的孢子丝和菌丝的形态
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第9期106
养基上气生菌丝呈白色，灰色，淡紫褐色或浅黄色，
基内菌丝分别为白色、豆沙色、粉白色、浅黄色或
灰色，在各种培养基上均无可溶性色素产生。
菌株 FX-139 能使明胶液化、淀粉水解、硝酸
盐还原，产生 H2S，不能使牛奶凝固与胨化不产酸
不产碱，能在纤维素滤纸上生长但不能分解纤维素，
表 3 拮抗菌株形态学特征
菌株编号 边缘特征 孢子形态 气生菌丝 基内菌丝
FX-139 整齐 卵圆形 头部紧密螺旋形 少、直、无横隔无断裂
FX-137 整齐 长圆形，表面光滑 直，较短 分枝少、无横隔、无断裂
FX-61 整齐 卵圆形 直，较长 直、无横隔、无断裂
FX-10 整齐 卵圆形，表面光滑 直，生长旺盛 少、无横隔、无断裂
表 4 四株放线菌的培养特征
菌株编号 培养基 生长状况 气生菌丝 基内菌丝 可溶性色素
FX-139 克氏一号 差 白色 杏色 无
高氏一号 繁茂 粉色 白色 无
蔗糖察氏 好 浅肉粉色 豆沙色 无
马铃薯块 好 淡紫褐色 粉白色 无
葡萄糖酵母 繁茂 浅灰色 灰白色 无
淀粉铵琼脂 好 灰白色 白色 无
葡萄糖天冬门 好 白色 浅黄色 无
EM 伊莫松 一般 浅黄色 深黄色 无
苹果酸钙琼脂 良好 淡紫褐色 灰色 无
FX-61 克氏一号 差 杏白色 无 无
高氏一号 繁茂 灰白相间 深灰色 无
蔗糖察氏 好 灰白色 灰色 无
马铃薯块 一般 灰白色 灰白色 无
葡萄糖酵母 繁茂 粉白色 浅灰色 无
淀粉铵琼脂 好 杏色色 黑色 无
葡萄糖天冬门 好 白色 黑色 无
EM 伊莫松 一般 白色 灰色 无
FX-137 克氏一号 一般 粉色 红灰色 无
高氏一号 繁茂 橙色 肉色 无
蔗糖察氏 好 肉粉色 驼色 无
马铃薯块 一般 粉白色 乳白色 无
葡萄糖酵母 繁茂 豆沙色 灰白色 棕色
淀粉铵琼脂 差 黄白色 粉色 无
葡萄糖天冬门 好 浅黄色 白色 无
EM 伊莫松 一般 白色 灰色 无
FX-10 克氏一号 一般 杏白色 黑色 无
高氏一号 繁茂 灰色 灰色 无
蔗糖察氏 好 浅灰色 深灰色 无
马铃薯块 好 灰色 暗褐色 无
葡萄糖酵母 好 灰色 灰色 无
淀粉铵琼脂 好 浅灰色 栗色 无
葡萄糖天冬门 好 淡灰色 乳白色 无
EM 伊莫松 一般 白色 灰白色 无
不产生黑色素。能较好地利用葡萄糖、木糖、蔗糖、
甘露醇、肌醇、棉籽糖，对果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、
麦芽糖的利用能力较差。最适生长温度为 30℃，pH
值为 4.4-10.4，最适 pH 为 7.4，具有耐盐性，耐盐
范围为 1%-10%。其他菌株培养特征及生理生化指
标见表 4 和表 5。
2014年第9期 107史册等：人参病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定
2.4.3 四株放线菌细胞壁化学成分的分析 4 株放
线菌细胞壁化学成分均含 L，L-二氨基庚二酸及甘
氨酸，化学型属于 I 型 ；全细胞水解液无特征性糖，
糖型为 C 型，符合链霉属的化学分类特征。
2.4.4 16S rDNA 序列分析与系统进化树构建 序列
分析表明，FX-139、FX-137、FX-61 和 FX-10 长度分
别 为 1 373、1 442、1 404 和 1 439 bp，GenBank 登
录 号 分 别 为 KF782840、KF782839、KF782838 和
KF782837。在 NCBI 数据库中 BLAST 比对结果显示，
与其同源性较高的菌株均属于链霉菌属。用 MEGA-
version5.0 软件将这 4 株放线菌与来自 GenBank 的放
线菌株一起构建基于 16S rDNA 序列的系统发育树可
知，FX-139 与 Streptomyces sp. （JX430825），FX-137
与 Streptomyces vinaceus（AB184394），FX-10（AB18-
4460），FX-61 与 Streptomyces sp.（HF56355）的同源
性最高，相似度达 99%（图 6）。
结合形态学和生理生化性状的鉴定结果，可
以初步鉴定试验分离到的拮抗菌，将 FX-139 鉴定
为酒红土褐链霉菌（Streptomyces vinaceus-drappus），
FX-10 为黑浅灰链霉菌（Streptomyces nigrogriseolus），
FX-137 为 酒 红 链 霉 菌（Streptomyces vinaceus），
FX-61 为链霉属的灰褐类群。
3 讨论
生物防治是当前植物病害防治的研究热点之一。
放线菌因其独特的生态地位而在生物防治中起着举
足轻重的作用。但是目前仅有少数利用放线菌进行
锈腐病防治的研究。Chung 等［17］从人参根际土壤中
分离到 5 株链霉菌并证明这些菌株对人参锈腐菌和
根腐菌具有明显的抑制作用。姜云等［18］筛选出一
株对人参锈腐病有较强拮抗作用的菌株 la-3，多相
分类确定菌株 la-3 为链霉菌属灰产色链霉菌。而本
研究所分离筛选出 3 株放线菌 FX-10、FX-61、FX-
137 对人参的 5 种病原菌及防线菌株 FX-139 对人参
的 7 种病原菌有抑制作用，并且抑菌效果稳定，目前，
利用这 4 株生防放线菌对植物病害进行生物防治的
报道很少。
本研究从吉林省抚松县万良镇人参栽培地土壤
中分离获得对人参真菌性病害有抑制作用的放线菌
36 株，选取 4 株抗菌活性较强的放线菌，并对其抑
菌活性进行了研究，但是通过生长速率法测定发酵
液的抑菌活性时却发现，其对人参 7 种病源菌的抑
菌效果没有活菌显著，可能是因为发酵液中抑菌成
分浓度不够，也有可能是活菌和发酵滤液的抑菌机
理存在一定的差异。
通过形态学观察、培养特征观察、生理生化试验、
表 5 四株放线菌的生理生化特征
试验项目 FX-139 FX-61 FX-137 FX-10
明胶液化 + - + +
硝酸盐还原 + + + +
牛奶凝固与胨化 - - - -
产酸产碱 - - + -
纤维素分解 - - + -
黑色素产生 - + - +
H2S 产生 + - - +
淀粉水解 + - + -
碳源利用 蔗糖 + + + +
果糖 + + - +
肌醇 + - + -
D-木糖 + + - -
棉子糖 + - - -
L-鼠李糖 + + - +
葡萄糖 + + + +
麦芽糖 + + + +
D-甘露醇 + + + +
L-阿拉伯糖 + - - -
+ ：阳性反应 ；- ：阴性反应
Streptomyces sp. AB222069
Streptomyces sp. AB688986
Streptomyces sp. AB222068
Streptomyces spororaveus JN862834
Streptomyces sp. GQ867034
Actinoalloteichus cyanogriseus AB006178
Nocardiopsis chromatogenes AY619715
Streptomyces chrysomallus NR041172
FX-137
Streptomyces vinaceus. NR041131
Streptomyces sp. EU054381
FX-139
Streptomyces sp. JX430825
Streptomycesaburaviensis AY999779
Streptomyces sp. EU054365
Streptomyces cirratus AB184377
FX-61
FX-10
Streptomyces nigro griseolus AB184460
Streptomyces sp. JN177516
Streptomyces sp. HF563554
Streptomyces purpureus NR042292
94
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98
96
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图 6 拮抗菌与相关菌株的系统发育树
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2014年第9期108
细胞壁化学类型分析及 16S rDNA 序列分析，将 FX-
139 鉴定为酒红土褐链霉，FX-10 为黑浅灰链霉菌，
FX-137 为酒红链霉菌，FX-61 为链霉属的灰褐类群。
但在生理生化特性方面放线菌 FX-139 与已知的酒红
土褐链霉菌间存在细微差别，究其原因是生理生化
与放线菌的状态活力有关，很多生理生化指标在菌
株活力不好的情况下，都会从阳性变为阴性，影响
试验结果。这样就需要与模式菌株进行生理生化性
质的比较，还需要进行 DNA 杂交，并根据同源性进
行进一步深入分析。
4 结论
本研究通过对吉林省抚松县万良镇不同年限人
参栽培基地土壤中放线菌进行分离、初筛和复筛，
获得 4 株对人参 7 种真菌性病害的菌丝生长具有较
强抑制活性的放线菌菌株，分别是 FX-10、FX-61、
FX-137 和 FX-139。其中 FX-10 对毁灭柱孢菌、灰葡
萄孢菌的抑制率分别为 91.28% 和 91.8% ；FX-61 对
人参核盘菌抑菌效果最好，抑制率为 90.07% ；FX-
137 对人参核盘菌的抑菌率达到 84.40% ；仅 FX-139
菌株对立枯丝核菌有抑制作用，抑菌率为 78.22%。
利用传统分类方法和 16S rDNA 序列测定对菌株进
行了鉴定，将菌株 FX-139 初步鉴定为酒红土褐链霉
菌，FX-10 为黑浅灰链霉菌，FX-137 为酒红链霉菌，
FX-61 为链霉属的灰褐类群。
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（责任编辑 马鑫）