作 者 ：姜坤妤;苏喆;王勇;潘超强;朱燕;郑秀;高强;
期 刊 ：生物技术通报 2011年 0卷 06期 页码：170-174
关键词：运动发酵单胞菌；同源重组；L-乳酸；乳酸脱氢酶；丙酮酸脱氢酶；
摘 要 ：以运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)CP4基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆得到其丙酮酸脱氢酶基因(pdc)同源下游p3片段,并连接到广谱宿主载体pBBR1MCS3-Ppdc-ldhL中构建了重组质粒pBBR1MCS3-Ppdc-ldhL-p3,将此重组质粒转化到受体菌Z mobilis CP4中,分别以Ppdc和p3片段作为同源上游和下游片段,利用同源双交换重组技术将重组质粒中的ldhL基因置换了Z.mobilis染色体中的pdc基因,得到重组菌株Z.mobilis CP4(△pdc::ldhL)。测得重组菌株乳酸产量为10.8g/L,明显高于出发菌株,说明初步成功构建了产L-乳酸的运动发酵单胞菌代谢工程菌株。