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ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.10No.1
Jan.2012
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2012.01.009
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EfectofknockoutingfumBonanaerobicmixedacidfermentationforE.coli
WANGGuangming,MAJiangfeng,LIANGLiya,LIURongming,XUBing,JIANGMin
(ColegeofBiotechnologyandPharmaceuticalEngineering,NanjingUniversityofTechnology,Nanjing210009,China)
Abstract:Basedonthemetabolicpathwayofsuccinate,afumBdefectionstrain,E.coliBA002(△ldh,
△pfl,△fum)wasconstructed,byusingλREDhomologousrecombinationtechnologywithE.coli
BA001(△ldh,△pfl)astheparentstrainThemalateaccumulatedbydecreasingthefluxofconversionof
malatetofumarateThefermentationresultsshowedthatdefectionoffumBcouldchangetheyieldsof
succinateandacetate,theyieldofsuccinateofdualphasefermentationandexclusivelyanaerobicfermen
tationdecreasedfrom81% and63% to76% and54%,respectively.TheportionofacetateinE.coli
BA002increasedlargely,thefinalconcentrationofthemalatewas025g/L;theyieldsofacetateand
succinateincreasedfurtherwhenaddedextramalicacid.Theexperimentspreliminarilydemonstratedthat
thedefectionoffumBmadetheacetateincreaseobviously.ThedominateanaerobicenzymeFumBdefec
tioncouldnotblockconversionofthemalatetothefumaratecompeletely.
Keywords:fumarase;malate;REDtechnology;succinate
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t/℃ ρ
(
0æ
)/
(g·L-1)
ρ(qe)/
(g·L-1)
ρ(q1)/
(g·L-1)
ρ()/
(g·L-1)
ρ(D)/
(g·L-1)
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37 — 1441 402 — 2000
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30 025 1246 236 111 1650
37 — 1451 349 096 2000
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