全 文 ：第24卷 第10期
2012年10月
生命科学
Chinese Bulletin of Life Sciences
Vol. 24, No. 10
Oct., 2012
文章编号：1004-0374(2012)10-1216-07
复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用
侯　斐1，王　红1，罗　成2，王立魁1*
(1 首都医科大学附属北京友谊医院，北京 100050；2 天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457)
摘　要：复合式悬液芯片系统 (multiplex suspension array system, MSAS)由悬浮芯片和微流体芯片组成，具
有高通量精确定量的特点，而且具有较高的准确性和重复性，在多种蛋白质分子的同时精确定量和大规模
样品检测方面有着很大的应用优势，其应用领域覆盖感染性疾病的快速诊断、细胞因子、信号通路、肿瘤
标志物、流行病学病原体的筛查、蛋白质的相互作用、单核苷酸多态性 (SNP)的研究等。就MSAS在病原
学检测中的应用作一简要综述。
关键词：复合式悬液芯片系统；病原学检测；悬浮芯片技术
中图分类号：R446.5 文献标志码：A
Clinical application of multiplex suspension array
system in pathogen detection
HOU Fei1, WANG Hong1, LUO Cheng2, WANG Li-Kui1*
(1 Beijing Friendship Hospital Affiliated, Capital Medical University, Beijing 100050, China; 2 School of Food
Engineering and Biotechnology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China)
Abstract: Multiplex suspension array system (MSAS) is composed of suspension array and microfluidic chip,
which demonstrates the features of high-throughput, precise quantification, accuracy, and repeatability. MSAS has
great applicable advantages in accurate quantification for large-scale sample detection of various protein molecules,
such as rapid diagnosis of infectious diseases, screening of cytokines, identification of signaling pathways,
development of tumor markers and epidemiological pathogens. It has been used in the investigation of interaction
proteins, single nucleotide polymorphism (SNP) analysis, etc. A briefly summary of the applications of MSAS in
pathogen detection has been illustrated in this review.
Key words: multiplex suspension array system; pathogen detection; suspension array
收稿日期：2012-03-13； 修回日期：2012-06-26
基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金[教外司
留(2009)1001号]
*通信作者：E-mail: wanalbert69@gmail.com；Tel: 010-
63138004
感染性疾病是临床最重要的疾病之一，变化多
样且病原学复杂。精确的病原学分析不仅是确诊依
据，也是合理选择治疗方案的基础，但实际上目前
病原学检测技术远远不能满足临床的需要。分子生
物学技术虽然敏感性和特异性都能满足临床的需
求，但面对复杂、众多的病原微生物种类，检测通
量一直是瓶颈问题。病原微生物的快速检出是及时、
准确地预测、预报和预警的关键，在感染性疾病的
诊治中具有决定性作用。高效检出病原微生物将对
指导临床诊断、合理用药以及疾病控制产生积极影
响。因此，只有建立高通量、快速、可靠、经济的
病原微生物诊断平台，才能切实有效地控制感染性
疾病的流行。复合式悬液芯片系统 (multiplex suspension
array system，MSAS)技术平台是一种以荧光微球
为基础的多指标数据采集和分析平台，技术集流式
细胞技术、荧光微球技术、激光技术、生物信息技
术为一体。该技术具有敏感性高、特异性强、检测
速度快、价格便宜等优点，并且可以实现高通量检
侯　斐，等：复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用第10期 1217
测，具有广泛的用途。
1　悬浮芯片
1.1　概述
悬浮芯片 (suspension array) 也称悬液芯片或液
相芯片 (1iquid chip)，最早是 20世纪 70年代美国
Luminex公司研制出的新一代生物芯片技术 [1]。该
技术利用带编码的微球体作为载体，流式细胞技术
作为检测平台，对核酸、蛋白质等生物分子进行大
规模测定。1977年，Horan 和Wheeless[1]将该技术
用于免疫学检测，这是最早的报道。
1.2　悬浮芯片的原理
悬浮芯片体系由多种不同的小球体组成，这些
小球体都是由染有荧光染料的聚苯乙烯构成，直
径大小为 10 nm~1 000 μm[2]，其中以直径为 5.6 μm
的最为常见 [2]。聚苯乙烯微球 (microspheres)内部
含有红色和橙色两种荧光染料，微球悬浮在有机溶
剂中时变肿胀，使染料分子扩散，但当微球转移到
一个水溶液时，它们缩水使染料分子滞留。根据两
种染料比例的不同，可以将微球分成 100种，每一
种拥有一个编号。每种微球因为内部荧光比例的不
同，具有特定的光谱特征，可被激光特异地识别 [3]。
检测时，Luninex l00检测系统对每一个微球单独检
测。该仪器同时发射红色和绿色两种激光，并同时
检测微球上的红色分类荧光和报告分子上的绿色荧
光强度。红色激光激发的是微球上的红色分类荧光，
根据微球的不同色彩编号，可以将微球分类，从而
将各个不同的分析反应区分开来；绿色激光激发的
是绿色报告荧光分子 [4]，目的是确定微球上结合的
报告荧光分子的数量，从而确定微球上结合的目的
分子的数量。因此，通过红绿双色激光的同时检测，
可以确定被结合的检测物的种类和数量，再通过机
器与计算机自动统计分析激光所检测到的微球种
类、数量，从而判定待测样本多种目标测试物的浓
度。具体检测工作流程如图 1。
根据检测物的不同，微球表面可以共价结合各
种各样的核酸或蛋白质检测探针，在杂交反应进行
时再加上荧光标记。在同一反应体系中可以同时加
入不同的检测微球，这样就可以利用少量的样本进
行快速、高通量的检测。如果待测物为核酸，悬浮
芯片检测的基本原理即为核酸分子杂交；若待测物
为蛋白质，其基本原理则为“三明治夹心”免疫测
定法。具体原理分述如下。
进行核酸分析的首要步骤就是用特定的核酸序
图1 悬浮芯片检测流程图
生命科学 第24卷1218
列对聚苯乙烯微球表面进行功能化标记，核酸探针
通常会以非共价物理吸附、亲和的方法或者共价连
接方式在微球表面固定。微球表面最佳检测探针长
度应为 18~20 mer[5]，应将突变位点或 SNP等鉴别
位置设计于探针的第 8~14 mer处，这样就可检测
到一个碱基位点的改变。设计扩增引物时，应将扩
增长度控制在 100~300 bp，这样可以减少在微球上
进行杂交反应时的位阻效应，从而更有利于杂交反
应。在下游扩增引物的 5端加上生物素标记，杂交
后即可利用亲和反应进行检测。采用生物素标记的
待测核酸分子以非共价结合的方式与核酸探针杂
交，这种结合方式特异、紧密而且十分稳定。为了
进一步加大检测效率，可以将悬浮芯片与多重 PCR
技术结合起来，使得在一个反应管中可以同时进行
尽量多的核酸检测。对于遗传和基因组分析，需要
分析的特定分子数量就相当大，可能会对数以万计
的基因进行表达分析以及进行单核苷酸多态性的分
析。单核苷酸多态性 (SNPs)分析可进行细菌鉴定 [6]，
在疾病诊断和药物开发等领域具有重要的指示意
义，特别是联合流式细胞术，悬浮芯片日渐成为一
种功能强大的检测方法。检测原理如图 2所示。
若检测物为蛋白质类物质，其检测的基本原理
则为“三明治夹心”免疫测定法。若待检物为抗体，
则相对简单，因为抗体本身具有 Fab段和 Fc段，
故微球上可共价结合其抗原 (针对 Fab段 )，再用
荧光素标记的二抗 (针对 Fc段 )作为报告分子即可。
若待检物为抗原，则要求此抗原至少要有 2个抗原
表位，先在微球上共价结合待检物的一种抗体，
而后再加入标记有荧光素的针对待检物另一抗原
表位的抗体，进行双抗夹心反应。酶和底物的相
互作用也采用聚苯乙烯微球该种分析方法进行分
析。荧光标记的底物通过“三明治夹心法”连接
到聚苯乙烯微球上，酶和底物反应之后，释放荧光
标记，通过检测反应体系中的荧光信号来进行分析。
如图 3所示。
1.3　悬浮芯片的优势
Bio-Plex采用了悬浮芯片技术，系统由于利用
微球在溶液中反应，克服了片膜芯片在大分子检测
时表面张力、空间效应等对反应动力学的影响，同
时利用激光检测技术和特别设计的自动校正和校验
图2 悬浮芯片检测原理：核酸分子杂交
图3 悬浮芯片检测原理：三明治夹心法
侯　斐，等：复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用第10期 1219
工具，样品检测的准确性和重复性有大幅度的提高。
Bio-Plex悬浮芯片系统检测细胞因子时，灵敏度可
以达到 0.2 pg/mL，重复性可以达到 90%以上，动
态范围也很宽，可以达到 0.2~32 000 pg/mL，样品
间差异、板间差、系统间差异控制在 10%以下，超
过了普通的 ELISA技术，与Western Blot类似 [7]。
由于其灵敏度高，需要的样品量也大大减少，12 μl
血清样品就可以给出100种指标的结果。自1977 年，
美国科学家 Horan 和Wheeless等 [1]报道了悬浮芯
片技术在免疫检测上的应用以来，该技术应用范围
越来越广泛。
1.4　悬浮芯片的应用
悬浮芯片系统由于其高通量精确定量的特点，
为生物芯片技术开拓了新的应用领域，如可以同时
对生理、疾病过程或药物、疫苗作用前后多至 100
种关键生物分子诸如各种抗原、细胞因子、磷酸化
蛋白等的表达或活动水平的变化进行精确的定量检
测，尤其适用于生物细胞、试验动物和人体标本中
多项重要生物标志分子及其相互作用以及与候选药
物的相互作用的研究，如功能基因组，先导药物的
阐明、再次筛选，药物的吸收、分布、代谢、毒理
等的研究，以及高通量 ELISA、Western Blot检测等。
在感染性疾病的快速诊断 [8]、细胞因子的检测 [9]、
信号通路的研究 [10]、肿瘤标志物的筛查 [11]、流行
病学病原体的筛选 [12-13]、蛋白质的相互作用 [14]、
SNP的研究 [15-16]中都有广泛的应用。尤其需要指
出的，该技术常用于多种感染性疾病 [17]，特别是常
见病毒的检测 [18-19]，还有如变态反应性疾病、流行
性腮腺炎、疱疹、麻疹、系统性真菌病等的检测也
多见报道 [20]。
2　微流体芯片
微流体芯片 (microfluidic chip)是结合生物技
术、微电子、微机械等技术，把实验室中许多仪器
的功能缩小到芯片上来处理。在这种芯片上加上微
泵和微闸就可以很容易地对生物细胞、溶剂、药物
等进行各种生物化学和分子生物学研究。该技术是
根据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上的差
异实现分离的一个全新的分离技术，它实际上包含
电泳技术和色谱技术及其交叉内容，是电泳技术的
一个重大进展，同时配合高灵敏的荧光染料和激光
检测器及电脑控制软件，完全实现了无人工干预的
电泳过程，减少了多个人工操作环节，从根本上改
变了传统凝胶电泳的不足，并大大提高了电泳的成
功率。加之整个电泳过程均在密闭的芯片系统中进
行，也减少了实验人员对有害化学试剂的接触。目
前微流体研究的主要方向包括稀有细胞的筛选信
息、核糖核酸的提取和纯化、基因测序、单细胞分析、
蛋白质结晶、药物检测等。
3　MSAS在病原微生物检测中的应用
3.1　MSAS在呼吸道病毒检测中的应用
人类呼吸道病毒是由数百个病毒株组成的多样
性病原体群体，这对做出准确的实验室诊断提出了
重大挑战，及时准确迅速地检测呼吸道病毒已经成
为当前抗病毒治疗方案的当务之急。此外，给予呼
吸系统疾病患者更好地治疗将有助于控制感染，防
止医院内传播，减少患者的住宿以及住院费用，复
合式分析系统提供了该种可能。
为了有效地检测病毒种类，Lee等 [21] 开发了
一种快速、多靶点、具有高敏感性和特异性的
检测方法，命名为 RMA (Respiratory MultiCode-PLx
Assay)。RMA将改进的多重 PCR技术与高通量微
球流式细胞仪 (Luminex公司 )结合，是 MSAS的
一种。此法用 PCR方法扩增病毒目的 cDNA，其中
一条引物需要用生物素标记，扩增产物变性后与
靶点特异性探针偶联的微球杂交，之后加入链亲
和霉素藻红素，最后用悬浮芯片系统检测。RMA
方法以所有可用呼吸道病毒的保守序列为基础，共
设计了 18套保守的病毒特定的多重 PCR引物，为
8 个不同的群体——人类鼻病毒 (HRV)、呼吸道合
胞病毒 (RSV)、副流感病毒 (PIV)、流感病毒 (IFV)、
偏肺病毒 (MPV)、腺病毒 (AD)、冠状病毒 (CV)，
采用靶点特异性引物延伸技术。Murali 等 [22]在针
对血液系统恶性疾病并发呼吸道感染患者的诊断过
程中，也曾经应用 RMA方法进行呼吸道病毒的检
测。近年来，Balada-Llasat等 [23]对 RMA方法诊断
成人的呼吸道病毒感染进行评价认为，RMA方法
具有较高的灵敏度和特异性，而且还简便易行，能
对多重病毒感染进行同时检测。这些表明，RMA
是检测呼吸道病毒的一种准确、灵敏、实用的方法，
其敏感性和特异性优于传统病毒培养和免疫荧光染
色技术。
3.1.1　MSAS在流感病毒的分型与检测中的应用
多重 PCR技术作为MSAS的一种重要的技术
手段，是高通量杂交检测的前提，已经用于本实验
室病原微生物的检测。Mahony等 [24]依据核酸分子
杂交的检测原理，采用多重 PCR的方法检测多种
生命科学 第24卷1220
不同的流感病毒并对其进行分型，该方法与多种病
毒特定引物配对，并且针对特定流感病毒进行特定
引物延伸，利用流式微球试验和悬浮蛋白芯片系统
分选特定引物延伸产物，该实验可以检测流感病毒
A、B，包括流感病毒 A的亚型 H1、H3、H5，副
流感病毒 1、2、3、4型。他们将其命名为 RVP检
测 (respiratory virus panel test)。除此之外，Pabbaraju
等 [25] 也对 RVP检测方法进行过深入的研究。这些
应用实践表明，RVP检测允许多重检测，节约时间
与成本，将有助于提升医院和公共医疗机构诊断流
感病毒感染的能力，并且在流感暴发时能够帮助医
疗卫生机构及时准确地确定病原体。
3.1.2　MSAS在SARS病毒检测中的应用
严重急性呼吸系统综合征 (SARS)，又称非典
型肺炎。2002年 12月，该病首次在我国华南地区
发现，该病传播快，死亡率高，已成为严重危害人
类健康的瘟疫 [26]。该病的病原体为一种全新的冠状
病毒，Jiang等 [27]研究了 SARS患者外周血细胞因
子与趋化因子的表达谱以及肺和淋巴组织的免疫病
理改变。采用悬浮芯片技术，动态扫描了 23例诊
断明确的 SARS患者血中 14种细胞因子与趋化因
子；应用反转录 PCR、免疫组化和免疫荧光技术对
SARS死亡患者经尸体解剖的肺和淋巴组织进行免
疫病理学观察。该研究将含有羧基基团的荧光编码
高分子微球与传统流式细胞仪技术相结合，建立了
所谓液相基因芯片技术，并将该技术应用于导致非
典型肺炎病原体的检测，结合 RT-PCR技术，对
SARS病原体进行检测，从而建立了一整套全新的
非典型肺炎病原体感染诊断的检测手段，并显示出
独特的优越性。
3.2　MSAS在b型流感嗜血杆菌检测中的应用
Pickering等 [28]在定量检测 b型流感嗜血杆菌
的抗体时，采用了复合式蛋白分析方法，基于液相
芯片多重分析物分析系统，开发了一种复用间接免
疫荧光检测法，并将此复合流式细胞法与酶联免疫
吸附法定量检测b型流感嗜血杆菌的抗体进行比较，
结果发现对于 b型流感嗜血杆菌，酶联免疫吸附法
和悬浮芯片检测法达到保护性抗体水平 (> 0.1 IU/ mL)
的比例分别为 45.0％和 39.0％。悬浮芯片检测法是
一个有吸引力的酶联免疫吸附法的替代方法，而且
它的优越性在于减少了劳动和试剂以及缩短检测时
间。
3.3　MSAS在手足口病检测中的应用
手足口病 (hand foot and mouth disease, HFMD)
是 1957年首次在新西兰发现的一种新型传染病，
1986年在我国被证实，一般由多种肠道病毒引起
的传染病 [29] 。HFMD主要由柯萨奇 A16型病毒
(coxsackievirus A16, CVA16)引起，也可由柯萨奇
A5、A6、B3及肠道病毒 71型引起发病 [30]。Clavij
等 [31]利用复合式蛋白分析方法在单一样本中同时
检测了针对口蹄疫病毒的几种抗体；通过与 ELISA
方法作比较发现，该方法具有更高的阳性检出率，
而且敏感性好、效率高，可实现高通量检测，节省
了检测时间和成本。此外，为了从不同的病毒中检
测出口蹄疫病毒 (FMDV)，Hindson等 [32]研发了一
种高通量复合式检测方法，此法通过使用复合式逆
转录 -聚合酶链反应 (MRT-PCR)扩增与微阵列杂交
和流式细胞仪检测，同时筛选五个 RNA和两个
DNA病毒。该实验方法还可以区分口蹄疫病毒和
其他水泡病毒。如猪水泡病病毒和猪流感病毒的水
疱疹。Tam等 [33]也利用MRT-PCR的方法检测口蹄
疫病毒。与 ELISA 方法相比，该方法具有较高的阳
性检出率，而且敏感性好、效率高，可实现高通量
检测，节省了检测时间和成本。Perkins等 [34]研究
指出，悬浮阵列技术先前已用于区分手足口病病毒
感染和接种疫苗，这是一种复合式非结构蛋白的血
清学检测方法，对复合式反应板的检测评价取得了
令人欣慰的结果，这有利于进一步检测方法的发展，
而且利于优化手足口病的血清学监测。
3.4　MSAS在结核分支杆菌检测中的应用
结核病 (tuberculosis，TB)是一种严重的全球
性疾病，是死亡率最高的传染病之一，当前检测结
核分枝杆菌感染的方法效率不高，特别是对于测试
大量的样品。Khan等 [35]基于微阵列技术，报告了
一个新的和有效的多重微珠免疫分析法 (MMIA)，
用于分析结核分枝杆菌抗体。MMIA可以同时检测
不同种群恒河猴血浆中的结核分枝杆菌抗体，这些
概念验证性的研究结果表明了多重微珠免疫分析法
的潜在临床使用。此外，通过分析结核分枝杆菌开
放阅读框 (约 4 000 bp)，MMIA的血清检测系统具
有发现新的目标蛋白的潜力，这将有助于结核病的
血清学诊断。
3.5　MSAS在沙门氏菌检测中的应用
在亚洲，甲型副伤寒沙门氏菌是导致肠热症的
重要原因。通过培养的方法进行诊断非常缓慢，而
且一些疑似伤寒和副伤寒患者培养的结果多数为阴
性，将会影响患者管理和公共健康。一般是根据沙
门氏菌的 O、H、Vi抗原对其进行分型，沙门氏菌
侯　斐，等：复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用第10期 1221
的血清学分型对于正确深入了解这种食源性疾病的
流行病学具有非常重要的作用。Dunbar和 Jacobson [36]
采用液相 Luminex xMAP技术及悬浮阵列杂交法快
速检测和鉴定沙门氏菌和其他细菌病原体。在一个
单一的复合式反应中，Luminex xMAP悬浮杂交阵
列可同时检测 100个不同的靶点，该方法快速，样
本处理简单，通过直接检测种属特异性的 DNA序
列，以足够的灵敏度和特异性检测并区分沙门氏菌
和其他九种待检物种。Fang等 [37]和 Ou等 [38]指出，
复合式悬浮芯片能够快速、经济地诊断沙门氏菌并
对其进行分型。
4　展望
综上所述， 病原微生物的快速检出在感染性疾
病的诊治中具有决定性作用，这将对指导临床诊断、
合理用药以及疾病控制产生积极影响。复合式蛋白
分析液态芯片技术可以作为一种新方法用于临床实
验室诊断。这项技术的发展和应用，将最终彻底改
变临床病原微生物检验的现状和传统观念，实现高
效、高质和廉价的统一；然而，液相芯片技术的缺点，
就是在蛋白质分析过程中，由于部分血清中含有嗜
异性抗体 [39]，可与微球或捕获抗体直接连接，从而
形成非特异性的背景值，但这种非特异影响可以通
过设定内对照和使用阻断液来消除 [40-41]。复合式悬
液芯片技术以其高通量、快速、灵敏、重复性好等
显著的优越性作为生物信息学一种先进的大规模生
物检测平台，必将有着更广阔的发展及应用前景。
[参　考　文　献]
[1] Horan PK, Wheeless LL Jr. Quantitative single cell
analysis and sorting. Science, 1977, 198(4313): 149-57
[2] 杨洋, 汤华. 液相芯片技术在检验医学和生物医学中的
应用. 中国生物化学与分子生物学报, 2007, 23(4): 256-
61
[3] Oliver KG, Kettman JR, Fulton RJ. Multiplexed analysis
of human cytokines by use of the FlowMetrix system. Clin
Chem, 1998, 44(9): 2057-60
[4] Biagini RE, Sammons DL, Smith JP, et al. Comparison of
a multiplexed fluorescent covalent microsphere immuno-
assay and an enzyme-linked immunosorbent assay for
measurement of human immunoglobulin G antibodies to
anthrax toxins. Clin Diagn Lab Immunol, 2004, 11(1):
50-5
[5] Spiro A, Lowe M, Brown D. A bead-based method for
multiplexed identification and quantitation of DNA
sequences using flow cytometry. Appl Environ Microbiol,
2000, 66(10): 4258-65
[6] Ye F, Li MS, Taylor JD, et al. Fluorescent microsphere-
based readout technology for multiplexed human single
nucleotide polymorphism analysis and bacterial identifica-
tion. Hum Mutat, 2001, 17(4): 305-16
[7] Pochechueva T, Jacob F, Goldstein DR, et al. Comparison
of printed glycan array, suspension array and ELISA in the
detection of human anti-glycan antibodies. Glycoconj J,
2011, 28(8-9): 507-17
[8] van der Wal FJ, Achterberg RP, Boer SM, et al. Bead-
based suspension array for simultaneous detection of
antibodies against the Rift Valley fever virus nucleocapsid
and Gn glycoprotein. J Virol Methods. 2012, 183(2): 99-
105
[9] Khan IH, Krishnan VV, Ziman M, et al. A comparison of
multiplex suspension array large-panel kits for profiling
cytokines and chemokines in rheumatoid arthritis patients.
Cytometry B Clin Cytom, 2009, 76(3): 159-68
[10] Campbell M, Lie WR, Zhao J, et al. Multiplex analysis of
Src family kinase signaling by microbead suspension
arrays. Assay Drug Dev Technol, 2010, 8(4): 488-96
[11] Long Y, Zhang Z, Yan X, et al. Multiplex immunodetection
of tumor markers with a suspension array built upon core-
shell structured functional fluorescence-encoded micros-
pheres. Anal Chim Acta, 2010, 665(1): 63-8
[12] Ros-Garcia A, Juste RA, Hurtado A. A highly sensitive
DNA bead-based suspension array for the detection and
species identification of bovine piroplasms. Int J Parasitol,
2012, 42(2): 207-14
[13] Janse I, Bok JM, Hamidjaja RA, et al. Development and
comparison of two assay formats for parallel detection of
four biothreat pathogens by using suspension microarrays.
PLoS ONE, 2012, 7(2): e31958
[14] 孙言伟, 姜颖, 贺福初. 差异蛋白质组学的研究进展. 生
命科学, 2005, 17(2): 137-40
[15] Armstrong B, Stewart M, Mazumder A. Suspension arrays
for high throughput, multiplexed single nucleotide
polymorphism genotyping. Cytometry, 2000, 40(2): 102-8
[16] Lalonde MS, Arts EJ. DNA suspension arrays: silencing
discrete artifacts for high-sensitivity applications. PLoS
One, 2010, 5(11): e15476
[17] Landlinger C, Preuner S, Willinger B, et al. Species-
specific identification of a wide range of clinically relevant
fungal pathogens by use of Luminex xMAP technology. J
Clin Microbiol, 2009, 47(4): 1063-73
[18] Fathima S, Drews SJ. Multi-analyte suspension arrays for
the detection of common viruses: how viable are these
assays in clinical laboratories. Expert Rev Anti Infect
Ther, 2011, 9(11): 979-82
[19] Yu D, Wu S, Wang B, et al. Rapid detection of common
viruses using multi-analyte suspension arrays. J Virol
Methods, 2011, 177(1): 64-70
[20] 杨昊, 杨笑鹤. 液相芯片在生物医学中的研究进展. 国
际生物医学工程杂志, 2011, 34(6): 371-4
[21] Lee WM, Grindle K, Pappas T, et al. High-throughput,
sensitive, and accurate multiplex PCR-microsphere flow
cytometry system for large-scale comprehensive detection
of respiratory viruses. J Clin Microbiol, 2007, 45(8):
2626-34
生命科学 第24卷1222
[22] Murali S, Langston AA, Nolte FS, et al. Detection of
respiratory viruses with a multiplex polymerase chain
reaction assay(MultiCode-PLx Respiratory Virus Panel) in
patients with hematologicmalignancies. Leuk Lymphoma,
2009, 50(4): 619-24
[23] Balada-Llasat JM, LaRue H, Kelly C, et al. Evaluation of
commercial ResPlex II v2.0, MultiCode-PLx, and xTAG
respiratoryviral panels for the diagnosis of respiratory
viral infections in adults. J Clin Virol, 2011, 50(1): 42-5
[24] Mahony J, Chong S, Merante F, et al. Development of a
respiratory virus panel test for detection of twenty
humanrespiratory viruses by use of multiplex PCR and a
fluid microbead-based assay. J Clin Microbiol, 2007,
45(9): 2965-70
[25] Pabbaraju K, Tokaryk KL, Wong S, et al. Comparison of
the Luminex xTAG respiratory viral panel with in-house
nucleic acidamplification tests for diagnosis of respiratory
virus infections. J Clin Microbiol, 2008, 46(9): 3056-62
[26] 张传海, 王一飞, 张美英, 等. SARS及其病原体研究进
展. 生命科学, 2003, 15(3): 129-33
[27] Jiang Y, Xu J, Zhou C, et al. Characterization of cytokine/
chemokine profiles of severe acute respiratorysyndrome.
Am J Respir Crit Care Med, 2005, 171(8): 850-7
[28] Pickering JW, Martins TB, Schroder MC, et al .
Comparison of a multiplex flow cytometric assay with
enzyme-linked immunosorbent assay for auantitation of
antibodies to tetanus, diphtheria, and Haemophilus
influenzae Type b. Clin Diagn Lab Immunol, 2002, 9(4):
872-6
[29] 杨国亮, 王侠生. 皮肤病学[M]. 上海: 上海医科大学出
版杜, 1992: 276-7
[30] 杨智宏, 朱启镕, 李秀珠, 等. 2002年上海儿童手足口病
病例中肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型的调查. 中
华儿科杂志, 2005, 43(9): 648-52
[31] Clavijo A, Hole K, Li M, et al. Simultaneous detection of
antibodies to foot-and-mouth disease non-structural
proteins 3ABC, 3D, 3A and 3B by a multiplexed Luminex
assay to differentiate infected from vaccinated cattle.
Vaccine, 2006, 24(10): 1693-704
[32] Hindson BJ, Reid SM, Baker BR, et al. Diagnostic
evaluation of multiplexed reverse transcription-PCR
microsphere array assay for detection of foot-and-mouth
and look-alike disease viruses. J Clin Microbiol, 2008,
46(3): 1081-9
[33] Tam S, Clavijo A, Engelhard EK, et al. Fluorescence-
based multiplex real-time RT-PCR arrays for the detection
andserotype determination of foot-and-mouth disease
virus. J Virol Methods, 2009, 161(2): 183-91
[34] Perkins J, Parida S, Clavijo A. Use of a standardized
bovine serum panel to evaluate a multiplexed nonstructural
protein antibody assay for serological surveillance of foot-
and-mouth disease. Clin Vaccine Immunol, 2007, 14(11):
1472-82
[35] Khan IH, Ravindran R, Yee J, et al. Profiling antibodies to
Mycobacterium tuberculosis by multiplex microbeadsus-
pension arrays for serodiagnosis of tuberculosis. Clin
Vaccine Immunol, 2008, 15(3): 433-8
[36] Dunbar SA, Jacobson JW. Quantitative, multiplexed
detection of Salmonella and other pathogens by Luminex
xMAP suspension array. Methods Mol Biol, 2007, 394:
1-19
[37] Fang NX, Huang B, Hiley L, et al. A rapid multiplex DNA
suspension array method for Salmonella typhimurium su-
btyping using prophage-related markers. J Microbiol
Methods, 2012, 88(1): 19-27
[38] Ou HY, Ju CT, Thong KL, et al. Translational genomics to
develop a Salmonella enterica serovar Paratyphi Amulti-
plex polymerase chain reaction assay. J Mol Diagn, 2007,
9(5): 624-30
[39] Studentsov YY, Schiffman M, Strickler HD, et al.
Enhanced enzyme-linked immunosorbent assay for
detection of antibodies tovirus-like particles of human
papillomavirus. J Clin Microbiol, 2002, 40(5): 1755-60
[40] Waterboer T, Sehr P, Pawlita M. Suppression of non-
specific binding in serological Luminex assays. J Immunol
Methods, 2006, 309(1-2): 200-4
[41] Martins TB, Pasi BM, Litwin CM, et al. Heterophile
antibody interference in a multiplexed fluorescent micro-
sphereimmunoassay for quantitation of cytokines in
human serum. Clin Diagn Lab Immunol, 2004, 11(2):
325-9