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"!lmnop:TQ921 6qrst:A 6u;p:1672-3678(2012)01-0046-05EfectofknockoutingfumBonanaerobicmixedacidfermentationforE.coliWANGGuangming,MAJiangfeng,LIANGLiya,LIURongming,XUBing,JIANGMin(ColegeofBiotechnologyandPharmaceuticalEngineering,NanjingUniversityofTechnology,Nanjing210009,China)Abstract:Basedonthemetabolicpathwayofsuccinate,afumBdefectionstrain,E.coliBA002(△ldh,△pfl,△fum)wasconstructed,byusingλREDhomologousrecombinationtechnologywithE.coliBA001(△ldh,△pfl)astheparentstrainThemalateaccumulatedbydecreasingthefluxofconversionofmalatetofumarateThefermentationresultsshowedthatdefectionoffumBcouldchangetheyieldsofsuccinateandacetate,theyieldofsuccinateofdualphasefermentationandexclusivelyanaerobicfermentationdecreasedfrom81%and63%to76%and54%,respectively.TheportionofacetateinE.coliBA002increasedlargely,thefinalconcentrationofthemalatewas025g/L;theyieldsofacetateandsuccinateincreasedfurtherwhenaddedextramalicacid.TheexperimentspreliminarilydemonstratedthatthedefectionoffumBmadetheacetateincreaseobviously.ThedominateanaerobicenzymeFumBdefectioncouldnotblockconversionofthemalatetothefumaratecompeletely.Keywords:fumarase;malate;REDtechnology;succinate 0æ,Õo¬ÏÐ;:ðEöX,ûö‘¼Eéÿ!,Õm²ÑgôìaEú6o[1],0Dɲya,âìí"?
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