全 文 ：生物杖术通推
研 究 报 告 召云口2万C 日四p 乙 O G Y B U L L E Tl rN 2 (洲刃 年 增 刊
红掌花药培养
杜宝贵 黄丽娟 2 张志胜 2 黎扬辉 梁彩红 2 易悉升
( 广州花卉研究中心, 广州 510 3印 ; 华南农业大学广东省植物分子育种重点实验室,广州 51 仪铸2 )
摘 要: 研究了发育时期 基因型 培养基 低温预处理等因紊对红掌花药愈伤组织诱导的影响 结果表明 ,小抱子中晚
期是红掌花药培养的适宜时期;基因型对花药移大率有显著的影响;不同培养基上的 sw e tD re am 和Jun gl e B us h 的花药膨大率
差异显著;低温预处理明显提高sw e : D re am 的花药珍大率从 swe et D re azn 花药诱导出致密和疏松两种愈伤组织 ,两种愈伤
组织芽分化率和生根率存在明显差异 ,致密愈伤组织的小苗生根率为 95 .0 % ,而疏松愈伤组织的小苗生根率为 30 .0 % sw e t
D re am 的花药再生植株与叶片再生植株在形态特征上有差异 , 染色体鉴定结果表明,花药再生植株均是二倍体
关性词: 红掌 花药培养 染色体鉴定
A n th er C ul tu re o f A n 功U对u m a n d 朋 朗n u刃. L in d
D u B ao测 , H ua ng Lijuan , zhang zhis he心 LiY an ghuil Li an g C汕 on扩 Y iM aosheng ,
(C幽 M乒ho u 凡刚 er Researc h Ce 映 r, C忿姗争ho o 510360 ; 七砚姐叨面喀 乃切少nc 过 检了Lab o吻 叮 of 月肠u M Ole c 2少 Bre edi 咯 so !a h
China A洲c心 耐 U成.e姆, G an 乎 ho u 510642)
A b straCt : T he e价 ets of de veloPm en目 s召e , gen otyP , cu lture m edi um an d low tem Pera tu re Pretre atm ent o n th e e山us
induetion of An 山面um an 如 ean um Lin d w ere mv es d乎ted 勿 using ofan th er as exP lan tS. The res ul ts show ed tharthe anth er at mi ddl e to
lat e 而 cro sP ore sta ge w ere sul ta ble fo r e山us indu etion. Ge notyP e si测 fiean 听 i祖ueneed th e sw eil ng ra tio of anther.C ultu re m edium had
sigIU fiean t efe ets on an th er eul tu re of sw eetD re am an d Ju心 e B us h.Low temP era七ure Pre tre atm ent eoul d obvi ous ly enhan ee the sw e压ng
ra tio o f Sw eet D re azn an th er. C omP ac t an d loo se eali wi th di fFe re nt re 罗 n erati on ab il ty w ere fo rm ed fr om th e an ther o f Sw oet D ream .
T h e ro o t di 玉 renti ati on rat e of th e P lan d et 如 m comP aet cal us w as 95 % , how ever th e ro ot di fFe re nti ati on rate o f th 亡 Plan det fro m loose
eal us w as orily 30% .T here w ere som e m orp hologi eal v州ation betw een an th er- derived an d leaf- derived Plan dets . H ow ever, 山 the
an th er 一 deriv ed Plandets identi6ed 场 Chrom osom e obs ervaoon wer di Pi ni d.
K e y wo rd s : An 比uri um 胡如 ean um An ther eul tu re C hr om osome iden姐 eati on
红掌 (A nth u找 um an dra eanum 口nd) 是具有重要
观赏价值和经济价值的花卉 ,市场前景广阔 我国
红掌产业起步较晚 , 基础研究和育种工作严重滞
后 ,已成为红掌产业进一步发展的瓶茎 因此 ,开展
红掌育种方法研究 ,培育基础研究材料具有紧迫的
现实意义
利用花药培养技术开展单倍体育种是植物育
种的重要途径之一 花药培养不仅可以加快育种进
展 ,还可以创造选择出新的基因型l] 研究人员分
别在矮牵牛[2] 百合13 荔枝l4] 花椰菜l,] 等作物上进
行了花药培养的研究并取得了成功 , 认为基因型
小抱子发育时期 培养基成分等是影响花药培养的
重要因素 但是 目前花药培养仍存在一些问题 ,例
如 :诱导频率和分化成苗率低 ;花药培养容易受到
体细胞的干扰 ,在产生单倍体的同时也产生二倍体
和四倍体等
收稿 日期 :2侧为一03 一01
基金项 目:广州市农业局新 品种招标项 目 (2(X) 2G K 023 104 )
作者简介:杜宝贵 (l 97 8一),男 ,山东烟台人 ,硕士 ,助理农艺师.现主要从事花卉育种工作;E 一ha l:lian 目ub aogU i@ 126.co m
通讯作者:张志胜(l % 5一),男 ,博士 ,教授 ,主要从事花卉遗传育种工作 ;E 一二 1::sz han 夕sc au.ed u. cn
190 健物技术通橄刀勿. 动no 加盯 B u山如 2(X 刃 年增 刊
杂交育种是红掌育种的主要方法 , 目前国内外
未见到有通过红掌花药培养的报道 ,本试验系统研
究影响红掌花药培养的因素 ,旨在建立红掌花药培
养技术体系 ,为今后开展红掌遗传育种研究积累资
料
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料为红掌品种 Sw e t D re aln Jun gl e Bu-
sh R nk Cham pion M ylene BB 掌 Cleo琳tra R ed A -
nge So nate 肠 no 上述品种种植在广州花卉研究
中心广东省名优花卉种质资源圃中 , 常规方法管
理
1.2 方法
1.2.1 材料的选择与消毒
1.2.1.1 材料的选取 根据形态学及小抱子形成
和发育时期的对应关系选取不同发育时期的花药
作材料 其中 Swe t Dre am 和 Ju 心 e Bus h 按表 1选
择不同时期的花药 , 而 Pi nk Cham 户on 等其余品种
取苞片即将展开到完全展开 , 柱头还未伸出的花
序
1.2.L 2 消毒 将摘下的花序在 自来水下冲洗 1
m in 后 ,在花序上加少量洗洁精 ,用手轻轻地搓洗
花序片刻 ,接着在自来水下冲洗 5 m in ,除去洗洁精
和表面污染物 然后在超净工作台上用 75 % 酒精浸
泡 30 5 ,再用 0.1% 升汞消毒 10 一巧 m in ,边摇晃 倒
去升汞溶液后 ,用无菌水冲洗 4一5 次
裹 , S W e t o re 创m 和 Jung le B ush 小抢子形成和发育时期的判别标准
小抱子形成和发育各时期的对应花序和苞片形态
品种 四分体期
苞片未展
小抱子期
S w e I D 悦帅
lungl e B朋h
花序为浅黄色
苞片未展 ,
花序为浅萦色
苞片未展 ,花序为
萦红色 ,柱头未突
苞片展开 ,花序为
深萦色 ,柱头未突
二胞花粉期
柱头伸出 ,
开始分泌
柱头伸出 ,
开始分泌
衰 2 实脸中所用的培养基配方
序号 荃本培养羞 肌醉 2 ,4 一D B A KT N A A C W A C
(吨 L一, ) (哪 L一, ) (叱 L一, )
生物素
(叱 L一, ) (叱 L一, ) (吨 L一, )
Su Gl u
(% ) (% )
麦芽
(% ) (% )
15
(叱 L一, )
2 ,0 3 2
气全J甘咤曰呢山.二勺卫谧几,伟2 0
2 0
0
0 .5
2,
,
户 Jr一U宙.二盛卫自二2,八,伟j
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
0 .5
1 .0
1 .0
2 .0
1 .0
1 .0
1.0
1 0
2 .0
2 .0
2 .0
1.0
1 .0 0 .2
0,妞
08
0 .5
心J全 0,J. 1,2
弓凡
咤20.称
112 N 6
112N 6
1/2N 6
1 12 N 6
112N 6
112N 6
112 N 6
1 12 N 6
112N 6
112N 6
112N 6
112N 6
N 6
N 6
N 6
2 .0
1o
o
0 .5
0 .5
飞IJ0 .5 1 .0
2 .0
2 .0
1 .0
1 .0
2.0
1.0
1 .0
0 .2
0 .5
AGHMCDEBFKOLNJ1
P 112M S 0 .5 1.0 2.0 2 2
一 一 一 一 一 ~ 一 一 , - 叫- 一 一
2峨X 旧 年 增 刊 杜宝贵等:红掌花药培养 19 1
1.2. 2 低温预处理 将苞片去掉 , 用 75% 酒精棉
擦洗花序表面 ,然后放人培养瓶中 ,分别置于 10
的恒温箱中 3 d 和 s d 取出后按 1.2.1.2 的方法进
行消毒后 ,用解剖针剥出花药 ,接种到诱导培养基
中培养
1.2. 3 花药愈伤组织的诱导 将花药接到诱导培
养基 (表 2) 上 ,每瓶接约 o 一10 个花药 ,一个花序
接约 6 瓶 ,在 25 左右自然散射光下培养 培养过
程中 ,每隔 3一s d 观察一次 ,记录污染花药数 40 d
后统计膨大的花药个数和愈伤组织块数 按照下述
公式计算无菌花药获得率 膨大率和诱导率
无菌花药获得率 (% )=无污染瓶数/接种总瓶数x
l(X) (1)
花药膨大率 (% )二发生膨大的花药数/无菌花药总
数x l(X) (2 )
花药诱导率 (% )二产生愈伤的花药数/同一花序的
无菌花药总数xl o (3)
1.2. 4 根尖染色体鉴定 采用压片法 ,参见张志胜
16]的方法
1.2. 5 统计分析 采用 SPS S ro .0 专业版和 M i-
cro soft ofi ce Exc el 20 3 版软件进行统计分析
2 结果与分析
2.1 无菌花药的获得
不同品种的无菌花药获得率的差异达显著水
平(F=7.50 , F0. (,.:)=2.51) , 9 个品种中 ,Ju飞 le B ush
的无菌花药获得率最高 ,为 72. 61 % ,与其它品种的
获得率差异显著 ;Son at e 和 A rino s 的无菌花药获得
率最低 ; 其余品种的无菌花药获得率在 50% 左右
(图 l)
不同月份的无菌花药获得率存在明显差异 (图
2 ) 10 月份到次年的 2 月份的无菌花药获得率较
高 这表明取材时间也对无菌花药获得有影响
吸 创
圈 2 取材时间对无菌花药获褥率的影响
图中相同字母数据之间的差异在 0.05 水平上不显著 , 不同字母
数据之间的差异在 0. 05 水平上显著 (下同 )
圈 l 品种间无菌花药获得率的差异
2. 2 花药愈 伤组织发生过程
Sw eet D re aln 的 花药接种到 l/ ZN 6 + 肌 醇 10
m g L 一l + B A O 5 m g L 一l + 2 , 4 一D 2 .0 m g L 一l
+ 生物素 1.0 m g L一1+ 椰子汁 (CW ) 15% + 蔗糖
(Su )3% + 葡萄糖(Gl u) 2% 培养基上培养 ,约在 7 d
后大部分花药变褐死亡 ,少数膨大 3一4 倍 ,变黄绿
色 ;20 d 后 ,4 粒膨大的花药分裂形成绿色的愈伤
组织 ,其中三粒愈伤组织是致密坚实的 ,另一粒愈
伤组织质地较松散 (图版 I 一a)
2. 3 影响花药膨大和愈伤组织诱导的因素
2.3.1 小抱子发育时期 以 Sweet D re am 和 Jungle
Bus h 的花药为材料 , 研究小抱子发育时期对花药
膨大的影响 (表 3 ) 结果表明 ,小抱子期的花药膨
大率最高 ;四分体期的无菌花药获得率最高 ,但花
药膨大率是最低 二胞花粉期的花药无菌获得率最
低且膨大率低 表明小抱子期的花药有利于愈伤组
织诱导 ,以小抱子中晚期为佳
2. 3. 2 基因型 不同品种的花药膨大率和愈伤组
织诱导率见表 4 从表中结果可以看出 :不同基因
型的花药膨大率的差异达显著水平 (F二139.64 ,F0
(.,:)= 2.5 1 ) 在 l/2N 6 + 肌醇 10 m g L一,+ B ^ 0 .5
m g L一, +2 , 4一D 2.o mg L一+ 生物素 l.o m g L一,
+ CW 15% + Su 3% + G lu Z% 培养基上 , 9 个品种
的花药膨大率都很低 , 其中 Ju ng le B us h 的膨大率
最高 ,为 17.33% R ed A ngel 和 So nate 的花药膨大
率都低于 5.0 % Swe t D re am 的愈伤组织诱导率
为 1.67% ,其余品种均未形成愈伤组织 表明基因
型对红掌花药膨大率和诱导率有显著影响
192 位物该术通橄召勿血思几肋城盯 2 (X 为 年 增 刊
裹 3 发, 时期对花药培养的影晌
品种 小抱子时期 接种花药数 花药膨大数 无菌花药获得率 花药膨大率(个 ) (个 ) (% ) (% )
69139sw e t 公陀帅
Jungj e Bus h
四分体期
小抱子期
二胞花粉期
四分体期
小抱子期
二胞花粉期
18 (X)
18(X)
巧60
侧洲)
创洲
7 2 0
l0
! 54
5 7 .6 9 土2 .5 7
36 .67 土1.72
2 3.33 土2 .70
80 .峨力士4 .以
8 6 .6 7 土3 .2 7
25 .以土2.89
1 .4
10 .45
2 .14
2 .3 8
19 .7 4
5 .5 6
培养基为 112 N6 + 肌醉 lo mg L一, + BA 0. 5 !ng L一, + 2 ,4一D 2.0 吨 L一, + 生物紊 1.O mg L一1+ Cw 巧% +
Su 3 % + Gl u Z %
衰 4 因型对花药培养的影晌
墓因型 平均膨大率 愈伤组织诱导率
(% ) (% )
Jun砂 e Bu曲 17.33土0.43 a 0.(X)
A ri n佣 12 .50士 0 .67 b 0.(X)
CleO Pa tZa 12 .33土0 .34 bC 0.(X)
BB 掌 11.20土0 .58 ed 0 .(X)
Sw eet D 花.0. 10 .65 士 0 .12 d 1.67
M ylen e 7 .95 土0 .59 e 0 .(X)
R nk C ham Pion 5 .5 1土0 .29 f 0 .(X)
与 n时 e 3 .减土0 .19 f 0 .(X)
R 记 为唱 el 2. 69 土0. 26 f 0. 0
培养基 A :112N 6 + 肌醉 10 叱 L一, + B A 0.5 吨 L一, + 2 , 4一D 2 .0 吨 L一, + 生物素 1.0 吨 L一, + C W 15% +
S u 3 % + Gl u Z%
2. 3. 3 培养基 培养基对花药膨大率影响显著(F=
1肠.69 , F0. 侧,6,,,:二 =l .79 ) ,不同培养基的花药膨大
率存在显著差异 (表 5 ) sw e t Dre aln 在培养基 A
(112N6 + 肌醉 10 毗 L一, + BA 0.5 m g L一, +2 , 4-
D 2.o m g L一, + 生物素 1.0 毗 L一, + CW 15% +
Su 3% + Gl u Z% )上的花药膨大率最高 ,而 Jun gl e
衰 5 培养鑫对红攀花药培养的影晌培养鑫代号
培养基代号 花药膨大率 (% )
Sw e t D ~ lu心 e Bu曲
ACDB
Bush 在培养基 G (112N 6 + 肌醉 l(X) 毗 L一,+ B A E
0.5 叱 L一, +2 , 4一 D 1.0 哪 L一, + 生物素 1.0 哪 F
L一, + Cw 巧% + Su 3% + Gl u Z% )中的花药膨大
率最高 表明以 112 N6 为基本培养基比 N 6 和 1
ZM S 的花药培养效果好 , 2 , 4一D 浓度在 1.0一2. 0
m g L一, 的范围内有利于花药培养 , 培养基中加人
KT N AA 和活性炭都不利于花药培养 两个品种在
培养基 A 和 B 上的花药膨大率差异均不显著 ,但 C
上的膨大率都比 A 低 , 证明蔗糖和有萄糖配合使
用的效果优于麦芽糖 培养基 E 上的花药膨大率显
著高于 D ,表明肌醉对花药培养有显著的影响
10 .6 5土0 .9 8 a
9 .8 9士o .2 0 a
5 .42 土0 .5 7 e d
4 .3 1土 0 .5 3 d e
7.78土0.50 b
5 .25 士0 .54 cd
4 .6 3 土0 .47 ed e
2.33土0.58 fg
2.92土0.05 efg
4 .17土0 .5 6 d e
4 .33土0 .20 de
5 .37土0 .68 cd
3 .67 土0 .76 d ef
5 .42 土0 .7 1 ed
0 .仪士0 .仪) h
1.31士0 59 gh
17 .33士0 .19 b
16 .7 0土0 .1 7 b
8 .83土0 .33 de
4 .75土0 .35 h
10 .洲)土0 .59 ed
4 .35土0 .创 卜
18 .9土0 .7 7 a
10.92 土0.80 e
3 33土0 .39 h
4 .35土0 .20 h
6.97 土0 53 龟
6 .25 土0 29 9
3 .83土0 .22 h
3.48 土0 .10 h
1 .8 3士0 .3 2
1.3 1士0 .4()
GHMKNOLJP1
2 X 旧 年 增 刊 杜宝贵等 :红掌花药培养 193
2. 3. 4 低温预处理 观察了低温预处理对花药膨
大率的影响(图 3 ) 结果发现 ro 3 d 低温处理后
的花药膨大率与对照的差异达显著水平 (F二ro .85 ,
F0. (:.6)= 4.28 ) 低温预处理后花药的膨大率显著提
高 但经 ro s d 的预处理后 ,无菌花药获得率为
0 表明长时间的低温预处理降低无菌花药获得率
次.)杖:帐
下
砚方
圈 3 低沮预处理对花药培养影晌
2. 4 花药愈伤组织的增殖
将 4 粒 Swe t Dre am 的愈伤组织转接到 N6 +
BA 0.5 m g L一, + NA A 0.2 m g L一, + 生物素 1.0
m g L一, + CW 10% + su 3% 培养基上 培养 3 个月
后 , 2 粒致密坚实的愈伤组织停止生长 ,开始变褐 ,
1 粒致密和 1 粒松散愈伤组织继续增殖 (图版 I -
b) 将增殖的愈伤组织转到 112 M S + BA 1.o mg
L一, + N A A 0.5 m g L一, + 生物素 1.0 毗 L一, + CW
5% + su 3% 培养基上培养 , 3O d 转接一次 4 个
月后 ,共获得 196 块愈伤组织 ,其中 146 块来源于
致密愈伤组织 表明 ,致密愈伤组织增殖速度快
2. 5 芽分化
将愈伤组织分别接到分化培养基上培养 ,结果
发现在培养基 W 和 X 上的平均芽分化数差异显著
(表 6) 在培养基 X 上的芽分化率比 W 上的高 ,
且分化形成的芽壮 松散愈伤组织的芽分化率比
致密愈伤组织高 ,但散愈伤组织分化苗的叶片黄
(图版 I一和图版 I 一d )
2. 6 生根
当芽长到约 Z cm 时 ,将其由愈伤组织上切下 ,
转至 lzZM s + BA 0.2 m g L一, + IBA 1.0 m g L一, +
CW 10 % + su 3% 培养基上诱导生根 致密愈伤再
生的小苗 4 d 后开始长根 , 20 d 后根长可达 1一2
cm (图版 I一e) ,生根率达 95 .0 % , 50 d 后全部生
根 松散愈伤获得的苗 ZO d 后根长 0. 5 m ,生根
率为 30. 0 % , 30 d 后达 1 cm ,根细且根毛浓密(图
版 I一f)
2. 7 再生植株细胞学鉴定
由花药培养产生的再生植株和由叶片培养产
业的再生植株在形态上是不同的 (图版 I 一g 和图
版 I 一h ) ,但根尖染色体的鉴定结果表明 ,花药培养
形成的植株和叶片培养产生的植株根尖细胞染色
体数均为 2n =2x 二30 ,为二倍体 ,另有 2 条 B 染色体
(图版 I一i和图版 I一) ,未发现单倍体植株
3 讨论
花药培养是获取单倍体的有效途径 ,是快速培
育植物新品种的重要方法 本研究建立了红掌花药
培养技术体系 ,为进一步开展红掌花药培养研究奠
定了技术基础
无菌花药的获得是红掌花药培养的关键技术
之一 本研究结果表明 ,不同品种无菌花药获得率
差异显著 这主要是是因为不同红掌品种小花在肉
穗状序上排列紧密程度不同 ,导致消毒效果不同所
致 每年 1 月至次年二月份取材 ,无菌花药的获得
率高 , 因此红掌花药培养的适宜取材时间为秋冬
培养基 愈伤组织数
衰 6 培养共对芽分化的影响
平均芽分化数
(个l块 )
生长情况
70 (致密 )
25 (松散 )
76 (致密)
25 (松散 )
1.92 士0 .29 a
3 .94 土0 .38 a
3.98 士0 .27 b
7.38土0 .24 b
芽弱小 (图版 3一A )
芽矮小且弱 ,叶片容易变黄(图版 3一C )
芽壮且浓绿粗壮(图版 3一B )
芽矮壮 ,叶片容易变黄(图版 3一D )
WX
培养墓 w :112M S + eA 0 .2 叫 L一l + N ^ A 0.5 叱 L一1 + 生物素 1.0 哪 l
X :112 M S + B A 1.0 吨 L一l + IB A 1.o mg L 一l + C W 10% + Su 3 %
194 健物杖术通报刀初佗chno 匆g护 2 O( 为 年 增 刊
季
影响花药培养的因素有基因型l7] 小抱子发育
时期18 基本培养基等 本研究结果也表明 ,红掌品
种间花药膨大率和愈伤组织诱导率存在明显差异 ,
所有品种的花药膨大率都偏低 , 9 个品种中只有
Swea t Dr eam 诱导出愈伤组织 ,而且诱导率都很低
小抱子期的红掌花药有利于愈伤组织诱导 ,且以小
抱子中晚期为佳 1 2N6 培养基的花药培养效果比
N6 和 1/2 M S 的好 这些研究结果与在其他植物上
的研究结果一致
在花药培养中 ,麦芽糖被证明能提高花药愈伤
组织的诱导率19. 10] 在矮牵牛的花药培养中 2% 的蔗
糖的愈伤组织诱导率达 40 % ,而麦芽糖的愈伤组织
诱导率达到 67% ,而且愈伤组织形态好 ,分化能力
强 1 但本研究却发现麦芽糖未能提高花药膨大
率 , 而蔗糖和葡萄糖配合使用的效果优于麦芽糖
这可能是不同植物花药培养对碳源的要求不同
培养基中激素的种类 用量及配比对小抱子的
启动 分裂 生长和分化及愈伤组织的产生都具有
重要的影响 ,对花药发育的类型 二倍体体细胞和
单倍体细胞的生长增殖也会产生影响 百合花药培
养过程中 , 在 2 ,4一D 含量高的培养基上可获得较
高的愈伤组织诱导率 ,含量低时则无法获得愈伤组
织 , 而且愈伤组织的诱导率也取决于 2 , 4一DI KT
值 , 在没有 K T 的培养基上无法诱导产生愈伤组
织 ,而当 2 , 4一D/ K T 值为 0.5 时诱导率最高 ,过高或
过低都会影响诱导率l2] 结果表明 , 2 , 4一D 浓度在
1.0一2. 0 m g l一, 的范围内有利于花药愈伤组织诱
导 ,而 KT N AA 都不利于花药培养
对花药进行低温预处理已成为一项广泛采用
, . 日巨
卜
. 花药愈伤组织诱导;b . 花药愈伤组织继代增殖;c. 花药致密愈伤组织分化出芽 ;d. 花药松散愈伤组织分化出芽;e. 花药致密愈伤组
织分化出苗 ;f. 花药松散愈伤组织分化出苗;9.红掌叶片愈伤组织分化出苗 ;h .花药致密愈伤组织形成的再生植株;1. 花培植株的染
色体;1. 红掌叶片再生植株的染色体
圈版 I 红掌 Sw e t D re am 花药培养
2 X为 年 增 刊 杜宝贵等:红掌花药培养 195
的提高诱导率的措施 l3] Ni tsh 等 1j 认为在低温预
处理时 ,小抱子受寒冷刺激 ,使有丝分裂由不均等
分裂转为均等分裂 ,结果使多核细胞增多 ,启动了
雄核发育 发现 , Sw e t Dre am 经过 ro 3 d 处理
后 ,花药膨大率显著提高 ,但未能产生愈伤组织
从理论上讲 ,花粉植株应当都是单倍体 ,但许
多研究表明 ,花药培养的后代是不同倍性植株的混
合体115, 61 本实验结果表明 ,经染色体鉴定过的花培
植株都是二倍体 , 尚未发现单倍体或多倍体 ,但
R A PD 分析表明花药培养的再生植株和叶片的在
带型上存在差异 ,并且部分植株在形态特征上有所
不同 这是无性系变异 ,还是单倍体自然加倍的结
果有待于进一步研究
参考文献
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